一种调节糖尿病小鼠皮肤伤口愈合的方法
【专利摘要】一种调节糖尿病小鼠皮肤伤口愈合的方法，本发明首次提出Reg蛋白能够调节糖尿病小鼠皮肤伤口愈合的假说，采用Real-timeRT-PCR、Westernblot和免疫染色等方法对糖尿病小鼠皮肤伤口中的RegIII?表达进行检测,为阐述RegIII?蛋白在糖尿病小鼠皮肤伤口愈合中的作用提供有效的实验数据。为进一步研究人糖尿病伤口愈合的机制作理论基础,且为开发研制治愈糖尿病患者皮肤伤口愈合缓慢的药物做准备。本实验的研究结果将会对糖尿病伤口愈合缓慢的机制提供理论依据，为进一步阐明糖尿病并发症的原因做好准备。
【专利说明】一种调节糖尿病小鼠皮肤伤口愈合的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生命科学领域，特别涉及一种Reg蛋白调节糖尿病小鼠皮肤伤口愈合的方法。
【背景技术】
[0002]糖尿病是威胁人类的重大疾病之一，伤口愈合不良是糖尿病的一个并发症，严重时可能导致截肢，已成为糖尿病患者住院率最高的疾病，但是其确切的机制尚不清楚。目前研究发现糖尿病发生时有多种分子和细胞功能受损，最终导致糖尿病伤口愈合不良。[0003]CN 101293062 A中公开一种治疗糖尿病伤口愈合的药物，是以西洋参、冬虫夏草、乳香、没药、血竭、麝香、三七、川贝母、植物降糖素为原料组方，按常规制剂方法制成的散剂或膏剂，但是该发明并未深入探究糖尿病伤口不易愈合的真正影响因素，因此该药物仅仅能做到活血止痛、排脓抗炎的功效，而对于糖尿病伤口愈合速度上并无太大功效。
[0004]目前国内外对糖尿病皮肤伤口愈合速度慢的原因有过相关报道，但是相对较少，人们对于糖尿病患者伤口愈合速度慢的真正原因还是没有找到。Spravchikov N报道高血糖可以抑制角质形成层细胞增增殖，促进角质形成层细胞分化。高血糖对角质形成层细胞的形态也会产生影响。
[0005]胰岛再生基因(Regenerating islet-derived, Reg)家族是近年来新发现的一类C-类凝集素。Regl蛋白可以促进胰腺细胞增生，并且在胃糜烂周围的ECL细胞中Reg蛋白表达量非常高。在受损的胃粘膜上皮细胞中Reg蛋白表达量也非常高。但是对皮肤损伤后伤口中Reg蛋白的表达以及糖尿病病人皮肤伤口中Reg蛋白的表达是否改变尚无相关报道。因此研究Reg蛋白在糖尿病皮肤伤口中的表达非常重要。
【发明内容】
[0006]针对以上情况，本发明首次提出Reg蛋白能够调节糖尿病小鼠皮肤伤口愈合的假说，采用Real-time RT-PCR、Western blot和免疫染色等方法对糖尿病小鼠皮肤伤口中的RegIII表达进行检测，为阐述RegIII蛋白在糖尿病小鼠皮肤伤口愈合中的作用提供有效的实验数据。为进一步研究人糖尿病伤口愈合的机制作理论基础，且为开发研制治愈糖尿病患者皮肤伤口愈合缓慢的药物做准备。
[0007]本发明研究的RegIII在糖尿病小鼠的皮肤伤口愈合中起着关键作用，RegIII能促进角质形成层细胞的增殖，能够加快糖尿病皮肤的愈合。与小鼠中RegIII结构相似的基因在人中为Reg3A，由于本发明在小鼠中得到了这样的结论，就为进一步研究Reg3A在人糖尿病皮肤伤口愈合中的作用打下了坚实的研究基础，如果经过后期研究将Reg3A在糖尿病皮肤伤口愈合中的机制阐明清楚，就可以在后续的工作中开发针对这一机制的治疗糖尿病皮肤伤口愈合缓慢的药物，这将会有广阔的应用前景，产生的社会经济效益也会是很可观的。【具体实施方式】
[0008]1、建立模型
利用链脲菌素诱导成年雄性BALB/c小鼠，建立糖尿病模型，两周后在小鼠背部制作伤口，观察并记录伤口愈合情况；
2、检测RegIII mRNA的表达
用Real-time RT-PCR的方法检测RegIII mRNA的表达，用HE染色的方法观察糖尿病小鼠皮肤伤口组织形态学变化。
[0009]3、结果比照
结果与对照组小鼠比较，糖尿病小鼠皮肤伤口愈合缓慢，RegIII mRNA的表达量明显降低；糖尿病小鼠伤口周围表皮层变薄。
[0010]可以得出糖 尿病小鼠皮肤伤口愈合缓慢与RegIII有关，RegIII有利于角质形成层细胞的增殖。
【权利要求】
1.一种调节糖尿病小鼠皮肤伤口愈合的方法，其特征在于，利用链脲菌素诱导成年雄性BALB/c小鼠，建立糖尿病模型。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，用Real-timeRT-PCR的方法检测RegIII mRNA的表达，用HE染色的方法观察糖尿病小鼠皮肤伤口组织形态学变化。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，与对照组小鼠比较，检测伤口愈合速度、RegIII mRNA的表达量以及伤口周围表皮情况。
【文档编号】A61P3/10GK103908658SQ201310006052
【公开日】2014年7月9日 申请日期:2013年1月8日 优先权日:2013年1月8日
【发明者】张超 申请人:上海市浦东新区知识产权保护协会