专利名称：：银芩口服液的制备方法
技术领域：
：本发明属于中药制剂
技术领域：
，具体涉及一种银芩口服液的制备方法。
背景技术：
：银芩胶囊原标准收载于国家中成药标准汇编内科肺第(一)分册，由金银花、黄芩、三七叶、鱼腥草等组成。其功效为傣医雅英别菲、噢习特摆，唉少，泵接开摆。哇黄害埋，唉列乎火接，兵打呃。中医清热解毒、清宣风热。用于外感风热所致的发热、咳嗽、咽痛及上呼吸道感染、扁桃体感染、咽炎见以上症状者。该产品为胶囊制剂，服用不方便，在体内由一个崩解溶出的过程，吸收缓慢，生物利用度低，且目前该产品生产厂家较少，市场开发不足，不能满足市场需要，致使该品种虽然疗效确切，但不能使更多的患者受益。目前国内市场该方只有胶囊剂一种剂型，产品剂型单一，迫切需要开发出新的品种以满足市场需要，为患者提供更多的选择余地。现有的银苓胶囊工艺"以上四味药材，加水煎煮三次，第一次1小时，第二、三次各45分钟，合并煎液，滤过，滤液减压浓縮后加乙醇至含醇量达65%，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓縮成稠膏，低温干燥，研成粉末，加辅料填充空心胶囊即得"。这种水提工艺以干膏收率和黄芩中黄芩苷含量两量为评价指标，其在原制剂中的生产工艺不够细致、明确，有效成分转移率低，产品质量控制标准不够科学和完善，质量差异大，产品的疗效受到一定影响。
发明内容针对现有技术存在的上述缺陷，本发明提供一种银芩口服液的制备方法，该制备方法科学合理，有效成份提取率高，生物利用度高，体内吸收快，该方法制备的口服液服用方便，确保了产品的质量和疗效。为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案是该银苓口服液的制备方法为首先称取金银花625g、黄芩450g、三七叶350g和鱼腥草500g，分别加水煎煮三次，第一次1小时，第二、三次各45分钟，第一、二、三次分别加原料药质量的10、8、6倍量水，合并煎液，预处理，离心分离或超滤膜分离，滤液减压浓縮后加乙醇至含醇量达65%，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓縮成稠膏，加水至950ml，加甜蜜素5g，苯甲酸钠3g，过滤，加水至1000ml，调整PH值7.2，混匀，灌装压盖，灭菌，即得。所述预处理是采用板框过滤机或钛棒过滤器，滤去水提取液中大部分固体物质和微粒，起到很好的保护滤膜作用。所述离心分离采用离心分离机，离心机转速6000-15000转/分；所述超滤膜分离采用超滤膜组件设备，膜孔径0.01-0.03um，预处理后的中间体作为超滤液，压力《1.7MPa，温度45土5。C，膜两侧压差《0.6MPa。由上述方法制备的银苳口服液，系由金银花、黄苳、鱼腥草、三七叶四味药相扶助组方而成，解风热毒邪、止咳、抗菌抗病毒、补益，能激活人体免疫力，对外感风热所致的发热、咳嗽、咽痛及上呼吸道感染、扁桃体感染、咽炎等有确切疗效。方中金银花味甘，性寒。归肺、心、胃经。有清热解毒，凉散风热之功效。用于痈肿疔疮，喉痹，丹毒，热毒血痢，风热感冒，温病发热。方中黄芩味苦，性寒。归肺、胆、脾、大肠、小肠经。有清热燥湿，泻火解毒，止血，安胎之功效。用于湿温、暑温胸闷呕恶，湿热痞满，泻痢，黄疸，肺热咳嗽，高热烦渴，血热吐衄，痈肿疮毒，胎动不安。方中鱼腥草味辛，性微寒；归肺、膀胱、大肠经。有清热解毒，化痰排脓消痈，利尿消肿通淋之功效。主治肺热喘咳，肺痈吐脓，喉哦，热痢，疟疾，水肿，痈肿疮毒，热淋，湿疹，脱肛等病症。方中三七叶为双子叶植物药五加科植物三七的干燥叶，味微苦，性平。有散瘀止血，消肿止痛之功效。主治吐血，衄血，便血，外伤出血，跌打肿痛，痈肿疮毒。处方中各味药协同作用，对于外感风热所致的发热、咳嗽、咽痛及上呼吸道感染、扁桃体感染、咽炎见以上症状者有很好的疗效。服用方法为口服，成人一次10ml，一日3次，5天为一疗程；儿童一次2ml/10公斤，一日3次，5日为一疗程。银芩口服液服用口感好，服用方便，服用后更易于吸收，更易于被接受。下面结合试验方法来说明本发明方法的合理性。1、加水量试验按l/5处方量称取金银花125g、黄芩90g、三七叶70g和鱼腥草100g，共385g，按下表设计加水倍量，分别加水煎煮三次，第一次1小时，第二、三次各45分钟，合并煎液，滤过，采用离心分离，转速10000转/分，离心液减压浓縮，冷却至室温，分别加入乙醇使含醇量为65%，静置24小时，滤过，回收乙醇，浓縮至180ml左右，转移至200ml瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密移取10ml，置于干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于105。C干燥3小时，移置于干燥器中，放置30min，称定重量，计算干膏收率；同时测定浓縮液中黄芩苷的含量(测定方法见附注)。