本发明涉及药物组合，其包含至少一种法尼醇x受体(fxr)激动剂及另一种治疗剂(特别地是胱天蛋白酶抑制剂，如恩利卡生(emricasan))，任选地存在药学上可接受的载体，并且涉及包含它们的药物组合物。此外，本发明涉及这类药物组合用于治疗或预防纤维化疾病或障碍(例如肝脏疾病或障碍)的用途，并且涉及关于这类组合的组合物、方法、用途和方案。
背景技术：
法尼醇x受体激动剂(fxr)是由胆汁酸活化的核受体，也称为胆汁酸受体(bar)。fxr在胆汁酸代谢的主要部位(如肝脏、肠和肾脏)中表达，fxr在这些主要部位以组织特异性方式介导对多种代谢途径的作用。
fxr在肝脏和肠中的作用模式是众所周知的，并且例如在(calkin和tontonoz，(2012)，naturereviewsmolecularcellbiology[自然综述：分子细胞生物学]13，213-24)中有描述。fxr在肝和肠中负责通过多种机制来调节胆汁酸的产生、缀合和清除。在正常生理学中，fxr检测胆汁酸水平升高，并且响应方式是通过降低胆汁酸合成和胆汁酸摄取，同时增加肝脏中的胆汁酸的修饰和分泌。在肠中，fxr检测胆汁酸水平升高并降低胆汁酸吸收且增加fgf15/19的分泌。最终结果是胆汁酸的总体水平降低。在肝脏中，fxr激动作用增加小管和基底外侧胆汁酸流出和胆汁酸解毒酶中所涉及的基因的表达，同时抑制肝细胞对基底外侧胆汁酸的摄取并抑制胆汁酸合成。
此外，fxr激动剂降低肝脏甘油三酯合成以使得脂肪变性减少，抑制肝脏星状细胞活化以减少肝纤维化，并且刺激fgf15/fgf19表达(胆汁酸代谢的关键调节因子)以使得肝脏胰岛素敏感性提高。因此，fxr充当胆汁酸升高的传感器，并引发稳态反应以控制胆汁酸水平，这是一种据信在胆汁淤积中受损的反馈机制。在患有胆汁淤积障碍(nevens等人，j.hepat0l.[肝脏病学杂志]60(1增刊1)：347a-348a(2014))、胆汁酸吸收不良性腹泻(walters等人，alimentpharmac01.ther.[营养药理学与治疗学]41(1)：54-64(2014))以及非酒精性脂肪性肝炎(nash；neuschwander-tetri等人，2015)的受试者中，fxr激动作用已经显示临床益处。
胆汁酸通常由生物体产生。在高剂量时，它们会引起不同的副作用，因为它们具有清洁特性(腹泻或细胞损伤)。另外，它们还可引起瘙痒。
已知胱天蛋白酶抑制剂(例如，恩利卡生)参与肝细胞凋亡，并且细胞凋亡途径在慢性肝脏疾病中起重要作用。最新数据指示，胱天蛋白酶抑制剂(例如，恩利卡生)抑制多种胱天蛋白酶，并且降低患有慢性肝脏疾病的患者中的血清天冬氨酸转氨酶(ast)及丙氨酸转氨酶(alt)水平。恩利卡生(还被称为3-[2-[(2-叔丁基-苯基氨基草酰基)-氨基]-丙酰基氨基]-4-氧代-5-(2，3，5，6-四氟-苯氧基)-戊酸)抑制胱天蛋白酶1、2、3、6、7、8和9。
非酒精性脂肪性肝脏疾病(nafld)是西方世界慢性肝脏疾病最常见的原因(ratziu等人2010)。nafld的主要阶段为1-单纯性脂肪肝(脂肪变性)；2-非酒精性脂肪性肝炎(nash)，nafld的一种更严重形式；3-纤维化，其中在肝中存在持续发炎，从而在肝细胞及血管周围生成纤维瘢痕组织；以及4-硬化，这种损害是永久性的并可导致肝衰竭及肝癌。
nash包括肝脏中的脂肪积聚，以及随时间推移会导致纤维化、硬化和末期肝脏疾病增加的炎症。肝脏移植是伴有肝功能衰竭的晚期硬化的唯一治疗手段，接受移植的罹患nash的人数在不断增加。
估计全世界nafld患病率的范围是从6.3％至33％，一般人群中位数为20％。nash的估计患病率较低，范围从3％至5％(younossi等人，hepatology[肝脏病学]，第64卷，第1期，2016)。nash是一个世界性的问题，在过去的几十年里发病率不断增长。在过去的十年中，在美国，nash从肝移植的罕见适应症跃升为第二适应症。预期到2020年它将成为移植的主要原因(wong等人，gastro[胃]2015)。nash与代谢综合征和2型糖尿病高度相关。nash是进行性纤维化和硬化的原因。由nash引起的硬化增加了肝细胞癌瘤和肝细胞癌症的风险。此外，心血管死亡是nash患者死亡的重要原因。
慢性胆汁淤积和肝脏炎症是原发性胆汁性肝硬化(pbc)和原发性硬化性胆管炎(psc)这两大类疾病的两个主要病理生理组成部分，这两大类疾病导致胆管破坏并最终导致硬化和肝功能衰竭。肝移植似乎是唯一可以挽救生命的手术。
熊脱氧胆酸(ucda)，也称为熊去氧胆酸，是pbc的主要治疗手段。ucda是次级胆汁酸，即它是在初级酸分泌到肠内后，由肠道细菌从初级胆汁酸(由肝脏产生)代谢而来。udca不是fxr激动剂。
udca使许多患者的进展停止，但约30％-40％的人群没有反应。自2016年5月起，另一种分子在美国已被批准用于治疗pbc，当与udca联合时用于治疗对udca反应不足的成人患者的原发性胆汁性胆管炎(pbc)，或在无法耐受udca的成人中作为单一疗法。这种新分子是奥贝胆酸(oca，obeticholicacid)，一种胆汁酸模拟物。oca是fxr激动剂。
目前尚无批准用于nash的疗法。
仍需要针对由fxr介导的肝脏病症，特别是肝脏疾病如nafld、nash或pbc以及针对晚期肝脏疾病的有效治疗和疗法。
nash的发展涉及若干机制：肝脏中脂肪的积累(脂肪变性)、肝脏发炎、肝细胞气球样变性和纤维化。nafld活动度评分(nas)被开发作为用于测量治疗试验期间nafld的变化的工具。以脂肪变性(0-3)、小叶炎症(0-3)和气球样变性(0-2)评分的未加权总和来计算评分。
对于预防或治疗此类疾病或障碍，如果药物对这些不同方面中的每个方面都有影响，则该药物将是特别有效的。
当在非酒精性脂肪性肝炎患者中进行试验时，奥贝胆酸显示出功效，特别是nas显著改善，即对脂肪变性有强烈影响并且对炎症和气球样变性有额外的作用。但是长期施用oca引起了安全性问题，因为它可能与瘙痒以及ldl胆固醇升高有关(参见“interceptannouncesnewflinttrialdatashowingocatreatmentincreasesfibrosisresolutionandcirrhosispreventioninhigh-risknashpatients[intercept制药公司公布新的flint试验数据显示oca治疗会增加高危nash患者的纤维化消退和硬化预防]”，2015年4月23日)。为了避免不良心血管事件的风险，对于nash患者的长期治疗可能需要伴随施用他汀类。
恩利卡生已在nash和冷缺血以及再灌注性损伤的临床前模型中，以及在涉及患有nash/nafld、门静脉高血压和硬化的受试者的临床试验中显示出效能。
因此，需要提供针对纤维化/硬化疾病或障碍(例如肝脏疾病或障碍)的治疗，该治疗可解决需要这种治疗的任何患者的这些复杂病症的不同方面，同时展示出可接受的安全性和/或耐受性特征。具有不同作用机制(moa)的两种或更多种分子的组合可以为改善治疗功效和响应率提供额外的益处。
技术实现要素：
基于fxr激动作用与泛胱天蛋白酶抑制的互补分子机制并且基于临床前数据和临床数据，当将fxr激动剂与泛胱天蛋白酶抑制剂组合时，预计产生协同药理学效应。泛胱天蛋白酶抑制的抗炎性效应及抗细胞凋亡效应与fxr激动作用的抗脂肪变性、抗胆汁郁积及抗纤维变性效应的组合彼此互补，并在nash、任何病因的肝纤维化、硬化和/或门静脉高血压的情形中产生药理学协同作用。
本发明提供了用于同时地、顺序地或单独地施用的药物组合，其包含(单独地或一起)fxr激动剂和一种或多种另外的治疗剂。本发明还提供了包含这类组合的药物。
根据本发明，fxr激动剂是非甾体fxr激动剂和/或是非胆汁酸衍生的fxr激动剂，例如是非胆汁酸衍生的fxr激动剂。
