专利名称：中药唐草片在制备升高白细胞药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及中药，具体涉及中药唐草片的新适应症，尤其涉及中药唐草片在制备升高白细胞药物中的应用。
背景技术：
中药唐草片是由20余味精选中药材经过精选、检验、科学配伍、现代化加工制备得到的中药制剂。中药唐草片的组成成分多，包括老鹳草、金银花、瓜蒌皮、柴胡、香薷、石榴皮、黄芪、甘草、木棉花、鸡血藤、红花、糯稻根、诃子、白花蛇舌草、菱角、银杏叶、马齿苋、胡黄连、龙葵、全蝎等。各成分所包含的化合物结构多样性，使其产生作用的靶点较多，现代药理研究表明其具有明确的抑制HIV病毒复制、提高机体免疫功能、修复损伤的免疫细胞、抗氧化清除自由基的作用、保护肝脏、延缓艾滋病的进程、防御患者的机会性感染等作用。中药唐草片组方体现了中医药的整体调理、固本祛邪的理念，又在临床实践中不断总结完善，现可用于HIV阳性的病毒感染者，弥补了“鸡尾酒”疗法的不足，同时又可以作为艾滋病患者的辅助治疗手段。中药唐草片的特点在于疗效确切，对无症状感染者及各期艾滋患者均可服用。长期服用该药能增强自身的抗病毒能力，提高CD4细胞数，提高患者整体生活质量。是天然药物用于治疗艾滋病的典范。中药唐草片的诞生，是抗击艾滋病史上也是中药史上的一个里程碑。本发明人对中药唐草片的质量进行研究，提供了中药唐草片的质量控制方法，已申请中国发明专利申请号为200910048798. 6-“中药唐草片的质量标准及检测方法”。目前，在用一些抗艾滋病药物治疗或随着病情进展，由于骨髓抑制会引起白细胞降低，如高效抗逆转录病毒治疗(HAART)方案中的齐多夫定等。由于白细胞的减少，造成机体免疫功能下降，易引起机会感染。而艾滋病感染者本身就是细胞免疫功能受损，因此，在治疗的同时会带来白细胞的减少的副作用。另外，抗肿瘤药物的治疗过程中更容易引起造血骨髓抑制，而目前临床上经常使用的一些具有升高白细胞的药物其作用仍然有限，因此寻找具有骨髓保护，减轻化疗药物毒性，减少化学药物治疗所产生的毒副作用，提高患者的生存质量具有非常重要的意义。本发明人在不断的研究中，发现唐草片具有升高白细胞的作用。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于克服上述不足之处，研究设计中药唐草片的新适应症，扩大应用范围。本发明提供了中药唐草片在制备升高白细胞药物中的应用。本发明所述中药唐草片为中国国家SFDA批准的合法上市药品，其中药原料组成成分及工艺路线为国家SFDA批准的合法的内容。为下列重量配比老鹳草120-150、黄芪 120-150、龙葵 120-200、金银花 120-200、木棉花 60-100、诃子40-60、白花蛇舌草80-150、石榴皮40-60、糯稻根150-200、菱角80-150、瓜蒌皮40-60、柴胡60-100、香薷40-60、甘草60-80、鸡血藤120-150、红花40-60、银杏叶40-60、马齿苋 60-120、胡黄连40-60、全蝎沘-40。优选的，本发明所述中药唐草片的中药原料组成成分为下列重量配比老鹳草120-150、黄芪 120-150、龙葵 120-200、金银花 120-200、木棉花 60-100、诃子40-60、白花蛇舌草80-150、石榴皮40-60、糯稻根150-200、菱角80-150。更优选的，本发明所述中药唐草片的中药原料组成成分为下列重量配比老鹳草180、黄芪180、龙葵180、金银花180、木棉花120、诃子90、白花蛇舌草180、 石榴皮90、糯稻根300、菱角180。