紫菀萃取物于治疗鸦片类药物所引发便秘的用途的制作方法

专利名称：紫菀萃取物于治疗鸦片类药物所引发便秘的用途的制作方法
紫菀萃取物于治疗鸦片类药物所引发便秘的用途本申请案主张2010年12月23日申请的台湾专利申请TW 99145642的优先权，在此将该申请案全文纳入作为参照。
技术领域：
本发明是有关于鸦片类药物所引发便秘(opioid-induced constipation，简称 0IC)的治疗。具体来说，本发明系有关于紫菀属萃取物于治疗鸦片类药物所引发便秘的用途。
背景技术：
鸦片类药物泛指可和鸦片受体结合的各种化合物。鸦片受体广泛地分布于人体中枢与周边神经系统以及肠胃道中。鸦片类药物可分为天然、合成或内生性(endogenous)鸦片类药物。天然鸦片类药物如甲基吗啡(codeine)、吗啡等系源自罂粟(opium poppy)中所含的鸦片生物碱(opiate alkaloids)。合成鸦片类药物包括对天然鸦片类药物进行化学修饰所得的人造化合物(如，羟基可待因酮(oxycodone))或以非鸦片类物质为起始物所合成的物质(如，美沙冬(methadone))。内生性鸦片类药物则是指人体可自然生成者，如脑内啡 (endorphins)。鸦片类药物常用于镇痛(analgesic)或止痛(pain-killing)，亦可用于其它经鸦片受体调节的用途。然而，使用鸦片会导致多种副作用，包括嗜睡、恶心、呕吐、呼吸减缓以及对呼吸系统的抑制。此外，鸦片类药物经常会引发便秘，更明确地说，可将此种便秘称为鸦片类药物所引发便秘。因此，在开立可能引发便秘的鸦片类药物作为止痛剂时，通常需要同时开立额外的药物来预防/缓解便秘的情形。举例来说，通常会开立用来治疗一般功能性便秘、(functional constipation)的软便齐[J (laxatives)禾口 / 或湾药(cathartics)来治疗鸦片类药物所引发便秘。泻药能够加速排便，而软便剂通常可通过软化粪便而使得患者能够轻易排便；有某些药物兼具软便剂与泻药的功能。虽然功能性便秘和鸦片类药物所引发便秘具有许多共同的征兆与症状，但用以治疗功能性便秘的疗法不一定能有效治疗鸦片类药物所引发便秘。因此，相关领于一直在寻求能够以鸦片类药物所引发便秘为标的的疗法。口服鸦片受体拮抗剂如纳洛酮(naloxone)、纳曲酮(naltrexone)与纳美芬 (nalmefene)被认为可用以缓减鸦片类药物在肠胃道的作用。然而，这些药物会通过血脑障碍(blood-brain barrier)，进而抵消其它鸦片类药物的止痛效果，还可能导致令患者不适的鸦片戒断症状(opioid withdrawal symptoms)，因此限制了此类药物在治疗鸦片类药物所引发便秘方面的应用。甲基纳曲酮(methylnaltrexone)是一种较新的药物，其可阻断周边神经系统与肠胃道上的鸦片受体。因此，甲基纳曲酮可以降低鸦片类止痛药物在肠胃道中所引发的便秘效果，而不会影响鸦片类止痛药物对中枢神经系统的止痛作用。然而，有高达百分的六十的鸦片类止痛效果是由周边感应神经元所负责，而甲基纳曲酮可能会增加此类神经元所感应到的疼痛。
有鉴于此，相关领域亟需提出一种新颖的组合物与方法，以治疗鸦片类药物所引发便秘。

