专利名称：：一种修复睾丸衰老损伤增强男性功能的药物组合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种修复睾丸衰老损伤增强男性功能的药物组合物，该药物组合物是由中药淫羊藿和人参须组成的复方制剂，研究表明该复方制剂，对老年性睾丸损伤具有较好的预防及治疗作用，可以增强男性功能，延缓衰老。
背景技术：
：随着生活和卫生条件的逐步改善、人的寿命不断延长，衰老伴随的疾病成为全球共同面l為的问题。人类的衰老与性腺结构和功能的退化有密切关系，从50岁开始，男性睾丸组织就可以出现退行性变化，然后进一步出现结构萎缩和功能退化。随着老龄化中老年男性睾九的生理功能会出现不同程度的减退，睾丸间质细胞分泌T能力下降，从而使机体呈现神经功能紊乱、抑郁、记忆力减退、潮热和性功能减退等症状，严重者可出现中老年部分雄激素缺乏综合征。虽然老年男子睾丸功能的改变是逐渐缓慢发生的，但是近年来衰老对睾丸功能的影响已得到确认。尽管不同研究报道的衰老引起睾丸功能减退的发生率和发生的年龄不尽一致，然而越来越多的临床研究显示随着年龄的增加，即使在健康男子也会逐渐出现血清睾酮水平下降，其发生的比例和降低的程度随着年龄的增加而增加，并与老年男子肌力下降、骨容积减少、腹部脂肪堆积、脂肪代谢和糖代谢异常增加、认知功能减退、情绪改变以及勃起功能障碍相关，这些临床表现也被称为中老年男子雄激素部分缺乏综合征。目前对由于衰老导致的睾丸损伤，男性性功能降低还没有找到合适的治疗方法，也没有合适的治疗药物，补充睾酮，是目前治疗男性性功能降低的唯一办法，其^'也雄激素目前还不能取代睾酮用于治疗，对于睾酮的类型及剂量目前还要争论，一般建议使用肌内给药。但睾酮治疗可导致红细胞增多症，乳房发育和水潴留等不良反应，要在医生指导下应用。本课题组曾证明淫羊藿，人参，人参须等中药对老年性大鼠骨质疏松有明显的防治作用，最近，我们通过给大鼠注射大剂量D-半乳糖制作了亚急性衰老动物模型,观察该模型动物睾丸的变化，寻找具有预防和治疗睾丸损伤的中药，和中药复方。我们的研究发现，由淫羊藿和人参须组成的复方制剂，对D-半乳糖亚急性衰老大鼠睾丸损伤有很好的预防作用，该复方制剂可以提高睾丸S()D活性和降低MDA含量而提高整个机体的抗氧化能力，维持自由基代谢的平衡，减少脂质过氧化，从而有效地抑制由细胞氧化诱导的睾丸细胞凋亡，显著改善或调整衰老细胞的新陈代谢，延缓衰老的进程。该制剂可作为保健水平和药品，用于预防男性衰老，修复睾九衰老损伤增强男性功能
发明内容本发明提出的一种修复睾丸衰老损伤增强男性功能的药物组合物，其特征该药物组合物是由淫羊藿和人参须组成。该药物组合物可按如下工艺制备(一)人参须(或人参)l公斤，淫羊藿l公斤，粉碎，再用贝利微粉机进行微粉化，加水煎煮3次，每次2h，过滤，合并三次滤液，浓缩至千膏，然后，可按药剂学的工艺制备为片剂，胶囊剂，颗粒剂，口服液，冲剂。(二)取淫羊藿1公斤粉碎，水提取三次，第一次加75%乙醇回流提取1.5小时，滤过，第二次加50°/(;乙醇回流提取]..5小时，滤过，合并两次滤液蒸发乙醇。第三次加15倍水回流提取2小时，合并以上滤液，浓缩。另取人参须(或人参)l公斤粉碎，粉碎，加15倍水提三次，每次1小时，过滤，合并三次滤液，与上述淫羊藿滤液合并，浓缩，干燥，按药剂学工艺制成可供临床应用的其他制剂。