专利名称：铁皮石斛防治糖尿病并发症的新用途的制作方法
技术领域：
本发明属于中药技术领域，具体涉及中药铁皮石斛防治糖尿病并发症的用途。
背景技术：
铁皮石斛(PendrobiumofficinaleKiMuraetMigo')为兰科(Prchidaceaes)石斛属多年生草本植物的新鲜或干燥茎。其味甘，性微寒，归胃、肾经，具有养阴清热、益胃生津的功效，用于热病津伤，口干烦渴，胃阴不足，食少干呕，病后虚热不退，阴虚火旺，骨蒸劳热，目暗不明，筋骨痿软。糖尿病是临床常见、多发的内分泌代谢失常性疾病，具有难根治、并发症多、发病率、死亡率、致残率高的特点,严重威胁人类健康。高血糖能危及人体周身器官，引起人脑血管动脉粥样硬化导致高血压、高血脂，严重者发生心肌梗塞、脑梗塞及脑溢血；也可因肾脏三级血管病变导致肾功能衰竭，临床上出现蛋白尿；还可引起神经系统损伤，出现痛觉过敏或消失；肢端活动受限，肌无力，便秘、阳痿、骨轻瘫；可因视网膜病变导致视物不清，严重者失明；高血糖更可以引起血管和小血管病变导致糖尿病足的发生，出现足部溃疡、坏疽甚至不得不截肢。铁皮石斛是一种名贵的中药。中国传统中医认为:铁皮石斛归胃、肾经，具有益胃生津，滋阴清热等功效，主治热病伤津，口干烦渴，病后虚热，夜盲，阴伤目暗等症。李时珍在《本草纲目》中评价铁皮石斛“除痹，下气，补五脏虚劳羸瘦，强阴益精，久服，厚肠胃，补内绝不足，平胃气，长肌肉，益智除惊，轻身延年。”现代药理研究证明，铁皮石斛具有抗衰老、抗肿瘤和提高免疫等作用。
发明内容
基于上述原因，申请人以链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型观察铁皮石斛对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠并发症的影响。药理试验表明，本发明铁皮石斛在糖尿病并发症的用途表现在:改善糖尿病大鼠神经、眼球、心脏、血管、肾脏、肝脏、睾丸等的并发症。本发明通过下述技术方案实现的。铁皮石斛在制备防治糖尿病并发症的应用。上述所属防治糖尿病并发症的药物不限于铁皮石斛，包括鲜品、干品(枫斗)、石斛多糖等。上述所述糖尿病并发症包括但不限于神经、眼球、心脏、血管、肾脏、肝脏、睾丸。上述所述的糖尿病器官并发症包括但不限于神经、眼球、心脏、血管、肾脏、肝脏、睾丸等器官的功能衰退及病理损伤。
图1各组大鼠心肌组织病理学检查(X 100，HE)
图2各组大鼠主动脉病 理学检查(X 100，HE)图3各组大鼠睾丸组织病理学检查(X 100，HE)
图4各组大鼠肾组织病理学检查(X 100，HE)
图5各组大鼠眼底视网膜病理学检查(X 100，HE)
图6各组大鼠肝组织病理学检查(X 100，HE)
实施例实验材料 1.1实验动物
SD大鼠，SPF级，24(T280g，雄性，共30只，由广东省医学实验动物中心提供，许可证号:SCXK (粤)2008-0002，合格证号:0100517。1.2实验试剂及药材