发明内容发明内容旨在提供本揭示内容的简化摘要，以使阅读者对本揭示内容具备基本的理解。此发明内容并非本揭示内容的完整概述，且其用意并非在指出本发明实施方式的重要/关键组件或界定本发明的范围。发明内容旨在提供本揭示内容的简化摘要，以使阅读者对本揭示内容具备基本的理解。此发明内容并非本揭示内容的完整概述，且其用意并非在指出本发明实施方式的重要/关键组件或界定本发明的范围。本发明部分系基于发明人首度发现紫菀(Aster tartaricus)植株萃取物能够有效地治疗鸦片类药物所引发便秘。因此，本发明的一态样是有关于紫菀萃取物的用途，其系用于制备鸦片类药物所引发便秘的治疗性药物。根据本发明一实施方式，所述的萃取物是由紫菀植株的植物部分所制得。萃取过程中所用的植物部分可为取自紫菀植株根茎部和/或根部的新鲜或干燥材料。根据本发明多个实施方式，该药物的制备方法包含一萃取步骤，以及此步骤中利用一萃取剂来萃取紫菀的植物部分以得到萃取混合物。适当的萃取剂包括水以及含有 10-95% (ν/ν)乙醇的乙醇水溶液。可利用各种适当的方式来进一步分离纯化上述萃取混合物，如析出或管柱层析。在一实施方式中，通过改变萃取混合物中的溶剂组成以得到一析出物，此析出物可用以制备供治疗鸦片类药物所引发便秘的药物。举例来说，当萃取剂为乙醇水溶液时，可将水加入萃取混合物中，以得到析出物。或者是，当萃取剂为水时，可将乙醇水溶液加入萃取混合物中，以得到析出物。非必要地，可将所述析出物干燥以得到萃取物粉末。或者是，在某些实施方式中，对萃取混合物进行管柱层析，依序以水和至少一洗提液来洗提管柱，以得到至少一洗出物，此洗出物可用以制备供治疗鸦片类药物所引发便秘的药物。例示性的洗提液包括但不限于40-95% (ν/ν)乙醇、丙酮以及含有0. 1-1% (ν/ν) 甲酸的40-95% (ν/ν)乙醇。非必要地，在进行管柱层析前，可先过滤浓缩和/或干燥该萃取混合物。同样非必要地，可浓缩该洗出物以减少洗出物的体积，并将洗提液自经浓缩的洗出物中移除。根据本发明第一种具体实施方式
，该药物的制备方法包含以下步骤。利用水来萃取紫菀植株的干燥根茎部、根部或两者的混合物，以得到一萃取混合物。之后，对萃取混合物进行管柱层析，依序以水和95% (ν/ν)乙醇来洗提管柱，并收集95% (ν/ν)乙醇管柱洗提所得的洗出物。根据本发明第二种具体实施方式
，该药物的制备方法和上述第一种具体实施方式
不同之处在于依序以水、40% (ν/ν)乙醇以及95% (ν/ν)乙醇来洗提管柱，以得到一洗出物。除了此洗提步骤之外，所述第一与第二种具体实施方式
的制备方法大致上相同，且同样收集95% (ν/ν)乙醇管柱洗提所得的洗出物。根据本发明第三种具体实施方式
，该药物的制备方法包含以下步骤。利用50% (ν/ν)乙醇来萃取紫菀植株的干燥根茎部、根部或两者的混合物，以得到一萃取混合物。之后，对萃取混合物进行管柱层析，依序以水、95% (ν/ν)乙醇、丙酮、含有0. 1% (ν/ν)甲酸的95% (ν/ν)乙醇以及含有0.1% (ν/ν)甲酸的50% (ν/ν)乙醇来洗提管柱，并收集、合并丙酮管柱洗提所得的一洗出物、含有0.1% (ν/ν)甲酸的95% (ν/ν)乙醇管柱洗提所得的一洗出物与含有0.1% (ν/ν)甲酸的50% (ν/ν)乙醇管柱洗提所得的一洗出物。根据本发明第四种具体实施方式
，该药物的制备方法和上述第三种具体实施方式
不同之处在于依序以水、70% (ν/ν)乙醇、95% (ν/ν)乙醇、丙酮、含有0. (ν/ν)甲酸的 95% (ν/ν)乙醇以及含有0.1% (ν/ν)甲酸的50% (ν/ν)乙醇来洗提管柱，以得到一洗出物。除了此洗提步骤之外，所述第三与第四种具体实施方式
的制备方法大致上相同。此处收集、合并95% (ν/ν)乙醇管柱洗提所得的一洗出物、丙酮管柱洗提所得的一洗出物、含有 0.1% (ν/ν)甲酸的95% (ν/ν)乙醇管柱洗提所得的一洗出物与含有0.1% (ν/ν)甲酸的 50% (ν/ν)乙醇管柱洗提所得的一洗出物。根据本发明第三种具体实施方式
