专利名称：赤芍有效组分及其制备方法与用途的制作方法
技术领域：
本发明属于中药领域，涉及中药有效组分，具体涉及从赤芍中提取有效组分及其 制备方法和医药用途。
背景技术：
心血管疾病是危害人类健康的第一杀手，近年来，随着我国人口老年化以及人们 工作、生活、饮食结构及环境等的变化，冠心病等心脑血管疾病的发生率也逐年增多，严重 威胁着人民的身心健康。天然产物中许多活性物质具有抗心肌缺血、缺氧作用，其中一些已 开发成治疗冠心病和心绞痛的新药。因而从天然产物中寻找具有抗心肌缺血、缺氧生理活 性的有效物质，是发现、开发新药的有效途径之一。我国药用生物资源十分丰富，其生理活 性物质是研究和发现新药先导化学物，开发新药的天然宝库。目前，我国从天然产物中提取 活性物质，用于开发成治疗冠心病、安全性好、毒性低的新药还很少，从天然产物中提取活 性物质，开发成具有抗心肌缺血，用于治疗冠心病和心绞痛的新药，具有重要应用价值和广 阔发展前景。赤芍为毛茛科芍药(Paeonialactiflora Pall.)或川赤芍(A veitchii Lynch.)的干燥根。其味苦，微寒，归肝经，具有清热凉血，散瘀镇痛之功效。现代研究表明， 赤芍中主要含有芍药苷、羟基芍药苷、苯甲酰芍药苷、氧化芍药苷、芍药花苷、没食子酰芍药 苷等苷类化合物，此外还有环烯醚萜类、三萜类、酚及其苷类、留醇及其苷类、鞣质、酸类、酯 类、黄酮类、酮类、烷类、挥发油、糖、氨基酸、蛋白质、脂肪油、树脂、黏液质、生物碱、色素、微 量元素等物质。赤芍是传统的活血化瘀类中药，有较强的抗动脉粥样硬化作用，该药也能扩张冠 脉血管，增加冠脉血流量从而增加心肌营养性血流量，保护缺血心肌，提高心肌对低氧的耐 受性，降低肺血管阻力，减轻后负荷。同时赤芍能够降低门脉高压，对微循环也有影响。药理 学研究表明赤芍能抑制血小板聚集，改善红细胞的通透性，增加红细胞对低渗张力的抗性， 有一定稳定红细胞膜结构的作用。另外，赤芍总苷能明显延长大鼠和小鼠的凝血时间，并能 延长电刺激大鼠颈总动脉血栓形成的时间，提示赤芍总苷通过对凝血系统和血小板功能的 影响而产生抗血栓作用。赤芍具有以上对心血管系统的明显药理作用，因此，从赤芍中分离 出有效组分，开发出治疗心血管疾病的现代中药具有重要的意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种赤芍有效组分，通过以下步骤制备获得将赤芍药材粉 碎后加入乙酸乙酯和乙醇，加热提取，药渣加乙醇水溶液提取，将提取液浓缩成浸膏，用反 相硅胶柱对其进行分离，首先用低浓度甲醇作为流动相，得洗脱液I，然后改换高浓度甲醇 作为流动相，得洗脱液11，最后改换甲醇作为流动相，得洗脱液III，将洗脱液111浓缩干燥 后得赤芍有效组分。具体制备步骤如下取赤芍药材，将其粉碎后加入体积比1:1为乙酸乙酯和乙醇，加热回流1小时，提取2次，滤液合并得提取液I，药渣加入70%乙醇溶液，加热回流1小时， 提取2次，滤液合并得提取液II，将提取液II浓缩成浸膏，用50%甲醇溶液溶解浸膏，采用 ODS-C18柱对其进行分离，首先用低浓度的3% -8%甲醇溶液作为流动相，得洗脱液I，然后 改用高浓度的50% -80%的甲醇溶液作为流动相，得洗脱液II，最后改换100%的甲醇溶液 作为流动相，得洗脱液III，将洗脱液III浓缩干燥后得赤芍有效组分。也可选用低浓度的 5%甲醇溶液和高浓度的60%甲醇溶液。本发明的另一个目的是提供所述赤芍有效组分在制备治疗心血管疾病的药物中 的应用。经药理实验证明，本发明提供的赤芍有效组分对心肌细胞有保护作用。本发明提供的赤芍有效组分作为活性成分，加入药剂学上接受的辅料，按照药剂 学上记载的制剂的制备方法制成制剂。所述的制剂包括注射液、滴注液、粉针剂、颗粒剂、片剂、冲剂、散剂、口服液、糖衣 片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口含剂、颗粒剂、丸剂、膏剂、 丹剂、喷雾剂、滴丸剂、崩解剂、口崩片、微丸等。本发明提供的赤芍有效组分可在制备治疗、预防心血管疾病药物中的应用。本发 明提供的制备方法设计合理，能快速准确地得到有效成分，在生产中更易于药物的质量控 制。
具体实施例方式下面将结合实施例进一步详细说明本发明的实质内容和有益效果，该实施例仅用 于说明本发明而非对本发明的限制。实施例一赤芍有效组分的制备
