专利名称：杜仲化学成分作为血管保护剂的新用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及传统中药材杜仲中的若干化学成分的新用途，特别是杜仲中的千叶素A、汉黄芩素、α-氧_β-D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羟基二氢查耳酮、白桦脂酸、京尼平苷作为血管保护剂的制药用途。
背景技术：
人体血管系统有其自身的正常代谢平衡功能，但是出现血管功能异常，可造成对血管系统的损害。如血管平滑肌细胞增殖是动脉粥样硬化斑块形成和冠状动脉成形术后发生再狭窄的病理基础；平滑肌细胞内钙离子浓度升高会引起血管收缩，而血管舒缩功能的异常会导致高血压的发生。一些血管保护剂可通过拮抗高钾引起的血管平滑肌细胞内钙离子浓度的升高以及拮抗去甲肾上腺素引起的血管收缩而发挥降压作用，通过抑制血管平滑肌细胞增殖防治动脉粥样硬化斑块形成，从而维持血管的正常生理功能，在防治高血压、动脉粥样硬化、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病中具有重要的作用。众所周知的，一些已应用于临床的血管保护剂具有诸多有益的生理学作用，例如可降低毛细血管通透性和脆性、防止因血管通透性升高引起的水肿、对抗5-羟色胺和缓激肽引起的血管损伤、保护血管内皮细胞、促进新血管形成以增进侧支循环、抑制血小板聚集、防止血栓形成、对急性缺血性脑损伤有显著保护作用，它们还具有抗放射线操作、抗炎、抗过敏、抗溃疡等作用，可适用于闭塞性脑血管病引起的偏瘫、失语、冠心病梗死前综合征、中心性视网膜炎、血栓性静脉炎、血管通透性升高引起的水肿、淋巴水肿、烧伤及创伤水肿动脉硬化等。血管保护剂可用 于降低微血管壁通透性、增加抵抗力、改善淋巴液回流、减少水肿、降低血液粘稠度、纠正白蛋白/球蛋白比值、降低血小板的高聚集性从而防止血栓形成、提高红细胞柔韧性。血管保护剂还可用于抑制血管活性物质(例如组织胺、5-羟色胺、缓激肽、透明质酸酶、前列腺素等)对微血管引起的高通透作用，减少血管内膜损伤，改善基底膜胶原的生物合成。在临床上可适用于糖尿病性机网膜病变，各种微血管病，静脉曲张
坐寸ο杜仲为杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoides Oliv.的树皮,又名思仙(《本经》)，木绵、思仲(《别录》)，石思仙(《本草衍义补遗》)。味甘微辛，性温入肝、肾经。具有补肝肾，强筋骨，安胎的功效。用于治疗腰脊酸疼，足膝痿弱，小便余浙，阴下湿痒，胎漏欲堕，胎动不安。鉴于杜仲良好的效果，药物学家对其化学成分进行了广泛的研究。目前从杜仲中分离的生物活性成分主要有三类，木质素类，环烯醚萜类和黄酮类等化学成分。现代药理研究表明，杜仲的降压作用与松脂醇二葡萄糖苷、生物碱、绿原酸、桃叶珊瑚苷和糖类有关。抗肿瘤作用与木质素、苯丙素和环烯醚萜有关。其水煎液和醇提液均有补肾、增强免疫作用。杜仲药材还有抗氧化、抗衰老、抗肌肉骨骼老化、抗菌、抗病毒的作用。CN101347418(中国专利申请号:200710044099.5，
公开日:2009 年 I 月 21 日)研究了 8-0-4’型木质素在制备抗补体活性药物中的用途，该发明据说从中药杜仲中分离提取得到化合物8-0-4'型木脂素，经体外实验证实对在补体系统的经典和旁路途径激活所引发的细胞溶血有抑制，对补体系统的经典和旁路途径激活有明显抑制作用；药理试验结果证明，具有显著的抗补体作用，且有效浓度低。CN101260131(中国专利申请号:200810031122.1，
公开日:2008 年 9 月 10 曰)公开了从杜仲中提取得到环烯醚職活性部位及单体京尼平式酸(geniposidic acid,GPA)、京尼平式(geniposide,GP)及桃叶珊瑚式(aucubin,AU)的方法,该方法以杜仲(皮、叶或籽)为原料，采用常规浸提法、超声波提取法或微波提取法对原材料进行提取，以溶剂萃取、特种吸附剂吸附分离等方法对提取液进行初步纯化，得到环烯醚萜活性部位(环烯醚萜总量不低于50%)，再采用制备高效液相色谱技术，以醇-水溶液为流动相，对GPA、GP和AU进行分离，低温浓缩并冷冻干燥，得到以上三种单体，其含量均不低于90%。临床治疗中仍然需要有新的血管保护剂和/或降血压的方法。
发明内容
本发明的目的是提供有效的血管保护剂和降血压剂，为临床上相关疾病的治疗和/或预防提供新的途径。本发明人对杜仲进行系统的植物化学分离，令人意外地发现，中药材杜仲，特别是其提取物，或者从杜仲中提取的某些单体化学成分具有有效的血管保护剂和/或降血压等的作用。本发明基于上述发现而得以完成。为此，本发明第一方面提供了杜仲在制备用于作为血管保护剂和/或降血压剂的药物中的用途，或者在制备用于治疗和/或预防血管增生性疾病的药物中的用途。根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述血管保护剂用于治疗和/或预防选自下列的疾病或病症:血管性病症包括但不限于动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病。