，该药物的制备方法包含以下步骤。利用95% (ν/ν)乙醇来萃取紫菀植株的干燥根茎部、根部或两者的混合物，以得到一萃取混合物。之后，浓缩该萃取混合物并加入水以得到一析出物。本发明的另一态样是有关于对有需要的对象治疗鸦片类药物所引发便秘的方法。 在实作上，该方法包含向该对象投予一有效量的紫菀萃取物。更明确地说，适用于本方法的紫菀萃取物系指根据上述本发明各种实施方式所制得的紫菀萃取物。本发明的又一态样是关于一种可治疗鸦片类药物所引发便秘的组合物，此组合物包含一紫菀植株萃取物。更明确地说，适用于本组合物的紫菀萃取物系指根据上述本发明各种实施方式所制得的紫菀萃取物。在参阅下文实施方式后，本发明所属技术领域中具有通常知识者当可轻易了解本发明的基本精神及其它发明目的，以及本发明所采用的技术手段与实施态样。
具体实施方式为了使本揭示内容的叙述更加详尽与完备，下文针对了本发明的实施态样与具体实施方式
提出了说明性的描述；但这并非实施或运用本发明具体实施方式
的唯一形式。实施方式中涵盖了多个具体实施方式
的特征以及用以建构与操作这些具体实施方式
的方法步骤与其顺序。然而，亦可利用其它具体实施方式
来达成相同或均等的功能与步骤顺序。除非本说明书另有定义，此处所用的科学与技术词汇的含义与本发明所属技术领域中具有通常知识者所理解与惯用的意义相同。此外，在不和上下文冲突的情形下，本说明书所用的单数名词涵盖该名词的复数型；而所用的复数名词时亦涵盖该名词的单数型。同时，在此处「至少一」以及「一或多」等词汇当包含一、二、三或更多种。虽然用以界定本发明较广范围的数值范围与参数界是约略的数值，此处已尽可能精确地呈现具体实施方式
的相关数值。然而，任何数值本质上不可避免地含有因个别测试方法所致的标准偏差。在此处，「约」通常系指实际数值在一特定数值或范围的正负10%、 5%、1%或0.5%之内。或者是，「约」一词代表实际数值落在平均值的可接受标准差之内， 视本发明所属技术领域中具有通常知识者的考虑而定。除了实验例之外，或除非另有明确的说明，当可理解此处所用的所有范围、数量、数值与百分比(例如用以描述材料用量、时间长短、温度、操作条件、数量比例及其它相似者)均经过「约」的修饰。因此，除非另有相反的说明，本说明书与附随申请专利范围所揭示的数值参数皆为约略的数值，且可视需求而更动。至少应将这些数值参数理解为所指出的有效位数与套用一般进位法所得到的数值。在此处「治疗」(treatment) —词一般包含预防性(preventative or prophylactic)、疗愈性(curative)或缓和性(palliative)的处置。具体来说，当「治疗」 做动词用时，系指对于患有一病症、症状、疾病或异常或易于患有该些病症的个体投予或施用根据本发明实施方式的药物，以期能部分地或完全地缓和、改善、减轻一特定病症的一或多种症状或特征，或延缓其发生、阻碍其进展、减轻其严重性和/或减低发生率。亦可对并未表出现疾病、异常和/或病症的征兆的个体和/或呈现早期征兆的个体进行治疗，以期降低发展出与该疾病、异常和/或病症相关的病理变化的风险「有效量」(effective amount) 一词在此处系指一药物的用量足以产生所欲的疗效反应。具体的有效量取决于多种因素，如欲治疗的特定状况、患者的生理条件(如，患者体重、年龄或性别)、接受治疗的哺乳动物或动物的类型、治疗持续时间、目前疗法(如果有的话)的本质以及所用的具体配方和化合物或其衍生物的结构。举例来说，可将有效量表示成药物的总重量(譬如以克、毫克或微克为单位)或表示成药物重量与体重的比例(其单位为毫克/公斤(mg/kg))。在本说明书中，「便秘」一词系指包含至少一种下列症状的生理状况肠道运动频率降低、粪便变硬以及排便困难。「功能性便秘」一词专指便秘的情况并非由特定物理或生理作用所致；譬如说，便秘的情况并非服用其它药物的副作用所引发。而「鸦片类药物所引发便秘」一词则专指因服用鸦片类药物所致的便秘。