专利名称：Dna诱变损伤的修复的制作方法
技术领域：
本发明涉及牛尿酚、脱氢牛尿酚、异黄3烯和异黄烷化合物在促进DNA诱变损伤的修复方面的用途。
金属硫蛋白(MT)是应答于DNA损伤剂，例如UVR而合成或过量表达的蛋白(Hansen等人，1997)。在绝大多数动物和组织培养物的研究中，较高剂量的辐射用于诱导MT，且因此，很难推知人暴露于较低水平的UVR下或反复照射UVR的结果(Cai等人，1999)。MT的诱导合成被认为是涉及对低剂量UVR照射的适应反应的机理之一，且MT水平的升高似乎与对UVR的防护有关，很可能是通过清除皮肤中的ROS而介导的(Hanada等人，1992)。同样，正如在MT＝I和II敲除小鼠中证实的那样，MT涉及防止UVR对细胞介导的应答的免疫抑制作用(Reeve等人，2000)。UVR在角质形成细胞和皮肤成纤维细胞中诱导免疫组织化学可检测的MT，同时伴有p53的光电导，其表明这些蛋白系统在功能方面是保护性的且有益的。UV照射后2小时，可在皮肤成纤维细胞中检测到MT(Anstey等人，1996)。
牛尿酚、脱氢牛尿酚、isofla-3-ene和异黄烷化合物以及用于生产它们的方法在相关的国际专利申请PCT/AU03/00427和WO98/08503中描述，它们引入此处作为参考。
UV照射皮肤引起DNA损伤，进而导致癌发生。人类最普遍的肿瘤是基底细胞癌(BCC)，其次是鳞状上皮细胞癌(SCC)，更少见恶性黑素瘤。
现在本申请人已经发现，当把本发明的化合物施用于皮肤上时，导致皮肤、特别是被辐射皮肤的基底层中产生的金属硫蛋白升高。
如上所述，金属硫蛋白可影响并促进UV照射过的被试者皮肤的DNA诱变损伤的修复。
根据本发明，提供牛尿酚、脱氢牛尿酚、异黄3烯或异黄烷结构用于保护皮肤免受与UV照射有关的DNA诱变损伤的用途。
另一方面，本发明提供牛尿酚、脱氢牛尿酚、异黄3烯或异黄烷结构用于在皮肤，特别是皮肤基底层中过量表达金属硫蛋白的用途。
根据本发明另一方面，提供一种保护皮肤免受UV诱导的DNA诱变损伤的方法，其包括给皮肤施用含有混合皮肤可接受载体的牛尿酚、脱氢牛尿酚、异黄3烯或异黄烷化合物中的一种或多种的组合物。
异黄3烯和异黄烷化合物，包括其药学可接受的盐和衍生物可由通式(II)代表 其中R1、R2、R3和R4独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R10、OS(O)R10、CHO、C(O)R10、COOH、CO2R10、CONR11R12、烷基、卤代烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、烷芳基、烷氧芳基、硫代、烷基硫代、氨基、烷氨基、二烷氨基、硝基或卤素，或R3和R4是如前面所定义的，且R1和R2与和它们相连的碳原子共同形成选自以下的五元环 R1和R4是如前面所定义的，且R2和R3与和它们相连的碳原子共同形成选自以下的五元环 或
R1和R2是如前面所定义的，且R3和R4与和它们相连的碳原子共同形成选自以下的五元环且其中 R5、R6和R7独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R10、OS(O)R10、CHO、C(O)R10、COOH、CO2R10、CONR11R12、烷基、卤代烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、硫代、烷基硫代、氨基、烷氨基、二烷氨基、硝基或卤素，R8是氢、羟基、烷基、芳基、氨基、硫代、NR11R12、CONR11R12、C(O)R13，其中R13是氢、烷基、芳基、芳烷基或氨基酸、或CO2R14，其中R14是氢、烷基、卤代烷基、芳基或芳烷基，R9是烷基、卤代烷基、芳基、芳烷基、C(O)R13，其中R13是如前面所定义的、或Si(R15)3，其中每个R15独立地是氢、烷基或芳基，R10是氢、烷基、卤代烷基、氨基、芳基、芳烷基、氨基酸、烷氨基或二烷氨基，R11是氢、烷基、芳烷基、烯基、芳基、氨基酸、C(O)R13，其中R13是如前面所定义的、或CO2R14，其中R14是如前面所定义的，R12是氢、烷基或芳基，或R11和R12与和它们相连的氮原子共同形成吡咯烷基或哌啶基，图 代表单键或双键，优选双键，T独立地是氢、烷基或芳基，且X是O、NR12或S，优选O。