本发明人通过建立稳定的中药筛选研究的白细胞降低动物模型，观察中药唐草片对药物造成白细胞降低的升白作用。本发明人在参考多种文献的基础上反复摸索，设计建立了丝裂霉素为诱导剂的新方法，不仅适合观察对白细胞的影响，也可以观察对血小板的影响。应用丝裂霉素造成正常小鼠白细胞降低模型，能较长时间的使动物处于白细胞降低水平，荷瘤小鼠接受丝裂霉素治疗同时加用中药唐草片，在不同时间取外周血测定白细胞等细胞数的变化，观察唐草片在药物引起的白细胞降低所起的作用。本发明经研究唐草片的升白作用，发现中药唐草片在中、小剂量提前应用时可以加快化疗药物作用后白细胞的回升，即具有升高白细胞作用，比模型对照组的白细胞恢复时间提前至少10天，中性粒细胞、淋巴细胞也几乎同步恢复至正常水平，预示着机体的免疫功能恢复。研究过程中，应用了目前临床公认的升高白细胞比较有效的化学药物重组人粒细胞集落刺激因子作阳性对照药，在唐草片组起效后4天使白细胞恢复至正常水平，升高的强度和持续时间均有好的效果。另一方面，为观察中药唐草片在预防性用于化疗药物引起的白细胞减少时，是否会影响化疗药物的抗肿瘤作用，本发明进行了中药唐草片对小鼠实体瘤和腹水瘤的影响研究。结果显示应用中药唐草片低剂量0. 5g/kg、中剂量1. Og/kg体重治疗组比模型组提前恢复到正常水平。并且不干扰丝裂霉素的抗肿瘤作用，甚至有增强抗肿瘤作用，抑瘤率达到43. 5 %，极大地超过了单用丝裂霉素组抑瘤率11. 4%，也超过了化学药物40%的有效标准，能预防性用于化疗药物引起的白细胞减少症的治疗。研究结果说明中药唐草片在升白的同时并不影响化疗药物的抗肿瘤作用。中药唐草片中剂量、低剂量组可以促进模型中白细胞的升高，对中性粒细胞和淋巴细胞的促进作用和白细胞类似，中药唐草片低剂量组升白作用更明显；中剂量中药唐草片也有一定的升高白细胞的作用。中药唐草片能增加动物骨髓集落形成细胞数，是其升高白细胞作用的体现。中药唐草片在荷瘤动物接受化疗药物丝裂霉素治疗过程中，有升高白细胞的作用。中药唐草片与抗肿瘤药物合用能够提高抗肿瘤化疗药物的抗肿瘤作用。中药唐草片可以缓解抗肿瘤药物对骨髓的抑制作用。此外，本发明研究观察到中药唐草片在治疗艾滋病的同时，还具有保护骨髓造血功能，加快机体免疫功能的恢复和减轻常规抗艾滋病药物(如齐多夫定等)骨髓抑制的不良反应，也是本发明重要创新点。本发明的唐草片的低剂量升白作用更好，升白临床使用量每次不高于16片，一日三次。本发明的唐草片升白的最佳临床使用剂量为每次小于等于8片，一日三次。本发明的唐草片升白的最佳临床使用剂量为每次相当于服用药材量为< 13.7克。本发明的唐草片升白的最佳服用剂量为每天相当于服用药材量为< 41. 1克。中药唐草片具有抗艾滋病的作用，同时也具有升高白细胞的作用，可以对抗其他药物治疗方案的不良反应，提高治疗的综合疗效，增加中药唐草片的适应症，扩大应用范围，可用于制备升高白细胞作用的药物，充分显示中药的治疗优势，有较大的临床应用价值，具有明显的社会效益和经济效益。
具体实施例方式实施例1中药唐草片升高白细胞药效学研究试验本发明应用丝裂霉素造成正常小鼠白细胞降低模型，使白细胞减低到对照组的 35%以下，模型建立成功。实验中发现药物剂量过大，骨髓抑制过深，白细胞下降太多，动物容易死亡，也不利于药物作用的表现，本发明采用小鼠腹腔注射丝裂霉素:3mg/kg —次，五天后再注射丝裂霉素ang/kg—次的方案，动物容易耐受，白细胞下降后维持时间比较长， 药物有充分的作用时间，而且用药方案更接近临床实际的用药方式，表现真正的造血抑制， 而不是外周白细胞的耗竭。