「鸦片类药物」在此泛指能和鸦片受体结合的化合物。在本说明书中，鸦片类药物涵盖了所有天然与合成的鸦片类药物。具体来说，鸦片类药物不限于和吗啡一样具有止痛效果的化合物；在此处，鸦片类药物不但包含可对中枢神经系统和/或周边神经系统上的鸦片受体作用的化药物，也包含了可作用于肠胃道中的鸦片受体上的药物。天然鸦片类药物的例示包括但不限于吗啡、甲基吗啡、副吗啡(thekiine)与二萜内酯(salvinorin A)。 合成鸦片类药物包括半合成类鸦片生物碱衍生物，如二乙酰吗啡(diacetylmorphine，又称海洛因(heroin))、二氢可待因(dihydrocodeine)、氢吗啡酮(hydromorphone)、烟碱酰吗啡(nicomorphine)及羟基可待因酮。完全合成鸦片类药物的例示包括但不限于苯胺哌啶(anilidopiperidines)，如吩坦尼(fentanyl)；苯基哌啶(phenylpiperidines)，如配西汀(pethidine) ；二苯基丙胺衍生物(diphenylpropylamine derivatives)，如洛哌丁胺 (loperamide)；苯并吗啡烧衍生物(benzomorphan derivatives),如地佐辛(dezocine)； 东罂粟碱衍生物(oripavine derivatives)，如丁基原啡因(buprenorphine)；及吗啡喃衍生物(morphinan derivatives),如美妥芬诺(butorphanol)。在本说明书中，「新鲜」(fresh) 一词系指于采收后，尚未经过处理或仅经过最少处理(如，切段、切片和/或包装)的植物部分，且亦未基于保藏的目的而经过大幅干燥。此外，「新鲜」一词不必然与采收时间有严格的相关性。反之，「新鲜」在此只是用来区隔经干燥的植物部分以及未经干燥的植物部分。「干燥」(dried) —词在此系用来形容植物部分经脱水后的含水量情形，干燥植物部分的含水量通常为1-20% (重量百分比)，较佳为约2-5% (重量百分比)。可利用任何习知的方法来进行干燥，包括利用日晒(sun drying)、烘干(oven drying)与冷冻干燥 (freeze drying)等方式。
「紫菀植株萃取物」、「植物萃取物」以及其它类似用语在此系指将取自紫菀植株的植物部分和一溶剂接触后，利用此处所述的程序所制得的组合物。所述的萃取物包含了粗萃物(crude extract)以及经处理、纯化后的精制萃取物(refined extract)。更明确地说， 粗萃物是由简单萃取所得的产物，而经纯化的精制萃取物则是对粗萃物进行一或多次的分离和/或纯化所得。植物萃取物可以是液体形式(如，溶液、浓缩物、蒸馏物)，也可以是去除溶剂的固形物(如，颗粒或粉末)。一般来说，植物萃取物的制备方法包含将所选的植物部分和至少一萃取剂接触。 在可任选的情形中，之后可将所得的萃取混合物进行一或多种分离和/或纯化处理。然而， 本申请案发明人发现并非利用各种方式制得的紫菀萃取物都能够有效地治疗鸦片类药物所引发便秘；亦即，只有经由特定方式制备的紫菀萃取物才具有此一功效。因此，本发明的一态样是有关于紫菀萃取物的用途，其系用于制备鸦片类药物所引发便秘的治疗性药物。更明确地说，适用于治疗鸦片类药物所引发便秘的紫菀萃取物是根据下文所述方法所制得的萃取物。首先，在萃取步骤中，利用萃取剂来萃取取自紫菀植株的植物部分，以得到一萃取混合物。之后，在分离步骤中，对萃取混合物进行管柱层析或析出处理。根据本发明多个实施方式，适用于萃取的植物部分可以是取自紫菀植株的根茎部和/或根部的新鲜或干燥材料。在某些实施方式中，所用的萃取剂为水；在其它实施方式中，所用的萃取剂是由乙醇和水所形成的乙醇溶液，如10-95% (ν/ν)乙醇。