专利名称：从蜜蜂胚胎中提取蜂子精华素的方法
技术领域：
本发明涉及一种从蜜蜂胚胎中提取可供人们直接口服健身或美容护肤的蜂子精华素的方法。
背景技术：
蜜蜂胚胎又称之谓蜂子，它包括蜂皇胚胎、雄蜂胚胎、工蜂胚胎，它们的营养成份和药理作用相仿，只是前两种胚胎的性能优于后者，尤其是蜂皇胚胎，但蜂皇胚胎和雄蜂胚胎的数量远少于工蜂胚胎，故人们通常将工蜂胚胎称作蜂子。关于蜂子对人体的作用已在我国多部药典中记载，例如在《神农本草经》中“蜂子……治风头、除蛊毒、补虚羸伤中，久服令人光泽，好颜色、不老”；在《名医别录》中“蜂子轻身益气，治面目萎黄，精血不畅……”；近代的《中国蜂业》中也有记载“临床证明，蜂皇幼虫能调节中枢神经系统，既能振奋精神，增加食欲，增加体力，又能益智安神、改善睡眠；……还对白血球减少症、神经衰弱、风湿性关节炎、月经失调、营养性水肿、肝脏病及溃疡病等都有较好的疗效”。但长期以来，对于这种其貌似蝇蛆的蜂子，人们比较忌诲、不敢直接取用；有的试将它与中草药一起煎煮，可是蜂子的营养组分不全都能溶于水，并且也不能承受得了100℃的高温长时间煎煮；总之，对于药典中记载的蜂子营养和药理作用，因人们长期以来缺少一种能保全其营养的可靠提取方法而不能利用起来。
发明内容
本发明是要解决上述现有技术中不能利用蜂子资源的问题，提供一种能有效地从蜜蜂胚胎中提取蜂子精华素的方法，以使提取到的蜂子精华素具有我国古代药典中所记载的有关蜂子的营养价值和药理作用，并可直接供人体口服健身、护肤抗衰老、延年益寿，同时还使该方法具有科学可靠、不破坏蜂子的有效成份，且操作简便、成本较低等特点。
本发明从蜜蜂胚胎中提取蜂子精华素的方法，它包含以下的步骤1)制备活性物质提取液先将新鲜的蜜蜂胚胎粉碎呈浆状、置于可密闭的器具内，再加入酒精度不低于75％(V/V)的食用酒精并搅拌，使胚胎浸渍液的酒精度至45～60％，在室温中浸渍15～25天，且在浸渍过程中作间歇搅拌，以充分浸渍出胚胎组织中的有效成分，经离心过滤得到滤液，同时又用无菌水洗涤滤渣，再离心过滤，此后将所得到的洗涤液与滤液合并、再过滤，滤得活性物质提取液、待用，并且洗涤后的残渣也待用；2)制备复合氨基酸液将上述的残渣置于不锈钢容器中，并以100℃蒸汽加热20～30分钟，冷却至50℃以下，然后加入与残渣等重量的无菌水进行匀浆，此后加入其浓度为6～7％的NaOH水溶液，并搅拌至PH＝9，同时加入活力单位为2000u/g胰蛋白酶、其量为酶解底物重量的0.3～0.8％，最后在温度46～50℃搅拌下进行酶促水解2～4小时得到水解物，再在水解物中加入其量为残渣重量2～5倍的无菌水，并以浓度低于3N的食用盐酸，使其PH＝4.0～4.5，并继续搅拌2小时，以充分溶出其有效成分；然后升温到75～80℃，且搅拌30分钟进行灭酶，再在5～0℃下冷沉12～24小时，以离心过滤得到复合氨基酸液；3)制取蜂子精华素原液将上述的活性物质提取液与复合氨基酸液合并、搅拌、压滤，再将滤得的滤清液减压蒸发，在温度45～55℃、真空度0.091～0.085兆帕下浓缩，并在抽样检测浓缩液中的可溶性干物质含量达35～45％时，即得琥珀色的蜂子精华素原液；4)在蜂子精华素原液中加入常规用量的天然防腐剂并充分均质，即可制得本发明的蜂子精华素。
上述的方法中所用的蜜蜂胚胎可以是蜂皇幼虫、雄蜂幼虫及蛹、工蜂幼虫及蛹。