根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述血管增生性疾病选自下列的疾病或病症:血管性病症包括但不限于动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎、偏头痛、血管性头痛。根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述血管保护剂用于治疗和/或预防选自下列的疾病或病症:血管性病症(例如动脉粥样硬化)、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎、偏头痛、血管性头痛、闭塞性脑血管病(及其引起的偏瘫、失语)、冠心病梗死前综合征、中心性视网膜炎、血栓性静脉炎、血管通透性升高引起的水肿、淋巴水肿、烧伤及创伤水肿动脉硬化、糖尿病性机网膜病变、微血管病、静脉曲张。根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述药物给予哺乳动物，其给药剂量为所述哺乳动物每天每kg体重相当于杜仲药材l_40g,优选2-20g,更优选5-10g。
本发明第二方面提供了杜仲提取物在制备用于作为血管保护剂和/或降血压剂的药物中的用途，或者在制备用于治疗和/或预防血管增生性疾病的药物中的用途。
根据本发明第二方面任一项的用途，其中所述血管保护剂用于治疗和/或预防选自下列的疾病或病症:血管性病症包括但不限于动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎、偏头痛、血管性头痛。根据本发明第二方面任一项的用途，其中所述血管增生性疾病选自下列的疾病或病症:血管性病症包括但不限于动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎、偏头痛、血管性头痛。根据本发明第二方面任一项的用途，其中所述血管保护剂用于治疗和/或预防选自下列的疾病或病症:血管性病症(例如动脉粥样硬化)、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎、偏头痛、血管性头痛、闭塞性脑血管病(及其引起的偏瘫、失语)、冠心病梗死前综合征、中心性视网膜炎、血栓性静脉炎、血管通透性升高引起的水肿、淋巴水肿、烧伤及创伤水肿动脉硬化、糖尿病性机网膜病变、微血管病、静脉曲张。根据本发明第二方面任一项的用途，其中所述的杜仲提取物中包含至少一种选自以下的成分:京尼平苷(在本文可称为EUB30-1)、汉黄芩素(在本文可称为EUC-4)、千叶素A(在本文可称为EUC-6)、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羟基二氢查耳酮(在本文可称为EUE-3)、和白桦脂酸(在本文可称为EUC-2)。根据本发明第二方面任一项的用途，其中所述的杜仲提取物中包含以下的成分:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素Α、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基_4，2'，4'-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。根据本发明第二方面任一项的用途，其中所述京尼平苷、汉黄芩素、千叶素Α、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸的总量占所述提取物总重量的1-90%(w/w，即重量百分数，下同)，优选2-90%，优选5-80%，优选5_60%，优选5-50%,优选 5-30%，优选 5-20%。根据本发明第二方面任一项的用途，其中所述的药物的剂量为所述哺乳动物每天每kg体重相当于杜仲药材l_40g,优选2-20g,更优选5-10g。根据本发明第二方面任一项的用途，其中所述的杜仲提取物是通过用水、乙醇或乙醇水溶液作为溶剂提取得到的。在一个实施方案中，所述的杜仲提取物是通过用水、乙醇或乙醇水溶液作为溶剂提取，然后经过纯化(例如采用溶剂萃取的方法)得到的。所述溶剂萃取使用例如但不限于下列溶剂:石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇及其组合。根据本发明第二方面任一项的用途，其中所述的杜仲提取物是经如下步骤制备的:将杜仲用含水乙醇溶液提取；使所得醇提取物用石油醚萃取，弃醚层，将残余物浓缩，干燥，得提取物；或者使所得醇提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，将各萃取物分别回收溶剂后得固形物，合并氯仿部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分的固形物，得提取物。根据本发明第二方面任一项的用途，其中所述的杜仲提取物是经如下步骤制备的:a)将杜仲用2 20倍量(优选5 15倍量，更优选8 12倍量，例如10倍量)的60 98%(优选70 98%，更优选80 98%，例如80%、85%、90%、95%或98%)乙醇浸泡5 24小时(优选5 18小时，更优选8 15小时)；b)回流提取0.5 10小时(优选0.5 8小时，更优选0.5 6小时，更优选