在本发明的一些方面，fxr激动剂是2-[3-({5-环丙基-3-[2-(三氟甲氧基)苯基]-1，2-噁唑-4-基}甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基]-4-氟-1，3-苯并噻唑-6-甲酸(化合物a)、4-((n-苄基-8-氯-1-甲基-1，4-二氢苯并吡喃并[4，3-c]吡唑-3-甲酰胺基)甲基)苯甲酸(化合物b)、其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、酯和/或氨基酸缀合物。
在本发明的一些方面，另外的治疗剂是胱天蛋白酶抑制剂，如以下各项中所述：linton，currenttopicsinmedicinalchemistry[药物化学的前沿课题]，(2005)5∶1-20；以及linton等人，j.med.chem.[医药化学杂志]，2005，11，295-322295；美国专利号7,351,702；7,410,956；7,443,790；7,553,852；7,652,153；7,612,091；7,807,659；7，857,712；7,960,415；8,071，618；7,074,782；7,053,057；6,689,784；6,632,962；6,559,304；6,201，118；6,800,619；6，197,750；6,544,951；6,790,989；7,053,056；7，183,260；7,692,038；以及国际申请号wo2006/017295；wo2005/021516；wo04/002961；wo02/085899；wo02/094263和wo01/094351。这些参考文献的内容通过引用以其整体并入本文中。
在一些方面，另外的治疗剂是胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生(3-[2-[(2-叔丁基-苯基氨基草酰基)-氨基]-丙酰基氨基]-4-氧代-5-(2，3，5，6-四氟-苯氧基)-戊酸)或其药学上可接受的衍生物，例如其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药和/或酯。在一个实施例中，药学上可接受的衍生物是药学上可接受的盐。
基于临床前数据和临床数据，根据本发明的药物组合，例如含有化合物a和恩利卡生的药物组合显示肝发炎及肝细胞凋亡的标记物迅速且持续减少。含有化合物a及恩利卡生的药物组合显示3个月后meld＞15的受试者中肝功能测试(包括临床代偿失调的替代指标(meld和cpt))有改善。在与安慰剂组中的患者相比时，含有化合物a和恩利卡生的药物组合在患有纤维化(f1-f3)的患者中显示至少1个阶段的纤维化改善。
本发明还提供了用于同时地、顺序地或单独地施用的药物组合，其包含(单独地或一起)(i)fxr激动剂，例如非甾体fxr激动剂，和(ii)另外的治疗剂，例如胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生、或其药学上可接受的盐、前药或溶剂化物。
可以一起、相继地或单独地以一个组合的单位剂型或以两个单独地单位剂型施用组分(i)和(ii)。该单位剂型还可以为固定组合。
在一些方面，该药物组合是固定组合，例如包含(i)fxr激动剂，例如非甾体fxr激动剂，和(ii)另外的治疗剂，例如胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生(如本文所定义的，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)的固定组合。
在一些方面，提供了该fxr激动剂和另外的治疗剂用于治疗纤维化疾病或障碍，例如肝脏疾病或障碍，例如慢性肝脏疾病或障碍，例如，选自下组的疾病或障碍，该组由以下组成：胆汁郁积、肝内胆汁郁积、雌激素诱发型胆汁郁积、药物诱发型胆汁郁积、妊娠胆汁郁积、肠外营养相关胆汁郁积、原发性胆汁性肝硬化(pbc)、原发性硬化性胆管炎(psc)、进行性家族性胆汁郁积(pfic)、非酒精性脂肪肝病(nafld)、非酒精性脂肪肝炎(nash)、药物诱发型胆管损伤、胆结石、肝硬化、酒精诱发型肝硬化、囊性纤维化相关肝病(cfld)、胆管阻塞、胆石病、肝纤维化、肾纤维化、血脂异常、动脉粥样硬化、糖尿病、糖尿病性肾病、结肠炎、新生儿黄疸、核黄疸的预防、静脉闭塞性病、门静脉高压症、代谢综合征、高胆固醇血症、肠内细菌过度生长、勃起功能障碍、由任何上述疾病或由传染性肝炎引起的肝脏进行性纤维化；例如，nafld、nash、肝纤维化、肝脂肪变性或pbc。
在本发明的其他方面，提供了该fxr激动剂和另外的治疗剂，用于减慢、阻止或减低硬化疾病或障碍(例如慢性肝脏疾病或障碍，例如nafld、nash、肝纤维化和pbc)的发展。
在又另一个方面，提供了该fxr激动剂和另外的治疗剂，用于预防或延迟慢性肝脏疾病或障碍进展成更晚期或更严重的病症，例如用于预防或延迟选自下组的慢性肝脏疾病或障碍的进展，该组由以下组成：nafld、nash、肝纤维化和pbc。
在一些方面，该fxr激动剂为2-[3-({5-环丙基-3-[2-(三氟甲氧基)苯基]-1，2-噁唑-4-基}甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基]-4-氟-1，3-苯并噻唑-6-甲酸(化合物a)、其立体异构体、对映异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、酯、和/或其氨基酸缀合物。
在其他方面，该fxr激动剂为4-((n-苄基-8-氯-1-甲基-1，4-二氢苯并吡喃并[4，3-c]吡唑-3-甲酰胺基)甲基)苯甲酸(化合物b)、其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、酯、和/或其氨基酸缀合物。
本发明还涉及药物组合，其包含：(i)fxr激动剂，例如非甾体fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物a，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐或溶剂化物)；或化合物b(如本文所定义的，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐或溶剂化物)；和(ii)胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生(如上文所定义的，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐或溶剂化物)，任选地存在药学上可接受的载体。
例如，提供了药物组合，其包含：(i)非甾体fxr激动剂，例如化合物a、化合物b、其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、酯、和/或其氨基酸缀合物，和(ii)恩利卡生，呈游离形式或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、和/或酯，以及(iii)药学上可接受的载体。在本发明的一些实施例中，这样的药物组合是组合的单位剂型。
在一些方面，提供了药物组合，其包含：(i)非甾体fxr激动剂，和(ii)至少一种另外的治疗剂，例如恩利卡生、其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、和/或酯，所述药物组合的量为在联合治疗上有效地用于治疗或预防纤维化或硬化疾病或障碍(例如肝脏疾病或障碍，例如nafld、nash、肝纤维化或pbc)的量。
