专利名称：用作5－ht的制作方法
本文所述的发明涉及用作5-HT6和/或5-HT75-羟色胺受体的配体的5-卤代色胺衍生物；它们的制备方法；它们作为药物，特别是用于治疗与5-羟色胺水平不足有关的神经系统病理情况，涉及心血管系统、胃肠道的系统病理情况的药物的应用；和包含它们的药物组合物。
背景技术：
在过去的10年中，分子克隆已揭示14种5-羟色胺亚型，这些亚型已被分成7个亚族。已提出5-羟色胺受体的多样性是5-HT系统进化时代的直接结果。除了作为配体门控的离子通道的5-HT3受体以外，所有的受体都是5-羟色胺受体超家族的成员，属于一大类通过G-蛋白与它们的效应子功能相连的受体。(Gerhardt，C.C.等人，Brain Res.746207-219，1997；Hoyer，D等人，Neuropharmacol.36；419-428，1997)。
1994年，在猪尾状核和小脑膜上发现5-HT65-羟色胺受体。从那时起，在嗅结节、额叶和内嗅皮层、伏隔核、纹状体、海马和小脑的分子层中观察到5-HT65-羟色胺受体。5-HT65-羟色胺受体似乎几乎专门存在于脑和5-HT投射区，而不存在于缝核的5-HT神经元中，这表明5-HT6受体可能具有突触后作用。还发现5-HT6受体是G-蛋白超家族的成员，且它们与腺苷酸环化酶第二信使系统正偶联。
5-羟色胺与5-HT6受体结合诱导腺苷酸环化酶的活化，同时增加细胞内cAMP水平。最近对于5-HT65-羟色胺受体的发现已刺激了深入5-HT6-选择性配体的研究，以表明该新的受体亚族的独特性及其本身确切的临床意义。实际上已知许多精神药物(抗抑郁药、抗精神药)表现出对5-HT6的高度亲合力，但是不具有选择性(Monsma，F.J.等人，Molecular Pharmacology(分子药理学)43.320-327，1993；Roth，B.L.等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.(药理实验治疗杂志)268，1403-1410；1994)，而5-HT6受体可能调节中枢神经系统中的胆碱能神经传递。而且，已提出出现在纹状体中含GABA的神经元和海马含谷氨酸的神经元上的5-HT6受体介导内源性5-羟色胺作用。因此，5-HT6受体的配体可能用于治疗运动障碍、抑郁、焦虑、心境障碍、记忆障碍、亨廷顿舞蹈病、帕金森病和阿尔茨海默氏病(Branchek，T.A.和Blackburn，T.P.，Annu.Rev.Pharm.Toxicol.40319-34，2000)。
在数种啮齿动物和人组织中鉴定了5-HT75-羟色胺受体。在大鼠脑中，5-HT7受体出现并特别高度分布在下丘脑、丘脑和海马，而在大脑皮层、纹状体、嗅球和嗅结节中发现较低的5-HT7受体RNAm水平。5-HT7受体RNAm的存在不限于脑，还见于外周组织(脾、胃、肠、心脏、冠状动脉)。5-HT7受体与腺苷酸环化酶系统在功能上偶联。体外药理学证据表明在5-HT7受体刺激之后细胞内cAMP水平升高。同5-HT65-羟色胺受体一样，5-HT7受体的临床价值目前未知(Sleight，A.J.，Boess，F.G.，Bourson，A.，Sibley，D.R.，Monsma，F.J.，1997DN&P；10(4)214-224)。已提出5-HT7受体可能参与调节血压的机理。5-HT7受体高度分布于血管上，药理学数据表明在5-羟色胺与5-HT7受体结合后发生血管舒张，这些事实提示可将5-HT7配体用作降低血压药(Martin，G.R.和Wilson，R.，(1995)British J.Pharmacol.(英国药理学杂志)114383P)。而且，以前证明在下丘脑中丰富存在的5-HT7受体涉及调控中枢神经系统中自发的神经元电活动的生理节奏(Lowenberg，T.N.等人，Neuron(神经元)(1993)11449-58)。