丝裂霉素是广谱的抗肿瘤药物，同时造血抑制作用也比较强，持续时间长，这样的模型表现出的药物作用比较可靠。一.目的观察中药唐草片对化疗药物所引起的白细胞减少症的疗效。二 .材料和方法1.实验动物昆明种健康小鼠，清洁级，雄性，体重31 士 2克。2.药品和试剂注射用丝裂霉素浙江海正药业股份有限公司，批号090302重组人粒细胞集落刺激因子山东泉港药业有限公司，批号20081四01中药唐草片上海百岁行药业有限公司生产，批号081203，每片0.4g，含生药量为 1. 708go(老鹳草180g、黄芪180g、龙葵180g、金银花180g、木棉花120g、诃子90g、白花蛇舌草180g、石榴皮90g、糯稻根300g、菱角180g。制成1000片)3.动物模型根据文献(Akahori H, Shibuya K, Ozai M, et al. Effects of pegylated recombinant human megakaryocyte growth and development factor on thrombocytopenia induced by a new myeIosuppressive chemotherapy regimen in mice. Stem Cells. 1996,14(6) :678-689 ；Shimomura K, Manda Τ, Mukumoto S, et al.Antitumor activity and hematotoxicity of a new, substituted dihydrobenzoxazine, FK973, in mice. Cancer Res. 1988，48 (5) :1166-1172)和预实验结果，采用下述方法，小鼠腹腔注射丝裂霉素:3mg/kg —次，五天后再注射丝裂霉素ang/kg — 次。4.升高白细胞实验分组和剂量动物根据体重随机分为6组，每组10只。分为正常对照组、模型组、模型+中药唐草片低剂量组、模型+中药唐草片中剂量组、模型+中药唐草片高剂量组、阳性药对照组。中药唐草片采用强制口服给药方式。中药唐草片用生理盐水溶解后定容至所需体积，动物灌胃体积按0. lml/10g体重。中药唐草片低、中、高剂量依次为0. 5,1. 0,2. 0g/kg体重，中药唐草片用药5天后腹腔注射丝裂霉素，中药唐草片连续灌服21天，正常对照组、模型组灌服等量生理盐水，阳性药对照组在模型成功后皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子50 μ g/kg，连续注射4天。5.荷瘤动物实验分组和剂量(徐叔云主编.药理实验方法学.第二版.北京人民卫生出版社，1994. 1243-1249)动物根据体重随机分为5组，每组6只。分为正常对照组、 荷瘤动物组、荷瘤动物+中药唐草片(1. Og/kg体重)组、荷瘤动物+中药唐草片(1. Og/kg 体重)+丝裂霉素(5. Omg/kg体重)组、荷瘤动物+丝裂霉素(5. Omg/kg体重)组。预防应用中药唐草片5天，分别给小鼠接种鼠S180肉瘤和腹水瘤(107只，0. 2ml)，第二天同时应用化疗药物丝裂霉素5. Omg/kg治疗一次。接种鼠S180肉瘤组(形成实体瘤)中药唐草片连续给药11天，腹水瘤组中药唐草片连续给药18天。三.观察指标1.白细胞计数按常规方法取小鼠尾静脉血50 μ 1，加入含有EDTA-I的150 μ 1 生理盐水中，混勻，用血细胞分析仪分别计数外周血白细胞(WBC)数、血小板(PLT)数、红细胞(RBC)数等。