专利名称：用于治疗白血病的方法和组合物的制作方法
用于治疗白血病的方法和组合物发明背景发明领域用于治疗白血病的BCR-ABL抑制剂和刺猬(hedgehog)途径抑制剂的组合。相关
背景技术：
本领域已描述了刺猬(hedgehog)信号传导途径(参见例如Nybakken等人,Curr.Opin. Genet. Dev. 2002，12 :503-511 ;和 Lum等人，Science 2003，299 :2039-2045)。简言之，在不存在刺猬(hedgehog)配体的情况下，跨膜受体Patched (Ptch)结合Smoothened (Smo)并阻断Smo的功能。在配体存在时，这种抑制作用有所缓解，这使Smo引发信号传导级联，而导致转录因子Glis从融合的胞质蛋白(cytoplasmic proteins fused) (Fu)和Suppressor of Fused(SuFu)释放。在失活情况下，SuFu防止Glis转位至细胞核。在活性情况下，Fu抑制SuFu,从而Glis被释放。Gli蛋白转位至细胞核中并控制祀基因转录。BCR-ABL致癌基因是费城染色体(Ph) 22q的产物，并编码嵌合BCR-ABL蛋白，该嵌合BCR-ABL蛋白已组成型激活ABL酪氨酸激酶活性。(Lugo等人，Science 1990，247 1079-1082)。BCR-ABL是慢性髓性白血病(aka慢性髓性白血病或CML)的潜在原因。2IOkDaBCR-ABL蛋白在CML患者中表达，但是从BCR基因中的替代断裂点产生的190kDaBCR_ABL蛋白在Ph阳性(Ph+)急性成淋巴细胞性白血病(ALL)患者中表达。(Bartram等人，Nature1983，306 :277-280 ；Chan 等人，Nature 1987，325 :635-637)。已经显示BCR-ABL通过各种机制在定型髓样或淋巴样祖细胞或3T3成纤维细胞中诱导增殖和抗-细胞凋亡。(Pendergast等人，Cell 1993, 75 :175-85 ;Ilaria等人,J. Biol.Chem. 1996，271:31704-10 ；Chai 等人，J. Immunol. 1997，159 :4720-8 ；和 Skorski等人，EMBO J. 1997，16 :6151-61)。然而，关于BCR-ABL对造血干细胞(HSC)种群的作用知之甚少。最近的出版物表明发育途径如fct信号传导途径或Polycomb基因BMIl可能与白血病干细胞的调节和扩增有关(Mohty等人，Blood, 2007 ;Hosen等人，Stem Cells, 2007)。BMIl和￠-连环蛋白在CML原始细胞危象(blast crisis)中均得以上调，且它们的表达与疾病的进展相关。具有获得性P -连环蛋白表达的BCR-ABL阳性粒细胞-巨噬细胞祖细胞是原始细胞危象CML中的候选白血病干细胞。自我更新途径与慢性期BCR-ABL阳性白血病干细胞的扩增有关，这种扩增导致恶性克隆的初期扩增。发明简述本发明提供可用于抑制肿瘤细胞生长并用于治疗多种癌症的组合和治疗性治疗方法。一方面，本发明提供包含抑制刺猬(hedgehog)信号传导途径的第一活性剂和抑制BCR-ABL的第二活性剂的组合。另一方面，本发明提供包含治疗有效量的抑制刺猬(hedgehog)信号传导途径的第一活性剂、抑制BCR-ABL的第二活性剂和药学上可接受载体的药物组合物。本发明还提供用于治疗癌症、特别是BCR-ABL阳性白血病如CML的方法，其包括向系统或对象施用治疗有效量的包含抑制刺猬(hedgehog)信号传导途径的第一活性剂和抑制BCR-ABL的第二活性剂或其药学上可接受的盐或药物组合物的组合物，由此治疗所述BCR-ABL阳性白血病。例如，本发明的组合物可用于治疗慢性髓性白血病或急性淋巴细胞白血病。而且，本发明提供治疗有效量的包含抑制刺猬(hedgehog)信号传导途径的第一活性剂和抑制BCR-ABL的第二活性剂或其药学上可接受的盐的组合或其药物组合物在制备用于治疗细胞增殖性病症、特别是BCR-ABL阳性白血病的药剂中的用途。在上述组合物和使用本发明的组合物的方法中，本发明组合物中的第一活性剂可结合Smo。在其它实施方案中，本发明组合物中的第二活性剂是ABL抑制剂、ABL/Scr抑制齐U、极光(Aurora)激酶抑制剂或BCR-ABL的非-ATP竞争性抑制剂。在上述组合、组合物和使用本发明的组合物的方法中，可给包括细胞或组织的系 统施用本发明组合物。在一些实施方案中，可给人患者或动物对象施用本发明组合物。附图简述图I表示“第一次再接种”实验，其中用递增浓度的化合物A处理3天后，由原代CML细胞的单菌落形成的第二代菌落的总数。结果表示为未处理对照的百分比。图2表示在图I的“第二次再接种”后形成的原代CML细胞的菌落总数。