因此，5-HT7配体可以是多种由生理节奏特别是睡眠周期调节的过程的调节剂，它的失调导致睡眠障碍。其它证据表明5-HT7受体可能参与抑郁的发病机理和治疗。大鼠下丘脑中的5-HT7受体结合部位决定了在抗抑郁剂氟西汀长期治疗之后的下调，这一观察支持了这种治疗适应症(Sleight，A.J.等人，Mol.Pharm.(分子药理学)(1996)，4799-103)。神经递质失调假设的严格的经典观点将抑郁与可利用的神经递质的不足或主要是去甲肾上腺素能和/或5-羟色胺能受体系统的反应性低下相关联，这种观点近来已扩展至包括生物节律调节的紊乱。许多人已提出节律保持效力的损害或节律失调导致精神疲劳和抑郁(Goodwin F.K.，Wirz-Justice A.，Wehr T.A.，1982.In CostaRagni(eds.)，Typical and atypical antidepressantClinical Pratical(典型和非典型抗抑郁药临床实践))。
虽然一般认为褪黑激素是主要的生理节奏功能调节剂，但5-羟色胺也起着关键作用，特别是作用于下丘脑交叉上核中的5-HT1a、5-HT1b、5-HT2a、5-HT7亚型(Van Den Pol，A.N.，Dudek，F.E.，(1993)Neurosciensce(神经科学)56793-811；Mullins，U.L.等人，(1999)Neuropsychopharmacology(神经心理药理学)21，(3)352-367)。
5-HT6和5-HT7受体部位同时定位于在功能上与注意力和学习过程有关的脑区域(海马、额叶皮层)，虽然以不同的分布密度存在，并且两种受体在被刺激之后具有相同的增加细胞内cAMP水平的能力表明与5-HT6和5-HT7受体结合的物质可调节个体获知和随后的学习过程所潜在的神经元可塑性机理。
对5-HT6和5-HT7受体同时具有亲合力的配体可能在需要改善认知过程的病症中具有治疗应用(Menese，A.，(1999)Neurosci.Biobehav.Rev.，23(8)1111-25)。
近来的证据提出5-HT7-配体在过敏性肠疾病的治疗中的可能应用。认为胃动力减弱是这种综合征的病理生理学机理中的一种潜在机理，并仍是一个诱人的治疗目标。实际上，新一代促动力药包括5-HT4受体配体(替加色罗、普卡比利)。初步的证据引起对定向针对上述治疗目标的5-HT7受体配体研究的兴趣(De Ponti，F.，Tonini，M.，(2001)Drugs(药物)，61(3)317-332)。实际上，关于5-HT7受体介导平滑肌松驰和5-HT7结合部位定位于肠组织上的观察结果应该表明5-HT7受体的配体的治疗应用。
目前，已鉴定对5-HT6受体具有亲合力的化合物属于不同的化学种类。例如，EP 0 815 861和EP 0 930 302，Hoffmann-La Roche描述磺酰胺和苯并磺酸酯衍生物为上述受体的选择性配体；WO 98/27058，SmithKline Beecham描述羧基酰胺吲哚衍生物为5-HT6受体拮抗剂，而WO 98/27081和WO 99/42465，SmithKline Beecham和US 6,187,805，Merck Sharp和Dohme特别描述了磺酰胺衍生物；WO 00/12623，SmithKline Beecham描述了磺酸酯和磺酰胺衍生物；WO 00/37452，Merck Patent描述磺酰基噁唑基胺；WO 00/63203和US 6,133,287，Allelix Bio-pharmaceutical Inc.描述哌啶子基吲哚用作5-HT6拮抗剂。
已知色胺衍生物用于数种药理学应用。WO 97/06140描述它们用于治疗与褪黑激素紊乱有关的病理情况；WO 97/46525和WO98/23587描述它们作为5-HT1D受体的选择性配体和它们在偏头痛治疗中的应用；WO 97/48680描述用于血管痉挛的治疗；WO 98/06695描述用于皮肤病治疗；WO 98/47868描述作为多种5-HT1受体亚型的拮抗剂的联合活性；WO 00/11619描述它们作为选择性5-HT2A受体的选择性拮抗剂；WO 99/51576描述用于治疗与5-羟色胺能系统有关的神经疾病；WO 99/54301描述它们作为抗菌剂；WO 00/37441描述用于心血管、局部缺血、寄生虫、炎性、神经变性疾病、肌病和镰状细胞贫血的治疗；WO 00/78716和WO 00/44721描述它们作为作用于肾上腺素能系统的活性剂。