结果见下表表1加水量考察试验结果表<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>试验结果表明12、10、8倍量水与8、6、6倍量水提取评分接近，10、8、6倍量水提取效果最佳，故认为IO、8、6倍量水为最佳提取条件。浓縮液中黄芩苷的含量测定方法色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇一水一磷酸(47:53:0.2)为流动相；检测波长280nm。理论塔板数按黄芩苷峰计算应不低于2500。对照品溶液的制备精密称取在6(TC减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加50X乙醇制成每lml含0.14mg的溶液，即得。供试品溶液的制备精密量取浓縮液定容后的溶解3ml，置100ml量瓶中，加50%乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加50%乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加50%乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定方法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。(含量以每lml浓縮液定容后的溶液中的黄芩苷毫克数计。)2、矫味剂的选择由于中药提取液口味较苦，本品相对密度较大，蔗糖不适合作为本品的矫味剂，通过试验选择甜蜜素来调节口味。按照本发明方法煎液、滤过、浓縮至稠膏、加水后，分别加入甜蜜素3g、5g、7g，过滤，加水至1000ml，搅匀，试尝口感，结果如下表<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>从试验的结果计算可得出，加入甜蜜素0.5%时，即每个处方甜蜜素用量为5g时，口感较好。3、防腐剂的确定测定本发明制备出的口服液的pH值为6.95，根据2005版中国药典一部附录IJ合剂项下规定如需加入防腐剂，山梨醇和苯甲酸钠的用量不得超过0.3%，(其钾盐、钠盐的用量分别按酸计)，故选择苯甲酸钠为防腐剂。4、样品质量检验按照1倍量处方制备试验样品1、2、3号样，进行样品的质量检验。4.1、性状银芩口服液本品为棕褐色的澄清液体，味甜、微苦。4.2、鉴别(1)、参照原银芩胶囊中金银花的鉴别方法对其进行整理，具体方法如下取本品5ml，加甲醇10ml，振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml溶解，作为供试品溶液。另取金银花对照药材0.2g，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。另按[处方]比例及工艺[制法]同法制备缺金银花的阴性对照样品，照供试品溶液制备方法制得阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液及阴性对照溶液各1520u1、对照药材溶液10y1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸丁酯-甲酸-水(7:2.5:2.5)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，立即置紫外光灯G65nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照样品在此相应位置上无斑点，表明该鉴别方法专属性强，重现性好且阴性无干扰。表l检验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>结论中试三批样品均检出金银花，阴性对照样品无干扰。(2)、原标准中三七叶的薄层色谱鉴别取本品20ml，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤3次，每次20ml，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取人参皂苷R^对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。另按[处方]比例及工艺[制法]同法制备缺三七叶的阴性对照样品，照供试品溶液制备方法制得阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水-冰醋酸(13:7:2:1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105。C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照样品在此相应位置上无斑点，即阴性无干扰。表2三七叶的薄层鉴别结果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>结果中试三批样品均检出三七叶，阴性对照样品无干扰。