牛尿酚与通式(II)相对应，其中R1、R2、R3、R4、R6、R7和R8是氢，R5是羟基，X是O，且 是单键。脱氢牛尿酚与通式(II)相对应，其中R1、R2、R3、R4、R6、R7和R8是氢，R5是羟基，X是O，且 是双键。
皮肤可接受的载体和洗剂是本领域熟知的，且在下列文献中描述，例如Remington’s Pharmaceutical Sciences，Gennaro A.第18版，Mack Publishing Co.，Easton，PA，1990，pp.1492-1517。任何皮肤可接受的载体均可用于本发明的组合物中。此处所用的“皮肤病学可接受的载体”是指赋形剂、稀释剂、载体，其可包括已知用于皮肤病学组合物中的助剂、添加剂、或赋形剂。本发明的组合物包括，但不限于，霜剂、软膏剂、溶液、棒状物、拭纸、洁面剂和/或凝胶。本发明的化合物可简单混合，与适宜的载体混合或掺在一起，从而产生适合施用于皮肤上的组合物。皮肤可接受的载体可包括一种或多种防晒剂。防晒剂包括通常用于阻断紫外线的那些物质。举例性的化合物包括桂皮酸盐的衍生物、PABA、和水杨酸盐。例如，可使用辛基甲氧基桂皮酸盐和2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮(也称作羟苯甲酮)。辛基甲氧基桂皮酸盐和2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮可商业获得，商标分别为Parsol MCX和Benzophenone-3。所用防晒剂的准确量可根据所需的防止阳光中UV辐射的程度而定。
在优选的实施方案中，将通式(II)的一种或多种化合物配制成化妆品。化妆品的例子包括霜剂、凝胶、粉剂、糊剂、饼状物等。通常，这种化妆品可被称作“化妆品”和/或粉底(通常用于提供平滑、均一外观的皮肤并作为彩妆的基础)。
通式(II)的化合物可以0.001％-100％、优选0.1％-20％、最优选0.1％-10％w/w的量用于组合物中。例如，组合物可含有1μm-500mmol、如20μm-400μm牛尿酚或通式(II)的其它化合物。组合物的其余部分可包含一种或多种本领域熟知的皮肤病学可接受的载体和赋形剂。组合物中可使用一种或多种化合物，特别优选牛尿酚和脱氢牛尿酚。可在阳光照射之前、之中和/或之后局部给予皮肤所述组合物。通常，剂量约1-500mg/天，优选2-100mg/天的剂量。
根据本发明另一方面，提供一种用于治疗、改善或预防皮肤癌，如基底细胞癌(BCC)、鳞状上皮细胞癌(SCC)及恶性黑素瘤的方法，其包括将含有通式(II)的牛尿酚、脱氢牛尿酚、或异黄3烯或异黄烷化合物中的一种或多种的组合物施用于被试者的皮肤上。
本发明另一方面提供一种增加皮肤中，如皮肤基底层中金属硫蛋白产生的方法，其包括将牛尿酚、脱氢牛尿酚、异黄3烯或异黄烷化合物中的一种或多种结合皮肤可接受的载体施用于皮肤上。
申请人还发现本发明的化合物可促进DNA修复。促进DNA修复可以是通过增加环丁烷嘧啶二聚物(CPD)的修复率、通过降低p53表达而促进DNA修复、和/或通过促进金属硫蛋白(MT)形成中的一种或多种实现的。
CPD的形成被认为是UV照射的重要的致命和诱变结果(Mitchell等人，1989；Liardet等人，2000)。动物模型已经证实了表皮CPD修复与皮肤癌发生之间的反涵数关系(Young等人，1996)。P53蛋白(TP53)是在UV辐射导致DNA损伤之后表达。P53是一种转录因子，其阻断G1-S期的细胞进程，由此防止受损DNA复制(Campbell等人，1993)。P53蛋白可起肿瘤促进剂的作用(Murphey等人，2001)。