在某些方面，本文所述的胱天蛋白酶抑制剂在口服施用0.001-1000mg/kg后在肝脏疾病模型中具有效能。在某些实施例中，本文所述的化合物在口服施用0.01-100mg/kg后在肝脏疾病模型中具有效能。
此外，本发明涉及这样的药物组合，例如固定或自由组合，例如组合的单位剂量，用于治疗、预防或改善纤维化或硬化疾病或障碍，例如肝脏疾病或障碍。在一些方面，此类方法包括向有需要的受试者施用该fxr激动剂和另外的治疗剂(例如胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生(呈游离形式或呈其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、和/或酯))，每一者的量是联合治疗有效的量。
提供了非胆汁酸衍生的fxr激动剂与一或多种另外的治疗剂(例如胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生(或其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、和/或酯))的组合(例如固定组合或自由组合)的用途，其用于制造用于预防或治疗肝脏疾病或障碍(例如，选自下组的肝脏疾病或障碍，该组由以下组成：nafld、nash、肝脂肪变性、肝纤维化、肝硬化、pbc)的药物。
还提供了用于预防、延迟或治疗肝脏疾病或障碍的药物组合，其中该组合包含(i)非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物a、化合物b(例如，呈游离形式、或其药学上可接受的盐或溶剂化物))，和(ii)胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生(呈游离形式或呈其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、和/或酯)。
在本发明的一些方面，提供了用于预防、延迟或治疗慢性肝脏疾病或障碍(例如，其选自下组，该组由以下组成：脂肪变性、nash、纤维化和硬化，例如脂肪变性、nash和/或纤维化)的药物组合，其中该组合包含(i)非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物a、化合物b，例如呈游离形式、或其药学上可接受的盐或溶剂化物)，和(ii)胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生(呈游离形式或呈其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药和/或酯，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)。
进一步提供了用于预防、延迟或治疗nash的药物组合，其包含：(i)非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物a或化合物b，例如呈游离形式或其药学上可接受的盐或溶剂化物)，和(ii)胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生(呈游离形式或呈其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、和/或酯，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)。
此外，还提供了用于预防、延迟或治疗肝纤维化的药物组合，其包含：(i)非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物a或化合物b，例如呈游离形式或其药学上可接受的盐或溶剂化物)，和(ii)胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生(呈游离形式或呈其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、和/或酯，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)。
还提供了用于预防、延迟或治疗肝脂肪变性的药物组合，其包含：(i)非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物a或化合物b，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)，和(ii)胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生(呈游离形式或呈其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、和/或酯，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)。
进一步提供了用于预防、延迟或治疗肝细胞气球样变性的药物组合，其包含：(i)非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物a或化合物b，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐或溶剂化物)，和(ii)胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生(呈游离形式或呈其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、和/或酯，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)。
还提供了用于预防、延迟或治疗pbc的药物组合，其包含：(i)非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物a或化合物b，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)，和(ii)胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生(呈游离形式或呈其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、和/或酯，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)。
本发明的另一方面是用于治疗、延迟或预防纤维化疾病或障碍(例如肝脏疾病或障碍，例如慢性肝脏疾病或障碍)的方法，该方法包括向需要此类治疗的受试者施用治疗有效量的以下组合，该组合具有：(i)非胆汁酸衍生的fxr激动剂，例如，如上文所定义的化合物a或化合物b(例如，呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)，和(ii)如本文所定义的另外的治疗剂，例如胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生(呈游离形式或呈其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、和/或酯，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)，以及药学上可接受的载体。治疗有效量的本发明的组合的每种组分可以同时地或顺序地以任意顺序施用。