(3)、原材料中黄芩的高效液相鉴别本品在含量测定项下记录的色谱图中，供试品主峰的保留时间应与对照品主峰的保留时间一致。表3黄芩的高效液相鉴别结果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>4.3检查应符合合剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录IJ项)a)、装量差异检查照中国药典2005年版一部附录IJ合剂项下的装量差异检查法检査取供试品5支，将内容物分别倒入经校正的干燥量筒内，在室温下检视，每支装量与标示装量相比较，少于标示装量的不得多于1支并不得少于标示装量的95%，结果见下表。表4三批中试样品装量差异检验结果表<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>结果表明，银芩口服液中试三批样品的装量差异均符合规定。(2)、PH值根据生产工艺研究本品PH值在6.0—8.0之间质量稳定，故确定PH值为6.0—8.0。对三批中试样品按《中国药典》2005年版一部附录VIIGPH值测定法检査，结果见下表。表5银芩口服液三批样品PH检查表<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>结论银芩口服液三批样品PH值均符合要求。(3)、相对密度依据《中国药典》2005年版一部附录VIIA相对密度测定法比重测定法试验，对自制三批样品的相对密度进行测定按下式计算供试品的相对密度供试品重量供试品的相对密度二-水重量表6<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>根据以上3批样品的相对密度测定结果，规定银芩口服液的相对密度应不低于I.IO，并收入标准正文。(4)、重金属的检查①试验方法按《中国药典》2005年版一部附录IXE重金属检查法第二法检査取本品lml，置坩埚中，缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.51.0ml，使恰湿润。用低温加热至硫酸除尽后，加硝酸0.5ml，蒸千，至氧化氮蒸汽除尽后，放冷，在50060CTC炽灼使完全灰化，放冷，加盐酸2ml，置水浴蒸干后加水15ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，再加醋酸盐酸缓冲液(PH3.5)2ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加水稀释成25ml，作为供试品溶液管。另取配制供试品溶液的试剂置瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液(PH3.5)2ml与水15ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，精密加标准铅溶液lml，再加水稀释成25ml，作为标准对照溶液管。再在分管中分别加硫乙酰胺试液各2ml，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，样品管所显颜色比标准管浅。②试验结果三批中试产品的重金属检査结果见下表。表7重金属限量测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>测定结果表明，本品重金属含量小于10ppm。(5)、砷盐的检査①试验方法按《中国药典》2005年版一部附录IXF砷盐检査法第一法(古蔡氏法)检查取本品lml，置坩埚中，缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.51.0ml，使洽湿润。用低温加热至硫酸除尽后，放冷，在50060(TC炽灼使完全炭化，放冷，加盐酸5ml和水21ml，作为供试品溶液。精密量取标准砷溶液2ml，加盐酸5ml和水21ml，作为对照品溶液。在上述两瓶中，再分别加入碘化钾试液5ml和酸性氯化亚试液5滴，在室温放置10分钟后加无砷锌粒2g，立即装妥砷盐检査装置，置254(TC水浴中反应45分钟，取出溴化汞试纸，供试品液生成砷斑色泽浅于标准对照液砷斑。②试验结果三批中试产品的砷盐限量检查结果见下表。表8砷盐限量测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>测定结果表明，本品中砷含量小于2ppm。(6)、微生物限度检査三批中试样品，按《中国药典》2005年版一部附录XniC微生物限度检查法检查，结果如下:表9银芩口服液微生物限度检査结果表<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>结果表明三批中试样品微生物限度检查结果均符合规定。4.4含量测定银芩口服液由金银花、黄芩、三七叶、鱼腥草等四味纯中药组成。功能:傣医雅英别菲，噢习特摆，唉少，泵接开摆。哇黄害埋，唉列乎火接，兵打呃；中医清热解毒、清宣风热。