将参考下列非限制性实施例描述本发明。
实施例1牛尿酚对CPD诱导的作用是在受到与模拟日光的紫外线辐射(SSUV)的没有毛发的小鼠(人皮肤病学研究的标准模型)皮肤中检测的。在SSUV后的各个时间点，切下背部皮肤，在标准固定介质(HistoChoiceTM，Amersco Inc，Solon，Ohio，USA)中固定6小时，处理并用石蜡包埋。嘧啶二聚物是用柠檬酸抗原恢复和H3抗-嘧啶二聚物抗体进行免疫组织化学检测的。以40x的放大倍率，在每只小鼠的30个视野中人工计算二聚物-阳性细胞数。
在用1×3MED的SSUV辐射前以及辐射后，每天施用牛尿酚洗剂(含20μM牛尿酚)共7天，牛尿酚的作用可降低二聚物的初始诱导，并提高它们的修复率，这是由24小时时的二聚物数的降低加以证实的(表1)。
表1UV辐射后表皮CPD-阳性细胞的诱导收集时间 处理 CPD+ve细胞/线性的cm正常皮肤0SSUV后1小时赋形剂+SSUV 300±18牛尿酚+SSUV 238±22赋形剂+SSUV 340±55SSUV后24小时牛尿酚+SSUV 167±17在SSUV照射后立即施用牛尿酚(且持续5天)导致辐射后第1天(显著降低23％)和第二天(显著降低42％-没有给出数据)二聚物显著降低。
在SSUV照射之前7天和之后5天施用牛尿酚洗剂(20μM)时，与对照组(单独的赋形剂)相比，在照射后的第1、24和48小时，CPD数立即显著降低(p＜0.05；CPD数分别降低54％、50％和26％)。
实施例2在UV辐射后立即，和4小时和6小时后，将牛尿酚施用于5名人类志愿者的皮肤上。还使用了不含牛尿酚的对照洗剂。UV辐射后24小时，采集皮肤活检样品并利用免疫组织化学测量MT的产生。
表2表示基底真皮和表面真皮中的显示MT阳性染色的细胞数。基底真皮中大约一半的细胞以基线水平组成型表达MT，而在更表面的真皮层中，几乎没有细胞表达MT。照射2.5MED SSUV后24小时，在用牛尿酚处理过的切片和用基础洗剂(赋形剂)中的DMSO处理过的那些之间，MT在真皮基底层中的表达有明显差异。在所有5名参与者中，MT在用牛尿酚处理过的皮肤中的表达水平更高，差异的大小在+4％-+21％之间。
表2治疗组5名人类志愿者的表皮中MT阳性染色的细胞比例总真皮 上层真皮 基底真皮受试者处理 阴性 阳性％ 阴性 阳性％ 阴性阳性％NO1DWH基线 303 201 40 99 0 0 204 201 5010mins255 179 41 72 0 0 183 179 49DMSO 282 185 40 70 0 0 212 185 47牛尿酚303 382 56 185 2 1 118 380 76NO3PPA基线 227 109 32 97 0 0 130 109 4610mins231 237 51 77 4 5 154 233 60DMSO 317 236 43 96 4 4 221 232 51牛尿酚270 271 50 82 0 0 188 271 59NO6MED基线 420 413 50 169 0 0 251 413 6210mins437 565 56 168 1 1 269 564 68DMSO 440 442 50 130 6 4 310 436 58牛尿酚315 539 63 76 8 10 239 531 69N13PDO基线 267 217 45 112 0 0 155 217 5810mins468 703 60 270 10 4 198 693 78DMSO 465 405 47 144 0 0 321 405 56牛尿酚323 527 62 169 5 3 154 522 77N14GBO基线 270 127 32 113 0 0 157 127 4510mins381 242 39 247 0 0 134 242 64DMSO 276 217 44 111 4 3 165 213 56牛尿酚225 234 51 68 1 1 157 233 60注释“基线”是指在照射2.5MED SSUV前采集的刺取活检样品的皮肤切片。