注意到其它色胺衍生物对不同于5-HT6的5-羟色胺能受体的活性，例如WO 95/14004、WO 95/24200、WO 96/26922、WO 96/26923、WO 97/13512、WO 99/51576，EP 1023898和WO 00/52002。
关于对5-HT6受体具有特异性活性的化合物，WO 99/47516，Slassi等人描述了对5-HT6受体具有亲合力的在3位被烷基吡咯烷取代的1-酰基或1-磺酰基吲哚。WO 99/65906，Allelix Biopharmaceuticals Inc.公开了与吲哚残基连接的二环哌啶和哌嗪作为5-HT6受体的抑制剂。
专利申请WO 00/34242，Virginia Commonwealth University公开了具有增加的对5-HT6受体的亲合力和选择性的5-羟色胺衍生物。专利申请WO 00/63203，Allelix Biopharmaceuticals Inc.公开了对5-HT6受体具有亲合力的在3位被哌啶取代的1-酰基或1-磺酰基吲哚。
关于5-HT7受体，WO 00/37082，SmithKline Beecham公开了在WO 97/29097、WO 98/48681和WO 97/49695中所述的5-HT7受体拮抗剂用于治疗由局部缺血事件导致的神经元变性的应用；EP 0 998 923，BASF公开5-HT7受体拮抗剂在预防局部缺血，特别是梗塞中的应用；WO 99/54303和WO 98/00400，Meiji公开四氢苯并吲哚用于治疗精神和循环疾病。
发明概述本发明涉及对5-HT6和/或5-HT75-羟色胺受体具有亲合力的基于色胺的配体。从治疗学的观点来看，这些物质可以用于治疗与5-羟色胺水平不足有关的神经系统病理情况，涉及心脏循环系统(高血压)和胃肠道(过敏性肠疾病)的系统病理情况。
已知许多中枢神经系统疾病通过使用可与5-羟色胺受体特异性相互作用的药物来有效地治疗，所述药物由于这个原因在临床上被批准用于治疗偏头痛、抑郁、高血压、精神病和精神疲劳、睡眠障碍和其它由生理节奏失调导致的效应。
已发现式(I)的化合物对5-HT6和/或5-HT7受体具有亲合力， 其中R1和R2，相同或不同，为H或C1-C6直链或支链烷基；R3＝C1-C6直链或支链烷基；R4＝卤素。
因此，本发明的一个目的是以上式(I)的化合物及其药学上可接受的盐用于制备用作5-HT6和/或5-HT75-羟色胺能受体的配体，特别是用于治疗与5-羟色胺水平不足有关的神经系统病理情况，涉及心脏循环系统(特别是高血压)、胃肠道(特别是过敏性肠疾病)的系统病理情况的药物的用途。
本发明的其它目的是式(I)的新化合物，从式(I)中排除这样的化合物其中的R4为氟、氯或溴，R3为甲基或乙基，R1和R2相同或不同，为氢和甲基；一种用于制备所述式(I)的新化合物的方法；其用作药物，特别是用于治疗与5-羟色胺水平不足有关的神经系统病理情况，涉及心血管系统(特别是高血压)、胃肠道(特别是过敏性肠疾病)的系统病理情况的药物的应用；和包含该化合物作为活性成分的药物组合物。
发明详述在式(I)的化合物中，术语C1-C6烷基意指甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、已基和所有可能的异构体，优选甲基和乙基。
卤素意指氟、氯、溴和碘，优选氯和溴。
在式(I)的化合物中，第一优选的小组包括其中的R1和R2相同，特别是甲基的化合物。
第二优选的小组包括这样的式(I)的化合物，其中R3为如以上定义的烷基，特别是甲基或乙基，而R4为氯。
其中的R4为氯的式(I)的化合物对5-HT65-羟色胺受体具有选择性亲合力，因而用于制备用作5-HT6的配体的药物，例如用于治疗抑郁、心境障碍、精神病、精神分裂症、运动障碍、认知障碍、帕金森病、阿尔茨海默氏病、亨廷顿舞蹈病。
第三优选的小组包括这样的式(I)的化合物，其中R3为如以上定义的烷基，特别是甲基，而R4为溴。
特别地，当R4为溴时，所述分子还获得对5-HT7受体亚型的亲合力。
由于这种性能，所述化合物被指示用于治疗抑郁、偏头痛、高血压，特别是改善个体学习过程，对抗生物节律失调和许多源于此的变化(精神疲劳、抑郁、睡眠障碍)。
特别优选的化合物为5-溴-2-甲基-N，N-二甲基色胺(ST 1938)、5-氯-2-乙基-N，N-二甲基色胺(ST 2253)和5-氯-2-甲基-N，N-二甲基色胺(ST 1936)。