0.5 4小时，更优选I 4小时，例如I小时、2小时、3小时、4小时)，倾出提取液；c)任选地使步骤b)的药渣重复进行步骤a)和步骤b) I 3次(例如I次、2次、3次)；d)合并步骤b)和步骤c)的提取液，过滤，滤液回收乙醇至在室温下的密度约为
1.15-1.20的浓缩液，得提取物；或者进一步地e)使步骤d)的浓缩液用石油醚萃取，弃醚层，将残余物浓缩，干燥，得提取物；或者，e)使步骤d)的浓缩液依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，将各萃取物分别回收溶剂后得固形物，合并氯仿部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分的固形物，得提取物。上述方法所得的提取物的化学组成可通过本发明下文所述的纯化步骤知晓，或者直接进行色谱分析测得该提取物中包含至少一种选自以下的成分:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素Α、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。优选的是包含全部的上述5种成分。本发明第三方面提供了选自下列成分的一种或多种的组合在制备作为血管保护剂和/或降血压剂的药物中的用途，或者在制备用于治疗和/或预防血管增生性疾病的药物中的用途:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素Α、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基_4，2'，4'-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。根据本发明第三方面任一项的用途，其中所述血管保护剂用于治疗和/或预防选自下列的疾病或病症:血管性病症包括但不限于动`脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎、偏头痛、血管性头痛。根据本发明第三方面任一项的用途，其中所述血管增生性疾病选自下列的疾病或病症:血管性病症包括但不限于动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎、偏头痛、血管性头痛。根据本发明第三方面任一项的用途，其中所述血管保护剂用于治疗和/或预防选自下列的疾病或病症:血管性病症(例如动脉粥样硬化)、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎、偏头痛、血管性头痛、闭塞性脑血管病(及其引起的偏瘫、失语)、冠心病梗死前综合征、中心性视网膜炎、血栓性静脉炎、血管通透性升高引起的水肿、淋巴水肿、烧伤及创伤水肿动脉硬化、糖尿病性机网膜病变、微血管病、静脉曲张。根据本发明第三方面任一项的用途，其为下列成分在制备作为血管保护剂和/或降血压剂的药物中的用途:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素Α、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述药物给予哺乳动物，其给药剂量为所述哺乳动物每天每kg体重相当于杜仲药材l_40g,优选2-20g,更优选5-10g。根据本发明第三方面任一项的用途，其中所述药物给予哺乳动物，以所述哺乳动物每天每kg体重计，其中所述各成分单独或任意组合时的剂量可以相互独立地分别为:
权利要求
1.杜仲在制备用于作为血管保护剂和/或降血压剂的药物中的用途，或者在制备用于治疗和/或预防血管增生性疾病的药物中的用途。
2.杜仲提取物在制备用于作为血管保护剂和/或降血压剂的药物中的用途，或者在制备用于治疗和/或预防血管增生性疾病的药物中的用途。
3.根据权利要求1或2的用途，其中:所述血管保护剂用于治疗和/或预防选自下列的疾病或病症:血管性病症(例如动脉粥样硬化)、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎、偏头痛、血管性头痛、闭塞性脑血管病(及其引起的偏瘫、失语)、冠心病梗死前综合征、中心性视网膜炎、血栓性静脉炎、血管通透性升高引起的水肿、淋巴水肿、烧伤及创伤水肿动脉硬化、糖尿病性机网膜病变、微血管病、静脉曲张。
4.根据权利要求1或2的用途，其中:所述血管增生性疾病选自下列的疾病或病症:血管性病症包括但不限于动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎、偏头痛、血管性头痛。
5.根据权利要求2的用途，其中: 所述的杜仲提取物中包含至少一种选自以下的成分:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸；或者 所述的杜仲提取物中包含以下的成分:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素Α、α -氧-β -D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。