“10分钟”是指在照射2.5MED SSUV后10分钟采集的刺取活检样品的皮肤切片。该皮肤没有用基础洗剂(赋形剂)中的DMSO或200μM牛尿酚处理过。
“DMSO”是指在照射2.5MED SSUV后24小时采集的刺取活检样品的皮肤切片。该皮肤来源于用基础洗剂(赋形剂)中的DMSO处理过的格栅。
“牛尿酚”是指在照射2.5MED SSUV后24小时采集的刺取活检样品的皮肤切片。该皮肤来源于用200μM牛尿酚处理过的格栅。
刚刚照射过UV的个体的基底和基底上角质形成细胞中MT免疫反应性的增加在已用牛尿酚处理过的皮肤中是最高的。
实施例3
利用免疫组织化学测试实施例2中5名人类志愿者的皮肤活检样品的环丁烷嘧啶二聚物的形成。
表3给出用CPD抗体阳性染色的细胞数和百分比。这些数据证实了，正如所预期的，在用2.5MED辐射前，表皮中基本没有CPD-阳性细胞。然而，从UV照射后10分钟的所有参与者采集的皮肤切片显示出高水平的DNA损伤，阳性染色的细胞比例为36％(参与者N01DWH和N03PPA)-87％(参与者N14GBO)。
UV照射后24小时所采集的皮肤切片显示出在所有被试者中，CPD损伤水平均显著降低。对于5名参与者中的4名而言，与用基础洗剂(赋形剂)中的DMSO处理过的皮肤切片相比，用牛尿酚洗剂处理过的皮肤切片中的CPD-阳性细胞成比例地减少。
表3治疗组5名人类志愿者的表皮中CPD阳性染色的细胞比例总真皮 上层真皮基底真皮受试者处理阴性阳性 ％ 阴性阳性 ％ 阴性 阳性 ％NO1DWH基线345 0 0134 0 02110 010mins 162 10740 64 51 44 98 56 36DMSO231 10531 81 47 37 15058 28牛尿酚 164 39 19 70 23 25 94 16 15NO3PPA基线309 0 0104 0 02050 010mins 204 19148 56 10665 14885 36DMSO179 25 12 55 20 27 1245 4牛尿酚 349 18 570 17 20 2791 0NO6MED基线309 0 090 0 02190 010mins 136 36473 19 19891 11716659DMSO339 65 16 112 59 35 2276 3牛尿酚 279 92 25 98 71 42 18121 10N13PDO基线205 0 060 0 01450 010mins 69 19574 20 94 82 49 10167DMSO105 68 39 78 51 40 27 17 39牛尿酚 213 94 31 79 50 39 13444 25N14GBO基线255 0 098 0 01570 010mins 34 38992 0 157100 34 23287DMSO240 13135 93 69 43 14762 30牛尿酚 188 85 31 63 44 41 12541 25注释“基线”是指在照射2.5MED SSUV前采集的刺取活检样品的皮肤切片。
“10分钟”是指在照射2.5MED SSUV后10分钟采集的刺取活检样品的皮肤切片。该皮肤没用基础洗剂(赋形剂)中的DMSO或200μM牛尿酚处理过。
“DMSO”是指在照射2.5MED SSUV后24小时采集的刺取活检样品的皮肤切片。该皮肤来源于用基础洗剂(赋形剂)中的DMSO处理过的格栅。
“牛尿酚”是指在照射2.5MED SSUV后24小时采集的刺取活检样品的皮肤切片。该皮肤来源于用含200μM牛尿酚的洗剂处理过的格栅。当把所有参与者的数据汇集在一起时，可以看出用牛尿酚处理过的皮肤切片在第24小时的CPD损伤水平适度降低。