(三)取淫羊藿1公斤和人参须(或人参)1公斤，粉碎，加10倍沸水浸泡30分钟，过滤，保留滤液；滤渣再加15倍沸水浸泡30分钟，过滤，保留滤液；滤渣加10倍70%浸泡24小时，后，加热提取2小时，过滤，得滤液。合并三次滤液，浓縮，千燥，按药剂学工艺制成可供临床应用的其他制剂。(四)取淫羊藿1公斤和人参须(或人参)1公斤，粉碎，用贝利微粉机进行微粉化，加15倍沸水浸泡30分钟，过滤，保留滤液；滤渣再加15倍沸水浸泡30分钟，过滤，保留滤液；滤渣加10倍70%浸泡24小时，后，加热提取2小时，过滤，得滤液。合并三次滤液，浓缩，干燥，按药剂学工艺制成可供临床应用的制剂。(五)取淫羊藿1公斤和人参须(或人参)i公斤，粉碎.，用贝利微粉机进行微粉化，加15倍20'CT25TJ蒸馏水浸泡30分钟，过滤，保留滤液；滤渣再加15倍2[Td5'C蒸馏水浸泡30分钟，过滤，保留滤液；滤渣加10倍蒸馏水，用盐酸调ra到l;加热反应2小时，放冷，加碱调ra到7;过滤，得滤液。合并三次滤液，浓縮，干燥，按药剂学工艺制成可供临床应用的制剂。(六)取淫羊藿1公斤和人参须(或人参)1公斤，粉碎，加15倍70%乙醇浸泡24小吋，加热提取2小时，过滤，得滤液。滤渣再加犯％乙醇浸泡24小时，加热提取2小时，过滤，得滤液。合并两次滤液，浓縮，干燥，按药剂学工艺制成可供临床应用的制剂。(七)取淫羊藿l公斤和人参须(或人参)l公斤，粉碎，用贝利微粉机进行微粉化，加15倍70%乙醇浸泡24小时，加热提取2小时，过滤，得滤液。滤渣再加40%乙醇浸泡24小时，加热提取2小时，过滤，得滤液。合并两次滤液，浓缩，干燥，按药剂学工艺制成可供临床应用的制剂。上述工艺中，人参须也可以用人参取代。根据上述工艺制备的淫羊藿和人参须复方制剂，通过[)-半乳糖建立得到老年性大鼠动物模型研究，结果表明以上七个工艺制备的淫羊藿和人参须复方制剂，均有较好的预防衰老大鼠睾丸损伤有很好的预防作用，对衰老大鼠骨质疏松也有很好的预防作用。D-半乳糖导致衰老的动物模型己被广泛作为人类抗衰老的研究，D-半乳糖造成大鼠衰老性睾丸损伤和骨质疏松与人类老年性骨质疏松十分相似，淫羊藿和人参须复方制剂，对该模型的睾丸损伤有明显的预防和治疗作用，表明了淫羊藿和人参须复方制剂，可作为人类老年性睾丸损伤和骨质疏松预防和治疗的药物或功能性食品。以上由淫羊藿和人参须制备的制剂，还可制成临床其他可凄受的制剂，如片剂、丸剂、冲剂、颗粒剂、胶囊剂、注射剂、滴丸、皮肤外用制剂中的任何一种，供临床应用。具体实施例方式实施例一1材料1.1实验动物本研究选用SPF级的3月龄雄性SD大鼠共33只，体重(208±28)g。由广东省实验动物中心提供，广东省实验动物证编号:粵监证字2006A015,北京产大鼠维持期全价饲料佝养,自由摄食、摄水。1.2实验药物及试剂1.2.1实验药物淫羊藿人参须水提液(羊参口服液)的制备按本发明专利工艺(一)提出的方法，取淫羊藿1公斤和人参须1公斤，分别粉碎，再用贝利微粉机进行微粉化，加水煎煮3次，每次2h，过滤，合并三次滤液，浓缩至100^(lg生药/ml)浓度，配置成羊参口服液，供实验应用。