在Chapman，N.B等人，J.Chem.Soc.(化学学会杂志)1965；1424-1428中描述了这样的式(I)的化合物，其中R3为甲基，R1和R2相同或不同，为氢和甲基。
根据本发明的化合物可以通过以下路线例示的方法，根据在文献中对类似化合物所报道的步骤来制备(Spadoni，G.等人，J.Med.Chem.(医药化学杂志)，1993；36(25)4069-74)。
对于与上述式(I)有关的目标最终产物，本领域技术人员将能够选择正确的原料化合物和相应的试剂与反应条件。
本发明的方法根据以下报道的路线1完成。
原料化合物5-卤代-2-烷基-吲哚可商购得到或可以由类似J.Med.Chem.1993，36，4069所述的方法制备，但还参见JOC 1994，59，6372-6377。
将式(I)的化合物与可商购得到的1-二甲基氨基-2-硝基乙烯反应。摩尔比不是关键，例如便利的是使所述化合物以等摩尔量反应，即使有关不同的式(I)的最终产物可能考虑到存在过量的一种或另一种反应物。所述反应在三氟乙酸中，并在可以根据所用的反应物、它们的浓度和溶剂而选择的一定的温度下持续一段时间。适宜地，反应可以在低温下，例如0℃，高至与反应条件相容的温度下，在不存在或存在减少量的次要产物或降解的情况下，进行数分钟至数小时的时间。
如果需要的话，使用本领域技术人员已知的常规方法从反应介质中分离化合物(2)，然后将与硝基相邻的乙基双键还原得到对应的饱和衍生物(3)。本领域技术人员可以从前面的段落中获得有关反应条件的考虑。
最终的步骤用在R1和R3的定义中所给出的基团将伯氨基官能化。这通过文献如J.Org.Chem.(有机化学杂志)37，1673-1674(1972)记载的常规方法完成。
以下的实施例进一步例示本发明。
实施例1(E)-5-溴-2-甲基-3-(2-硝基乙烯基)-1H-吲哚将在5mL三氟乙酸中的0.58g 1-(二甲基氨基)-2-硝基乙烯(5mmol)的溶液搅拌并冷却至0℃，加入1.05g(5mmol)5-溴-2-甲基-吲哚，并使所得的混合物在室温下和氮气氛下反应30分钟。然后将反应混合物置于冰水浴中。用乙酸乙酯萃取水溶液，并合并有机相，然后用饱和碳酸氢盐溶液洗涤，随后用水洗涤，最后用无水硫酸钠干燥。过滤后，在低压下除去溶剂，剩下固体、橙色残余物，然后将其悬浮在乙酸乙酯-乙醚混合物中，并过滤。
产率89％Rf＝0.3(环己烷/EtOAc∶1)M.p.196-198℃(分解)1H-NMR(200MHz)(DMSO-d6)δ2.59(s，3H)，7.34(m，2H)，7.97(d，1H，J＝13.2Hz)，8.06(m，1H)，8.26(d，1H，J＝13.2Hz)EIMSm/z 280，282(M+)，154(100)5-溴-2-甲基色胺盐酸盐在氮气氛和0℃下将在25mL无水THF中的硝基乙烯基吲哚(2)(1.7g，6mmol)的溶液滴加到LiAlH4(1.2g，36mmol)在THF(6.5mL)中的悬浮液，并将所得的混合物于室温下搅拌5小时。冷却至0℃后，通过小心地加入水而破坏过量的LiAlH4并使所得的悬浮液通过C盐过滤。将溶剂真空蒸发，用2N HCl将残余物酸化，然后用水和乙酸乙酯进行分配。随后用6N NaOH将水相碱化，并用乙酸乙酯萃取3次。用盐水洗涤合并的有机相，用无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。然后通过加入在无水甲醇中的HCl溶液将所得的游离胺转化为盐酸盐。随后通过在乙酸乙酯中结晶而将盐纯化。
产率69％。
1H NMR(200MHz，(DMSO-d6)δ2,33(s，3H)，7.09(dd，1H，J＝1,9和J＝8,3Hz)，7.21(d，1H，J＝8,3Hz)，7.65(d，1H，J＝1,5Hz)，7.94(br，s，3H)，11,15(s，1H)，7.94(br，s，3H)，11.15(s，1H)。
5-溴-2-甲基-N，N-二甲基色胺(ST 1938)将在16mL MeOH中的40％HCHO溶液(0.95mL)滴加到搅拌的5-溴-2-甲基色胺(0.8g，3.16mmol)、AcOH(0.47mL)和NaCNBH4(0.35g)的溶液。使此溶液在室温和搅拌下反应2.5小时；然后加入5mLK2CO3饱和水溶液；在真空下蒸发甲醇，并用乙酸乙酯萃取水相。