以本发明方法制得的蜂子精华素，其组分包含有天门冬氨酸、酪氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、赖氨酸、谷氨酸、组氨酸、甘氨酸、精氨酸、丙氨酸、脯氨酸、缬氨酸、胱氨酸、甲硫氨酸、色氨酸、异亮氨酸、亮氨酸。
上述各组分对人体的保健和药理作用如下天门冬氨酸能阻止癌细胞(白血病)的增殖；能改善心肌收缩力、降低氧消耗量而用于恢复疲劳，治疗心脏病、肝病、糖尿病。
苏氨酸能参与脂肪新陈代谢，预防肝脏病变。
丝氨酸是合成嘌呤、胸腺嘧啶、胆碱的前体。
谷氨酸参与脑蛋白和碳水化合物的代谢，改进和维持脑机能。
甘氨酸与谷氨酸、丙氨酸一起使用，对前列腺肥大并发症、排尿障碍、频尿、残尿等症状颇有效。
丙氨酸对体内蛋白质合成过程起重要作用。
缬氨酸预防中枢神经系统功能紊乱，共济失调、四肢震颤。
甲硫氨酸能治疗食欲减退、生长减缓、肾脏肿大、胃溃疡、肝脏铁堆积。
异亮氨酸能治疗神经障碍、食欲减退和贫血。
亮氨酸可作头晕治疗药和营养滋补剂类药物。
酪氨酸是合成甲状腺素、肾脏腺素的原料，也可作为降压药制剂。
苯丙氨酸可作为肾脏腺素、甲状腺素和黑色素的原料，可抑制肿瘤蛋白质的合成，具有抗肿瘤作用。
赖氨酸是合成大脑神经再生性细胞和其他核蛋白、血红蛋白等的重要原料，可调节人体代谢平衡，提高胃液分泌，促进幼儿生长和智力发育，防止老人记忆衰退。
组氨酸可扩张血管、降低血压、减轻肾源性贫血。
精氨酸可构成精子蛋白质，对男性不育症有效。
脯氨酸可增强牙齿、骨骼中软骨及韧带组织，还具有降血压作用。
胱氨酸对放射线有防治效果，是治疗药物中毒、白血球减少、皮肤损伤的药物。
色氨酸与苏氨酸一起使用，可防止皮肤老化、促进毛发生长。
从上述十八种组分对人体保健和药理作用，足以说明本发明方法制得的蜂子精华素正是一种在我国多部药典中所记载的能供人们健身防病、护肤抗衰老、延年益寿的物质，且它能直接以口服液，或口服乳剂、口服软胶囊等剂型供人们服用，也可用作制药领域的天然氨基酸输液制剂，或者用作为嫩肤防皱和养颜悦目的疗效化妆品添加剂、缓释剂；在分离、纯化后可得到多种单个氨基酸或保幼激素、蜕皮激素等。
本发明所用的天然防腐剂可以是天然食用防腐剂，如乳链菌肽(Nisin)；也可以是自制的天然防腐剂。自制的天然防腐剂的制备方法是取用含20％蜂胶的蜂胶乙醇溶液37.5(重量％)、取用Tween-20 12.5(重量％)、取用Tween-60 50％(重量％)，三者混合并充分搅拌即可。
本发明在蜂子精华素原液中加入其重量为0.5～2.0％的活性碳，并在35～45℃下搅拌20～30分钟，经过滤、脱色即成为可用作高档疗效化妆品的主料的浅琥珀色浓缩液。
本发明的有益效果是1)本发明通过物理和生化的方法解决了长期以来人们无法从蜜蜂胚胎中提取其有效组分的问题，所制得的蜂子精华素是一种源自于蜜蜂胚胎而具有与人体脏器良好的亲和性的物质，它富含小分子的生理活性物质、氨基酸、多种维生素和矿物质元素等，故在用于人体的营养保健时其药理功效显著；2)所制得的产品是一种蜜蜂胚胎组织细胞的内容物，故在用于人体嫩肤、防皱、养颜悦目等高档疗效化妆品的主料时，具有其它生物活性物质所无法比拟的功效；3)本发明方法只需采用投资费用较低的通用设备，且操作所用的溶剂、配料、胰蛋白酶等均可从市场上廉价、方便地买到，操作也简便，因此其可行、可靠且制造成本低。
具体实施例方式