1.2.2试剂MDA试剂盒、SOD试剂盒均购自南京建成生物工程研究所，D-半乳糖购自上海化学试剂二厂-.2.3仪器AE240电子天平(梅特勒-托利多仪器公司上海分公司)，Y-FL型荧光显微镜(NikonJapan〕，ELX800型酶标仪(美国B10-Tek公司)，JI-80-2B台式离心机(上海安亭科学仪器厂)。2方法2.1动物分组将33只大鼠随机分为3组正常对照组13只、模型组、羊参口服液用药组各为10只。2.2造模方法正常对照组大鼠用生理盐水皮下注射(0.5ml/100g/d，共90d)，另外2组均用D-半乳糖连续皮下注射(IOOmgZkg/d，共90d)制作亚急性衰老大鼠模型，同时羊参口服液用药组大鼠给予羊参口服液(lml/100g)灌胃。2.3观察指标及方法2.3.1脏器系数心脏取血处死大鼠，迅速取双侧睾丸，称重，然后按照公式睾丸脏器系数=睾丸脏器重(g),'大鼠体重(g)X100%。2.3.2睾丸经织SOD活性和MDA含量对一侧^丸组织进行匀浆，按试剂盒说明书分别测出超氧化物歧化酶(SOD)和MDA含量。2.3.3睾丸生精小管形态结构的观察取大鼠另一侧睾丸，加入4%多聚甲醛固定，常规石蜡包埋，以4pm厚度连续切片。常规HE染色，脱水、透明、封片，光镜下观察。2.4统计学处理本研究中，正态分布的计量资料以均数士标准差。士s)表示，两组间比较采用t检验，以双侧p值<().()5为差异有统计学意义。3结果3.1各组大鼠体重与睾丸脏器系数各组大鼠体重与睾丸脏器系数见表l表l各组大鼠的体重与睾丸脏器系数(％，S±s)组别实验前体重实验后体重睾丸脏器系数正常对照组216.8±19.8373.6±30.4C.512土0.064A模型组205.8±21.3420.6±49.6女0.401±0.040羊参口服油组207.8±7.3465.7±49.6腿0.498±0.050A与模型组^比，P〈〔I.Q5.与正常组相比，p<0.05.与正常组相比，p<C.01由表1可见，模型组衰老大鼠的睾丸脏器系数低于正常对照组，且差异有统计学意义(P<0.05)，羊参口服液组大鼠睾丸的脏器系数高于模型组，且差异有统计学意义(P〈0.05)。3.2各组大鼠睾丸组织SOD和MDA的含量各组大鼠睾丸组织S0D和MDA的含量见表2:表2大鼠睾丸组纟只SOD和MDA的含量(x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>由表2玎见，与正常对照组大鼠相比，模型组衰老大鼠睾丸组织中SOD的含量明显降低，且差异有统计学意义(P〈0.05);羊参口服液组SOD的含量高于模型组，且差异有统计学意义(P〈0.05)，说明羊参口服液可以明显抑制衰老大鼠睾丸组织SOD活性的下降。与正常对照组大鼠相比，模型组衰老大鼠睾丸组织中MDA的含量明显升高，且差异有统计学意义(P〈0.05);羊参n服液组MDA的含量低于模型组，且差异有统计学意义(P〈0.05)，说明羊参口服液可以明显抑制衰老大鼠睾丸组织MDA的含量的增高。3.>各组大鼠睾丸组织形态学观察正常对照组大鼠睾丸组织中生精小管界膜完整，无增厚及纤维化；生精小管内可见排列整齐的各级生精细胞和支持细胞，管腔内可见精子，间质细胞的数目和形态无异常改变。