用无水硫酸钠干燥有机相，并在真空下蒸发溶剂后得到一种橙色油，通过硅胶过滤和随后用二氯甲烷-己烷结晶将其纯化。
产率56％M.p.135-136℃Rf＝0,52(CH2Cl2/MeOH/TEA 9∶0,4∶0,4)1H NMR(200MHz，(CDCl3)δ2,35(s，6H)，2,37(s，3H)，2,44-2,52(m，2H)，2,78-2,86(m，2H)，7,11(d，1H，J＝8,5Hz)，7,18(dd，1H，J＝1,6eJ＝8,5Hz)，7,60(d，1H，J＝1,6Hz)，7,95(br s，1H)。
EIMSm/z 280，282(M+)，222，224(100)。
实施例2
根据所述的方法，并根据以上的路线和实施例，制备以下化合物(E)-5-氯-2-甲基-3-(2-硝基乙烯基)-1H-吲哚橙色固体产率85％；M.p..191-193℃1H NMR(200MHz，(丙酮-d6)δ2,68(s，3H)，7,21(dd，1H，J＝1,95和J＝8,5Hz)，7,5(d，1H，J＝8,5Hz)，7,85(d，1H，J＝13,3Hz)，7,86(d，1H，J＝1,95Hz)，8,30(d，1H，J＝13,3Hz)；EIMSm/z 236(M+)，154(100)。
5-氯-2-甲基色胺盐酸盐从EtOH/Et2O沉淀的淡棕色固体结晶。
产率72％1H NMR(200MHz，(DMSO-d6)δ2,33(s，3H)，6,97(dd，1H，J＝1,9和J＝8,3Hz)，7,25(d，1H，J＝8,3Hz)，7,52(d，1H，J＝1,5Hz)，8,03(br，s，3H)，11,15(s，1H)。
5-氯-2-甲基-N，N-二甲基色胺(ST 1936)白色固体；产率75％；M.p.＝126-127℃1H NMR(200MHz，CDCl3)δ2,35(s，6H)，2,38(s，3H)，2,44-2,52(m，2H)，2,79-2,87(m，2H)，7,05(d，1H，J＝1,9和J＝8,6Hz)，7,17(d，1H，J＝8,2Hz)，7,45(d，1H，J＝1,9Hz)，7,86(br s，1H)EIMSm/z 236(M+)，178(100)。
实施例3
反应物(a)t-BuLi，THF，-20℃；EtI，-78°至室温，2h；(b)2N NaOH、MEOH，回流，40h；(c)1-(二甲基氨基)-2硝基乙烯，TFA，0℃，0,5h；(d)LiAlH4，THF，室温，6h；(e)NaCNBH3，40％，HCHO，MeOH，AcOH，室温，2,5h。
N-(苯磺酰基)-5-氯-2-乙基吲哚(2).
在-70℃和氮气氛下将t-BuLi(3.7mL在戊烷中的1.7M溶液)滴加到在THF(35mL)中的N-(苯磺酰基)-5-氯吲哚(1)(J.Org.Chem.(有机化学杂志)1981，46，3859)(1.5g，5.14mmol)的溶液。将混合物搅拌15分钟，在20分钟内温至室温，冷却至-70℃，并用在无水THF(5mL)中的碘乙烷溶液(0.84mL，10.5mmol)处理。将混合物于-78℃下搅拌1小时，使其温至室温，搅拌2小时，倾入冰(15g)和饱和NH4Cl水溶液，然后用乙醚(3×20mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机萃取物，干燥(Na2SO4)，并真空蒸发得到残余物，通过快速色谱处理(硅胶，环己烷/乙酸乙酯，8∶2)和用乙酸乙酯/环己烷结晶而将残余物纯化。
产率80％M.p.108℃(分解)1H-NMR(MHz，)(CDCl3)δ1.33(τ，3H)，3.01(q，2H)，6.35(s，1H)，7.23(dd，1H)，7.39-7.74(m，6H)，8.11(d，1H)
EIMSm/z 319(M+)；178，143(100％)5-氯-2-乙基吲哚(3)将2(1.3g，4.07mmol)、2N NaOH(12mL)和MeOH(62mL)的混合物回流40小时。蒸发有机溶剂，并用EtOAc萃取残余物。用盐水洗涤合并的萃取物，干燥(Na2SO4)，并在真空下蒸发得到残余物，通过快速色谱处理(硅胶，环己烷/乙酸乙酯，8∶2)和用乙醚/环己烷结晶对其进行纯化。
