专利名称：一种右归丸的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及右归丸的一种应用，具体说，是涉及右归丸在改善慢性肝损伤药物中的应用，属于中药技术领域。
背景技术：
反复慢性肝损伤是在临床上较为常见的肝损伤，各种病因所导致的慢性肝损伤，均可引起肝细胞炎症坏死，并继发肝纤维化，肝纤维化(Hepatic fibrosis)是指肝脏纤维组织过度沉积，是纤维增生和纤维分解不平衡的结果。如果肝纤维化得不到有效控制，可最终发展为肝硬化并引起严重的并发症(门脉高压、肝衰竭、肝癌等)。因此保护肝细胞，减少各种损伤因素，可以防止或延缓肝纤维化及其并发症的进展。肝细胞坏死后，肝细胞内的一些酶类进入血液，血清中转氨酶(ALT等)水平升高，血清转氨酶的升高在一定程度上反映了肝细胞的损伤程度，因此ALT活性升高是肝实质细胞损伤的标记。慢性肝损伤一般都伴有肝纤维化改变，表现为胶原面积增加，肝组织羟脯氨
酸含量增高。目前对抗肝纤维化药物的研究比较多，中医中药尤其受到人们的极大重视。右归丸出自《景岳全书》，由10味药组成。方中以附子、肉桂、鹿角胶为君药，温补肾阳，填精补髓。臣以熟地黄、枸杞子、山茱萸、山药滋阴益肾，养肝补脾。佐以菟丝子补阳益阴，固精缩尿；杜仲补益肝肾，强筋壮骨；当归补血养肝。诸药配合，共奏温补肾阳，填精止遗之功。药理研究显示右归丸本方具有调节免疫、改善机体内分泌功能、改善骨代谢、抗衰老，调节性激素含量等作用，常用于治疗男性不育症、坐骨神经痛、肥大性脊椎炎等。至今，未见右归丸有改善肝功能的报道。中医认为“肝肾同源、乙癸同源”，如果能揭示右归丸具有改善慢性肝损伤的作用，将为临床治疗慢性肝损伤提供一种新的选择。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供右归丸的一种新应用，即，右归丸在制备用于改善慢性肝损伤药物中的应用。本发明人经过长期研究发现:右归丸不仅能够降低CCl4小鼠血清ALT水平，减少肝组织胶原面积，降低肝组织Hyp含量；右归丸还能够减少DMN大鼠肝组织胶原面积，降低肝组织Hyp含量，增加大鼠体重。右归丸具有改善慢性肝损伤的作用，其作用机制可能是:一、通过保护肝细胞，从而避免肝细胞内的酶进入血液，血清中转氨酶水平升高；二、通过改善肝纤维化，减少胶原沉积，降低肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量。
图1是CCl4模型中小鼠肝组织天狼染色图(光镜，200倍)；图2是DMN模型中大鼠肝组织天狼染色图(光镜，200倍)；
图中:N为正常组；M为模型组；Y为右归丸组。
具体实施例方式下面结合具体实施例和附图，进一步阐述本发明。这些实施例应理解为仅用于说明本发明而不是用于限制本发明的保护范围。在阅读了本发明记载的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等效变化和修饰同样落入本发明权利要求书所限定的范围。实施例1.实验目的:观察右归丸对慢性肝损伤的影响2.实验材料2.1 药物右归丸:熟地240克，附子(炮附片)60克，肉桂60克，山药120克，山茱萸(酒炙)90克，菟丝子120克，鹿角胶120克，枸杞子120g，当归90克，杜仲(盐炒)120克。中药饮片购自上海华宇药业有限公司，由上海中医药大学中药所制备成浸膏，方法如下:水煎煮2次，第I次用水量为药物10倍量，第2次为药物8倍量，从沸腾计时每次I小时，两次煎煮液再合煎浓缩至所需温度，_20°C保存，灌胃前37°C温育。2.2 试剂CCl4 (分析纯，批号:20080107)、橄榄油:(化学纯，批号:F20090324)、DMN(批号:EPK2669)，购自和光纯药工业株式会社、对 二甲氨基苯甲醛(分析纯，批号:F20100820)、氯氨_Τ(分析纯，批号:Τ20090505)，均购自国药集团化学试剂有限公司。