本发明涉及气管插管领域，尤其是一种大、小鼠气管插管方法。
背景技术：
在医学和生物学常用小鼠和大鼠进行实验，实验中经常需要给小鼠和大鼠进行气管插管以进行机械通气或气管给药等操作。目前已有的插管方法有盲插法、气管切开法和直视插管法。
盲插法易插入食管，成功率低，需要反复试，容易损伤小鼠和大鼠会咽部，导致分泌大量的粘液影响给药，容易造成感染，且创伤不易恢复，反而又给动物增加了病理状态，增加了整个实验过程的误差。
气管切开法需要切开大鼠的颈部皮肤，进行逐层分离暴露气管并切开气管，插管后绑紧，这种方法容易造成术后局部感染和一些并发症的发生，造成了二次创伤，且由于动物插管处理后不能长时间存活，不能进行延续性研究。
而直视插管法，操作者使用大功率白炽灯泡或冷光源紧贴大、小鼠颈部，借助透过颈部的光线，辅以牵拉大、小鼠舌根，即可暴露声门，以提高直视下插管法的成功率。但是目前的直视下插管法需要两人才能完成，其中一人一只手将大功率白炽灯泡或冷光源紧贴大、小鼠颈部，另一只手打开大、小鼠口腔，另外一个人将气管插管经口腔插入。这种插管方法增加了人力投入。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种大、小鼠气管插管方法，解决大、小鼠气管插管时易损伤会咽部、易感染和人力投入大的问题。
具体的，本发明提供了一种大、小鼠气管插管方法，包括以下步骤：
步骤一、动物准备及器具准备；
器具包括简易喉镜和导引套件；
步骤二、左手持简易喉镜置入大鼠或小鼠口腔，暴露大鼠或小鼠声门；
步骤三、暴露大鼠或小鼠声门后，直视下将气管导管插入大鼠或小鼠的气管：包括导引钢丝进入声门、气管导管在导引钢丝的引导下送过声门和导引钢丝连同操作柄一同撤出；
步骤四、气管导管末端连接小动物呼吸机及小动物麻醉机，进行持续吸入麻醉及机械通气。
使用简易喉镜和气管导管套件配合使用，能够提高插管的成功率，减少大鼠或小鼠的应激反应，不影响后续试验结果。
进一步地，步骤一中动物准备包括过程为：准备大鼠或小鼠，将基础麻醉后的大鼠或小鼠仰卧位放置在鼠板，皮筋固定大鼠或小鼠四肢及上颌门齿，鼠板头端抬高30°。
基础麻醉后，大鼠或小鼠固定，头板太高，这个角度有利于操作，并且保证操作者视线能够尽可能多的看到大鼠或小鼠的声门。
进一步地，基础麻醉过程具体为：首先腹腔注射10％水合氯醛0.5ml，并将大鼠或小鼠放置于事先预充1.5％异氟醚气体的密闭气体麻醉箱中3-5min。
基础麻醉保证大鼠或小鼠固定过程不会跳动，不利于操作，同时不能过量麻醉，防止过量麻醉对后续试验的影响。
进一步地，步骤一中器具准备包括：将导引套件的气管导管通过连接管连接固定在操作柄上，右手手动拨动导引钢丝，使得导引钢丝伸出气管导管外，并手动将导引钢丝的末端进行弯曲。
导引钢丝和气管导管配合，导引钢丝对气管导管进行导向，同时末端弯曲，能够避免导引钢丝插入的过程中对大鼠或小鼠的口腔或者气管划伤，避免后续出现感染等状况。
进一步地，所述简易喉镜包括手柄、镜臂和照明设备；
手柄与所述镜臂相连接；
照明设备包括指示灯和电池；
指示灯螺纹旋入所述镜臂扁平端的前端，电池安装于手柄内，指示灯通过导线与电池相连。
指示灯螺纹连接的结构操作方便，节省空间，同时自身带有开关的功能，简化看喉镜的整体结构，使用方便。
进一步地，导引套件包括气管导管、操作柄和导引钢丝；
气管导管一端与操作柄可拆卸的连接，气管导管另一端为斜口端；导引钢丝一端穿过气管导管，另一端盘在操作柄内。
操作柄和导引钢丝用于气管导管插入气道时的辅助作用，可拆卸的连接使得拆除时操作简便，且使用时组装方便。
