专利名称：流感样疾病的疗法的制作方法
技术领域：
本发明涉及患有在确立的流感样疾病(ILI)期间或之后发展的下呼吸道疾病的个体的治疗。我们用确立的流感样疾病来表示其中症状例如对于个体或护理人员而言已经明显持续至少24小时、更具体至少48小时的疾病。更具体地，本发明涉及通过气雾剂递送干扰素-β (IFN-β)或增加IFN-β表达的药剂至下呼吸道来治疗患有在ILI期间或之后发展的下呼吸道疾病的个体、特别是住院患者。流感样疾病是特征为以下症状中的两个的疾病头痛、咳嗽、喉咙痛和肌肉痛和/或确诊流感。更具体地，ILI可以被定义为发烧>37. 8°C加上以下症状中的两个(头痛、咳嗽、喉咙痛和肌肉痛)和/或确诊流感病毒感染。发明背景
季节性流感是常见感染，特别是在冬季。每年流感病毒株(A型或B型)传播，导致初级护理的临床接诊、住院治疗的发生(王要在老年人和幼童中，但偶尔也在中年人中)和死亡(主要在老年人中)。由于流感病毒感染的直接效应或其可能的并发症，最常见的是继发性细菌感染，可能需要初级护理和住院的治疗。针对ILI的初级护理接诊和冬季病床压力的增加常常与已知社区流感活动期相关。当出现新的流感病毒亚型时发生大流行流感，所述新的流感病毒亚型明显不同于近期传播的亚型和毒株，并且能够·感染人类；·在人与人之间高效传播；·在闻比例的受感染者中引起显者的临床疾病。因为病毒在人类中是新颖的，高比例的人群具有很少或没有免疫性，产生大量的易感者；因此，疾病广泛且迅速传播。之前已经提出干扰素在流感治疗中的预防性或早期介入，但是取得的成功有限。高致病性流感病毒是流感病毒的强毒力形式，例如H5N1，导致迅速且高水平的发病。ILI包括季节性流感、大流行流感和高致病性流感。现在，我们已经发现了治疗患有在ILI期间或之后发展的下呼吸道疾病的个体、特别是住院患者的新方法。发明概述相应地，本发明提供了选自以下的药剂(a)干扰素-β (IFN- β )；(b)增加IFN-β表达的药剂；或(c)能够表达(a)或(b)的多核苷酸；用于治疗患有在确立的ILI期间或之后发展的下呼吸道疾病的个体，其中所述治疗是通过气雾剂递送所述药剂至下呼吸道。本发明还提供了治疗经诊断患有在确立的ILI期间或之后发展的下呼吸道疾病的个体的方法，该方法包括向所述个体的下呼吸道气雾剂递送选自由以下组成的组的药剂(a)干扰素-β (IFN- β )；(b)增加IFN-β表达的药剂；(c)能够表达(a)或(b)的多核苷酸。还提供了选自以下的药剂(a)干扰素-β (IFN- β )；(b)增加IFN-β表达的药剂；或
(c)能够表达(a)或(b)的多核苷酸；在制备用于治疗在确立的ILI期间或之后发展的下呼吸道疾病的药物中的用途，其中所述治疗是通过气雾剂递送所述药剂至下呼吸道。附图
简述图Ia显示在A型流感病毒感染后96小时时期内感染的人肺支气管上皮细胞的百分比增加和从感染后48小时开始的IFN-β治疗的效应(η = I次实验)。图Ib显示在A型流感病毒感染后96小时时期内感染的人肺支气管上皮细胞的百分比增加和从感染后48小时开始的IFN-β治疗的效应(η = 3次实验,包括原始数据)。图2a显示在A型流感病毒感染人肺支气管上皮细胞之后96小时时期内的病毒脱落和从感染后48小时开始的IFN-β治疗的效应。病毒脱落在48至96小时达到稳态(η=I次实验)。图2b显示在A型流感病毒感染人肺支气管上皮细胞之后96小时时期内的病毒脱落和从感染后48小时开始的IFN-β治疗的效应。病毒脱落在48至96小时达到稳态(η=3次实验，包括原始数据)。图3显示人类IFN-β治疗对IFN-β依赖性抗病毒基因粘液病毒抗性蛋白I (MxA)在来自健康人类自愿者或食蟹猕猴的血细胞中表达的效应(η = 3)。全血用IFN- β (0-1000IU/ml)处理4小时，提取RNA并测量对MxA基因表达的效应。图4显示人类IFN-β治疗对IFN-β依赖性抗病毒基因2’ -5’寡腺苷酸合成酶(2’ -5’ 0AS)在来自健康人类自愿者或食蟹猕猴的血细胞中表达的效应(η = 3)。全血用IFN-β (0-1000IU/ml)处理4小时，提取RNA并测量对2’ -5’ OAS基因表达的效应。图5显示人类IFN-β在感染了季节性流感的食蟹猕猴细胞中的保护性效应(η =4)。在用流感病毒株 A/Victoria/3/75 (Η3Ν2)以 0. 