6.根据权利要求5的用途，其中所述京尼平苷、汉黄芩素、千叶素Α、1氧-0-0-葡萄吡喃糖基_4，2'，4'-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸的总量占所述提取物总重量的1-90%。
7.根据权利要求2的用途，其中所述的杜仲提取物是通过用水、乙醇或乙醇水溶液作为溶剂提取得到的。
8.选自下列成分的一种或多种的组合在制备作为血管保护剂和/或降血压剂的药物中的用途，或者在制备用于治疗和/或预防血管增生性疾病的药物中的用途:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素Α、α-氧-D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸；进一步地，其中所述血管保护剂用于治疗和/或预防选自下列的疾病或病症:血管性病症包括但不限于动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎、偏头痛、血管性头痛；或者进一步地，其中所述血管增生性疾病选自下列的疾病或病症:血管性病症包括但不限于动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎、偏头痛、血管性头痛；或者进一步地，其中所述血管保护剂用于治疗和/或预防选自下列的疾病或病症:血管性病症(例如动脉粥样硬化)、高血压、血管成形术后再狭窄、冠心病、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎、偏头痛、血管性头痛、闭塞性脑血管病(及其引起的偏瘫、失语)、冠心病梗死前综合征、中心性视网膜炎、血栓性静脉炎、血管通透性升高引起的水肿、淋巴水肿、烧伤及创伤水肿动脉硬化、糖尿病性机网膜病变、微血管病、静脉曲张；或者进一步地，其为下列成分在制备作为血管保护剂和/或降血压剂的药物中的用途:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素Α、α -氧-β -D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。
9.用于作为血管保护剂和/或降血压剂或者用于治疗和/或预防哺乳动物(特别是人)血管增生性疾病的药物组合物，其中包含治疗和/或预防有效量的杜仲提取物以及任选的药学可接受的赋形剂；进一步地，其中所述的杜仲提取物中包含至少一种选自以下的成分:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素Α、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基_4，2'，4'-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸；或者进一步地，其中所述的杜仲提取物中包含以下的成分:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素Α、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基_4，2'，4'-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸；或者进一步地，其中所述京尼平苷、汉黄芩素、千叶素Α、α -氧-β -D-葡萄吡喃糖基_4，2'，4'-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸的总量占所述提取物总重量的1_90%。
10.用于作为血管保护剂和/或降血压剂或者用于治疗和/或预防哺乳动物(特别是人)血管增生性疾病的药物组合物，其中包含治疗和/或预防有效量的至少一种药物活性成分以及任选的药学可接受的赋形剂，所述的药物活性成分选自:京尼平苷、汉黄芩素、千叶素Α、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸；或者进一步地，其中包含治疗和/或预防有效量的京尼平苷、汉黄芩素、千叶素Α、α -氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4，2'，4'-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸，以及任选的药学可接受的赋形剂 。
全文摘要
本发明涉及杜仲化学成分作为血管保护剂的新用途。具体地说，本发明涉及杜仲或杜仲提取物在制备用于作为血管保护剂和/或降血压剂的药物中的用途，或者在制备用于治疗和/或预防血管增生性疾病的药物中的用途。其中所述的杜仲提取物中包含至少一种选自以下的成分京尼平苷、汉黄芩素、千叶素A、α-氧-β-D-葡萄吡喃糖基-4,2′,4′-三羟基二氢查耳酮、和白桦脂酸。根据本发明，所述5种化学成分或者包含它们的杜仲提取物可以用作有效的血管保护剂和/或降血压剂，用于治疗和/或预防血管增生性疾病。
文档编号A61K31/7048GK103191174SQ20131012489
公开日2013年7月10日 申请日期2011年9月29日 优先权日2010年10月9日
发明者高秀梅, 王虹, 苏艳芳, 樊官伟, 刘二伟, 王跃飞, 张伯礼 申请人:天津中医药大学