举例来说，该乙醇溶液可含有10、15、20、 25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90 或 95% (ν/ν)的乙醇。在一非必要的实施方式中，于进行分离步骤前，先过滤、浓缩和/或干燥该萃取混合物。在一实施方式中，对萃取混合物进行减压浓缩，以得到浓缩物，之后以水冲洗该浓缩物以得到一析出物，此析出物可用以制备此处所述的药物。非必要地，可干燥所述析出物以得到萃取物粉末，此萃取物粉末亦可用以制备此处所述的药物。在替代性的实施方式中，可对萃取混合物进行管柱层析，其系依序以水以及至少一洗提液来洗提管柱以得到至少一洗出物。非必要地，可浓缩该洗出物以减少洗出物的体积，并将洗提液自经浓缩的洗出物中移除。同样非必要地，可干燥经浓缩的洗出物以得到萃取物粉末。根据本发明的原理与精神，所述的洗出物、经浓缩的洗出物以及萃取物粉末皆可分别用以制备所述的药物。适用于管柱层析的洗提液的例示包括但不限于40-95% (ν/ν)乙醇、丙酮、以及含有 0. 1-1% (ν/ν)甲酸的 40-95% (ν/ν)乙醇。本发明的另一态样是关于对有需要的对象治疗鸦片类药物所引发便秘的方法。具体而言，本发明针对患有鸦片类药物所引发便秘但对目前市售抗便秘药物(其成分包括但不限于乳酮糖(lactulose)、氧化镁(magnesium oxide)及番泻叶苷 A&B (sennoside A&B)) 反应不佳的患者，提供了一种治疗方法。在实作上，本发明提出的方法包含对该对象投予一有效量的紫菀萃取物。更明确地说，适用于本所述方法的紫菀萃取物乃根据本发明各种实施方式所述的方法所制备。本发明的又一态样是关于一种可治疗鸦片类药物所引发便秘的组合物，此组合物包含一紫菀植株萃取物。更明确地说，适用于本组合物的紫菀萃取物系指根据本发明各种实施方式以及下列实施例所制得的紫菀萃取物。下文举出多种实施例来阐明本发明的部分态样，以使本发明所属技术领域中具有通常知识者能藉以实践本发明。因此不应将这些实施例视为对本发明范围的限制。本发明所属技术领域中具有通常知识者基于此处提的说明，当可在不需过度推衍的情形下运用本发明。此处提及的所有文献，皆视为已完全引用而成为本说明书的一部份。实施例1紫菀萃取物的制备1. 1水萃取将干燥且切片的紫菀部分(根部及根茎部)(购自金汉行有限公司，高雄，台湾) 加入10倍量(W/W)的逆渗透(reverse osmotic, R0)水，以加热包加热沸腾后回流1小时而得到一粗萃物。使用350筛目滤网过滤该粗萃物，取滤液再以孔径5μπι的过滤器过滤， 得溶液状的水萃取混合物。利用冷冻干燥将萃取混合物浓缩干燥后，得水萃取粉末。1.1.1管柱层析A将实施例1.1制得的水萃取粉末重新溶于水中，而后以Diaion ΗΡ20管柱 (Diaion，Mitsubishi Chemistry he.)进行分离，水萃取粉末与管柱胶体干重比约 1 30。之后，依序以3倍柱床体积(bed volume, BV)的RO水以及3倍柱床体积的95% (ν/ν)乙醇洗提管柱，并收集95% (ν/ν)乙醇洗提管柱所得的洗出物。将95% (ν/ν)乙醇洗提管柱的洗出物进行减压浓缩以浓缩至适当体积并实质上去除乙醇，而后冷冻干燥该浓缩物，以得到洗提粉末(下文称为粉末Α)。1. 1. 2管柱层析B取实施例1.1制得的水萃取粉末重新溶于水中，而后以Diaion ΗΡ20管柱 (Diaion, Mitsubishi Chemistry he.)进行分离，水萃取粉末与管柱胶体干重比约 1 20。之后，依序以3倍柱床体积的RO水、3倍柱床体积的40% (ν/ν)乙醇以及3倍柱床体积的95% (ν/ν)乙醇洗提管柱，并收集95% (ν/ν)乙醇洗提管柱所得之。