实施例4在UV辐射后，测试实施例2中5名人类志愿者的皮肤活检样品的P53染色。结果在表4中给出。
表4治疗组5名人类志愿者的表皮中p53阳性染色的细胞比例总真皮 上层真皮基底真皮受试者 处理阴性阳性 ％ 阴性阳性 ％ 阴性 阳性 ％NO1DWH 基线261 0 0115 0 01460 010mins 343 1 0154 1 11890 0DMSO187 12 679 4 51088 7牛尿酚 270 94 26 109 48 31 16146 22NO3PPA 基线274 2 1112 1 11621 110mins 316 2 1114 2 22020 0DMSO223 55 20 81 31 28 14224 14牛尿酚 337 87 21 165 72 30 17215 8NO6MED 基线412 1 0134 0 02781 010mins 402 3 1153 1 12492 1DMSO462 13322 165 77 32 29756 16牛尿酚 500 50 9250 19 725031 11N13PDO 基线325 0 0141 0 01840 010mins 304 0 0140 0 01640 0DMSO222 45 17 109 8 711337 25牛尿酚 287 13 4147 4 31409 6N14GBO 基线321 0 0149 0 01720 010mins 292 4 1185 2 11072 2DMSO217 19047 106 10650 11184 43牛尿酚 227 76 25 109 35 24 11841 26
注释“基线”是指在照射2.5MED SSUV前采集的刺取活检样品的皮肤切片。
“10分钟”是指在照射2.5MED SSUV后10分钟采集的刺取活检样品的皮肤切片。该皮肤没用基础洗剂(赋形剂)中的DMSO或200μM牛尿酚处理过。
“DMSO”是指在照射2.5MED SSUV后24小时采集的刺取活检样品的皮肤切片。该皮肤来源于用基础洗剂(赋形剂)中的DMSO处理过的格栅。
“牛尿酚”是指在照射2.5MED SSUV后24小时采集的刺取活检样品的皮肤切片。该皮肤来源于用200μM牛尿酚处理过的格栅。
正如所预期的，在用2.5MED辐射前，在所有参与者的表皮中均基本上没有表达p53的细胞。类似的，与文献所述一致的是，在UV照射后10分钟，从参与者采集的皮肤切片显示可忽略不计的p53表达水平。
与UV照射后24小时采集的皮肤切片在所有被试者中显示明显更高的p53表达水平。在5名用牛尿酚处理过的被试者中的4名中，上层和/或基底表皮中的p53表达百分比降低。例如，与赋形剂对照组相比，在被试者N13PDO和N14GBO中，p53染色的百分比显著降低(通常高于50％)。
结论在这些实验中评价的生物标记是以它们和皮肤癌的生物学相关性为基础而选择的(其与UV-诱导的DNA诱变损伤直接相关)。
UV-诱导的氧化损伤现在被认为可能是皮肤癌的重要原因。MT是具有抗-氧化性的分子，它们应答于UV照射而被特异性诱导。本研究发现了一致的证据，即用牛尿酚，且据信用通式(II)的其它化合物处理过的人类皮肤可较之用基础洗剂处理过的皮肤诱导更多的MT。
CPD是UV辐射后，分子损伤的最早期指示剂，且如果不被修复将导致皮肤细胞DNA的固定突变。因此，照射后处理的作用的其中一个机理是增加对这些损伤的修复率。这里进行的实验表明CPD修复可由局部施用牛尿酚组合物及含有一种或多种通式(II)化合物的其它组合物来提高。
很明显P53是一种重要的调节基因，其通常在表皮皮肤癌中突变。此外，在正常皮肤细胞中，p53在UV照射后被向上调节，从而防止DNA损伤修复前的有丝分裂。对5名被试者中的4名而言，在引起表达p53的上表皮或基底表皮中的细胞数降低的研究中牛尿酚可调节p53的表达。