实施例1. 本实施例的从蜜蜂胚胎中提取蜂子精华素的方法包含以下的步骤1)制备活性物质提取液先将新鲜的蜜蜂胚胎粉碎呈浆状、置于带塞的大玻璃瓶或有盖的陶瓷瓦缸中，再缓缓加入酒精度为75％(V/V)的食用酒精并搅拌，使胚胎浸渍液的酒精度至48～56％(V/V)时，在室温中浸渍15～25天，且在浸渍过程中作间歇搅拌，以充分浸渍出胚胎组织中的有效成分；停止浸渍并静置后，用双层布袋离心过滤、收集过滤液；过滤后的残渣用少量的无菌水搅拌洗涤并经离心过滤得到洗涤液，最后将上述所得的洗涤液与过滤液合并、过滤，滤得活性物质提取液、待用，并且洗涤后的残渣也留着待用；2)制备复合氨基酸液将上述的残渣置于不锈钢容器中，并以100℃蒸汽加热25～28分钟，冷却至50℃以下，然后加入与残渣等重量的无菌水对其匀浆，此后加入其浓度为6～7％的NaOH水溶液并搅拌至PH＝9，同时加入活力单位为2000u/g胰蛋白酶、其量为酶解底物重量的0.5～0.6％，最后在温度47～48℃搅拌下进行酶促水解3小时左右，得到水解物，再在水解物中加入其量为残渣重量4倍的无菌水，并以浓度2N的食用盐酸，使其PH调至4.0～4.5，并继续搅拌2小时，以充分溶出其有效成分；然后升温到78℃左右，且搅拌约30分钟进行灭酶，再在温度为4℃左右冷沉20小时，以离心过滤得到复合氨基酸液；3)制取蜂子精华素原液将上述的活性物质提取液与复合氨基酸液合并、搅拌、压滤，再将滤得的滤清液减压蒸发，在温度50℃、真空度0.091～0.085兆帕下浓缩，并抽样检测浓缩液中的可溶性干物质含量达39％时，即得琥珀色的蜂子精华素原液；4)在蜂子精华素原液中加入常规用量的天然防腐剂并充分均质，即得本发明的蜂子精华素。
本发明方法制得的蜂子精华素经“浙江省测试技术研究所”测定，所含组分列于下表(下表内的各组分含量是取三次测试的平均数值，单位为mg/100ml)蜂子精华素中氨基酸成分与含量表
上表中的色氨酸因设备的原因未测，并且蜂子精华素中还含有的保幼激素、蜕皮激素因无对照品而无法测定数据，还有多种维生素和矿物质也有待于检测。
实施例2.与实施例1提取蜂子精华素的方法所不同的是本实施例所用的天然防腐剂是自制的，它含20％蜂胶的蜂胶乙醇溶液37.5(重量％)、Tween-20 12.5(重量％)、Tween-6050％(重量％)。
实施例3.与实施例1或2的提取蜂子精华素的方法所不同的是本实施例在制得的蜂子精华素原液时，往该原液中加入其重量为0.5～1.0％的活性炭，加热至35～45℃、搅拌30分钟，趁热粗滤脱炭，再精滤得到制药领域用的天然氨基酸输液制剂。
实施例4.与实施例1或2或3的提取蜂子精华素的方法所不同的是本实施例在制得的蜂子精华素原液时，往该原液中加入其重量为0.5～2.0％的活性炭，并在35～45℃下搅拌20～30分钟，趁热粗滤脱炭，再经过滤得到用于美容护肤的主料。
权利要求
1.一种从蜜蜂胚胎中提取蜂子精华素的方法，它包含以下的步骤1)制备活性物质提取液先将新鲜的蜜蜂胚胎粉碎呈浆状、置于可密闭的器具内，再加入酒精度不低于75％(V/V)的食用酒精并搅拌，使胚胎浸渍液的酒精度至45～60％，在室温中浸渍15～25天，且在浸渍过程中作间歇搅拌，以充分浸渍出胚胎组织中的有效成分，经离心过滤得到滤液，同时又用无菌水洗涤滤渣，再离心过滤，此后将所得到的洗涤液与滤液合并、再过滤，滤得活性物质提取液、待用，并且洗涤后的残渣也待用；2)制备复合氨基酸液将上述的残渣置于不锈钢容器中，并以100℃蒸汽加热20～30分钟，冷