模型组衰老大鼠睾丸生精小管形态结构发生明显变化，生精小管基膜部分增厚，变得不完整；基膜内生精细胞的排列还基本正常，但生精细胞层数减少，细胞稀疏，由于上皮突入管腔或各级生精细胞脱落，使管腔变狭窄。支持细胞和间质细胞未见异常改变。这可能是D-半乳糖对大鼠睾丸产生毒性作用，使睾丸结构发生变化。羊参口服液组大鼠睾丸生精小管的形态结构较模型大鼠明显恢复，基膜趋于完整，生精细胞层数增多，但与正常大鼠睾丸相比，仍显生精细胞较稀疏。4讨论D-半乳糖是目前公认的致衰老物质，D-半乳糖致衰老模型基于衰老的代谢学说而复制的衰老模型。D-半学L糖河致大鼠睾丸SOD活性降低，MDA含量升高及睾丸损伤。从实验结果中我们可以看出模型组大鼠睾丸的形态结构发生明显变化，睾丸组织中SOD含量低于正常对照组、MDA的含量高于正常对照组，表现出明显的衰老特征，说明本研究大鼠的亚急性衰老模型造模成功；本课题组曾发现D-半乳糖可导致雄性大鼠原发性骨质疏松和血清睾酮含量降低以及睾丸结构发生改变，研究表明，正常机体内SOD能清除自由基，减少脂质过氧化物的产生。正常机体内SOD能清除自由基，减少脂质过氧化物的产生。随着衰老的进程，机体抗氧化能力减弱，清除自由基的启动因子-SOD活性降低，使自由基的链式反应受到抑制，过多地氧化不饱和脂肪酸生成脂质过氧化物MDA。SOD含量减少或活性降低以及MDA含量的增高被认为与细胞的衰老、实质脏器功能减退乃至整个机体的衰老进程都有着密切的关系。通过MDA的测定可以反映机体内脂质过氧化的程度，间接地反映出细胞损伤的程度，SOD是机体内源性抗衰老物质，可以通过歧化作用清除体内氧自由基,从而减少脂质过氧化反应，维持生物膜结构及其功能，其活性的高低间接反映了组织抗氧化的能力，SOD和MDA含量的测定被公认是抗衰老药物研究的重要指标。由结旲可见，羊参口服液用药组睾丸的形态结构趋于恢复，睾丸组织中SOD含量高于模型组，MDA的含量低于模型组，说明羊参口服液可以通过提高睾丸SOD活性和降低MDA含量而提高整个机体的抗氧化能力，维持自由基代谢的平衡，减少脂质过氧化，从而有效地抑制由细胞氧化诱导的细胞凋亡,显著改善或调整衰老细胞的新陈代谢，延缓衰老的进程，可作为保健制品的原料,具有广阔的开发利用前景。权利要求1.一种修复睾丸衰老损伤增强男性功能的药物组合物，其特征该药物组合物是由淫羊藿和人参须组成。2.如权利要求l所述的-一种修复睾丸衰老损伤增强男性功能的药物组合物，其特征是由淫羊藿和人参须组成该药物组合物是按如下工艺制备的取人参须1公斤，淫羊藿l公斤，粉碎，再用贝利微粉机进行微粉化，加水煎煮3次，每次2h，过滤，合并三次滤液.，浓缩至干膏，然后，可按药剂学的工艺制备为片剂，胶囊剂，颗粒剂，口服液，冲剂。3.如权利要求l所述的--种修复睾丸衰老损伤增强男性功能的药物组合物，其特征是由淫羊藿和人参须组成该药物组合物是按如下工艺制备的取淫羊藿1公斤粉碎，水提取三次，第一次加75%乙醇回流提取1.5小时，滤过，第二次加50%乙醇回流提取1.5小时，滤过，合并两次滤液蒸发乙醇。第三次加15倍水回流提议2小时，合并以上滤液，浓縮。另取人参须l公斤粉碎，粉碎，加15倍水提三次，每次1小时，过滤，合并三次滤液，与上述淫羊藿滤液合并，浓縮，干燥，按药剂学工艺制成可供临床应用的其他制剂。4.