本发明属于组织修复材料制备技术领域，尤其涉及一种海地瓜胶原蛋白复合再生纤维修复材料的制备方法。
背景技术：
纤维素作为天然的生物高聚物，具有生物可降解性、生物相容性以及独特的物理、化学和机械性能，已成为新型生物医学材料领域的研究热点。而现有技术多是采用再生纤维素与其他材料共混，冷冻干燥制备复合膜，采用此方法制得的复合膜均匀性、稳定性较差，且组织修复能力及药物附着性有待进一步的提高。
技术实现要素：
为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供了一种具有良好的组织修复能力及药物附着性的海地瓜胶原蛋白复合再生纤维修复材料的制备方法。
本发明采用以下技术方案：
一种海地瓜胶原蛋白复合再生纤维修复材料的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：将新鲜的海地瓜伞部用自来水流水清洗，剪碎，放入烧杯中，加入质量浓度为9％的10倍体积氯化钠溶液浸泡海地瓜，搅拌浸泡24h后取出自然风干；
步骤二：称取经步骤一处理后的海地瓜50g，加入100ml去离子水、2400u/g蛋白酶，于20℃进行酶解反应3h，ph为7.5，酶解产物进行冷冻干燥，得海地瓜胶原蛋白；
步骤三：称取2.5g大豆分离蛋白，量取50ml去离子水和1ml甘油于烧杯中，混合均匀，边搅拌边将大豆分离蛋白加入其中，将烧杯放在恒温磁力搅拌器上，温度调到45℃，向混合溶液中滴加1mol/l的naoh，将溶液的ph调节到10，再加入质量百分比2％的丙三醇，搅拌3h后升温至90℃继续搅拌0.5h，制得成膜液，将成膜液倒在玻璃板上，置于水平的工作台面上，室温下自然成膜；
步骤四：将步骤三制得的膜加入丙酮中，制成质量浓度5％的溶液，在搅拌下缓慢加入质量百分比1％的乙酸酐，ph控制在7-8，55℃反应1h，离心分离后取上清液，超声处理20min，制得大豆分离蛋白溶液；
步骤五：将蚕茧去蛹，置入煮沸的质量浓度为0.5％的碳酸钠水溶液中，浴比为1:50，除去蚕茧表面丝胶,将已成丝状的蚕茧捞出并拧干，再重复上述操作一次后，用去离子水洗净，风干后得到脱胶丝素；
步骤六：将cacl2在室温状态下溶解于甲酸中，搅拌30min，制得浓度为5wt.％的cacl2-fa溶液，然后将脱胶丝素溶解于cacl2-fa溶液中，磁力搅拌3h，获得再生丝素蛋白溶液，室温下干燥成膜，将膜用去离子水浸泡3h，再干燥，获得再生丝素蛋白膜，将再生丝素蛋白膜在室温状态下二次溶解于甲酸中，浴比为1:10，溶解时间为2h，得再生丝素蛋白纺丝液；
步骤七：取棉短绒5g，将其溶解在甲酸中，配制成质量浓度4％的纤维素溶液；
步骤八：将再生丝素蛋白纺丝液与纤维素溶液按重量比4:1混合均匀得再生纤维素纺丝液；
步骤九：将海地瓜胶原蛋白、大豆分离蛋白溶液、再生纤维素纺丝液按质量比3:5:19混合均匀，使用超声波震荡对其进行分散，50℃条件下磁力搅拌1h，再在室温下继续搅拌8h，得到粘稠溶液置于与高压装置连接的医用针管中，通过静电纺丝制得修复材料，高压装置电压为20kv，纺丝流量2ml/h，将制得的材料置于体积浓度75％乙醇中浸泡30min，在40℃下真空干燥。
优选的，步骤九中所述的医用针管的容量为20ml。
优选的，步骤九中所述的医用针管的针头固定在距离静电纺丝接收板20cm处。
优选的，步骤九中所述的医用针管的针头内径为0.41mm。
本发明的有益效果在于：