M.p.＝89℃产率90％1H NMR(CDCl3)δ1.35(t，3H)，2.79(q，2H)，6.19(s，1H)，7.06(dd，1H)，7.21(d，1H)，7.49(s，1H)，7.92(br s，1H)EIMSm/z 179(M+)；164(100)(E)-5-氯-2-乙基-3-(2-硝基乙烯基)-1H-吲哚(4)将吲哚3(5mmol)加到搅拌的冰冷的在三氟乙酸(5mL)中的1-(二甲基氨基)-2-硝基乙烯(0.58g，5mmol)的溶液。将混合物于室温和N2气氛下搅拌0.5小时，然后倾入冰水。用乙酸乙酯萃取水溶液，用饱和NaHCO3溶液洗涤合并的有机层，然后用水洗涤。用Na2SO4干燥之后，在减压下蒸发溶剂得到粗橙色固体，将其悬浮在EtOAc-Et2O的混合物中并过滤，或者用硅胶进行色谱处理(环己烷/EtOAc，1∶1，作为洗脱剂)。
产率89％M.p.188℃分解。
1H(CDCl3)δ1,42(t，3H)，3,02(q，2H)，7,21-7,34(m，2H)，7,68(m，1H)，7,72(d，1H)，8,3(d，1H)，8,68(br s，1H)EIMSm/z 250(M+)，203，188(100)5-氯-2-乙基色胺(5)
在氮气氛下将在无水THF(25mL)中的硝基乙烯基吲哚4(6mmol)的溶液滴加到搅拌的冰冷的LiAlH4(1.2g，36mmol)在无水THF(65mL)中的悬浮液，并将混合物于室温下搅拌5小时。冷却至0℃后，通过小心地加入水而破坏未反应的LiAlH4。用Celite垫过滤所得的混合物，在真空下浓缩滤液，然后用2N HCl酸化，并用水和乙酸乙酯分配。用6N NaOH使水相变为碱性，然后用EtOAc萃取(3×)，用盐水洗涤合并的有机层，干燥(Na2SO4)，并在减压下浓缩得到粗油状胺。
(油)；EIMSm/z 222(M+)；192(100)，1775-氯-2-乙基-N，N-二甲基色胺(6)(ST 2253)将在MeOH(16mL)中的40％HCHO(0.95mL)滴加到搅拌的冷却的(0℃)(5)(3.16mmol)、AcOH(0.47mL)和氰基硼氢化钠(0.35g)的溶液。将所得的混合物于25℃下搅拌2.5小时。加入饱和的K2CO3水溶液(5mL)。在真空下除去MeOH，并用EtOAc萃取水相。用Na2SO4干燥后，在减压下蒸发溶剂得到粗残余物，用硅胶过滤而将其纯化。
(非晶形固体)；1H NMR(CDCl3)δ1.3(t，3H)；2.42(s，6H)；2.55(m，2H)，2.83(m，4H)，7.06(dd，1H)，7.19(d，1H)，7.45(m，1H)，7.88(br s，1H)EIMSm/z 250(M+)；192，177，58(100)根据本发明的化合物是5-HT6和/或5-HT75-羟色胺能受体的配体；因此它们用作药物，特别是用于治疗与5-羟色胺水平不足有关的神经系统病理情况，涉及心脏循环系统(高血压)、胃肠道(过敏性肠疾病)的系统病理情况的药物。
用本发明的化合物治疗的病理情况有偏头痛、抑郁、高血压、精神病和其它涉及功能改变，由生理节奏失调和/或丧失(清醒/睡眠周期、褪黑激素合成)导致的过程。
关于一组优选的式(I)的化合物，其中R3为甲基而R4为溴或氯，特别是当R4为溴时，所述分子获得对5-HT7受体亚型的亲合力。由于这种性能，称为ST 1938的化合物被指示用于治疗抑郁、偏头痛和高血压，特别是促进和改善个体的学习过程，和对抗导致精神疲劳、抑郁和睡眠障碍的人生物节律失调。
根据已公开的方法测定对结合5-HT6受体的抑制作用(Monsma，F.J.等人，Molecular Pharm.(分子药理学)，1993，43320-327)。采用稳定转染到HEK293(人胚胎肾细胞)的大鼠5-HT6并以[3H]-LSD(麦角酰二乙胺)作为放射性配体进行结合试验。先将每种化合物溶于DMSO以制备10mM储备溶液，然后将其溶于H2O达到0.1mM的最终浓度。在连续稀释之后，使用一式两份的8种不同浓度(从10μM至0.001nM)获得竞争曲线，由此评价每种受试化合物对5-HT6受体的结合亲合力。实验条件为2nM[3H]-LSD，100μM 5-羟色胺肌酸酐硫酸盐以定义非特异性结合，和60分钟，在37℃下，用于每份样品的温育。