多叶越南槐中氧化苦参碱的提取方法及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种多叶越南槐中氧化苦参碱的提取方法及其应用，该提取方法包括渗漉提取，732阳离子交换树脂洗脱提取，然后对树脂进行氯仿洗脱处理得到总碱，进行中性氧化铝柱色谱分离，最后用氯仿-甲醇混合溶剂（100:0-95:5）洗脱后得到氧化苦参碱，该过程简单、易实现工业化，所得氧化苦参碱在抗病毒、抗炎、抗肿瘤中有较好的效果，具有较大的市场开发前景。
【专利说明】多叶越南槐中氧化苦参碱的提取方法及其应用 【技术领域】
[〇〇〇1] 本发明属于药液提取【技术领域】，具体涉及一种多叶越南槐中氧化苦参碱的提取方 法及应用。 【背景技术】
[0002] 多叶越南槐 Gagnep. Z. Huang et Z. C. Zhou为豆科槐属植物，与常用中药材山豆根[学名：越南槐 Gagnep]是同科同属同种的根，是越南槐的一个变种。生长于石山区，分布于广西、广东、 云南、贵州和江西等省，在广西主要分布于红水河流域，如都安、马山、忻城、武鸣等地。其 性寒，味苦，具有清热解毒、消肿利咽之功效，常用于火毒蕴结，咽喉肿痛，齿龈肿痛，肺热咳 嗽，肝炎等疾患的治疗。
[0003] 有关多叶越南槐药物成分目前有了一些研究，例如卢文杰、牙启康在《广西科学》 2011年第四期发表了"多叶越南槐脂溶性成分研究"的文章，采用索氏提取法提取多叶越 南槐tonkinensis Gagnep. ν·&χ.polyphylla^. Ζ. Huang et Z. C. Zhou)的月旨溶性 成分，甲酯化后，用气相色谱-质谱联用（GC-MS)进行分析，计算机检索结合人工解析进 行成分分析和鉴定，共分离得到41个峰，鉴定了其中32种成分。多叶越南槐脂溶性成分 主要含长链脂肪酸。所有成分均首次在该植物中鉴定。
[0004] 多叶越南槐与山豆根具有相同的药用功效，广西民间常把多叶越南槐当作山豆根 药材来使用，《广西中药材标准，1990版》也将多叶越南槐作为山豆根药材的植物来源之一 收载。据分析，多叶越南槐与山豆根一样富含苦参类生物碱，特别是氧化苦参碱的含量较 高，可作为提取氧化苦参碱的原料。而目前市场上山豆根面临日益枯竭的现状，因此，对多 叶越南槐中氧化苦参碱进行提取开发，探索多叶越南槐药材能否作为山豆根的代用品，为 资源利用和临床应用提供科学依据，显得尤为重要。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是针对目前市场山豆根资源逐渐减少的问题，提供一种多叶越南槐 中氧化苦参碱的提取方法及其应用，以此探索多叶越南槐药材能否作为山豆根的代用品， 为资源利用和临床应用提供科学依据。
[0006] 本发明的目的是通过如下技术方案实现的： 本发明多叶越南槐中氧化苦参碱的提取方法，包括以下步骤： (1)将多叶越南槐药材粉碎成粗粉，过20目筛，用1%盐酸水溶液渗漉提取1-7天，质量 比为药材：提取液1:8-20,收集渗漉液；渗漉提取时先将打成粉的多叶越南槐药材加入渗 漉器，逐层加入并压实，然后再加入1%盐酸水溶液，渗漉时间1-7天，也可以多次渗漉后收 集渗漉液。
[0007] (2)渗漉液通过预先处理好的732阳离子交换树脂柱，用水洗脱树脂柱至水液无 色。
[0008] 732阳离子交换树脂柱预处理方法为：将树脂置于洁净的容器中，用清水漂洗，直 到排水清晰为止。用水浸泡树脂12~24小时，使树脂充分膨胀。如为干树脂，应先用饱和氯 化钠溶液浸泡，再逐步稀释氯化钠溶液，以免树脂突然急剧膨胀而破碎。用树脂体积2倍量 的2~5%HC1溶液浸泡树脂2~4小时，并不时搅拌。然后用低纯水洗涤树脂，直至溶液 PH接 近于4,再用2?5%Na0H溶液处理，处理后用水洗至中性。
[0009] (3)将树脂倒入敞开的器皿中，晾干，用氨水捏溶，用氯仿回流提取2-5次，至氯仿 提取液蒸干检查无生物碱反应，回收氯仿提取液得氯仿提取物，即得总碱。
[〇〇1〇] (4)总碱加适量甲醇溶解，用中性氧化铝拌样，进行中性氧化铝柱色谱分离，依次 用体积比为100:0-95:5的氯仿-甲醇混合溶剂梯度洗脱，收集95:5洗脱流份，回收溶剂， 残留物再进行中性氧化铝柱色谱分离，用体积比为95:5的氯仿-甲醇混合溶剂洗脱，收集 洗脱液，回收溶剂，得氧化苦参碱。