在其他实施例中，该另外的治疗剂是胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生(呈游离形式或呈其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、和/或酯，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)。在一些实施例中，提供了新的给药方案，用于预防、延迟或治疗纤维化或硬化疾病或障碍，例如肝脏疾病或障碍，例如，选自下组的慢性肝脏疾病或障碍，该组由以下组成：nafld、nash、肝纤维化、肝硬化和pbc，例如nash、肝纤维化或pbc。在一些实施例中，提供了新的给药方案，用于预防、延迟或治疗肾纤维化。
还提供了药物组合，其包含(单独地或一起)：(i)如本文所定义的化合物a(例如，呈游离形式或其药学上可接受的盐)；和(ii)胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生(如本文所定义的，例如，呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)，例如用于同时或顺序施用，其中化合物a与胱天蛋白酶抑制剂的比率(μg/mg(微克/毫克))为从约3∶100至约100∶100，例如从约5∶100至约40∶100，例如约3∶100，例如约60∶100。特别地，提供了药物组合，其包含(单独地或一起)：(i)呈游离形式或其药学上可接受的盐或溶剂化物的化合物a、和恩利卡生(如上文所定义的)，所述药物组合特别地包含化合物a，其中化合物a与恩利卡生的比率(μg/mg(微克/毫克))为从约3∶100至约100∶100；例如从约5∶100至约40∶100；例如约3∶100，例如约60：100。
在其他实施例中，提供了药物组合，其包含(单独地或一起)：(i)如本文所定义的化合物b，例如，呈游离形式或其药学上可接受的盐；和(ii)胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生(如本文所定义的，例如，呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)，用于同时或顺序施用，其中化合物b与胱天蛋白酶抑制剂例如恩利卡生(如上文所定义的)的比率(mg/mg)为约0.5∶1至约10∶1、例如约0.5∶1至约8∶1、例如约0.5∶1至约5∶1；约0.5∶1至约3∶1，例如约1∶1至约5∶1、例如约1∶1至约3∶1、例如约1∶1至约2∶1、例如约1∶1。特别地，提供了药物组合，其包含(单独地或一起)：(i)如本文所定义的化合物a，例如，呈游离形式或其药学上可接受的盐；和恩利卡生(如上文所定义的)，例如，呈游离形式或呈其药学上可接受的盐；所述药物组合特别地包含化合物a，其中化合物a与恩利卡生的比率(μg/mg(微克/毫克))为从约o.5∶1至约10∶1、例如约0.5：1至约8∶1、例如约0.5∶1至约5∶1；约0.5∶1至约3∶1、例如约1∶1至约5∶1、例如约1∶1至约3：1、例如约1∶1至约2∶1、例如约1∶1。
本文描述了本发明的各种(列举的)实施例。应认识到，每个实施例中指定的特征可以与其他指定特征组合以提供本发明的另外实施例。
具体实施方式
定义
出于解释本说明书的目的，将应用下面的定义，并且在适宜的情况下，以单数形式使用的术语还包括复数形式，并且反之亦然。
如本文所用，除非上下文另有说明，否则术语“约”相对于数值x，意指+/-10％。
如本文所用，术语“氨基酸缀合物”是指化合物a或化合物b与任何合适的氨基酸的缀合物。优选地，化合物a或化合物b的此类合适的氨基酸缀合物将具有在胆汁或肠液中完整性增强的附加优点。适合的氨基酸包括但不限于甘氨酸、牛磺酸和酰基葡萄糖醛酸苷。因此，本发明涵盖化合物a或化合物b的甘氨酸、牛磺酸和酰基葡萄糖醛酸苷缀合物。
如本文所用，术语“fxr激动剂”是指直接结合并且上调fxr的活性的药剂。
如本文所用，术语“盐”是指本发明化合物的酸加成盐或碱加成盐。“盐”特别包括“药学上可接受的盐”。
如本文所用，术语“药学上可接受的”意指并不干扰一种或多种活性成分的生物活性的有效性的无毒性材料。
如本文所用，术语“氨基酸缀合物”是指化合物(例如，化合物a或化合物b)与任何合适的氨基酸的缀合物。优选地，化合物a或化合物b的此类合适的氨基酸缀合物将具有在胆汁或肠液中完整性增强的附加优点。合适的氨基酸包括但不限于甘氨酸、牛磺酸和酰基葡萄糖醛酸苷。因此，本发明涵盖化合物a或化合物b的甘氨酸、牛磺酸和酰基葡萄糖醛酸苷缀合物。
如本文所用，术语“前药”是指在体内转化成本发明化合物的化合物。前药是活性的或非活性的。在将前药施用给受试者后，前药通过体内生理作用(例如水解、代谢等)被化学改性成本发明的化合物。制备和使用前药所涉及的适用性和技术是本领域技术人员所熟知的。合适的前药通常是药学上可接受的酯类衍生物。
如本文所用，术语“患者”或“受试者”是指人。
如本文所用，术语“治疗”任何疾病或障碍在一个实施例中是指改善疾病或障碍(即减缓或阻止或减少疾病或其至少一种临床症状或病理特征的发展)。在另一个实施例中，“治疗”是指减轻或改善疾病的至少一种身体参数或病理特征，例如，包括不能被受试者辨别的那些。在又另一个实施例中，“治疗”是指在身体上(例如，至少一种可辨别或不可辨别的症状的稳定化)或在生理上(例如，身体参数的稳定化)或在这两个方面调节疾病或障碍。在又另一个实施例中，“治疗”是指预防或延迟疾病或障碍，或与其相关联的至少一种症状或病理特征的发作或发展或进展。在又另一个实施例中，“治疗”是指预防或延迟疾病进展至更晚期或更严重的病症，例如肝硬化；或预防或延迟肝移植的需求。
例如，治疗nash可以指改善、减轻或调节与nash相关联的至少一种症状或病理特征；例如肝性脂肪变性、肝细胞气球样变性、肝脏炎症和纤维化；例如可以指减缓进展，减少或终止与nash相关联的至少一种症状或病理特征，例如肝性脂肪变性、肝细胞气球样变性、肝脏炎症和纤维化。还可以指预防或延迟肝硬化或肝移植的需求。
如本文所用，术语“治疗有效量”是指本发明的化合物(例如fxr激动剂，例如，如本文所定义的化合物a或化合物b)的量，该量足以实现所述的作用。因此，fxr激动剂，例如化合物a或化合物b(如上文所定义)的用于治疗或预防如上文所定义的肝脏疾病或障碍的fxr激动剂(例如，如上文所定义的化合物a或化合物b)的治疗有效量为足以治疗或预防这类疾病或障碍的量。
“治疗方案”意指疾病的治疗模式，例如在疾病或障碍治疗期间使用的给药模式。
如本文所用，如果受试者将会在生物学上、医学上或生活质量方面受益于此类治疗，则此受试者是对此类治疗“有需要的”。
如本文所用，术语“肝脏疾病或障碍”涵盖以下的一种、多种或全部：非酒精性脂肪性肝脏疾病(nafld)、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、药物诱发型胆管损伤、胆结石、肝硬化、酒精诱发型肝硬化、囊性纤维化相关肝脏疾病(cfld)、胆管阻塞、胆石症或肝纤维化。
如本文所用，术语nafld可以涵盖以下疾病的不同阶段：肝脂肪变性、nash、纤维化和硬化。
本文所用，术语nash可涵盖脂肪变性、肝细胞气球样变性和小叶炎症。
如本文所定义，“组合”是指一个单位剂型(例如，胶囊、片剂或药囊)的固定组合、自由(即非固定)组合、或用于组合施用的部件套组，其中本发明的fxr激动剂和一种或多种“组合伴侣”(即另一治疗剂，例如像恩利卡生或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或也称为“共药剂”)可以在同一时间独立地或在时间间隔内单独地施用，特别是在这些时间间隔允许组合伴侣显示合作作用(例如协同作用)的情况下。