进一步地，导引钢丝的长度为20cm，引导钢丝上刻有刻度，相邻刻度的间隔是1厘米。
导引钢丝上的刻度可保证操作者直视下准确测定插入的深度，保证导引钢丝不会因插入太深对器官造成损伤。
进一步地，步骤二中，操作者右手旋转指示灯伸入镜臂内，指示灯与导线接触，电池为指示灯供电，指示灯亮，操作者下蹲，使得操作者视线与大鼠或小鼠的头端等高；操作者左手将喉镜置入大鼠或小鼠口腔，充分暴露大鼠或小鼠声门。
充分暴露声门，目的在于插入气管导管时操作者能够尽可能的看到内部的结构，便于后续操作。
进一步地，充分暴露大鼠或小鼠声门具体为：喉镜从大鼠或小鼠舌体右侧进入，镜臂的扁平端置于舌根后，向上向前抬起喉镜，在喉镜指示灯的照射下，可见部分声门，微调喉镜与舌根相互位置，充分暴露声门。
喉镜带有指示灯，有利于充分暴露声门。
进一步地，步骤三中气管导管插入大鼠或小鼠的气管过程具体为：
操作者右手持气管导引套件的操作柄，直视下将导引钢丝插入大鼠或小鼠的口腔内，手动拨动导引钢丝，直视下将导引钢丝送过声门1cm，右手拇指将气管导管向前推，使得气管导管从操作柄上拆除，将气管导管在导引钢丝的引导下送过声门约1.5-2.0cm，右手按住导引钢丝，将导引钢丝连同操作柄一同从大鼠或小鼠的口腔内撤出，同时左手固定气管导管，将气管导管留在大鼠或小鼠体内。
插管过程中插入深度测量准确，能够减少动物的通孔，进而减少应激反应，提高插管的成功率。
本发明的有益效果是：
(1)该插管方法适用范围广，可应用于不同规格的大鼠和小鼠的造模、气管给药、肺功能测定等场合；
(2)本插管方法成功率高，能够避免盲插成功率低、对动物本身产生创伤；
(3)该插管方法所应用的器具适应大鼠和小鼠声门狭窄，气管位于口腔深部的特点，减少插管过程对组织伤害所带来的痛苦，使得动物插管应激反应小；
(4)该插管方法简单，只需一个人即可完成全部操作，操作简单省时；
(5)本插管方法中大鼠和小鼠所受创伤小，避免了气管切开带来的创伤，减少了对后续研究的影响。
附图说明
附图仅用于示出具体实施例的目的，而并不认为是对本发明的限制，在整个附图中，相同的参考符号表示相同的部件。
图1是用于本发明插管方法的喉镜的整体结构示意图；
图2是用于本发明插管方法的喉镜的部件拆分示意图；
图3是用于本发明插管方法的喉镜的前端照明灯位置示意图。
图4是用于本发明插管方法的气管导引套件整体结构示意图；
图5是用于本发明插管方法的气管导引套件的操作柄结构示意图；
图6是用于本发明插管方法的气管导引套件的操作柄局部放大图。
图中标号：1-手柄、2-镜臂、3-照明设备、301-指示灯、302-电池、4-气管导管、5-操作柄、6-导引钢丝。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
实施例一：
本发明中大、小鼠气管插管方法包括以下步骤：
步骤一、动物准备及器具准备；
具体的，动物准备过程为：准备大鼠，将基础麻醉后的大鼠仰卧位放置在鼠板，皮筋固定大鼠四肢及上颌门齿，鼠板头端抬高30°，即大鼠的头部所在那端抬高30°；
所准备的器具包括简易喉镜和导引套件；将导引套件的气管导管4通过连接管连接固定在操作柄5上，右手手动拨动导引钢丝6，使得导引钢丝6伸出气管导管4外，并手动将导引钢丝6的末端进行弯曲，以免对大鼠的组织或器官造成伤害；
进一步地，基础麻醉过程具体为：首先动物腹腔注射10％水合氯醛0.5ml，并将动物放置于事先预充1.5％异氟醚气体的密闭气体麻醉箱中3-5min。
本申请中的简易喉镜如图1所示，包括手柄1、镜臂2和照明设备3。