01 的 MOI 感染之前，用 IFN-β (O、100或1000IU/ml)预处理食蟹猕猴细胞24小时。在病毒感染之后48小时收集上清液，通过空斑测定法测量病毒脱落。*指示P < 0. 05。序列表简述SEQ ID NO :I显示了人类IFN-β Ia的核苷酸序列。SEQ ID NO :2显示了人类IFN-β Ia的氨基酸序列。SEQ ID NO :3显示了人类IFN-β Ib的核苷酸序列。SEQ ID NO:4显示了人类IFN-β Ib的氨基酸序列。IFN-β Ib与人类IFN-β Ia相同，除了在残基17的半胱氨酸被丝氨酸替代。发明详述如前文所述，本发明涉及IFN-β的新治疗用途。具体地，例如，本发明涉及通过气雾剂递送至下呼吸道来治疗被诊断为患有在流感样疾病期间或之后发展的下呼吸道疾病的个体、特别是已经接纳住院的那些患者的IFN-β的治疗用途。如上所述，之前已经提出干扰素用于预防或早期治疗ILI。相应地，已经提出干扰素在ILI症状显现之前或者在此类症状开始出现时使用。一般而言，已经将这些干扰素施用给上呼吸道，例如鼻咽。通常，用干扰素治疗的起始在症状出现24小时内开始。相比之下，我们已经发现，可以通过将干扰素_β药剂气雾剂化递送至下呼吸道来治疗患有ILI所产生的并发症、特别是患有下呼吸道疾病的已经住院的患者。通常，住院在症状首次出现之后48小时发生。IFN-β 的定义如本文使用的，术语IFN-β将被理解为指保留天然IFN-β的生物活性并且优选保留在肺中和具体是支气管和/或肺泡上皮中存在的IFN-β的活性的IFN-β的任何形式或类似物。IFN-β 可以与人类 IFN-β la (SEQ ID NO :2)或人类 IFN-β Ib (SEQ ID NO :4)的序列相同或者包括人类IFN-β la (SEQ ID NO :2)或人类IFN-β Ib (SEQ ID NO :4)的序·列。IFN-β还指具有与SEQ ID NO :2或4的序列不同的氨基酸序列的变体多肽。可选地，IFN-β可以是化学修饰的。IFN-β的变体可以是天然存在的变体，例如，由非人类物种表达的变体。而且，IFN-β的变体包括与SEQ ID NO :2或4不同但不一定是天然存在的序列。就SEQ ID NO :2或4的氨基酸序列的全长而言，基于氨基酸同一性，变体优选与该序列至少80%同源。更优选地，基于氨基酸同一性，多肽在整体序列上与SEQ ID Ν0:2或4的氨基酸序列至少85%或90%且更优选至少95%、97%或99%同源。在40或更多、例如60、80、100、120、140或160或更多的连续氨基酸段上存在至少80%、例如至少85%、90%或95%的氨基酸同一'丨生(“严格同源性(hard homology)”)。可以使用本领域已知的任何方法确定同源性。例如，UWGCG软件包提供了 BESTFIT程序，其可用于计算同源性，例如以其默认设置使用(Devereux 等人(1984)Nucleic Acids Research 12,p387_395)。可使用PILEUP和BLAST算法来计算同源性或对齐序列(例如，鉴定相同残基或相应序列(通常基于其默认设置))，例如在 Altschul S.F. (1993) J Mol Evol 36 :290-300 ；Altschul,S. F等人(1990) J Mol Biol 215 :403-10中所描述的。用于进行BLAST分析的软件可通过美国国家生物技术信息中心(http://www.ncbi.nhn.nih.gov/)公开获得。该算法包括首先通过鉴定查询序列中与数据库序列中相同长度的字比对时匹配或满足某一正值阈值得分T的长度W的短字来鉴定高得分序列对(HSP)。T被称为相邻字得分阈(Altschul等人，同上)。这些初始相邻字匹配用作开始检索以找到含有它们的HSP的种子。沿着每个序列的两个方向延伸字匹配，只要累加比对得分可以增加。当如下时停止每个方向上的字匹配延伸累加比对得分从其达到的最大值减少了量X ;由于一个或多个负得分残基比对的累积，累加得分达到O或以下；或者到达任一序列的末端。BLAST算法参数W、T和X决定比对的灵敏度和速度。BLAST程序使用11的字长(W)、50的BL0SUM62得分矩阵(参见HenikofT和 Henikoff (1992) Proc. Natl. Acad. ScL USA 89 :10915-10919)比对(B)、10 的预期(E) ,M=5、N = 4和双链对比作为默认值。