如本文所用的术语“共同施用”或“组合施用”等意在涵盖向有需要的单一受试者(例如患者)施用该另外的治疗剂，并且该另外的治疗剂旨在包括治疗方案，其中不需要通过相同的施用途径和/或在相同时间施用该fxr激动剂和另外的治疗剂。本发明组合的每种组分可以同时地或顺序地以任意顺序施用。共同施用包括同时、顺序、重叠、间隔、连续施用及其任何组合。
如本文所用的术语“药物组合”是指由一种以上活性成分组合(例如混合)产生的药物组合物并且包括活性成分的固定组合和自由组合。
术语“固定组合”意指活性成分，即i)非胆汁酸衍生的fxr激动剂，例如化合物a或化合物b(呈游离形式或例如呈其药学上可接受的盐或氨基酸缀合物)和ii)另外的治疗剂(例如恩利卡生)，二者都同时地以单个实体或剂量的形式施用于患者。
术语“自由组合”意指将如本文所定义的活性成分以不同的实体同时、并行或无特定时间限制地顺序地施用于患者，其中此类施用在患者体内提供了这两种化合物的治疗有效的水平。
“同时施用”意指在同一天施用该fxr激动剂和另外的治疗剂(例如恩利卡生)。两种活性成分可以同时施用(对于固定或自由组合)或一次施用一种(对于自由组合)。
根据本发明，“顺序施用”可意指在两天或更多天的连续共同施用期间，在任一给定日仅施用该fxr激动剂和另外的治疗剂(例如恩利卡生)中的一种。
“重叠施用”意指在两天或更多天的连续共同施用期间，至少一天进行同时施用以及至少一天仅施用fxr激动剂和另外的治疗剂(例如恩利卡生)中的一种。
“间隔施用”是指具有至少一个空日的共同施用的时期，即具有至少一天既不施用该fxr激动剂也不施用该另外的治疗剂(例如恩利卡生)。
所谓“连续施用”意指没有任何空白日的共同施用时段。如上所述，连续施用可以是同时的、顺序的或重叠的。
fxr激动剂
根据本发明，fxr激动剂可选自下组，该组由以下组成：化合物a(如上文所定义的，例如包括其立体异构体、对映异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、酯和氨基酸缀合物)，化合物b(如上文所述的，例如包括其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、酯和氨基酸缀合物)，gs-9676，gs-9674(这两者都是来自吉利德公司(gilead)的非胆汁酸衍生的fxr激动剂、或其药学上可接受的盐)，px102/104。
在本发明的一个实施例中，该fxr激动剂可以是非胆汁酸衍生的fxr激动剂，例如非甾体fxr激动剂。例如，其可选自下组，该组由以下组成：化合物a(如上文所定义的，例如，呈游离形式或其药学上可接受的盐)，化合物b(如上文所定义的，例如，呈游离形式或其药学上可接受的盐，例如葡甲胺盐)，gs-9676及其混合物。
化合物a意指2-[3-({5-环丙基-3-[2-(三氟甲氧基)苯基]-1，2-噁唑-4-基}甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基]-4-氟-1，3-苯并噻唑-6-甲酸。化合物a可以呈游离形式或呈其药学上可接受的盐或氨基酸缀合物；例如甘氨酸缀合物、牛磺酸缀合物或酰基葡萄糖醛酸苷缀合物。化合物a还可以包涵其立体异构体、对映异构体。化合物a还能以多晶型物、溶剂化物和/或水合物的形式的前药、酯施用。
化合物b为4-((n-苄基-8-氯-1-甲基-1，4-二氢苯并吡喃并[4，3-c]吡唑-3-甲酰胺基)甲基)苯甲酸。化合物b可以呈游离形式或呈其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药、酯、和/或氨基酸缀合物。
化合物b可以是4-((n-苄基-8-氯-1-甲基-1，4-二氢苯并吡喃并[4，3-c]吡唑-3-甲酰胺基)甲基)苯甲酸葡甲胺盐。在一个实施例中，化合物b为4-((n-苄基-8-氯-1-甲基-1，4-二氢苯并吡喃并[4，3-c]吡唑-3-甲酰胺基)甲基)苯甲酸葡甲胺盐a型或b型。在另一个实施例中，化合物b为4-((n-苄基-8-氯-1-甲基-1，4-二氢苯并吡喃并[4，3-c]吡唑-3-甲酰胺基)甲基)苯甲酸葡甲胺一水合物。在又另一个实施例中，化合物b为4-((n-苄基-8-氯-1-甲基-1，4-二氢苯并吡喃并[4，3-c]吡唑-3-甲酰胺基)甲基)苯甲酸葡甲胺一水合物ha型或一水合物hb型。
本文给出的任何化学式还旨在表示这些化合物的未标记的形式以及同位素标记的形式。
组合伴侣
根据本发明，本发明的组合伴侣可以是胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生(呈游离形式或呈其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药和/或酯)。
施用模式
可以将本发明的药物组合物配制为与其预期施用途径相容(例如口服组合物通常包括惰性稀释剂或可食用载体)。施用途径的其他非限制性实例包括肠胃外(例如，静脉内)、皮内、皮下、口服(例如，吸入)、经皮(局部)、跨粘膜和直肠施用。与每种预期途径相容的药物组合物是本领域熟知的。
疾病
如上文所定义，纤维化或硬化疾病或障碍可以是肝脏疾病或障碍(例如，如下文所定义的)或肾纤维化。
如上文所定义，肝脏疾病或障碍可以是胆汁淤积、肝内胆汁淤积、雌激素诱发型胆汁淤积、药物诱发型胆汁淤积、妊娠胆汁淤积、胃肠外营养相关性胆汁淤积、原发性胆汁性肝硬化(pbc)、原发性硬化性胆管炎(psc)、进行性家族性胆汁淤积(pfic)、非酒精性脂肪性肝脏疾病(nafld)、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、药物诱发型胆管损伤、胆结石、肝硬化、酒精诱发型肝硬化、囊性纤维化相关肝脏疾病(cfld)、胆管阻塞、胆石症、肝纤维化、肾纤维化、血脂异常、动脉粥样硬化、糖尿病、糖尿病肾病、结肠炎、新生儿黄疸、预防核黄疸、静脉闭塞性疾病、门静脉高血压、代谢综合征、高胆固醇血症、肠道细菌过度生长、勃起功能障碍，由上述任何疾病或传染性肝炎引起的肝脏进行性纤维化。
肝脏疾病或障碍也可以指肝移植。
在本发明的一个实施例中，(如本文所定义的)药物组合用于治疗或预防纤维化疾病或障碍，例如肝脏疾病或障碍，例如慢性肝脏疾病，例如选自下组的肝脏疾病或障碍，该组由以下组成：pbc、nafld、nash、药物诱发型胆管损伤、胆结石、肝硬化、酒精诱发型肝硬化、囊性纤维化相关肝脏疾病(cfld)、胆管阻塞、胆石症和肝纤维化。在本发明的一个实施例中，(如本文所定义的)药物组合用于治疗或预防纤维化，例如肾纤维化或肝纤维化。
根据本发明的一个实施例，肝脏疾病或障碍是指nafld，例如nafld的任何阶段，例如脂肪变性、nash、纤维化和硬化中的任一种。
在本发明的一个实施例中，提供本发明的药物组合，用于改善肝纤维化而不使脂肪性肝炎恶化。
在本发明的另一个实施例中，提供本发明的药物组合，用于在不恶化的情况下获得脂肪性肝炎的完全消退，例如肝纤维化改善。
在本发明的另一个实施例中，提供本发明的药物组合，用于预防或治疗脂肪性肝炎和肝纤维化。
在本发明的在另一个实施例中，提供本发明的药物组合，用于减轻nas评分的至少一个特征，即肝性脂肪变性、肝脏炎症和肝细胞气球样变性之一；例如nas评分的至少两个特征，例如肝性脂肪变性和肝脏炎症，或肝性脂肪变性和肝细胞气球样变性，或肝细胞气球样变性和肝脏炎症。