手柄1为中空的棒状管；手柄1与镜臂2相连接；照明设备3包括指示灯301和电池302，指示灯301安装于镜臂2的末端，电池302安装于手柄1内，指示灯301通过导线与电池302相连。
手柄1材质为木质或金属，为防止使用时手柄1会从操作者手中滑脱，手柄1的外壁面可套设防滑橡胶套，这样增加了操作者的手与手柄1之间的摩擦力，使得手柄1不易滑脱。
镜臂2的一端与手柄1为固定连接，可以为粘接或者焊接，二者之间不会有相对运动，保证使用过程中的稳定。
镜臂2另一端为带有曲面的扁平端，该扁平端的曲面适合大鼠的声门，可使得声门充分暴露，同时不会对声门造成伤害。
如图2和3所示，镜臂2扁平端的前端右侧，嵌有可旋进的指示灯301。指示灯301通过螺纹与镜臂2相连，可旋入镜臂2内部。电池302可选的为纽扣电池，占用空间小，供电时间长，电池302位于手柄1内，可从手柄1的末端取出更换，手柄1末端有密封盖，将电池302密封，防止使用时电池302从手柄1内掉出。
指示灯301与镜臂2的扁平端螺纹连接，常态时指示灯301伸出镜臂2外，与导线处于分离状态，需要使用时，指示灯301旋转伸入镜臂2内，指示灯301与导线接触，指示灯301的正输入端通过导线与电池的正极相连，指示灯301的负输入端通过导线与电池的负极相连，电池302为指示灯301供电，指示灯亮。
本申请中的导引套件如图4所示，包括气管导管4、操作柄5和导引钢丝6。
气管导管4一端与操作柄5可拆卸的连接，另一端为斜口端，导引钢丝6一端穿过气管导管4，另一端盘在操作柄5内。
气管导管4为直段圆管，一端固定有连接管，另一端为斜口端，斜口段用于插入大鼠的口腔内，因大鼠声门狭窄，位于口腔深部，气管导管4不易插入，采用斜口形式易于进入，方便操作。连接管一端的外径与气管导管4的内径相同，插入气管导管4内，并使用密封胶密封，连接管另一端的内径与操作柄的外径相适应，连接管可套设在操作柄5一端的外壁面，进而将气管导管4固定在操作柄5上。
导引钢丝6一端穿过气管导管4，并且露出气管导管4的部分弯曲，使得导引钢丝的末端没有尖角，不会在伸入的过程中对大鼠的血管、声带等造成损伤。气管导管4材质为塑料，长10cm，内径1.8mm。气管导管4的长度太长则不方便操作，太短则在插管后不容易与其它设备相连。
如图5和6所示，操作柄5一端为渐缩口端，渐缩口易于与气管导管4的连接管相匹配，用于固定气管导管4，另一端为连通的圆环，导引钢丝6穿过操作柄5内部进入圆环内，在不使用时将导引钢丝6的多余长度都盘在圆环内，导引钢丝6不会占用多余的空间。
操作柄5的中间段是裸露的，这样穿过操作柄5内的导引钢丝6可裸露在操作柄5外，操作中可直接接触导引钢丝6，进而调节导引钢丝6的位置和伸出气管导管4的长度。
操作过程中，操作柄5要有一定强度，不易变形，因此操作柄5材质为硬质塑料。
在不使用时，导引钢丝6需盘在操作柄5内部，则要求导引钢丝6不能太硬，因此导引钢丝6材质为软质钢丝。
引导钢丝3用于引导气管导管4，因此其长度不能小于气管导管4的长度，本申请中导引钢丝6的长度为20cm。为了更直观的看到引导钢丝进入大鼠的长度，引导钢丝3上刻有刻度，相邻刻度的间隔是1厘米，这样可精确知道导引钢丝6前段置入的深度，可提高直视下气管插管的成功率，防止导引钢丝6插入太长时大鼠不适应，极大减少了插管过程的应激反应，同时可避免插入太深对大鼠器官的损伤。
步骤二、左手持简易喉镜置入大鼠口腔，暴露大鼠声门。具体地，右手旋转指示灯301伸入镜臂2内，指示灯301与导线接触，电池302为指示灯301供电，指示灯亮，操作者下蹲，使得操作者视线及大鼠头端等高；操作者左手将喉镜置入大鼠口腔，暴露大鼠声门，肉眼可见大鼠双侧声带及声门；