结果表示为未处理对照的百分比。表明第二次再接种后形成的菌落总数。图3描述了在三次重复中所得第二代菌落的总数，表示为未处理对照的百分比。图4是在用化合物A或尼罗替尼(nilotinib)或这两种药物处理3天的原代CML细胞的实验中第二代菌落总数的示例性实施例。结果表示为未处理对照的百分比。图5表明在暴露于化合物A、尼罗替尼或两者组合7天后，在“第一次再接种”实验中产生的第二代菌落的总数。结果表示为未处理对照的百分比。图6表明在暴露于化合物A、尼罗替尼或两者组合3天后，在“第一次再接种”试验中产生的第二代菌落的总数。结果表示为未处理对照的百分比。图7表明通过计算曲线下面积(AUC)而得的原代CML细胞用化合物A、尼罗替尼或这两种药物处理后的增殖指数(PD。该Pi既反映了产生的菌落也反映了它们的灭绝率。图8是将2. 5X IO5个感染有Bcr_abl逆转录病毒的小鼠骨髓细胞以400ul/每孔(48孔板)接种于存在所示浓度的AMN107和化合物A的OPTI-MEM培养基(10% FBS, 0. I %2_ 疏基乙醇，50ng/ml SCF, 25ng/mlmIL_3 和 25ng/ml mIL-6)中。培养 3 天后，以 1500 个细胞/35_板的浓度将细胞接种在甲基纤维素中。在接种后10天对菌落形成进行评分。图9 :将由图8的第一次接种试验获得的菌落重悬浮，在含10% FCS的PBS中洗涤。将细胞重悬浮在OPTI-MEM培养基中，以5000个细胞/35mm板的浓度接种在甲基纤维素中。在接种后10天对菌落形成进行评分。
图10比较了在小鼠CML模型中对照媒介物、化合物A、AMN107及化合物A与ANM107的组合的存活率。发明详述通过下面代表性实例非限制性地进一步例证本发明，这些实例旨在阐述本发明且不被理解为局限于此。式I化合物-Smo抑制剂
一方面，本发明提供式I化合物
权利要求
1.组合，其包含为Smo抑制剂的第一活性剂和为BCR-ABL抑制剂的第二活性剤， 其中所述第一活性剂是式I化合物或其药学上可接受的盐
2.权利要求I的组合，其中所述第一活性剂是2-甲基-4'-三氟甲氧基-联苯基-3-甲酸[6-(顺式-2，6- ニ甲基-吗啉-4-基)-吡啶-3-基]-酰胺或其药学上可接受的盐。
3.权利要求I的组合，其中所述第一活性剂是2-[(R) -4- (6-苄基-4，5- ニ甲基-哒嗪-3-基)-2-甲基-3，4，5，6_四氢-2H-[1，2']联吡嗪基-5'-基]-丙-2-醇或其药学上可接受的盐。
4.权利要求I的组合，其中所述第二活性剂是ABL抑制剂、ABL/Scr抑制剂、极光激酶抑制剂或BCR-ABL的非-ATP竞争性抑制剂。
5.权利要求I的组合，其中所述第二活性剂选自尼罗替尼(AMN107)、伊马替尼(STI571) ,2,6,9-三取代的嘌呤类似物(例如AP23464)、AZD-0530、博舒替尼(SKI-606)、CPG070603、吡啶并[2, 3-d]嘧啶化合物(例如达沙替尼(BMS-354825))、PD166326、PD173955、PD180970)、0N012380.3-取代的苯甲酰胺衍生物(例如 INN0-406)、MK-0457(VX-680)、PHA-739358、盐酸瑞他霉素(IPI-504)和 GNF-2。
6.权利要求5的组合，其中所述第二活性剂是尼罗替尼。
7.权利要求6的组合，其中所述第一活性剂是2-甲基-4'-三氟甲氧基-联苯基-3-甲酸[6-(顺式-2，6- ニ甲基-吗啉-4-基)-吡啶-3-基]-酰胺或其药学上可接受的盐。
8.权利要求6的组合，其中所述第一活性剂是2-[(R) -4- (6-苄基-4，5- ニ甲基-哒嗪-3-基)-2-甲基-3，4，5，6_四氢-2H-[1，2']联吡嗪基-5'-基]-丙-2-醇或其药学上可接受的盐。
9.药物组合物，其包含为Smo抑制剂的第一活性剂和为BCR-ABL抑制剂的第二活性剤， 其中所述第一活性剂是式I化合物或其药学上可接受的盐
10.权利要求I的组合在制备用于治疗BCR-ABL阳性白血病的药剂中的用途。
11.权利要求10的用途，其中所述BCR-ABL阳性白血病是慢性髓性白血病、急性髓性白血病或急性淋巴细胞白血病。
12.权利要求11的用途，其中所述BCR-ABL阳性白血病是慢性髓性白血病。
全文摘要
用于治疗白血病的BCR-ABL抑制剂和刺猬(hedgehog)途径抑制剂的组合。
文档编号A61K31/506GK102695547SQ201080045836
公开日2012年9月26日 申请日期2010年8月11日 优先权日2009年8月12日
发明者D·欧文, M·多施, M·科普兰德, P·W·曼雷, S·波伊克特 申请人:格拉斯哥大学董事会, 诺瓦提斯公司