在温育之后，在真空下将膜快速过滤通过玻璃纤维过滤器(GF/B，Packard)。用闪烁计数器(Topcount，Packard)，使用液体闪烁混合物(Microscint 0，Packard)测定结合放射性。使用Hill方程曲线拟合法对竞争曲线进行非线性回归分析而测定每种化合物的IC50。然后使用这些值计算抑制常数(Ki)值，由此表示每种受试化合物对5-HT6受体的亲合力。由Cheng Prusoff方程定义Ki值Ki＝IC50/1+([L]/Kd)，其中IC50值是将50％的特异性放射性配体从受体上置换下来的受试化合物的浓度(nM)，L是试验中特异性放射性配体的浓度，而Kd是放射性配体对受体的亲合力。
根据公开的方法(Shen，Y.等人，(1993)Journal BiologicalChemistry(生物化学杂志)26818220-18204)，进行置换实验以测定所述物质对5-HT7受体的亲合力。关于试验的进行，使用被稳定转染至CHO细胞(人卵巢细胞)的人5-HT7受体，并以[3H]-LSD(4nM)作为放射性配体。进一步实验条件为10μM 5-羟色胺作为非特异性配体，和120’，在22℃下，用于每份样品的温育。以一式两份的8种不同浓度(10-5M至10-12M)研究各种受试化合物以获得完全的竞争曲线。先将每种化合物溶于DMSO以获得10-3M储备液，然后将其溶于H2O至最终浓度为10-5M。在真空下通过玻璃纤维过滤器(GF/B，Packard)进行快速过滤而中断每种受试化合物的结合反应。然后用冰冷的缓冲液将过滤器洗涤数次。采用闪烁计数器(Topcount，Packard)，使用液体闪烁混合物(Microscint 0，Packard)测定结合的放射性。如上述，通过对每条竞争曲线进行非线性回归分析而测定IC50值，并由Chen Prusoff方程(Ki＝IC50/(1+L/Kd)计算Ki值。
在表1中，报道了每种受试化合物的5-HT6和5-HT7结合亲合力值。
表1对5-HT6e5-HT7的亲合力
ST 1936、ST 1938、ST 2253表现出对大鼠重组5-HT6受体的高度亲合力。此外，它们的结合亲合力还大于对5-羟色胺的观察结果。
在这些化合物中，称为ST1938的化合物还表现出对人重组5-HT7受体的最高亲合力，而ST1936和ST2253分别表现出中等和可以忽略的亲合力。
检查所选择的化合物以测定它们与5-HT6受体结合的特异性。预先评价对其它5-羟色胺部位的结合亲合力。
在表2中，显示了所选择的化合物对多种5-羟色胺亚型的亲合力值(Ki，nM)。
表2
该表表明化合物ST 1936和ST 2253能够选择性地结合5-HT6受体。而且还在对与其它神经递质有关的一些受体的结合亲合力进行评价之后，测试了ST 1936和ST 2253对5-HT6受体的结合特异性。
在23个部位测试了ST 1936和ST 2253。在大部分的这些受体中，所选择的化合物表现出可以忽略不计的亲合力。具体而言，ST 1936和ST 2253对以下受体的亲合力值类似或大于1000nMα1a和β1肾上腺素能；D1、D2、D3、D4，4、D5多巴胺能；NMDA、毒蕈碱性(非选择性)；N神经元(α-BGTX-sens.)，N神经元(α-BGTX-ins.)烟碱性，H1组胺能，阿片剂(非选择性)，血管加压素的V1a、V1b、V2，褪黑激素的ML1和ML2，NA转运蛋白，DA转运蛋白。此外所述化合物表现出对α1b肾上腺素能受体的中等亲合力，对于ST 1936和ST 2253分别为53nM和69nM。但是，所选择的化合物与α1b受体的相互作用能力比对5-HT6受体的评价值低约2倍和3倍。所有的数据表明化合物ST1936和ST 2253对5-HT6受体具有选择性亲合力。
相对于表现出对5-HT6和5-HT75-羟色胺受体的混合活性的称为ST 1938的所选择化合物而言，其对这些部位表现出的亲合力可以忽略不计(Ki＞1000nM)H1；NMDA；PCP；毒蕈碱性受体；烟碱性受体，阿片剂；血管加压素V1和V2；D1、D2、D3、D4，4、D5；DA转运蛋白，NA转运蛋白。