如权利要求l所述的一种修复睾丸衰老损伤增强男性功能的药物组合物，其特征是由淫羊藿和人参须组成该药物组合物是按如下工艺制备的取淫羊藿1公斤和人参须l公斤，粉碎，加10倍沸水浸泡30分钟，过滤，保留滤液；滤渣再加15倍沸水浸泡30分钟，过滤，保留滤液；滤渣加10倍70%浸泡24小时，后，加热提取2小时，过滤，得滤液。合并三次滤液，浓縮，干燥，按药剂学工艺制成可供临床应用的其他制剂。5.如权利要求1所述的一种修复睾丸衰老损伤增强男性功能的药物组合物，其特征是由淫羊藿和人参须组成该药物组合物是按如下工艺制备的取淫羊藿1公斤和人参须1公斤，粉碎，用贝利微粉机进行微粉化，加15倍沸水浸泡30分钟，过滤，保留滤液；滤渣再加15倍沸水浸泡30分钟，过滤，保留滤液；滤渣加1()倍70%浸泡24小时，后，加热提取2小时，过滤，得滤液。合并三次滤液，浓缩，干燥，按药剂学工艺制成可供临床应用的制剂。6.如权利要求l所述的一种修复睾丸衰老损伤增强男性功能的药物组合物，其特征是由淫羊藿和人参须组成该药物组合物是按如下工艺制备的取淫羊藿1公斤和人参须l公斤，粉碎，用贝利微粉机进行微粉化，加15倍2(TC25"C蒸馏水浸泡30分钟，过滤，保留滤液；滤渣再加15倍20。C25'C蒸镏水浸泡30分钟，过滤，保留滤液；滤渣加10倍蒸馏水，用盐酸调PH到1;加热反应2小时，放冷，加碱调PH到7;过滤，得滤液。合并三次滤液，浓縮，干燥，按药剂学工艺制成可供临床应用的制剂。7.如权利要求1所述的一种修复睾丸衰老损伤增强男性功能的药物组合物，其特征是由淫羊藿和人参须组成该药物组合物是按如下工艺制备的取淫羊藿1公斤和人参须1公斤，粉碎，加15倍70%乙醇浸泡24小时，加热提取2小时，过滤，得滤液，滤渣再加40%乙醇浸泡24小时，加热提取2小时，过滤，得滤液。合并两次滤液，浓缩，干燥，按药剂学工艺制成可供临床应用的制剂。8.如权利要求1所述的一种修复睾丸衰老损伤增强男性功能的药物组合物，其特征是由淫羊藿和人参须组成该药物组合物是按如下工艺制备的取淫羊藿1公斤和人参须l公斤，粉碎，用贝利微粉机进行微粉化，加15倍70%乙醇浸泡24小时，加热提取2小时，过滤，得滤液。滤渣再加40%乙醇浸泡24小时，加热提取2小时，过滤，得滤液。合并两次滤液，浓縮，干燥，按药剂学工艺制成可供临床应用的制剂。9.如权利要求l，2，3，4，5，6，7，8所述的一种修复睾丸衰老损伤增强男性功能的药物组合物，其特征的人参须可以用人参来代替。全文摘要本发明涉及一种修复睾丸衰老损伤增强男性功能的药物组合物，该药物组合物是由中药淫羊藿和人参须组成的复方制剂，研究表明，该复方制剂对D-半乳糖亚急性衰老大鼠睾丸损伤有很好的预防作用，该复方制剂可以提高睾丸SOD活性和降低MDA含量而提高整个机体的抗氧化能力，维持自由基代谢的平衡，减少脂质过氧化，从而有效地抑制由细胞氧化诱导的睾丸细胞凋亡，显著改善或调整衰老细胞的新陈代谢，延缓衰老的进程。该制剂可作为保健食品和药品，用于预防男性衰老，修复睾丸衰老损伤并增强男性功能。文档编号A61K9/16GK101406508SQ20081017592公开日2009年4月15日申请日期2008年10月29日优先权日2008年10月29日发明者铁吴,吴光粱,燎崔,张新乐,张益嘉,戴娟秀,彬李,林坚涛申请人:广东医学院