却至50℃以下，然后加入与残渣等重量的无菌水进行匀浆，此后加入其浓度为6～7％的NaOH水溶液，并搅拌至PH＝9，同时加入活力单位为2000u/g胰蛋白酶、其量为酶解底物重量的0.3～0.8％，最后在温度46～50℃搅拌下进行酶促水解2～4小时，得到水解物，再在水解物中加入其量为残渣重量2～5倍的无菌水，并以浓度低于3N的食用盐酸，使其PH＝4.0～4.5，并继续搅拌2小时，以充分溶出其有效成分；然后升温到75～80℃，且搅拌30分钟进行灭酶，再在5～0℃下冷沉12～24小时，以离心过滤得到复合氨基酸液；3)制取蜂子精华素原液将上述的活性物质提取液与复合氨基酸液合并、搅拌、压滤，再将滤得的滤清液减压蒸发，在温度45～55℃、真空度0.091～0.085兆帕下浓缩，并抽样检测浓缩液中的可溶性干物质含量达35～45％时，即得琥珀色的蜂子精华素原液；4)在蜂子精华素原液中加入常规用量的天然防腐剂并充分均质，即可制得本发明的蜂子精华素。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征是所说的蜜蜂胚胎是蜂皇幼虫、雄蜂幼虫及蛹、工蜂幼虫及蛹。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征是所说的天然防腐剂是天然食用防腐剂——乳链菌肽。
4.根据权利要求所述1的方法，其特征是所说的天然防腐剂是自制的天然防腐剂，其含有20％蜂胶的蜂胶乙醇溶液37.5(重量％)、Tween-20 12.5(重量％)、Tween-60 50％(重量％)。
5.根据权利要求1的方法提取的蜂子精华素，它包含有天门冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、精氨酸、色氨酸。
6.根据权利要求5所述的蜂子精华素，其特征是它能直接用作口服液，或口服乳剂、口服软胶囊。
7.根据权利要求1或2或3或4所述的提取蜂子精华素的方法，其特征是在制得的蜂子精华素原液时，往该原液中加入其重量为0.5～1.0％的活性炭，加热至35～45℃、搅拌30分钟，趁热粗滤脱炭，再精滤得到制药领域用的天然氨基酸输液制剂。
8.根据权利要求1或2或3或4所述的提取蜂子精华素的方法，其特征是在制得的蜂子精华素原液时，往该原液中加入其重量为0.5～2.0％的活性炭，并在35～45℃下搅拌20～30分钟，趁热粗滤脱炭，再经过滤得到用于美容护肤的主料。
全文摘要
从蜜蜂胚胎中提取蜂子精华素的方法。用于口服健身或美容护肤的蜂子精华素制备方法。粉碎新鲜蜜蜂胚胎并加食用酒精，室温中浸渍、间歇搅拌、过滤得到滤液，再用无菌水洗涤滤渣，并取洗涤液与滤液合并、滤得活性物质提取液；加热残渣并用无菌水匀浆、调pH至9，再加入活力单位为2000u/g胰蛋白酶、其量为酶解底物重量的0.3～0.8％，在温度46～50℃进行酶促水解，并在水解物中加无菌水、调pH至4.0～4.5、再升温灭酶、冷沉、离心过滤得到复合氨基酸液，最后将活性物质提取液与其混合压滤、浓缩得到蜂子精华素原液，再加天然防腐剂并均质得到蜂子精华素产品。本发明解决人们长期以来不能提取蜂子有效成分而谋福于人类的问题。
文档编号A61P1/00GK1562086SQ20041001734
公开日2005年1月12日 申请日期2004年3月25日 优先权日2004年3月25日
发明者夏介青 申请人:夏介青