铁皮石斛，深圳永生源公司提供。STZ，美国 sigma 公司，批号:110610。精蛋白生物合成人胰岛素注射液(预混30R)，丹麦诺和诺德公司，批号:YVG0215。氯化钠注射液，山东鲁抗辰欣药业有限公司，批号:101226705。无水乙醇，天津富宇精细化工有限公司，批号:100713。柠檬酸，广州化学试剂厂，批号:20070916-2。二水合柠檬酸三钠，广州化学试剂厂，批号:20101201-2。氯化钠，天津市大茂化学试剂厂，20100818。甲醛，广州化学试剂厂，批号:20090702-1。水合氯醛，天津市大茂化学试剂厂，20110319。1.3主要仪器及器材 HI98103型pH计，哈纳HANNA公司。日本岛津AUY120电子天平，广州湘仪机电设备有限公司。罗康全优越型血糖试纸,德国罗氏公司，批号:571620。罗氏罗康全优越型血糖仪,德国罗氏公司。DT2000型电子天平，常熟市双杰测试仪器厂。ALMEM-2390-5测痛计，深圳市瑞沃徳生命科技有限公司。1.4 其他
灌胃针、注射器、弯剪、直剪、尖镊、动脉夹等。实验方法
2.1试剂配制
2.1.1铁皮石斛鲜榨汁的制备
取石斛鲜品10g，剪段，解冻后移至榨汁机中，取IOOml蒸馏水少量加入榨汁机，榨汁，取出药汁用200目滤布过滤，滤液与药渣放入榨汁机，继续加少量蒸馏水榨汁，重复以上步骤直到IOOml蒸馏水完全加至榨汁机，过滤后药汁成青绿色粘稠状为止。将过滤好的药汁煎煮30mins，4°C保存。2.1.2柠檬酸缓冲液的制备
取柠檬酸2.lg，精密称定，置于IOOml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，配置成A液(0.lmol/L柠檬酸水溶液)。 取柠檬酸钠2.94g，精密称定，置于IOOml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，配置成B液(0.lmol/L柠檬酸水溶液)。将A液和B液按1: 1.941比例混合，调节pH至4.2，配置成0.lmol/L, pH4.2的柠檬酸缓冲液，冰浴保存。2.1.3 STZ溶液的配制
用0.lmol/L, pH4.2的柠檬酸缓冲液溶解STZ，配置成1%的STZ溶液，置于棕色瓶中，现配现用，配好的溶液置于冰浴中保存。2.2造模方法
取6周龄SD种大鼠30只(体重260±20g)，雄性，于自然光线、自由饮水、自由摄食条件下，适应性喂养I周后，随机取8只为正常组，余下22只造模。模型组和给药组分别用现配的1%STZ溶液，按5ml/kg的剂量给大鼠腹腔注射造模，造模Ih后开始进食进水，正常组按5ml/kg注射柠檬酸缓冲液，7天后大鼠禁食12h，尾静脉取血，测定血糖，血糖彡16.7mmol/L则造模成功。将糖尿病大鼠随机分为模型组和铁皮石斛给药组，每组10只。2.3给药方法
造模7天后进行给药。给药组每天用铁皮石斛鲜榨汁按Ig生药/kg的剂量灌胃给药，正常组与模型组则用蒸馏水按10ml/kg灌胃。每天给药一次，连用5周。2.5检测指标
①一般状态观察:每天观察大鼠造模后及给药后大鼠毛色、神态、摄食、饮水、尿量、体重、死亡及活动状况等变化。②体重、血糖检测:分别于给药前、末次给药后称量各组大鼠体重，取尾静脉血测其血糖。③痛觉:给药期间，每2周对各组大鼠测一次痛觉。先将大鼠放在镂空的铁丝网上适应一段时间，到大鼠不频繁走动时用挑好的测痛计的探针刺大鼠的后足底，力度由小到大，记录大鼠抬起该足时测痛记显示的读数。每只大鼠测六次。2.6标本的采集与处理