将95% (ν/ ν)乙醇洗提管柱的洗出物进行减压浓缩以浓缩至适当体积并实质上去除乙醇，而后冷冻干燥该浓缩物，以得到洗提粉末(下文称为粉末B)。1. 2 50% (ν/ν)乙醇萃取本实施例的萃取过程与上文实施例1. 1中所述的水萃取过程相似，不同之处仅在使用了 50% (ν/ν)乙醇来取代水作为萃取剂，以得到溶液状的50%乙醇萃取混合物。而后， 利用冷冻干燥将萃取混合物浓缩干燥后，得50%乙醇萃取粉末。1. 2. 1管柱层析C将实施例1. 2制得的50%乙醇萃取粉末重新溶于50%乙醇中，而后以DiaiOnHP20 管柱(Diaion，Mitsubishi Chemistry he.)进行分离，50%乙醇萃取粉末与管柱胶体干重比约1 20。之后，依序以3倍柱床体积的RO水、3倍柱床体积的95% (ν/ν)乙醇、2倍柱床体积的丙酮、2倍柱床体积的含0. (ν/ν)甲酸的95% (ν/ν)乙醇以及1倍柱床体积的含0.1% (ν/ν)甲酸的50% (ν/ν)乙醇洗提管柱，以分别得到洗出物。将丙酮、含0.1% (ν/ν)甲酸的95% (ν/ν)乙醇以及含0.1% (ν/ν)甲酸的50% (ν/ν)乙醇洗提管柱的洗出物合并进行减压浓缩以浓缩至适当体积并实质上去除乙醇与丙酮，而后冷冻干燥该浓缩物，以得到洗提粉末(下文称为粉末C)。
1. 2. 2管柱层析D实施例1.2制得的50%乙醇萃取粉末重新溶于50%乙醇中，而后以DiaiOnHP20 管柱(Diaion，Mitsubishi Chemistry he.)进行分离，50%乙醇萃取粉末与管柱胶体干重比约与管柱胶体重量比约1 20。之后，依序以3倍柱床体积的RO水、3倍柱床体积的70% (ν/ν)乙醇、3倍柱床体积的95% (ν/ν)乙醇、2倍柱床体积的丙酮、2倍柱床体积的含0. 1% (ν/ν)甲酸的95% (ν/ν)乙醇以及1倍柱床体积的含0. (ν/ν)甲酸的50% (ν/ν)乙醇洗提管柱，以分别得到洗出物。将95% (ν/ν)乙醇、丙酮、含0.1% (ν/ν)甲酸的95% (ν/ ν)乙醇以及含0. 1% (ν/ν)甲酸的50% (ν/ν)乙醇洗提管柱洗出物合并进行减压浓缩以浓缩至适当体积并实质上去除乙醇与丙酮，而后冷冻干燥该浓缩物，以得到洗提粉末(下文称为粉末D)。1.3 95% (ν/ν)乙醇萃取与析出将干燥且切片的紫菀部分(根部及根茎部)加入10倍量(W/W)的95% (ν/ν)乙醇，以加热包加热沸腾后回流1小时而得到一粗萃物。使用350筛目滤网过滤该粗萃物，取滤液再以2号滤纸(购自日本Toyo Roshi Kaisha Ltd.)过滤，得溶液状的萃取混合物。利用减压浓缩使萃取混合物的体积浓缩至原始体积的二分之一，而后加入等重RO水混合以产生析出物。析出物离心取得沈淀物，沈淀物以冷冻干燥机进行干燥得析出物粉末(下文称为粉末E)。实施例2肠道推进时间Qntestinal Transit Time)量测2. 1 材料此处使用于实施例1所制备的紫菀萃取物(即粉末A-E)，并以多种市售抗便秘药物作为对照。所述的市售抗便秘药物包括乐多糖浆(LACTUL Syrup，含有666mg/mL乳酮糖，台湾杏辉药品工业股份有限公司)、氧化镁锭(含250mg氧化镁，台湾景德制药股份有限公司)以及清立飘锭(Sennapur ，含12. 5mg/tab番泻叶苷A&B，日本沢井制药株式会社)。利用盐酸洛哌丁胺(Loperamide HC1，购自Sigma，USA)来减缓肠道推进。本实验中所用的其它材料有羧甲基纤维素(carboxymethylcellulose，CMC，购自Sigma，USA)以及吐温乳化剂 80 (Tween 80，购自 Sigma, USA)。