在本发明的另一个实施例中，提供本发明的药物组合，用于减轻nas评分和肝纤维化的至少一个或两个特征，例如用于减轻肝脏炎症和肝纤维化，或肝性脂肪变性和肝纤维化或肝细胞气球样变性和肝纤维化。
在本发明的又另一个实施例中，提供了药物组合，用于治疗或预防阶段3纤维化至阶段1纤维化，例如，阶段3和/或阶段2和/或阶段1纤维化。
患者
根据本发明，接受本发明组合的患者可能受到影响或有纤维化疾病或障碍的风险，例如肝脏疾病或障碍，例如上文所定义。
在本发明的一些实施例中，患者是肥胖的或超重的。
在本发明的其他实施例中，患者可为糖尿病患者，例如可能患有2型糖尿病。患者可能有高血压和/或高血胆固醇水平。
给药方案
根据患者的一般状况、目标疾病或障碍以及此类疾病或障碍的阶段，给药方案，即药物组合的每种组分的施用剂量和/或频率可以变化。
本发明的fxr激动剂和另外的治疗剂(例如，呈固定剂量组合)的给药频率可以是每天一次、每天两次、每天三次、每天四次、每天五次、每天六次、或每两天一次、每三天一次或每周一次，例如每天一次。
根据本发明，fxr激动剂和另外的治疗剂可以不遵循相同的方案施用，即可以不以相同的频率和/或持续时间和/或剂量(例如相同的频率和/或剂量)施用。例如对于自由组合而言可能是这种情况。作为一个实例，该fxr激动剂可以每天施用一次，并且该另外的治疗剂(例如胱天蛋白酶抑制剂，例如xxxx(呈游离形式或呈其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药和/或酯))可以每天两次或交互地施用。
在一个实施例中，例如，在同时施用的情况下，每天一至四次施用该fxr激动剂系，且每天一至四次施用该另外的治疗剂，例如恩利卡生(呈游离形式或呈其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药和/或酯)。
在本发明的一个实施例中，共同施用进行至少一周、至少一个月、至少6周、至少三个月、至少6个月、至少一年。例如，本发明的药物组合向患者终生施用。施用频率和/或fxr激动剂和另外的治疗剂的剂量可以在整个施用期间变化。
在治疗期间，可以存在一个或多个以下时间段(例如天)，在所述时间段期间，既不向患者施用本发明的fxr激动剂也不施用另外的治疗剂(例如胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生(呈游离形式或呈其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药和/或酯)(即，没有组合治疗的时间段，例如天)，或在所述时间段期间，仅将fxr激动剂或另外的治疗剂中的一种药物施用于患者。
在顺序共同施用的情况下，fxr激动剂可以在另外的治疗剂之前施用，或交互地施用。施用fxr激动剂和另外的治疗剂之间的时间间隔可以从几分钟到几天不等，例如几分钟，例如几小时，例如1天到1周。
给药频率将尤其取决于治疗方案的阶段。
根据本发明，该非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如化合物a(如上文所定义的，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)以约3μg至约100μg，例如约5μg至约100μg、例如约10μg至约100μg、例如约20μg至100μg、例如约30μg至约90μg、例如约40μg至约60μg的剂量口服递送而施用。此类剂量可以用于口服施用。此类剂量可以用于每日施用、或每日两次施用或每两天一次施用，例如用于每日口服施用、每日两次口服施用或每两天一次口服施用。
在一些方面，将与另外的治疗剂(例如，恩利卡生(呈游离形式或呈其药学上可接受的盐、溶剂化物、前药和/或酯))一起施用的非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如化合物a(如上文所定义的，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)以约10μg、约25μg、约30μg、约60μg或约90μg的剂量施用。此类剂量可以用于每日一次或每日两次(例如每日一次)的施用。此类剂量特别适合fxr激动剂(例如化合物a(呈游离形式或其药学上可接受的盐))的口服施用。
在一些实施例中，该非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物a(例如，呈游离形式或其药学上可接受的盐))以在约20μg至约60μg范围内的口服递送(例如约30μg至约60μg口服递送)的剂量施用。此类剂量可以用于每日的施用(每日剂量)、或每日两次的施用或每两天一次的施用，例如用于每日的施用。
在一些实施例中，该非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物a(例如呈游离形式或其药学上可接受的盐))以约10μg至60μg口服递送、例如约10μg至约40μg口服递送、例如约20μg至约40μg口服递送的剂量施用。此类剂量可以用于每日的施用(每日剂量)、或每日两次的施用或每两天一次的施用，例如用于每日的施用。
在一些实施例中，该非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物a(例如，呈游离形式或其药学上可接受的盐))以在约5μg至约60μg范围内的口服递送(例如约5μg至约40μg口服递送)的剂量施用。此类剂量可以用于每日的施用(每日剂量)、或每日两次的施用或每两天一次的施用，例如用于每日的施用。
在其他实施例中，该非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物a(例如，呈游离形式或其药学上可接受的盐))以在约3μg至约40μg范围内的口服递送(例如约3μg至约30μg口服递送)的剂量施用。此类剂量可以用于每日的施用(每日剂量)、或每日两次的施用或每两天一次的施用，例如用于每日的施用。
在一些实施例中，该非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物a(例如呈游离形式或其药学上可接受的盐))以约3μg口服递送、约4μg口服递送、约5μg口服递送、约10μg口服递送、约20μg口服递送、约25μg口服递送、约30μg口服递送、约40μg口服递送、约60μg口服递送或约90μg口服递送的剂量施用。此类剂量可以用于口服施用。
在一些实施例中，该非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物a(例如呈游离形式或其药学上可接受的盐))以在约3μg/天至约100μg/天、例如约5μg/天至约100μg/天、例如约10μg/天至约100μg/天、例如约20μg/天至100μg/天、例如约30μg/天至约90μg/天、例如约40μg/天至约60μg/天、例如约10μg/天至60μg/天、例如约10μg/天至约40μg/天、例如约20μg/天至40μg/天、例如约20μg/天至约60μg/天、例如约30μg/天至约60μg/天、例如约5μg/天至60μg/天、例如约5μg/天至40μg/天、例如约3μg/天至约40μg/天、约3μg/天至约30μg/天范围内的剂量施用。
在一些实施例中，该非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物a(例如呈游离形式或其药学上可接受的盐))以约3μg/天、约4μg/天、约5μg/天、约10μg/天、约25μg/天、约30μg/天、约60μg/天或约90μg/天的剂量施用。此类方案可以口服递送。