在本说明书和权利要求书中，除非另有说明，词语“包含”，可理解为暗含包括规定的整体或整体的步骤或组或步骤，但不排除任何其它整体或整体的步骤或组或步骤。
本说明书中的任何现有技术的参考文献都不是，且不应被认为是澳大利亚常规知识的现有技术形式的确认或任何形式的暗示。
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权利要求
1.一种用于保护皮肤免受UV诱导的DNA诱变损伤的方法，其包括给皮肤局部施用含有混合皮肤病学可接受载体的一种或多种通式(II)的化合物或其药学可接受的盐或衍生物的组合物 其中R1、R2、R3和R4独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R10、OS(O)R10、CHO、C(O)R10、COOH、CO2R10、CONR11R12、烷基、卤代烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、烷芳基、烷氧芳基、硫代、烷基硫代、氨基、烷氨基、二烷氨基、硝基、或卤素，或R3和R4是如前面所定义的，且R1和R2与和它们相连的碳原子共同形成选自以下的五元环 R1和R4是如前面所定义的，且R2和R3与和它们相连的碳原子共同形成选自以下的五元环 或R1和R2是如前面所定义的，且R3和R4与和它们相连的碳原子共同形成五元环 且其中R5、R6和R7独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R10、OS(O)R10、CHO、C(O)R10、COOH、CO2R10、CONR11R12、烷基、卤代烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、硫代、烷基硫代、氨基、烷氨基、二烷氨基、硝基、或卤素，R8是氢、羟基、烷基、芳基、氨基、硫代、NR11R12、CONR11R12、C(O)R13，其中R13是氢、烷基、芳基、芳烷基或氨基酸，或CO2R14，其中R14是氢、烷基、卤代烷基、芳基或芳烷基，R9是烷基、卤代烷基、芳基、芳烷基、C(O)R13，其中R13是如前面所定义的、或Si(R15)3，其中每个R15独立地是氢、烷基或芳基，R10是氢、烷基、卤代烷基、氨基、芳基、芳烷基、氨基酸、烷氨基或二烷氨基，R11是氢、烷基、芳烷基、烯基、芳基、氨基酸、C(O)R13，其中R13是如前面所定义的、或CO2R14，其中R14是如前面所定义的，R12是氢、烷基或芳基，或R11和R12与和它们相连的氮原子共同形成吡咯烷基或哌啶基，图 代表单键或双键，优选双键，T独立地是氢、烷基或芳基，且X是O、NR12或S，优选O。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种通式(II)化合物包括牛尿酚和脱氢牛尿酚。
3.根据权利要求1所述的方法，其是用于预防皮肤癌形成的方法。
4.根据权利要求3所述的方法，其中皮肤癌选自基底细胞癌、鳞状上皮细胞癌及恶性黑素瘤。
5.根据权利要求1所述的方法，其中通过增加环丁烷-嘧啶二聚物的修复率、促进金属硫蛋白的形成、和降低p53表达中的一种或多种来保护皮肤免受UV-诱导的诱变损伤。
6.根据权利要求1-5所述的方法，其中在UV照射之前、之中和/或之后给予所述组合物。
7.根据权利要求6所述的方法，其中在UV照射之前给予所述组合物。
8.根据权利要求6所述的方法，其中在UV照射之前和之后给予所述组合物。
9.根据权利要求1-8所述的方法，其中所述组合物包含20μm-500mmol的通式(II)化合物。