用于外感风热所致的发热、咳嗽、咽痛及上呼吸道感染、扁桃体感染、咽炎见以上症状者。方中黄苳具有清热燥湿、泻火解毒的功能，与本方功能基本一致，我们采用高效液相法测定黄芩苷的含量，该方法具有操作简便、结果准确、灵敏度高等特点，可准确控制药品质量。(1)、仪器与试药高效液相色谱仪LabAlliance美国黄芩苷对照品批号110715-200413(供含量测定用)，中国药品生物制品检定所提供甲醇为色谱醇水为重蒸水其它试剂均为分析纯银芩口服液(自制；样品l、样品2、样品3)(2)、方法与结果①色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸(47:53:0.2)为流动相；检测波长为280nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500。②溶液的制备对照品溶液的制备精密称取在6(TC减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加50%乙醇制成每lml含0.14mg的溶液，即得。供试品溶液的制备精密量取本品3ml，置100ml量瓶中，加50%乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加50%乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。缺黄芩的阴性对照品溶液的制备依据处方比例，按制法制备缺黄芩的阴性对照样品，按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。且经检验阴性无干扰。测定方法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10Pl，注入液相色谱仪，测定，即得。(3)线性关系的考察取黄芩苷对照品溶液(0.136mg/ml)，分别精密吸取2.5u1、5ul、10P1、15Pl、20Ul注入高效液相色谱仪，测定峰面积。以黄苳苷峰面积积分值为纵坐标，进样量(Ul)为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程为Y=381432X+21685，R2=0.9991，表明黄荅苷在0.34yg2.72ug之间呈良好的线性关系。试验结果如下表10黄芩苷的线性考察<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>(4)精密度试验取同一对照品溶液，分别精密吸取10ixl，重复进样6次，测定黄芩苷峰面积并计算相对标准偏差，结果如下表ll.精密度试验(n二5)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>结果显示，所建立方法的精密度良好。(5)稳定性试验取同一供试品溶液(样品1)，分别在O、2、4、5、8小时进样测定黄芩苷峰面积，并计算黄苳苷峰面积积分值的相对标准偏差。结果如下:表12.精密度试验(n=5)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>结果显示，制备的供试品溶液在8小时内稳定。(6)重现性试验取同一批号(样品1)样品，按供试品溶液制备方法制备5份供试品溶液，分别进样10ul，测定黄芩苷峰面积，并计算其相对标准偏差。结果如下表13.重现性试验(n二5)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>4.5我们按照10倍量处方制备10批样品进行中试放大实验，制备10批样品，测定黄芩苷含量，结果分别是<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>测定根据中试样品测定结果，考虑到药材因产地、加工、运输、贮藏等因素的影响，药材中黄芩苷也会有较大的差别，因此暂拟定本品每lml含黄芩以黄芩苷(C21H180u)计，不得少于lOmg。5、对样品进行稳定性试验考察5.1、试验方法采用室温留样观察法，对银芩口服液三批样品(样品1、样品2、样品3)模拟市售包装条件下(药用溴化丁基橡胶塞、管制口服液瓶)进行考察，于0、1、3、6、9、12、18、24月取样考査。5.2、检测项目及结果依据《中药新药质量稳定性研究的技术要求》确定重点检测项目性状、鉴别、检査，按自拟《银芩口服液质量标准》(草案)检査；微生物限度检查按《中药药典》2005年版一部附录XIIIC检验。试验结果均符合标准规定，说明本品制备工艺科学合理可行，本品包装材料符合规定。6、为了验证本发明技术方案的可行性，按常规的技术方案试制样品，其方法是称取金银花625g、黄芩450g、三七叶350g和鱼腥草500g，分别加水煎煮三次，第一次1小时，第二、三次各45分钟，第一、二、三次分别加8、6、6倍量水，合并煎液，预处理，减压浓縮后加乙醇至含醇量达65%，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓縮成稠膏，加水至1000ml，混匀，灌装压盖，灭菌，即得。