将赤芍药材粉碎后加入乙酸乙酯和乙醇，加热提取，药渣加乙醇水溶液提取，将提取液 浓缩成浸膏，用反相硅胶柱对其进行分离，首先用低浓度甲醇作为流动相，得洗脱液I，然后 改用高浓度甲醇作为流动相，得洗脱液II，最后改换甲醇作为流动相，得洗脱液III，将洗 脱液III浓缩干燥后得赤芍有效组分。实施例二赤芍有效组分的制备
取赤芍药材，将其粉碎后加入体积比为1:1的乙酸乙酯和乙醇，加热回流1小时，提取 2次，滤液合并得提取液I。药渣加入70%乙醇，加热回流1小时，提取2次，滤液合并得提 取液II，将提取液II浓缩成浸膏，用50%甲醇溶解浸膏，采用ODS-C18柱对其进行分离，首 先用5%甲醇作为流动相，得洗脱液I，然后改用60%甲醇作为流动相，得洗脱液II，最后改 用100%甲醇作为流动相，得洗脱液III，将洗脱液III浓缩干燥后得赤芍有效组分。实施例三滴丸制剂的制备
取赤芍有效组分0. 5g与10. 5g聚乙二醇-20000混合均勻，加热熔融，化料后移至滴丸 滴灌中，药液滴至6、°C液体石蜡中，除油，制得滴丸400粒。实施例四冻干粉针剂的制备
取赤芍有效组分0. 5g、葡萄糖4. 5g、硫代硫酸钠0. 9g和蒸馏水1000ml，上述组分混合 均勻后，分装400支，冷冻干燥，即得。实施例五赤芍组分的活性评价实验
1.赤芍组分对H》2损伤心肌细胞的保护作用体外培养H9C2心肌细胞，培养液为DMEM(高糖)+10%FBS (G) +1%非必需氨基酸+0. 1%双 抗。取对数生长期细胞置于96孔细胞培养板上，恒温培养M h后，加入200 μ mol/mL H2O2 损伤心肌细胞30 min,再加入终浓度为50 μ g/mL的赤芍组分孵育M h，采用MTT法测定细 胞活力。结果表明，该组分对H2O2损伤心肌细胞的保护率为59.84%。
2.赤芍组分对缺氧复氧损伤心肌细胞的保护作用
体外培养H9C2心肌细胞，培养液为DMEM(高糖)+10%FBS (G) +1%非必需氨基酸+0. 1%双 抗。取对数生长期细胞置于96孔细胞培养板上，恒温培养M h后，在缺氧小室中培养6 h。 缺氧结束后，取出细胞培养板加入经无糖Hank’ s稀释的终浓度为50 μ g/mL的赤芍组分，在 正常培养条件下孵育6 h，取细胞培养上清液测定乳酸脱氢酶(LDH)含量。结果表明，该组 分对缺氧复氧损伤的心肌细胞保护率为50. 72%。
权利要求
1.一种赤芍有效组分，其特征在于，通过以下步骤获得将赤芍药材粉碎后加入乙酸 乙酯和乙醇，加热提取，药渣加乙醇水溶液提取，将提取液浓缩成浸膏，用反相硅胶柱对其 进行分离，首先用低浓度甲醇溶液作为流动相，得洗脱液I，然后改用高浓度的甲醇溶液作 为流动相，得洗脱液II，最后改用100%甲醇溶液作为流动相，得洗脱液III，将洗脱液III 浓缩干燥后得有效组分。
2.根据权利要求1所述的一种赤芍有效组分，其特征在于，低浓度甲醇为5%的甲醇溶 液，高浓度甲醇为60%的甲醇溶液。
3.根据权利要求1所述的一种赤芍有效组分，其特征在于，通过以下步骤获得取赤芍 药材，将其粉碎后加入体积比为ι ι的乙酸乙酯和乙醇，加热回流1小时，提取2次，滤液合 并得提取液I，药渣加入70%乙醇，加热回流1小时，提取2次，滤液合并得提取液II，将提 取液II浓缩成浸膏，用50%甲醇溶解浸膏，采用ODS-C18柱对其进行分离，首先用低浓度的 体积百分比3% -8%的甲醇溶液作为流动相，得洗脱液I，然后改用高浓度的50% -80%甲 醇溶液作为流动相，得洗脱液II，最后改换100%甲醇溶液作为流动相，得洗脱液III，将洗 脱液III浓缩干燥后得赤芍有效组分。
4.根据权利要求1或3所述的一种赤芍有效组分在制备治疗心血管疾病的药物中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述药物由赤芍有效组分加入药剂学上 可接受的辅料，按照药剂学上记载的制剂制备方法制成。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的制剂包括液体制剂或固体制剂。
全文摘要
本发明提供一种赤芍有效组分，通过将赤芍药材粉碎加热提取，浓缩，反相柱分离，洗脱，洗脱液浓缩干燥后得到有效组分。本发明提供的赤芍有效组分可在制备治疗、预防心血管疾病药物中的应用。本发明制备方法设计合理，能快速准确地得到有效成分，在生产中更易于药物的质量控制。
文档编号A61P9/10GK102133277SQ201110057639
公开日2011年7月27日 申请日期2011年3月10日 优先权日2011年3月10日
发明者李云飞, 王毅, 程翼宇, 葛志伟 申请人:浙江大学