10.混合皮肤病学可接受载体的一种或多种通式(II)化合物或其药学可接受的盐或衍生物用于制备保护皮肤免受与UV照射有关的DNA诱变损伤的局部组合物的用途， 其中R1、R2、R3和R4独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R10、OS(O)R10、CHO、C(O)R10、COOH、CO2R10、CONR11R12、烷基、卤代烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、烷芳基、烷氧芳基、硫代、烷基硫代、氨基、烷氨基、二烷氨基、硝基或卤素，或R3和R4是如前面所定义的，且R1和R2与和它们相连的碳原子共同形成选自以下的五元环 R1和R4是如前面所定义的，且R2和R3与和它们相连的碳原子共同形成选自以下的五元环 或R1和R2是如前面所定义的，且R3和R4与和它们相连的碳原子共同形成选自以下的五元环 且其中R5、R6和R7独立地是氢、羟基、OR9、OC(O)R10、OS(O)R10、CHO、C(O)R10、COOH、CO2R10、CONR11R12、烷基、卤代烷基、芳烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、硫代、烷基硫代、氨基、烷氨基、二烷氨基、硝基或卤素，R8是氢、羟基、烷基、芳基、氨基、硫代、NR11R12、CONR11R12、C(O)R13，其中R13是氢、烷基、芳基、芳烷基或氨基酸，或CO2R14，其中R14是氢、烷基、卤代烷基、芳基或芳烷基，R9是烷基、卤代烷基、芳基、芳烷基、C(O)R13，其中R13是如前面所定义的、或Si(R15)3，其中每个R15独立地是氢、烷基或芳基，R10是氢、烷基、卤代烷基、氨基、芳基、芳烷基、氨基酸、烷氨基或二烷氨基，R11是氢、烷基、芳烷基、烯基、芳基、氨基酸、C(O)R13，其中R13是如前面所定义的、或CO2R14，其中R14是如前面所定义的，R12是氢、烷基或芳基，或R11和R12与和它们相连的氮原子共同形成吡咯烷基或哌啶基，图 代表单键或双键，优选双键，T独立地是氢、烷基或芳基，且X是O、NR12或S，优选O。
11.根据权利要求10所述的用途，其中所述一种或多种通式(II)化合物包括牛尿酚和脱氢牛尿酚。
12.根据权利要求10所述的用途，其是用于预防皮肤癌形成的方法。
13.根据权利要求12所述的用途，其中皮肤癌选自基底细胞癌、鳞状上皮细胞癌及恶性黑素瘤。
14.根据权利要求10所述的用途，其中通过增加环丁烷-嘧啶二聚物的修复率、促进金属硫蛋白的形成、和降低p53表达中的一种或多种来保护皮肤免受DNA诱变损伤。
15.根据权利要求10-14所述的用途，其中在UV照射之前、之中和/或之后给予所述组合物。
16.根据权利要求15所述的用途，其中在UV照射之前给予所述组合物。
17.根据权利要求15所述的用途，其中在UV照射之前和之后给予所述组合物。
18.根据权利要求10-17所述的用途，其中所述组合物包含20μm-500mmol的通式(II)化合物。
19.通式(II)的化合物用于保护皮肤免受与UV照射有关的DNA诱变损伤的用途。
20.根据权利要求1-9所述的方法，其中所述组合物包括化妆或防晒组合物。
21.根据权利要求10-19所述的用途，其中所述组合物包括化妆或防晒组合物。
22.一种化妆或防晒组合物，其包含与一种或多种皮肤可接受的载体或赋形剂相结合的如上文所定义的一种或多种通式(II)化合物。
23.根据权利要求22所述的化妆组合物，其包含化妆或粉底组合物。
全文摘要
本发明描述了用于保护皮肤免受UV－诱导的DNA诱变损伤的方法，包括给予混合皮肤可接受载体的牛尿酚、脱氢牛尿酚、异黄3烯和异黄烷化合物中的一种或多种。本发明还描述了用于预防皮肤癌形成的方法。
文档编号A61K31/35GK1688285SQ03824011
公开日2005年10月26日 申请日期2003年9月5日 优先权日2002年9月6日
发明者G·E·凯利, A·哈斯班德, C·沃尔克 申请人:诺沃根研究有限公司