Hyp标准品(ALDRICH, lot:H54409)，购自 sigma。ALT(20101123)购自南京建成有限公司。2.3实验动物10周龄C57BL/6小鼠雄性45只，清洁级，体重20±5g，由上海斯莱克实验动物有限公司提供，许可证号:SCXK (沪)2007-0005，所有小鼠饲养于上海中医药大学实验动物中心，自由饮食。6周龄WISTAR大鼠雄性36只，清洁级，体重200±20g，由上海斯莱克实验动物有限公司提供，许可证号:SCXK(沪)2007-0005，所有小鼠饲养于上海中医药大学实验动物中心，自由饮食。3.实验方法3.1采用两种不同的肝损伤动物模型观察右归丸改善慢性肝损伤的作用四氯化碳(CCl4)致小鼠慢性肝损伤模型:雄性C57BL/6小鼠45只随机分为3组，即:正常组、模型组、右归丸组。模型组和右归丸组小鼠以10% CC14橄榄油溶液2ml/kg体重腹腔注射，每周注射3次(隔天I次)，连续注射5周。正常组、模型组每天给予等量超纯水灌胃。右归丸用超纯水1:1稀释，右归丸组于造模之日起给予右归丸17.14ml.k^1 (相当于70克成人体重的10倍量)。给药第5周末，摘眼球取血，常温放置2-3h，3000rpm离心15min，血清_80°C保存备用；小鼠颈椎脱臼后处死，打开腹腔，摘取肝脏，取0.5X0.5X0.5cm3大小肝组织2块放入包埋框，4%中性甲醛固定液固定，24h后逐级酒精脱水，二甲苯透明，60°C石蜡包埋，用于普通病理实验；其余肝组织EP管分装成2管，-80°C保存。取小鼠血清检测ALT含量；取肝组织病理切片，经天狼星红染色检测胶原面积；取肝组织，采用Jamall氏盐酸水解法检测羟脯氨酸含量。
二甲基亚硝胺(DMN)致大鼠慢性肝损伤模型:雄性WISTAR大鼠36只，随机分为3组，即正常组、模型组、右归丸组。模型组和右归丸组以0.5% DMN溶液按2ml/kg体重腹腔注射，每周连续注射3次，连续注射6周。造模两周后，正常组、模型组每天给予等量清水灌胃，右归丸用超纯水1:1稀释，右归丸治疗组给予右归丸10.3ml *kg-l(相当于70克成人体重的6倍量)灌胃，连续四周。造模结束后，大鼠乙醚麻醉后，打开腹腔，腹主动脉取血，常温放置2 3h，3000rpm离心15min，血清_80°C保存备用;摘取肝脏，取0.5X0.5X0.5cm3大小肝组织2块，放入包埋框，4%中性甲醛固定液固定，24h后逐级酒精脱水，二甲苯透明，60°C石蜡包埋，用于普通病理实验；其余肝组织EP管分装成2管，_80°C保存。取大鼠血清检测ALT含量；取肝组织病理切片，经天狼星红染色检测胶原面积；取肝组织，采用Jamall氏盐酸水解法检测羟脯氨酸含量。3.2统计学分析计量资料以[±s表示，采用单因素方差分析，采用SPSS 11.0软件统计分析。4.实验结果4.1对CC14致小鼠慢性肝损伤模型血清ALT影响与正常组比较，模型组小鼠ALT显著增高(P < 0.01)。与模型组比较，右归丸组小鼠ALT显著降低(P < 0.01)。结果见表I所示。表I右归丸对CCl4致慢性肝损伤小鼠血清ALT的影响(x±S)
权利要求
1.一种右归丸的应用，其特征在于:右归丸在制备用于改善慢性肝损伤药物中的应用 。
全文摘要
本发明公开了一种右归丸的应用，即，右归丸在制备用于改善慢性肝损伤药物中的应用。右归丸能够降低CCl4小鼠血清ALT水平，减少肝组织胶原面积，降低肝组织Hyp含量；右归丸还能够减少DMN大鼠肝组织胶原面积，降低肝组织Hyp含量，增加大鼠体重。
文档编号A61K36/815GK103070979SQ20111033011
公开日2013年5月1日 申请日期2011年10月26日 优先权日2011年10月26日
发明者王晓玲, 闫晓风, 叶目亭杰, 刘平 申请人:上海中医药大学