各药剂所用的载体如下将粉末A、B分别分散于水中；粉末C至E分别分散于于羧甲基纤维素中；以及氧化镁锭与清立飘锭分别磨粉后分散于吐温乳化剂80中。给药单位体积为10mL/kg，根据选定的给药剂量来调整各药物的浓度。2. 2用于肠道推进试验的动物模型本实验计划通过台湾泛球药理股份有限公司研究所的动物管理及使用委员会的核准，并遵循国家动物保护相关规范。雄性ICR小鼠购自台湾乐斯科生物科技股份有限公司并饲育于有温度与湿度控制的饲养笼中，饲养温度约221至对1，湿度约40%至50%，光暗循环为12小时。在试验开始时，每一只小鼠的体重约为30至36克。试验过程中提供饮水与标准啮齿类饲料供任合每一试验组包括10只小鼠，并在非空腹状态下进行实验。除非另有说明，萃取物与抗便秘药物皆以口服方式投予各实验组小鼠，给药剂量如下表1所述。除非另有说明，每只小鼠于试验的第一天接受两剂待测药物，第二天则在以皮下注射盐酸洛哌丁胺(0. 7mg/ kg)前一个小时喂食第三剂。番泻叶苷A&B施用两剂，分别在第一天下班前(约下午5:30) 以及第二天皮下注射盐酸洛哌丁胺前一个小时口服给药。对各载体组动物分别施用与实验组相应的载体，其给药方式与剂量和各相应的实验组相同；并于最后一次给药后一小时皮下注射盐酸洛哌丁胺(0.7mg/kg)。对于假处理 (sham)组动物，则不给予任何药物，亦未注射盐酸洛哌丁胺。一般实验常用阿托品(atropine)或吗啡来建立用于研究肠道推进的动物模型， 而洛哌丁胺则常用以建立研究胃排空(gastric emptying)的动物模型。然而，由于阿托品或吗啡非常容易造成上瘾的副作用，在本实验中改以洛哌丁胺来建立肠道推进的动物模型。由于洛哌丁胺和吗啡一样可以减低纵走平滑肌(longitudinal smooth muscles) 的张力(tone)并增加环型平滑肌(circular smooth muscles)的张力，故洛哌丁胺亦会增加物质在肠道中停留的时间。此外，已知洛哌丁胺可减低结肠质块运动(colonic mass movements)并抑制胃结肠反射(gastrocolic reflex) 0因此，应当可以利用洛哌丁胺取代吗啡来建立肠道推进的动物模型以研究鸦片类药物所引发便秘。在注射盐酸洛哌丁胺后约30分钟，将直径约3公厘的玻璃珠由小鼠肛门口塞入距离肛门口 2公分的远程结肠处，并观测肠道内玻璃珠排出时间。所有结果表示成平均值士标准差，每一组中的动物数目(η)为10。以单向 (one-way)ANOVA分析搭配杜纳氏t检定(Durmett’ s t test)来比较各组动物间的差异； 当P值小于等于0. 05时代表具有显著差异。统计分析的结果显示，以紫菀萃取物处理的各组相较于载体组皆具有显著差异(P < 0. 05)。各组实验结果摘要整理于下表1。2. 3 结果本试验比较接受萃取物处理的小鼠(实验组)以及仅接受载体处理的小鼠(载体组)的玻璃珠排放时间的差异，来探讨紫菀萃取物对肠道推进的影响。下表1列出了各组动物的排放时间，此时间可作为肠道推进指标。表 权利要求
1.一种紫菀植株萃取物的用途，其用于制备鸦片类药物所引发便秘的治疗性药物。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，该萃取物由一植物部分所制得，该植物部分选自由该紫菀植株的新鲜根茎部、新鲜根部、干燥根茎部及干燥根部所组成的一群组。
3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，该制备包含利用一萃取剂来萃取该植物部分以得到一萃取混合物。
4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，该萃取剂为水。