在一些实施例中，该非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物a(例如呈游离形式或其药学上可接受的盐))以约3μg每日两次、约4μg每日两次、约5μg每日两次、约10μg每日两次、约25μg每日两次、约30μg每日两次的剂量施用。此类方案可以口服递送。
在一些实施例中，该非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如上文定义的化合物a(例如呈游离形式或其药学上可接受的盐))以每两天一次约5μg、每两天一次约10μg、每两天一次约40μg、每两天一次约60μg的剂量施用。此类方案可以口服递送。
此类剂量和方案特别适用于游离形式的化合物a。
在一些实施例中，该fxr激动剂(例如非胆汁酸衍生的fxr激动剂，例如，如本文所定义的化合物a(例如呈游离形式或其药学上可接受的盐))以约3μg或约5μg的每日剂量施用。
在一些实施例中，该fxr激动剂(例如非胆汁酸衍生的fxr激动剂，例如，如本文所定义的化合物a(例如呈游离形式或其药学上可接受的盐))以约10μg的每日剂量施用。
在一些实施例中，该fxr激动剂(例如非胆汁酸衍生的fxr激动剂，例如，如本文所定义的化合物a(例如呈游离形式或其药学上可接受的盐))以约20μg或25μg的每日剂量施用。
在一些实施例中，该fxr激动剂(例如非胆汁酸衍生的fxr激动剂，例如，如本文所定义的化合物a(例如呈游离形式或其药学上可接受的盐))以约30μg的每日剂量施用。
在一些实施例中，该fxr激动剂(例如非胆汁酸衍生的fxr激动剂，例如，如本文所定义的化合物a(例如呈游离形式或其药学上可接受的盐))以约40μg的每日剂量施用。
在一些实施例中，该fxr激动剂(例如非胆汁酸衍生的fxr激动剂，例如，如本文所定义的化合物a(例如呈游离形式或其药学上可接受的盐))以约60μg的每日剂量施用。
在一些实施例中，该fxr激动剂(例如非胆汁酸衍生的fxr激动剂，例如，如本文所定义的化合物a(例如呈游离形式或其药学上可接受的盐))以一种方式施用，该方式提供fxr激动剂的至少约0.2ng/ml(例如，在约0.2至约2.0ng/ml、例如约0.2至约1.0ng/ml、例如约0.2至约0.5ng/ml范围内)的cmax。
可替代地，施用剂量能以mg/m2/天为单位表示，其中可以使用患者身高和体重使用各种可用公式计算患者体表面积(bsa)，单位为m2。若给出患者的身高和体重，可以直接从一个单位转换为另一个单位。
根据本发明，化合物b(如上文所定义的，例如，呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)以约50mg、例如约60mg、例如约80mg、例如约100mg、例如约120mg、例如约140mg、例如约150mg、例如约180mg、例如约200mg、例如约220mg、例如约250mg的剂量施用。此类剂量可以用于化合物b的口服施用。此类剂量可以用于化合物b的每日的施用，每日两次的施用，或每两天一次的施用，例如用于每日的口服施用。
在一些方面，该非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如化合物b(如上文所定义的，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐))以在约30mg至约250mg、例如约50mg至约250mg、例如约100mg至约250mg、例如约10mg至约200mg、例如约100mg至约200mg、例如约30mg至约200mg、例如约50mg至约200mg范围内的剂量施用。此类剂量可以用于化合物b的口服施用。此类剂量可以用于化合物b的每日的施用，每日两次的施用，或每两天一次的施用，例如用于每日的口服施用。这些剂量可以特别用于化合物b的葡甲胺盐。
在一些实施例中，该非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物b(例如呈游离形式或其药学上可接受的盐))以约50mg口服递送、约60mg口服递送、约80mg口服递送、约100mg口服递送、约120mg口服递送、约140mg口服递送、约150mg口服递送、约180mg口服递送、约200mg口服递送、约220mg口服递送、约250mg口服递送的剂量施用。此类剂量可特别适用于体重为约50kg至约120kg、例如约70kg到约100kg的患者。这些剂量可以特别用于化合物b的葡甲胺盐。
在一些实施例中，该非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物b(例如呈游离形式或其药学上可接受的盐))以在约50mg/天，例如约60mg/天、例如约80mg/天、例如约100mg/天、例如约120mg/天、例如约140mg/天、例如约150mg/天、例如约180mg/天、例如约200mg/天、例如约220mg/天、例如约250mg/天范围内的剂量施用。此类方案可以口服递送。这些剂量可以特别用于化合物b的葡甲胺盐。
在一些实施例中，该非胆汁酸衍生的fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物b(例如，呈游离形式或其药学上可接受的盐))以约50mg每日两次、约60mg每日两次、约80mg每日两次、约100mg每日两次、约140mg每日两次、约150mg每日两次、约180mg每日两次、约200mg每日两次、约220mg每日两次、约250mg每日两次的剂量施用。此类方案可以口服递送。这些剂量可以特别用于化合物b的葡甲胺盐。
根据本发明，胱天蛋白酶抑制剂(例如，恩利卡生)以约50mg，例如约60mg、例如约80mg、例如约100mg、例如约120mg、例如约140mg、例如约150mg、例如约180mg、例如约200mg、例如约220mg、例如约250mg的剂量施用。此类剂量可以用于胱天蛋白酶抑制剂(例如，恩利卡生)的口服施用。此类剂量可以用于胱天蛋白酶抑制剂(例如，恩利卡生)的每日的施用，每日两次的施用，或每两天一次的施用，例如用于每日的口服施用。
在一些方面，胱天蛋白酶抑制剂(例如，恩利卡生)按以下范围内的剂量施用：约1mg至约250mg、例如约10mg至约100mg、例如约50mg至约50mg、例如约5mg、例如约25mg、例如约50mg。此类剂量可以用于胱天蛋白酶抑制剂(例如，恩利卡生)的口服施用。此类剂量可以用于胱天蛋白酶抑制剂(例如，恩利卡生)的每日的施用，每日两次的施用，或每两天一次的施用，例如用于每日的口服施用。
在一些实施例中，胱天蛋白酶抑制剂(例如，恩利卡生)按以下剂量施用：口服递送约5mg、口服递送约10mg、口服递送约15mg、口服递送约20mg、口服递送约25mg、口服递送约30mg、口服递送约40mg、口服递送约50mg、口服递送约75mg、口服递送约100mg、口服递送约150mg、口服递送约200mg、例如约250mg/天。此类剂量可以特别适用于体重在50kg至120kg之间，例如在70kg至100kg之间的患者。
在一些实施例中，胱天蛋白酶抑制剂(例如，恩利卡生)按以下范围内的剂量施用：约1mg/天、例如约5mg/天、例如约10mg/天、例如约15mg/天、例如约20mg/天、例如约25mg/天、例如约30mg/天、例如约40mg/天、例如约50mg/天、例如约75mg/天、口服递送约100mg、口服递送约150mg、口服递送约200mg、例如约250mg/天。此类方案可以口服递送。此类方案可以特别适用于体重在50kg至120kg之间，例如在70kg至100kg之间的患者。