按照自拟《银芩口服液质量标准》(草案)检査，溶液不澄清，有浑浊沉淀，有较浓的苦味，不易被人接受，黄芩苷含量测定为9.6mg/ml，转移率明显降低。从上述试验检测数据说明，本发明银芩口服液配方合理、安全，其制备方法科学先进。水煎煮的三次加水倍量按10、8、6倍量，干膏收率和黄芩苷含量较高，有效成份提取率高；对煎液进行预处理、离心或超滤膜分离工艺，去除了鞣质等杂质，明显提高了滤液的澄清度和稳定性，由于分离时无相变，因而有利于保持中药的生物活性和理化稳定性，易于保留原配方中的有效成分，确保产品的质量和疗效；工艺流程及生产周期短，操作简便易行，有效成分损失少，成品色泽较深，且澄清度好，产品质量稳定性增加，使超滤制剂有效成分含量较常法高10%50%，因而节约原料，同时节省大量溶剂。口服液服用方便，口感好，服用后更易于吸收，更易于被接受。下面结合附图对本发明的具体实施例作进一步详细的说明。图l本发明的工艺流程图。具体实施例方式如图l所示工艺，分别称取了l倍、10倍、ioo倍处方量，制备银芩口服液。1倍处方量提取物的制备称取金银花625g、黄苓450g、三七叶350g和鱼腥草500g，分别加水煎煮三次，第一次1小时，第二、三次各45分钟，第一、二、三次分别加10、8、6倍量水，合并煎液，采用了板框过滤机进行预处理，由滤纸滤去水提取液中大部分固体物质和微粒，起到很好的保护滤膜作用，离心分离采用离心分离机，离心机转速6000-15000转/分，滤液减压浓縮后加乙醇至含醇量达65%，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓縮成稠膏。银芩口服液的制备取上述稠膏，加水至950ml，加甜蜜素5g，苯甲酸钠3g，过滤，加水至1000ml，调整PH值7.2，混匀，灌装压盖，灭菌，即得。10倍处方量制备银芩口服液方法参照上述1倍处方制备方法，其中预处理采用板框过滤机，采用超滤膜组件设备由超滤膜分离，膜孔径0.01-0.03lim，压力《1.7MPa，温度45士5。C，膜两侧压差《0.6MPa，预处理后液体液作为超滤液。其中加水后调整PH值为6.0。100倍处方量制备银苳口服液方法参照上述1倍处方制备方法，其中预处理采用钛棒过滤器，采用超滤膜组件设备由超滤膜分离，膜孔径0.01-0.03ym，压力《1.7MPa，温度45士5。C，膜两侧压差《0.6MPa，预处理后液体液作为超滤液。其中加水后调整ra值为8.0。制备结果见下表:<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>通过上述实施例的技术数据可以看出，实施本发明的方法的产品数据与工艺细化结果一致，说明本发明银芩口服液的制备方法重现性好，工艺可控、可靠，适用于产业化的需要。权利要求1、一种银芩口服液的制备方法，其特征在于其是通过下列方法制备首先称取金银花625g、黄芩450g、三七叶350g和鱼腥草500g，分别加水煎煮三次，第一次1小时，第二、三次各45分钟，第一、二、三次分别加原料药质量的10、8、6倍量水，合并煎液，预处理，离心分离或超滤膜分离，滤液减压浓缩后加乙醇至含醇量达65％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩成稠膏，加水至950ml，加甜蜜素3-8g，苯甲酸钠1-5g，过滤，加水至1000ml，调整PH值6.0-8.0，混匀，灌装压盖，灭菌，即得。2、根据权利要求1所述的一种银芩口服液的制备方法，其特征在于所述预处理是采用板框过滤机或钛棒过滤器，滤去水提取液中大部分固体物质和微粒，起到很好的保护滤膜作用。3、根据权利要求1所述的一种银芩口服液的制备方法，其特征在于所述离心分离采用离心分离机，离心机转速6000-15000转/分；所述超滤膜分离采用超滤膜组件设备，膜孔径0.0卜0.03um，预处理后的中间体作为超滤液，压力《1.7MPa，温度45士5。C，膜两侧压差《0.6MPa。全文摘要本发明公开了一种银芩口服液的制备方法，其是通过下列方法制备首先称取金银花625g、黄芩450g、三七叶350g和鱼腥草500g，分别加水煎煮三次，第一次1小时，第二、三次各45分钟，第一、二、三次分别加10、8、6倍量水，合并煎液，预处理，离心分离或超滤膜分离，滤液减压浓缩后加乙醇至含醇量达65％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇并浓缩成稠膏，加水至950ml，加甜蜜素，苯甲酸钠，过滤，加水至1000ml，混匀，灌装压盖，灭菌，即得。与现有技术相比，制备方法科学合理，工艺重现性好，工艺可控、可靠，有效成份提取率高，保持中药的生物活性和理化稳定性，口服液服用方便，口感好，服用后起效迅速，更易于吸收，更易于患者接受，适用于产业化的需要。文档编号A61K9/00GK101380385SQ20081023048公开日2009年3月11日申请日期2008年10月20日优先权日2008年10月20日发明者曹长城,王祖红申请人:曹长城