专利名称：褪黑素鼻腔给药制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种含褪黑素的鼻腔给药制剂，其包括褪黑素及选自至少一种聚乙二醇200、聚乙二醇300、聚乙二醇400、聚乙二醇600的聚乙二醇。
背景技术：
褪黑素是人类松果体分泌产生的一种吲哚类激素，具有促进睡眠、延缓衰老、增强免疫和抗肿瘤等作用。褪黑素如作为一种新型催眠药，有其独特的优点(1)小剂量(0.1～0.3mg)下就有较为理想的催眠效果；(2)褪黑素是一种内源性的物质，通过对内分泌系统的调节而起作用，对机体来说并非异物，在体内有其自身的代谢途径，不会造成母药及其代谢物在体内蓄积；(3)褪黑素生物半衰期短，在口服几小时后即降至正常人的生理水平，不会因浓度残余而影响次日的精力，且即使发生药物滥用或过量服用，一般也不会发生生命危险；(4)毒性极小，动物实验中测不出其LD50，大剂量(800mg·kg-1)时也不引起大鼠死亡，再大的剂量因受水中溶解度的限制而不可能。
褪黑素在人体的口服吸收很不稳定，首过效应明显，同一剂量的褪黑素在不同个体可有10～20倍的差异，另外，口服给药起效较慢。为此，人们探讨了褪黑素非口服途径给药的可行性。1980年，HoechstAG申请了一项日本专利J55057563，该专利中处方组成为100mg褪黑素溶于10ml5％的乙醇溶液中，但该处方存在严重的副反应。该专利中另一处方组成采用丙二醇增溶，但丙二醇同样对鼻粘膜有严重副反应。PCT专利申请WO98/42333和美国专利US6007834也披露了一种含褪黑素的鼻腔给药制剂，其中采用环糊精类化合物或甘油增溶。
发明内容
本发明的目的是提供一种新的含褪黑素的鼻腔给药制剂，及其制备方法。本发明人经研究发现，聚乙二醇与褪黑素形成的鼻腔制剂显示出药物吸收迅速，起效快，且绝对生物利用度高的特点并优于已知报道的褪黑素鼻腔给药制剂。
因此，本发明涉及一种鼻腔给药制剂，其包括褪黑素和选自至少一种聚乙二醇200，聚乙二醇300，聚乙二醇400或聚乙二醇600的聚乙二醇。
根据本发明，本发明鼻腔给药制剂还包括至少一种pH缓冲剂，防腐剂，稳定剂，促渗剂，芳香剂及渗透压调节剂。
人鼻腔粘膜表面积达150平方厘米，表层上皮有大量鼻纤毛，它不仅能够清除异物，防止空气中的颗粒进入肺部；而且能够防止外源性的蛋白，病毒和细菌被吸入体内，是机体的重要免疫屏障。因此，对于维持人体正常生理功能非常重要。鼻腔给药制剂必须对于鼻纤毛刺激性较小。本发明褪黑素鼻腔给药制剂，具有对鼻纤毛毒性小的优点。
本发明中的术语“褪黑素”为原形药物褪黑素或其药学上可以接受的盐或其卤代衍生物，所述可以接受的盐包括盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、醋酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐和马来酸盐，或其酯类衍生物，如苯甲酸酯等。
本发明鼻腔给药制剂每1毫升或每1克制剂中含有相当于0.1-100mg的褪黑素，优选为1-50mg。
本发明褪黑素鼻腔给药制剂可以是喷雾剂、粉末剂、滴鼻剂、软膏剂、凝胶剂、膜剂、乳剂或微粒制剂。
本发明褪黑素鼻腔给药制剂中所采用的聚乙二醇是聚乙二醇类化合物中的一种或多种，其中聚乙二醇为液态的聚乙二醇，如聚乙二醇200、聚乙二醇300、聚乙二醇400、聚乙二醇600等。
本发明中采用的pH缓冲剂可以是醋酸缓冲盐、柠檬酸缓冲盐、碳酸缓冲盐和磷酸缓冲盐，浓度为0.1mol/L-0.2mol/L。
本发明采用高分子化合物纤维素类衍生物对制剂粘稠性进行调节，可选用甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素钠、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚维酮、卡波姆、聚乙烯醇、海藻酸盐、黄原胶、阿拉伯胶、西黄芪胶、脱乙酰壳多糖等，以延长药物与鼻粘膜的接触时间，提高生物利用度。