在本发明的一些实施例中，胱天蛋白酶抑制剂(例如，恩利卡生)按以下剂量施用：约5mg每日两次、约10mg每日两次、约15mg每日两次、约25mg每日两次、约50mg每日两次、约75mg每日两次、约100mg每日两次、约150mg每日两次、约200mg每日两次、约250mg每日两次。此类方案可以口服递送。
在本发明的一个实施例中，药物组合，例如固定或自由组合，其包含i)约100mg至约250mg的化合物b(如上文所定义，例如呈游离形式或作为其药学上可接受的盐，例如葡甲胺盐)；和ii)约5mg至约50mg的恩利卡生。例如，药物组合，例如固定或自由组合，其包含i)约100mg的化合物b(如上文所定义的，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)，和ii)约5mg、或10mg、或25mg、或50mg的恩利卡生。
还提供了药物组合，其包含(单独地或一起)：(i)如本文所定义的化合物a(例如，呈游离形式或其药学上可接受的盐)；和(ii)胱天蛋白酶抑制剂，例如，如本文所定义的恩利卡生(例如，呈游离形式或其药学上可接受的盐)，用于同时或顺序施用，其中化合物a与胱天蛋白酶抑制剂(例如，如上文所定义的恩利卡生)的比率(μg/mg(微克/毫克))为从约3∶100至约100：100；例如从约10：100至约100：100；例如从约20：100至约60∶100；例如从约10：100至约40：100；例如从约5：100至约60：100；例如从约5：100至约40：100。例如，化合物a与胱天蛋白酶抑制剂(例如，恩利卡生)的比率(μg/mg(微克/毫克))为约3∶100、约5：100、约10：100，例如约40∶100，例如约60：100。这些比率特别适用于包含化合物a和恩利卡生的药物组合。
在其他实施例中，提供了药物组合，其包含(单独地或一起)：(i)如本文所定义的化合物b(例如呈游离形式或其药学上可接受的盐，例如葡甲胺盐)；和(ii)胱天蛋白酶抑制剂，例如恩利卡生，用于同时或顺序施用，其中化合物b与胱天蛋白酶抑制剂(例如恩利卡生)的比率(mg/mg)为约0.5：1至约10：1、例如约0.5：1至约8∶1、例如约0.5：1至约5∶1；约0.5：1至约3∶1，例如约1∶1至约5∶1、例如约1∶1至约3∶1、例如约1∶1至约2：1、例如约1∶1。这些比率特别适用于包含化合物b(呈游离形式或其药学上可接受的盐，例如葡甲胺盐)和恩利卡生的药物组合。
在本发明的具体实施例中，将与另外的治疗剂(例如恩利卡生)一起施用的fxr激动剂(例如非胆汁酸衍生的fxr激动剂，例如，如本文所定义的化合物a或化合物b(例如，呈游离形式或其药学上可接受的盐，例如化合物b的葡甲胺盐))施用3个月的时间段至终身，例如6个月至终身，例如1年至终身，例如3个月的时间段至1年，例如6个月至终身，例如3个月、6个月或1年的时间段或终身。
用于治疗纤维化疾病或障碍(例如肝脏疾病或障碍)的试剂盒
因此，提供了药物试剂盒，这些试剂盒包含：a)fxr激动剂，例如非胆汁酸衍生的fxr激动剂，例如化合物a或化合物b(如上文所定义的，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐)；b)另外的治疗剂，例如胱天蛋白酶抑制剂(例如，恩利卡生)；和c)用于向受肝脏疾病或障碍影响的受试者施用该fxr激动剂(例如，如本文所定义的化合物a或b)和该另外的治疗剂(例如，恩利卡生)的装置；以及任选的d)使用说明书。
在本发明的一个实施例中，提供了组合包，其包含a)至少一种单个剂量的fxr激动剂，例如非胆汁酸衍生的fxr激动剂，例如，如本文所定义的化合物a或化合物b，例如呈游离形式或呈其药学上可接受的盐；和b)至少一个单独剂量的如上文所定义的另外的治疗剂，例如胱天蛋白酶抑制剂(例如，恩利卡生)。该组合包装还可以包括使用说明书。
实例
应理解，本文描述的实例和实施例仅用于举例说明目的，其各种修饰或改变对于本领域技术人员将是明了的，并包括在本申请的精神和范围内和所附权利要求书的范围内。出于所有目的，本文引用的所有出版物、专利、和专利申请都通过引用并入本文中。
与fxr激动剂组合的恩利卡生的体内效能研究在以下模型中进行：非酒精性脂肪性肝炎(例如，stam、hfd、mcd、cdaa或诸如此类)的啮齿类动物模型，和/或胆汁郁积或纤维化(例如，ccl4、taa、cbdl或诸如此类)的啮齿类动物模型，和/或门静脉高血压的啮齿类动物模型。
下文所述的研究例示了stamnash模型的实验细节。通过在出生后单次皮下注射200μg链脲菌素(美国西格玛公司(sigma，usa))并在4周龄(第28±2天)后任意饲喂高脂饮食(hfd，57％千卡脂肪，clea日本公司(cleajapan)，日本)，在怀孕14天的c57bl/6小鼠中建立nash。分别在治疗开始前一天，将6周龄(第42±2天)的12只nash小鼠随机分为六组，并将9周龄(第63±2天)的12只nash小鼠随机分为六组。向nash动物从6周龄至9周龄(研究1)或从9周龄至12周龄(研究2)给予下列任一种：媒介物、恩利卡生、fxr激动剂、或恩利卡生+fxr激动剂。研究1及研究2中均包括12只小鼠的非疾病媒介物-对照组。任意为这些动物饲喂正常饮食(ce-2；clea日本公司)。
收集pk样品并储存在≤-60℃下；在研究治疗最后一天，在最后一个早间剂量后5小时处死每只动物。
给药：
-恩利卡生：0.3mg/kg/天，口服，早上
-化合物a：0.01mg/kg或0.03mg/kg或0.06mg/kg或0.09mg/kg，口服，早上
-化合物b：3mg/kg至30mg/kg，口服，早上
-恩利卡生+fxr激动剂；各自如上给药。
测量：
每天测量或监测以下参数：个体体重、存活率、临床体征和小鼠行为。
药代动力学测量：按每种化合物每个时间点从4只动物收集pk样品。
治疗结束时的测量：在9周龄时(研究1)或在12周龄时(研究2)将小鼠处死。
采集以下样本：血浆、肝脏(在对每只小鼠进行最后一个早晨(am)给药后5小时，收集用于基因表达分析的新鲜肝脏样本)。测量器官重量。
进行以下生化测定：全血中的非空腹血糖，通过lifecheck(日本艾迪尔公司(eidia，japan))测定；血清alt，通过fujidri-chem(日本富士胶片公司(fujifilm，japan))测定；血清甘油三酯；血清mcp-1、rantes(ccl5)和mip-1α/mip-1定量，通过商业elisa试剂盒测定；肝脏甘油三酯，通过甘油三酯e检测试剂盒(日本和光(wako，japan))测定；肝脏羟脯氨酸定量，通过水解法测定；胱天蛋白酶-3、胱天蛋白酶-8活性，通过比色蛋白酶分析(chemiconintemational公司)测定。
肝脏切片的组织学分析；he染色和nafld活动度评分估算；天狼星红染色和纤维化面积(扣除和不扣除血管周围间隙)估算；油红染色和脂肪沉积面积估算；f4/80免疫组织化学染色和炎症面积估算；α-sma免疫组织化学染色和α-sma阳性面积的估算；tunel分析用于估算细胞凋亡。
使用来自肝脏的总rna进行基因表达分析。针对以下进行实时rt-pcr分析：mcp-1、mip-1α/β、rantes、emr1、cd68、tgf-β1、ccr2/5、timp-1、cola1a1、tnf、il-10、mmp-9、α-sma和cx3cr1/cx3cl1、shp(小异二聚体配偶体)、bsep(胆汁盐输出泵)、cyp8b1、casp3、casp8。
使用单因素方差分析(one-wayanova)进行统计学检验，接着视情况进行邓尼特检验(dunnett’stest)和曼-惠特尼检验(mann-whitneytest)，进行多组比较。p值＜0.05被认为具有统计学意义。