分别在给药后不同时间计数细胞，模型组动物外周血白细胞数恢复到正常水平时终止。2.股骨有核细胞计数在实验结束时用安死术处死小鼠，取一侧股骨，按常规冲出骨髓有核细胞，用血细胞计数器计数有核细胞数。骨髓集落形成细胞培养在实验结束时用安死术处死小鼠，取一侧股骨骨髓细胞，用6孔板做甲基纤维素培养，每样品设3孔，主要观察粒-单核细胞集落数(CFU-GM)。3.动物体重分别在给药前和给药后不同时间称量动物体重。4.荷瘤动物分别观察抑瘤率(实体瘤)和动物的寿命延长(腹水瘤)情况，并测定外周血细胞数等变化。四.统计处理实验数据以均数士标准差(X士 s)表示，应用SPSS10. 0分析软件对实验数据进行统计分析，采用多个样本均数比较的单因素方差分析法进行统计分析，取P < 0. 05为显著性检验水准。五·实验结果1.实验模型的验证从表1中可以看出，第一次注射丝裂霉素后4天，模型组白细胞数降低不明显，第二次注射丝裂霉素后6天，即第一次注射丝裂霉素后10天，模型组白细胞数显著低于正常对照组的35%，和正常对照组相比具有统计学差异，说明模型建立成功。所建立模型动物的白细胞、血小板数在低水平可以持续30天，红细胞持续7天。2.外周血白细胞数的变化表1外周血白细胞数的变化(X 109/L)
权利要求
1.中药唐草片在制备升高白细胞药物中的应用。
2.根据权利要求1所述中药唐草片在制备升高白细胞药物中的应用，其特征在于，所述中药唐草片的中药原料组成成分为下列重量配比老鹳草120-150、黄芪120-150、龙葵 120-200、金银花120-200、木棉花60-100、诃子40-60、白花蛇舌草80-150、石榴皮40-60、 糯稻根150-200、菱角80-150.瓜蒌皮40-60、柴胡60-100、香薷40-60、甘草60-80、鸡血藤 120-150、红花40-60、银杏叶40-60、马齿苋60-120、胡黄连40-60、全蝎沘_40。
3.根据权利要求1的应用，其特征在于，所述中药唐草片的中药原料组成成分为下列重量配比老鹳草120-150、黄芪120-150、龙葵120-200、金银花120-200、木棉花60-100、诃子 40-60、白花蛇舌草80-150、石榴皮40-60、糯稻根150-200、菱角80-150。
4.根据权利要求1的应用，其特征在于，所述中药唐草片的中药原料组成成分为下列重量配比老鹳草180、黄芪180、龙葵180、金银花180、木棉花120、诃子90、白花蛇舌草180、石榴皮90、糯稻根300、菱角180。
5.根据权利要求1的应用，其特征在于，所述药物为增加动物骨髓集落形成细胞数的药物。
6.根据权利要求1的应用，其特征在于，所述药物为缓解抗肿瘤药物对骨髓的抑制作用的药物。
全文摘要
本发明提供了中药唐草片在制备升高白细胞药物中的应用。所述中药唐草片的中药原料组成成分为老鹳草、黄芪、龙葵、金银花、木棉花、诃子、白花蛇舌草、石榴皮、糯稻根、菱角、瓜蒌皮、柴胡、香薷、鸡血藤、红花、银杏叶、马齿苋、胡黄连和全蝎。经中药唐草片对小鼠因化疗药物所引起的白细胞减少症的疗效实验，显示其具有升高白细胞的作用，可以提高治疗的综合疗效，增加中药唐草片的适应症，扩大应用范围，可用于制备升高白细胞作用的药物，有较大的临床应用价值，具有明显的社会效益和经济效益。
文档编号A61P43/00GK102335353SQ20101022939
公开日2012年2月1日 申请日期2010年7月16日 优先权日2010年7月16日
发明者杨莉娅, 殷建华, 邵宝平, 黄艳春 申请人:上海百岁行药业有限公司