本发明的防腐剂选用对羟基苯甲酸酯、苯甲酸及其盐、山梨酸、三氯叔丁醇、苯甲醇、苯乙醇、醋酸洗必泰、硫柳汞及季铵化合物类阳离子表面活性剂等，所述防腐剂在抑茵浓度范围内对人体无害、无刺激性、无特殊臭味、不影响制剂的理化性质。
本发明制剂中所加入的稳定剂有抗氧剂如焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、抗坏血酸、硫脲、半胱氨酸、生育酚及卵磷脂等。上述稳定剂用量的优选为制剂的0.01％-5％(w/v)。其它有螯合剂，如乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠、柠檬酸、酒石酸等。乙二胺四乙酸二钠用量的优选为0.005％-0.05％(w/v)。
本发明所述的促渗剂是月桂醇硫酸钠、胆酸衍生物、牛磺酸、透明质酸、吐温、司盘、聚氧乙烯月桂醇醚等表面活性剂及杆菌肽等环形肽类。其用量约为0.005％-10％，优选量为0.01％-5％。上述物质同时有增溶、乳化作用。
促渗剂也可以是1-麻黄碱、d-麻黄碱、1-伪麻黄碱、d-伪麻黄碱、薄荷醇、冰片。
本发明所述的芳香剂可以是桂皮醛、香草醛、薄荷油中的一种或多种。
本发明所述的渗透压调节剂可以是氯化钠、葡萄糖、乳糖、甘露糖、甘露醇中的一种或多种。其中，氯化钠的浓度在0.6％-1.2％范围内。
本发明还可采用聚乳酸、乙交酯-丙交酯共聚物等生物可降解型合成高分子材料和白蛋白、明胶、淀粉等天然高分子材料用于制备微粒制剂。
本发明所述制剂可按本领域常规方法制备，例如将褪黑素与聚乙二醇，及必要或选择性地，和其它药用辅料混合。
具体实施例方式
实施例1褪黑素鼻喷剂(15mg褪黑素/ml)褪黑素1.5gPEG40015mlEDTA-2Na 0.01g亚硫酸氢钠0.15g对羟基苯甲酸乙酯 0.1g氯化钠 0.9g注射用水 加至100ml按上述处方制备得澄清的黄色溶液，分装于定量喷雾泵中，即得鼻喷剂T1。
另参照PCT专利WO98/42333，设计以下处方褪黑素1.5g羟丙基β环糊精13gEDTA-2Na 0.01g维生素C 0.2g苯扎氯铵 0.1g氯化钠0.9g注射用水 加至100ml按上述处方制备得澄清的黄色溶液，分装于定量喷雾泵中，即得鼻喷剂T2。
另制备3mg/ml的褪黑素静脉注射剂R。取健康新西兰兔6只，雄性，体重2.5～3.5kg。将受试动物随机分成3组，按3*3拉丁方设计交叉给予鼻喷剂T1(15mg/ml*100ul)、T2(15mg/ml*100ul)和静脉注射剂R(3mg/ml*0.5ml)，清洗期为7d。分别于给药前和给药后2、5、10、20、30、45、60、90min自耳缘静脉取血1.2ml置含肝素的离心管中，立即离心，分离血浆，-20℃冰箱中冻存至取样进行HPLC分析，计算喷雾剂T1、T2的绝对生物利用度。表1为不同途径给药后血药浓度，表2为不同途径给药后兔血浆中药时曲线下面积AUC的比较。
表1 不同给药途径下的血药浓度(n＝6)
结果表明鼻腔给药后在5分钟血药浓度达到峰值，2分钟时血药浓度已非常高，快接近峰值。
表2 不同给药途径下的药时曲线下面积(AUC0-60)及生物利用度(n＝6)
由上表结果可见，按本发明制备的褪黑素鼻喷剂T1的绝对生物利用度为85.2±26.3％，按PCT专利WO98/42333制备的鼻喷剂T2的绝对生物利用度为44.2±14.2％，方差分析表明，两制剂间绝对生物利用度有显著性差异(P＜0.05)。
对鼻喷剂T1采用离体蟾蜍上颚模型评价纤毛毒性。通常认为试验组的蟾蜍上颚粘膜纤毛持续运动时间为生理盐水对照组的60％以上，则试验制剂的纤毛毒性较小。经试验证实本鼻腔给药制剂的纤毛毒性为生理盐水对照组的60％以上。
实施例2褪黑素鼻粉剂褪黑素1.5g乳糖 30g亚硫酸氢钠0.15g蒸馏水加至100ml将上述褪黑素和乳糖加入100ml蒸馏水中，搅拌至完全溶解，-35℃冷冻干燥过夜，再分别于-10℃和0℃条件下冷冻干燥24h，过100目筛，供鼻腔吸入用。