[〇〇11] 本发明多叶越南槐中氧化苦参碱，在制备抗病毒、抗炎、抗肿瘤药物中的应用。经 发明人试验验证，发现多叶越南槐中氧化苦参碱在抗病毒、抗炎和抑制肿瘤细胞生长方面 均有较好的效果。
[0012] 本发明的多叶越南槐中氧化苦参碱的提取方法及其应用具有以下显著进步和优 占· 一、本发明的多叶越南槐中氧化苦参碱的提取方法，提取过程中采用渗漉法，选用1% 盐酸水溶液作为渗漉提取溶剂，相对于使用有机溶剂提取更有利于保护生物碱的完整，同 时可以降低生产成本，在大生产中应用简单方便，人工操作易熟悉掌握。
[0013] 二、本发明的多叶越南槐中氧化苦参碱的提取方法，选用732阳离子交换树脂吸 附洗脱，732阳离子交换树脂为强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂，是一种磺酸化苯乙烯系凝 胶型强酸阳离子交换树脂，具有交换容量高、交换速度快、机械强度高的特点，应用在本发 明的多叶越南槐中提取氧化苦参碱较为合适，经发明人多次验证，使用该树脂洗脱提取氧 化苦参碱具有较高的收率。
[0014] 三、本发明多叶越南槐中氧化苦参碱，在合适用量下，在抗病毒、抗炎和抑制肿瘤 细胞生长方面均有较好的效果。
[0015] 为进一步理解本发明的本质，下面结合【具体实施方式】对本发明作进一步说明。 【具体实施方式】
[0016] 实施例1多叶越南槐中氧化苦参碱提取工艺 本发明多叶越南槐中氧化苦参碱的提取方法，包括以下步骤： (1)将20公斤多叶越南槐药材粉碎成粗粉，过20目筛，放入渗漉器中，层层压实，然后 用配置好的1%盐酸水溶液160公斤放入渗漉器，密闭，提取7天，渗漉过程中不搅动，收集 渗漉液。
[0017] (2)对732阳离子交换树脂柱预处理：将树脂置于洁净的容器中，用清水漂洗，直 到排水清晰为止。用水浸泡树脂15小时，使树脂充分膨胀。用树脂体积2倍量的5%HC1溶 液浸泡树脂4小时，并不时搅拌，然后用低纯水洗涤树脂，直至溶液 PH接近于4,再用5%Na0H 溶液处理，处理后用水洗至中性。
[0018] 将渗漉液通过预先处理好的732阳离子交换树脂柱，然后用水洗脱树脂柱至水液 无色。
[0019] (3)将树脂倒入敞开的容器中，晾干或在55-65°C下烘干，用氨水捏溶，用氯仿回 流提取5次，至氯仿提取液蒸干检查无生物碱反应，回收氯仿提取液得氯仿提取物，即得总 碱。
[0020] (4)总碱加适量甲醇溶解，用中性氧化铝拌样，进行中性氧化铝柱色谱分离，依次 用氯仿-甲醇（100:0-95:5 ) (V/V)混合溶剂梯度洗脱，收集95:5洗脱流份，回收溶剂，残留 物再进行中性氧化铝柱色谱分离，用氯仿-甲醇（95:5) (V/V)混合溶剂洗脱，收集洗脱液， 回收溶剂，得氧化苦参碱。
[0021] 实施例1中732阳离子交换树脂规格型号如下：
【权利要求】
1. 一种多叶越南槐中氧化苦参碱的提取方法，其特征在于：包括以下步骤： (1) 将多叶越南槐药材粉碎成粗粉，过20目筛，用1%盐酸水溶液渗漉提取1-7天，收集 渗漉液； (2) 渗漉液通过预先处理好的732阳离子交换树脂柱，用水洗脱树脂柱至水液无色； (3) 将树脂倒入敞开的器皿中，晾干，用氨水捏溶，用氯仿回流提取，至氯仿提取液蒸干 检查无生物碱反应，回收氯仿提取液得氯仿提取物，即得总碱； (4) 总碱加适量甲醇溶解，用中性氧化铝拌样，进行中性氧化铝柱色谱分离，依次用体 积比为100:0-95:5的氯仿-甲醇混合溶剂梯度洗脱，收集95:5洗脱流份，回收溶剂，残留 物再进行中性氧化铝柱色谱分离，用体积比为95:5的氯仿-甲醇混合溶剂洗脱，收集洗脱 液，回收溶剂，得氧化苦参碱。
2. 根据权利要求1所述的多叶越南槐中氧化苦参碱的提取方法，其特征在于：所述渗 漉提取中加入1%盐酸水溶液为多叶越南槐药材质量的8-20倍。
3. 根据权利要求1所述的多叶越南槐中氧化苦参碱的提取方法，其特征在于：步骤（3) 中所述氯仿回流提取2-5次。
4. 权利要求1所述提取方法得到的氧化苦参碱，在制备抗病毒、抗炎、抗肿瘤药物中的 应用。
【文档编号】A61P1/00GK104086549SQ201410371820
【公开日】2014年10月8日 申请日期:2014年7月31日 优先权日:2014年7月31日
【发明者】卢文杰, 陈家源, 陆国寿, 谭晓, 黄建猷, 黄周锋, 何开家 申请人:广西壮族自治区中医药研究院