1)海地瓜胶原蛋白多肽的肽链中含有多个氨基、羧基和羟基等亲水基团，而且由于其分子量小，与肌肤有很好的相容性，可进入角质层，不但具有维持肌肤的吸水能力，还具有组织修复功能。
2)大豆产量很高，大豆分离蛋白资源丰富，而且营养丰富，可加工性强，用其制成的材料生物相容性好，低碳环保，是一种很好的复合材料的原料。大豆分离蛋白可以与多种高分子聚合物共混，制备大豆蛋白纤维，这些大豆蛋白纤维具有良好的机械性能，比重轻，强度高，吸湿导湿性好。
3)丝素蛋白具有良好的抗菌性、生物相容性及组织修复能力。
4)纤维素具有良好的生物相容性、可降解性及优良的机械性能。
5)纤维素可以改善材料的机械性能，丝素蛋白可以改善材料的组织修复能力。
6)采用静电纺丝技术制备的材料，进一步提高了材料的孔隙率，有利于药物的附着。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的描述。
实施例1
一种海地瓜胶原蛋白复合再生纤维修复材料的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：将新鲜的海地瓜伞部用自来水流水清洗，剪碎，放入烧杯中，加入质量浓度为9％的10倍体积氯化钠溶液浸泡海地瓜，搅拌浸泡24h后取出自然风干；
步骤二：称取经步骤一处理后的海地瓜50g，加入100ml去离子水、2400u/g蛋白酶，于20℃进行酶解反应3h，ph为7.5，酶解产物进行冷冻干燥，得海地瓜胶原蛋白；
步骤三：称取2.5g大豆分离蛋白，量取50ml去离子水和1ml甘油于烧杯中，混合均匀，边搅拌边将大豆分离蛋白加入其中，将烧杯放在恒温磁力搅拌器上，温度调到45℃，向混合溶液中滴加1mol/l的naoh，将溶液的ph调节到10，再加入质量百分比2％的丙三醇，搅拌3h后升温至90℃继续搅拌0.5h，制得成膜液，将成膜液倒在玻璃板上，置于水平的工作台面上，室温下自然成膜；
步骤四：将步骤三制得的膜加入丙酮中，制成质量浓度5％的溶液，在搅拌下缓慢加入质量百分比1％的乙酸酐，ph控制在7-8，55℃反应1h，离心分离后取上清液，超声处理20min，制得大豆分离蛋白溶液；
步骤五：将蚕茧去蛹，置入煮沸的质量浓度为0.5％的碳酸钠水溶液中，浴比为1:50，除去蚕茧表面丝胶,将已成丝状的蚕茧捞出并拧干，再重复上述操作一次后，用去离子水洗净，风干后得到脱胶丝素；
步骤六：将cacl2在室温状态下溶解于甲酸中，搅拌30min，制得浓度为5wt.％的cacl2-fa溶液，然后将脱胶丝素溶解于cacl2-fa溶液中，磁力搅拌3h，获得再生丝素蛋白溶液，室温下干燥成膜，将膜用去离子水浸泡3h，再干燥，获得再生丝素蛋白膜，将再生丝素蛋白膜在室温状态下二次溶解于甲酸中，浴比为1:10，溶解时间为2h，得再生丝素蛋白纺丝液；
步骤七：取棉短绒5g，将其溶解在甲酸中，配制成质量浓度4％的纤维素溶液；
步骤八：将再生丝素蛋白纺丝液与纤维素溶液按重量比4:1混合均匀得再生纤维素纺丝液；
步骤九：将海地瓜胶原蛋白、大豆分离蛋白溶液、再生纤维素纺丝液按质量比3:5:19混合均匀，使用超声波震荡对其进行分散，50℃条件下磁力搅拌1h，再在室温下继续搅拌8h，得到粘稠溶液置于与高压装置连接的医用针管中，通过静电纺丝制得修复材料，高压装置电压为20kv，纺丝流量2ml/h，将制得的材料置于体积浓度75％乙醇中浸泡30min，在40℃下真空干燥。
步骤九中所述的医用针管的容量为20ml，所述的医用针管的针头固定在距离静电纺丝接收板20cm处，针头内径为0.41mm。