实施例3褪黑素微球制剂褪黑素 1.5gSpan 80 1.0g明胶6.0g药用蓖麻油 100ml饱和戊二醛的甲苯溶液适量取上述明胶溶于30ml55℃水中，加入褪黑素溶解。另取药用蓖麻油加乳化剂Span80于干燥烧杯中，将烧杯置于50℃水浴中，在搅拌下缓缓加入含药的明胶溶液中，搅拌速度为1000转/分。搅拌10min后加入饱和戊二醛的甲苯溶液，继续搅拌2h，用正己烷异丙醇(1∶1)洗涤。经离心所得微球用乙醚洗涤，干燥，筛分后分装使用。
实施例4褪黑素凝胶剂褪黑素1.5g卡波普934 1.5g甘油 10g亚硫酸氢钠 0.15g蒸馏水加至100ml将卡波普934与30ml蒸馏水混合溶胀，再加入褪黑素、甘油、亚硫酸氢钠充分搅匀，即得透明凝胶。
本发明通过以上描述和实施例进行说明，以上描述为非限制性的，并不限制本发明的权利要求范围。
权利要求
1.一种鼻腔给药制剂，其包括褪黑素的原形药物或其药学上可以接受的盐或其酯类衍生物或其卤代衍生物和至少一种选自聚乙二醇200、聚乙二醇300、聚乙二醇400、聚乙二醇600的聚乙二醇。
2.根据权利要求1所述的鼻腔给药制剂，其中每1毫升或每1克所述的鼻腔给药制剂中含有相当于0.1-100mg的褪黑素原形药物。
3.根据权利要求1或2所述的鼻腔给药制剂，其中每1毫升或每1克所述的鼻腔给药制剂中含有相当于1-50mg的褪黑素原形药物。
4.根据权利要求1-3任一所述的鼻腔给药制剂，其中所述的鼻腔给药制剂是喷雾剂、粉末剂、滴鼻剂、软膏剂、凝胶剂、膜剂、乳剂或微粒制剂。
5.根据权利要求1-4任一的制剂，其中根据需要，所述制剂还含有至少一种pH缓冲剂、增稠剂、防腐剂、稳定剂、促渗剂、芳香剂及渗透压调节剂。
6.根据权利要求5所述的制剂，其中所述的pH缓冲剂是醋酸盐，柠檬酸盐、碳酸盐和磷酸盐中的一种或多种，浓度为0.1mol/L-0.2mol/L；所述的增稠剂是甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素钠、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚维酮、卡波姆、聚乙烯醇、海藻酸盐、黄原胶、阿拉伯胶、西黄芪胶、脱乙酰壳多糖中的一种或多种；所述的防腐剂是对羟基苯甲酸酯、苯甲酸及其盐、山梨酸、三氯叔丁醇、苯甲醇、苯乙醇、醋酸洗必泰、硫柳汞及季铵化合物类阳离子表面活性剂中的一种或多种；所述的稳定剂是焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、抗坏血酸、硫脲、半胱氨酸、生育酚、乙二胺四乙酸及其钠盐、酒石酸和卵磷脂中的一种或多种，浓度为0.005％-5％(w/v)；所述的促渗剂是月桂醇硫酸钠、胆酸衍生物、牛磺酸、透明质酸、吐温、司盘、聚氧乙烯-月桂醇醚等表面活性剂及杆菌肽等环形肽类中的一种或多种，或1-麻黄碱、d-麻黄碱、1-伪麻黄碱、d-伪麻黄碱、薄荷醇、冰片、浓度为0.005％-10％；所述的芳香剂是桂皮醛、香草醛、薄荷油中的一种或多种；所述的渗透压调节剂是氯化钠、葡萄糖、乳糖、甘露糖、甘露醇中的一种或多种，浓度为0.6％-1.2％。
7.根据权利要求4所述的制剂，其中所述的微粒制剂是明胶、淀粉、白蛋白、聚乳酸、乙交酯-丙交酯共聚物。
8.权利要求5的制剂，其中每ml或每克所述制剂中含15mg褪黑素。
全文摘要
本发明涉及一种含褪黑素的鼻腔给药制剂，其包括褪黑素及选自至少一种聚乙二醇200、聚乙二醇300、聚乙二醇400、聚乙二醇600的聚乙二醇。
文档编号A61P37/04GK1969814SQ200510123890
公开日2007年5月30日 申请日期2005年11月24日 优先权日2005年11月24日
发明者梅兴国, 曹树贵 申请人:中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所