5.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，该萃取剂是由水与体积浓度10-95%的乙醇所组成。
6.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，该制备更包含对该萃取混合物进行一管柱层析，其包含依序以水和至少一洗提液来洗提该管柱以得到至少一洗出物，其中该至少一洗提液选自由下列物质所组成的一群组体积浓度40-95%的乙醇、含有体积浓度 0. 1-1%的甲酸的体积浓度40-95%的乙醇以及丙酮。
7.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，该制备包含以下步骤利用水来萃取该紫菀植株的该干燥根部和/或根茎部以得到一萃取混合物；以及对该萃取混合物进行一管柱层析，其依序利用水以及体积浓度95 %的乙醇来洗提该管柱，并收集该体积浓度95%的乙醇洗提的管柱的一洗出物。
8.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，该制备包含以下步骤利用水来萃取该紫菀植株的该干燥根部和/或根茎部以得到一萃取混合物；以及对该萃取混合物进行一管柱层析，其依序利用水、体积浓度40%的乙醇以及体积浓度 95%的乙醇来洗提该管柱，并收集该体积浓度95%的乙醇洗提的管柱的一洗出物。
9.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，该制备包含以下步骤利用体积浓度50%的乙醇来萃取该紫菀植株的该干燥根部和/或根茎部以得到一萃取混合物；以及对该萃取混合物进行一管柱层析，其依序利用水、体积浓度95%的乙醇、丙酮、含有体积浓度0. 1 %的甲酸的体积浓度95%的乙醇以及含有体积浓度0. 1 %的甲酸的体积浓度 50%的乙醇来洗提该管柱，并收集该丙酮洗提的管柱的一洗出物、该含有体积浓度0. 的甲酸的体积浓度95%的乙醇洗提的管柱的一洗出物、以及含有体积浓度0. 的甲酸的体积浓度50%的乙醇洗提的管柱的一洗出物。
10.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，该制备包含以下步骤利用体积浓度50%的乙醇来萃取该紫菀植株的该干燥根部和/或根茎部以得到一萃取混合物；以及对该萃取混合物进行一管柱层析，其依序利用水、体积浓度70%的乙醇、体积浓度 95%的乙醇、丙酮、含有体积浓度0. 的甲酸的体积浓度95%的乙醇以及含有体积浓度 0. 的甲酸的体积浓度50%的乙醇来洗提该管柱，并收集该95%的乙醇洗提的管柱的一洗出物、该丙酮洗提的管柱的一洗出物、该含有体积浓度0. 的甲酸的体积浓度95%的乙醇洗提的管柱的一洗出物、以及含有体积浓度0. 的甲酸的体积浓度50%的乙醇洗提的管柱的一洗出物。
11.根据权利要求3所述的用途，其特征在于，该制备包含以下步骤利用体积浓度95%的乙醇来萃取该紫菀植株的该干燥根部和/或根茎部以得到一萃取混合物；以及于该萃取物混合物中加入水以得到一析出物。
全文摘要
在此揭示紫菀属植物萃取物的用途，其用于制备鸦片类药物所引发便秘的治疗性药物。所述的萃取物萃取自新鲜和/或干燥的紫菀植株根部与根茎部，譬如可使用水或体积浓度10-95％的乙醇水溶液作为萃取剂，以得到萃取混合物。在某些实施方式中，以水和至少一洗提液来洗提该萃取混合物。
文档编号A61K36/28GK102552357SQ20111043884
公开日2012年7月11日 申请日期2011年12月23日 优先权日2010年12月23日
发明者古源翎, 吴建璋, 林哲毅, 林愉瑄, 洪志升, 陈月珠, 陈瑞青, 黄政博 申请人:财团法人医药工业技术发展中心