于最后一天给药后，禁食12小时，称重，登记好数据，对各组大鼠进行尾静脉取血，使用罗氏公司血糖仪及配套试纸测定大鼠血糖值。在测定血糖后，用10%水合氯醛对大鼠进行麻醉，按0.35ml/100g进行腹腔注射，首次注射剂量减半，根据老鼠麻醉的情况再适量增补。麻醉处死后，剖开腹腔，取出大鼠的心脏、脾脏、腹主动脉、睾丸、附睾、前列腺、肾以及眼球，将心脏、脾脏、睾丸、附睾、前列腺、肾以及眼球迅速移入生理盐水漂洗血液并用滤纸吸干，精确称量每个大鼠的心、脾、睾丸、肾以及眼球的重量。称量后分别将心脏、肝脏、肾脏、睾丸、血管、肾以及眼球放入10%的甲醛溶液中固定，以用作病理切片。计算脏器系数(％) =脏器重量/体重X 100%。2.7统计方法
记录相关数据，使用SPSS16.0软件进行统计学分析，结果用均数土标准差(I 士 S )表示，n为样本量，统计方法显著性差异使用完全随机成组资料的t检验，/X0.05表示差异有统计学意义。实验结果
3.1 一般状态变化
正常组在实验周期内，精 神状态良好、体重增加、动作自如、毛色白光洁，各项情况良好。糖尿病大鼠模型建立后，模型组与给药组的进食量与饮水量大增;给药第2周后，模型组与给药组除了进食与饮水量增多，体重明显下降、排尿量增多、毛发蓬松稀疏、精神萎靡、活动减少，还出现蛋白尿现象;给药第3周时，模型组与给药组体重继续下降、被毛发黄、蛋白尿增多，部分大鼠开始出现粪便糜烂情况；给药第5周时，模型组的体重严重下降，精神严重委靡，目光呆滞，行动也严重迟缓，蛋白尿情况更加严重，全部大鼠都出现严重的粪便糜烂情况，而给药组毛色较模型组好，粪便糜烂情况也相对较轻。3.2铁皮石斛对糖尿病大鼠体重的影响
正常组、模型组和给药组在给药前后各老鼠体重的变化见表I。 表I大鼠给药前后体重变化('X土s) _
权利要求
1.铁皮石斛对糖尿病并发症的影响。
2.根据权利要求1所述的影响，其中并发症包括神经、眼球、心脏、血管、肾脏、肝脏、睾丸等的并发症。
3.根据权利要求2所述的应用，其中神经并发症病变包括坐骨神经及神经末梢功能的衰退。
4.根据权利要求2所述的应用，其中眼球并发症病变包括视力下降、视网膜病变及视网膜电图的改变。
5.根据权利要求2所述的应用，其中心脏并发症病变包括心脏动静脉血栓的形成、心肌局部炎症浸润。
6.根据权利要求2所述的应用，其中血管并发症病变包括血管壁增厚、血管平滑肌细胞增生肥大、毛细血管血栓的形成。
7.根据权利要求2所述的应用，其中肾脏并发症病变包括肾脏排泄功能的衰退、肾组织肾小球及肾小管的病理改变。
8.根据权利要求2所述的应用，其中肝脏并发症病变包括肝脏对脂肪代谢功能的降低、肝细胞肥大、肝细胞的脂肪变性、肝窦变窄及肝脏中央静脉扩张。
9.根据权利要求2所 述的应用，其中睾丸并发症病变包管腔内精子细胞萎缩、各级生精细胞轻至重度萎缩。
全文摘要
本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种中药对糖尿病并发症的防治。本发明以链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型，从整体水平观察铁皮石斛对糖尿病大鼠各组织器官功能及组织学结构的影响，表明铁皮石斛能抑制糖尿病大鼠神经、眼球、心脏、血管、肾脏、肝脏、睾丸等功能的衰退及改善器官病理损伤程度，较好地抑制高血糖引起的全身多系统多器官并发症的加重。
文档编号A61P27/02GK103211979SQ20131000700
公开日2013年7月24日 申请日期2013年1月9日 优先权日2013年1月9日
发明者侯少贞, 赖小平, 黄松, 郭建茹, 梁楚燕, 陈建南 申请人:东莞广州中医药大学中医药数理工程研究院