BLAST算法进行两个序列之间相似性的统计分析；参见例如 Karlin 和 Altschul (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90 :5873_5787。由 BLAST 算法提供的相似性的一个量度是最小总和概率(P(N))，其提供了两个核苷酸或氨基酸序列之间碰巧发生匹配的概率的指示。例如，如果在一个序列与另一个序列对比中最小总和概率小于约I、优选小于约O. I、更优选小于约O. 01和最优选小于约O. 001，则认为第一序列与第二序列相似。可以对SEQ ID NO :1或2的氨基酸序列进行氨基酸取代，例如从1、2、3、4或5个至10、20或30个取代。例如，可以根据表I进行保守取代。第二列中同一单元格中的氨基酸和优选第三列中同一行中的氨基酸可以相互取代表I-保守氨基酸取代，非芳族的非极性的G A P I L V，极性、不带电荷的C S T M N Q，极性、带电荷的D E H KR，芳族的H F W Y表I-保守氨基酸取代
权利要求
1.一种选自以下的药剂 (a)干扰素_β (IFN-β)； (b)增加IFN-β表达的药剂；或 (C)能够表达(a)或(b)的多核苷酸； 用于治疗患有在确立的ILI期间或之后发展的下呼吸道疾病的个体，其中所述治疗是通过气道递送所述药物。
2.根据权利要求I所述的药剂，其中所述药剂是IFN-β。
3.根据权利要求2所述的药剂，其中所述IFN-β包括以下的序列(a)人类IFN-β la (SEQ ID NO 2);或(b)人类 IFN-β Ib (SEQ ID NO 4)。
4.根据前述权利要求中任一项所述的药剂，该药剂与神经氨酸酶抑制剂组合。
5.根据权利要求4所述的药剂，其中所述神经氨酸酶抑制剂是局部活性的。
6.根据权利要求4或权利要求5所述的药剂，其中所述神经氨酸酶抑制剂是扎那米韦。
7.根据权利要求I至6中任一项所述的药剂，其中所述下呼吸道疾病是哮喘或COPD。
8.根据权利要求I至7中任一项所述的药剂，其中所述个体是老年人，例如年龄超过60岁的老年人。
9.一种治疗经诊断患有在确立的ILI期间或之后发展的下呼吸道疾病的个体的方法，该方法包括给所述个体气道施用选自由以下组成的组的药剂 (a)干扰素_β (IFN-β)； (b)增加IFN-β表达的药剂； (C)能够表达(a)或(b)的多核苷酸。
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述药剂是IFN-β。
11.根据权利要求10所述的方法，其中所述IFN-β包括以下的序列(a)人类 IFN-β (SEQ ID NO :2);或(b)人类 IFN-β Ib (SEQ ID NO :4)。
12.根据权利要求9至11中任一项所述的方法，其中所述药剂与神经氨酸酶抑制剂组合以同时、分别或顺序施用。
13.根据权利要求9至12中任一项所述的方法，其中所述下呼吸道疾病是哮喘或COPD。
14.根据权利要求9至13中任一项所述的方法，其中所述个体是老年人，例如年龄超过60岁的老年人。
15.一种用于治疗流感样疾病的产品，包括用于同时、分别或顺序气道施用的(i)选自如权利要求I所定义的(a)至(C)的第一药剂和(ii)吸入型神经氨酸酶抑制剂。
16.如权利要求15所述的产品，该产品是用于气雾剂递送至气道、特别是下气道的药物组合物。
17.如权利要求15或权利要求16所述的产品，其中所述第一药剂是IFN-β。
18.根据权利要求I至8所述的药剂或者根据权利要求9至14中任一项所述的方法，其中所述药剂在ILI症状变得明显之后至少48小时通过气雾剂递送至下呼吸道。
全文摘要
一种选自以下的药剂(a)干扰素-β(IFN-β)；(b)增加IFN-β表达的药剂；或(c)能够表达(a)或(b)的多核苷酸；用于治疗患有在确立的ILI期间或之后发展的下呼吸道疾病的个体，其中所述治疗是通过气道递送所述药物。
文档编号A61P11/06GK102883741SQ201180013592
公开日2013年1月16日 申请日期2011年3月10日 优先权日2010年3月12日
发明者维多利亚·简·特尔, 詹姆斯·乔纳森·韦尔奇·罗伯茨, 菲利普·大卫·蒙克 申请人:希纳尔根研究有限公司