更为具体的，暴露大鼠声门具体为：喉镜从大鼠舌体右侧进入，镜臂2的扁平端置于舌根后，向上向前抬起喉镜，在喉镜指示灯301的照射下，可见部分声门。微调喉镜与舌根相互位置，以充分暴露声门。
步骤三、暴露大鼠声门后，肉眼可见大鼠双侧声带及声门，将气管导管4通过连接管连接固定在操作柄5上，操作者右手持气管导引套件的操作柄5，直视下将导引钢丝6插入大鼠的口腔内，手动拨动导引钢丝6，直视下将导引钢丝6送过声门1cm，右手拇指将气管导管4向前推，使得气管导管4从操作柄5上拆除，将气管导管4在导引钢丝6的引导下送过声门约1.5-2.0cm，右手按住导引钢丝6，将导引钢丝6连同操作柄3一同从大鼠的口腔内撤出，同时左手固定气管导管4，将气管导管留在大鼠体内；
步骤四、气管导管4末端连接小动物呼吸机及小动物麻醉机，进行持续吸入麻醉及机械通气。
实施例二：
本发明中大、小鼠气管插管方法包括以下步骤：
步骤一、动物准备及器具准备；
具体的，动物准备过程为：准备小鼠，将基础麻醉后的小鼠仰卧位放置在鼠板，皮筋固定小鼠四肢及上颌门齿，鼠板头端抬高30°，即小鼠的头部所在那端抬高30°；
所准备的器具包括简易喉镜和导引套件；将导引套件的气管导管4通过连接管连接固定在操作柄5上，右手手动拨动导引钢丝6，使得导引钢丝6伸出气管导管4外，并手动将导引钢丝6的末端进行弯曲，以免对小鼠的组织或器官造成伤害；
进一步地，基础麻醉过程具体为：首先动物腹腔注射10％水合氯醛0.5ml，并将动物放置于事先预充1.5％异氟醚气体的密闭气体麻醉箱中约3-5min。
本实施例中所使用的简易喉镜和导引套件与实施例一中所使用的简易喉镜和导引套件相同。
步骤二、左手持简易喉镜置入小鼠口腔，暴露小鼠声门。具体地，右手旋转指示灯301伸入镜臂2内，指示灯301与导线接触，电池302为指示灯301供电，指示灯亮，操作者下蹲，使得操作者视线及小鼠头端等高；操作者左手将喉镜置入小鼠口腔，暴露小鼠声门，肉眼可见小鼠双侧声带及声门；
更为具体的，暴露小鼠声门具体为：喉镜从小鼠舌体右侧进入，镜臂2的扁平端置于舌根后，向上向前抬起喉镜，在喉镜指示灯301的照射下，可见部分声门。微调喉镜与舌根相互位置，以充分暴露声门。
步骤三、暴露小鼠声门后，肉眼可见小鼠双侧声带及声门，直视下将导引钢丝6送过声门1cm，右手拇指将气管导管4向前推，将气管导管4在导引钢丝2的引导下送过声门约1.5-2.0cm，撤出导引套件；将气管导管4通过连接管连接固定在操作柄5上，操作者右手持气管导引套件的操作柄5，将导引钢丝6插入小鼠的口腔内，手动拨动导引钢丝6，直视下将导引钢丝6送过声门1cm，右手拇指将气管导管4向前推，使得气管导管4从操作柄5上拆除，将气管导管4在导引钢丝6的引导下送过声门约1.5-2.0cm，右手按住导引钢丝6，将导引钢丝6连同操作柄3一同从小鼠的口腔内撤出，同时左手固定气管导管4，将气管导管留在小鼠体内；
步骤四、气管导管4末端连接小动物呼吸机及小动物麻醉机，进行持续吸入麻醉及机械通气。
本申请的大、小鼠插管方法适用范围广，可应用于不同规格的大鼠和小鼠的造模、气管给药、肺功能测定等场合；成功率高，能够避免盲插成功率低、对动物本身产生创伤；所应用的器具适应大鼠和小鼠声门狭窄，气管位于口腔深部的特点，减少插管过程对组织伤害所带来的痛苦，使得动物插管应激反应小；操作简单，只需一个人即可完成全部操作。
尽管已经结合优选的实施例对本发明进行了详细地描述，但是本领域技术人员应当理解的是在不违背本发明精神和实质的情况下，各种修正都是允许的，它们都落入本发明的权利要求的保护范围之中。