本发明的另一个目的涉及包含至少一种式(I)的化合物作为活性成分的药物组合物，该化合物单独存在或与一种或多种其它的式(I)的化合物组合，或者该式(I)的化合物与其它用于治疗本文所述的病理情况的活性成分例如其它对5-HT6和/或5-HT75-羟色胺能受体具有活性的产物组合，所述组合物作为单独的剂量或适于联合治疗的形式存在。根据本发明的活性成分与适宜的在制药技术中常用的载体和/或赋形剂混合，例如这些载体和/或赋形剂如在Remington′s PharmaceuticalSciences Handbook(Remington药学科学手册)最新版中所述。本发明的组合物包含治疗有效量的活性成分。其剂量将由本领域技术人员如临床工作人员或医生根据所治疗的病理情况和患者的一般情况或者根据其它活性成分的给药来确定。
药物组合物的实例是允许口服、肠胃外、静脉内、肌内、皮下、透皮给药的药物组合物。
适于此目的的药物组合物为丸剂、硬或软胶囊、粉剂、溶液、悬浮液、糖浆、用于临时配成液体的固体剂型。例如，用于肠胃外给药的组合物是所有的可注射形式，不论肌内、静脉内、皮下注射剂，为溶液、悬浮液和乳液形式。还提及脂质体制剂。也包括活性成分的控释剂型，用于口服，例如用适宜的包衣材料包衣的剂型、微胶囊化粉剂、环糊精复合物，以及长效剂型，如用于进行皮下应用或作为植入物应用。
权利要求
1.式(I)的化合物及其药学上可接受的盐用于制备用作5-HT6和/或5-HT75-羟色胺能受体的配体的药物的应用 其中R1和R2，相同或不同，为H或者C1-C6直链或支链烷基；R3＝C1-C6直链或支链烷基；R4＝卤素。
2.根据权利要求1的应用，其中该药物用于治疗与5-羟色胺水平不足有关的神经系统病理情况，涉及心血管系统和胃肠道的系统病理情况。
3.根据权利要求2的应用，其中该药物用于治疗高血压。
4.根据权利要求2的应用，其中该药物用于治疗过敏性肠疾病。
5.根据权利要求1的应用，其中该药物用于治疗偏头痛、抑郁、高血压、精神病和由生理节奏(清醒/睡眠周期和褪黑激素合成)失调和/或丧失引起的症状。
6.根据权利要求1的应用，其中该药物是5-HT65-羟色胺能受体的配体，并用于治疗抑郁、心境障碍、精神病、精神分裂症、运动障碍、认知障碍、帕金森病、阿尔茨海默氏病、亨廷顿舞蹈病。
7.根据权利要求1的应用，其中在式(I)的化合物中，R1等于R2。
8.根据权利要求1或4的应用，其中在式(I)的化合物中，R3为甲基，而R4为溴或氯。
9.根据权利要求1或5的应用，其中在式(I)的化合物中，R4为溴。
10.根据权利要求9的应用，其中式(I)的化合物为5-溴-2-甲基-N，N-二甲基色胺。
11.根据权利要求1或6的应用，其中在式(I)的化合物中，R4为氯。
12.根据权利要求11的应用，其中式(I)的化合物为5-氯-2-甲基-N，N-二甲基色胺或5-氯-2-乙基-N，N-二甲基色胺。
13.根据权利要求9的应用，其中该药物用作5-HT75-羟色胺能受体的配体。
14.根据权利要求11或12的应用，其中该药物用作5-HT65-羟色胺能受体的配体。
15.根据权利要求13的应用，用于制备用于治疗抑郁、偏头痛和高血压，特别是帮助或改善个体学习过程和对抗导致精神疲劳、抑郁和睡眠障碍的人生物节律失调的药物。
16.根据权利要求14的应用，用于制备用于治疗抑郁、心境障碍、精神病、精神分裂症、运动障碍、认知障碍、帕金森病、阿尔茨海默氏病、亨廷顿舞蹈病的药物。
17.式(I)的化合物及其药学上可接受的盐， 其中R1和R2，相同或不同，为H或C1-C6烷基；R3＝C1-C6烷基；R4＝卤素；附带条件是当R4为氟、氯或溴，R3为甲基时，R1和R2相同或不同，不为H或甲基。
18.用于制备根据权利要求17的化合物的方法，所述方法遵循以下路线
19.根据权利要求17的化合物作为药物的应用。
20.药物组合物，包含至少一种权利要求17的化合物作为活性成分，与药学上可接受的载体和/或赋形剂相混合。
全文摘要
式(I)的化合物及其药学上可接受的盐用作制备作为5－HT
文档编号A61P25/20GK1535146SQ02814337
公开日2004年10月6日 申请日期2002年6月17日 优先权日2001年6月21日
发明者P·米内蒂, M·A·迪切萨雷, G·塔吉亚, G·斯帕多尼, P 米内蒂, 炼嗄, 迪切萨雷 申请人:希格马托制药工业公司