本发明属于药品、保健品
技术领域：
，具体涉及一种具有辅助治疗男性少弱精子症的辅酶q10制剂及其制备方法。
背景技术：
：辅酶q是一种存在于自然界的脂溶性醌类化合物，其结构与维生素k、维生素e及质体醌相似，是动植物细胞中线粒体的重要成分之一，作为细胞呼吸链上的一种递氢体，使细胞自身产生天然抗氧化剂、细胞代谢激活剂。各种生物均含有一种特有的辅酶q，人体中存在的是辅酶q10。辅酶q10(coq10)，又称“泛醌”，室温下为黄色或橙黄色结晶粉末，对光、热敏感，易溶于乙醇和油相溶剂中，它存在于人体内的每个细胞中，在促进精力供给的功能上是不可或缺的必需物质。辅酶q10借着刺激线粒体的制造来帮助产生能量，生成三磷酸腺苷(atp)来使身体产生动力，增加心肌的新陈代谢，提高心脏跳动的效率。此外，作为一种代谢活剂，辅酶q10能激活人体细胞，具有提高免疫力、增强抗氧化、减少疾病、延缓衰老、抗疲劳、提高人体精力和活力的功能，对于降血脂、减肥等也都具有较强的保健功效，目前已经广泛应用于保健品、化妆品、食品、饮料等行业。目前，在辅酶q10的服用人群中，有一定比例的人是为了补肾益精，但是由于辅酶q10仅能清除生殖系统中的活性氧，而不能增强生殖系统的生精功能，所以疗效并不显著；此外，辅酶q10现有产品多使用多种药物成分和化学添加剂进行生产，多种化学添加剂相互作用影响人体的吸收，导致消费人群口服与吸收的量不成正比，辅酶q10产品在人体中的吸收率和利用率均较低。因此，提供一种添加剂少、、原料简单易得、成本低廉、生物利用度高且具有补肾益精功效的辅酶q10制剂及其制备方法，是目前亟需解决的问题。技术实现要素：为了克服上述问题，本发明人进行了锐意研究，结果发现：在辅酶q10的制备过程中，选用天然抗氧化剂作为原料制备辅酶q10制剂，能够减少化学添加剂对人体的不利影响，提高辅酶q10的生物利用度，且在辅酶q10制剂中添加具有补肾益精及补气活血作用的活性中药组分，与辅酶q10协同增效，能够有效提升治疗男性少弱精子症的功效，从而完成了本发明。具体来说，本发明的第一个目的在于提供一种辅酶q10制剂，其由包括以下重量配比组分的原料制成：本发明的第二个目的在于提供一种上述辅酶q10制剂的制备方法，包括以下步骤：步骤1，任选地，制备活性中药组分；步骤2，按照重量比例分别称取各原料组分，先将除油脂以外的原料组分混合，再将混合组分加入油脂中，得到混合料液；步骤3，将步骤2所得混合料液制备得到辅酶q10制剂。本发明的第三个目的在于提供一种上述辅酶q10制剂在辅助治疗男性少弱精子症方面的应用。本发明所具有的有益效果包括：(1)本发明提供的辅酶q10制剂，原料组分中大部分为纯天然产品，化学添加剂少，生物活性高，产品质量稳定，适用于满足现代人对于健康饮食的要求；(2)本发明提供的辅酶q10制剂，原料广泛易得，选用葡萄籽提取物作为抗氧化剂，利用了其高抗氧化和清除自由基的能力，不仅降低了产品成本，也同时获得了良好的抗氧化效果；(3)本发明提供的辅酶q10制剂，添加了活性中药组分，充分发挥了辅酶q10与活性中药组分的协同增效作用，大大提高了辅酶q10的生物利用度，也增加了活性中药组分的功效；(4)本发明提供的辅酶q10制剂，能够提高人体精力和活力，对于辅助治疗男性少弱精子症具有显著的功效，前景良好；(5)本发明提供的辅酶q10制剂的制备方法，步骤简单，条件易控，制得的制剂稳定性高，不易受温度和光照影响。附图说明图1示出了实验例3中所述的辅酶q10的血药浓度-时间曲线。具体实施方式下面通过优选实施方式和实施例对本发明进一步详细说明。通过这些说明，本发明的特点和优点将变得更为清楚明确。本发明的第一方面，提供了一种辅酶q10制剂，该制剂由包括以下重量配比组分的原料制成：优选地，所述辅酶q10制剂由包括以下重量配比组分的原料制成：更优选地，所述辅酶q10制剂由包括以下重量配比组分的原料制成：根据本发明一种优选的实施方式，所述糖选自单糖、二糖或多糖中的一种。在进一步优选的实施方式中，所述糖选自二糖和/或多糖，优选为蔗糖、乳糖或糊精中的一种。在更进一步优选的实施方式中，所述糖为乳糖。根据本发明一种优选的实施方式，所述油脂为人体吸收率较高的油，优选选自椰子油、米糠油、大豆油、玉米油、花生油、橄榄油、芝麻油或亚麻籽油中的一种或多种。在本发明中，由于辅酶q10不溶于水，需要将其溶于油脂中进行调和，以促进辅酶q10的溶解分散。在进一步优选的实施方式中，所述油脂选自椰子油、米糠油、大豆油、玉米油或亚麻籽油中的一种或多种。在更进一步优选的实施方式中，所述油脂选自椰子油、米糠油或亚麻籽油中的一种或多种。本发明人经过研究发现，天然功能性油脂椰子油在机体内可快速消化，不易在组织中作为脂肪沉积，且具有抗病毒和抗菌、促进新陈代谢等多种功效；米糠油具有很高的营养价值，有八成不饱和脂肪酸(单元不饱和脂肪酸占47％，多元不饱和脂肪酸占33％)，且有丰富的维他命e及其抗氧化物，米糠油食后吸收率达90％以上，其中的脂肪酸、维生素e、甾醇、谷维素等有利于人体的吸收，具有清除血液中的胆固醇、降低血脂、促进人体生长发育等有益作用。此外，亚麻籽油是一种高不饱和度的天然油脂，含有人体必需脂肪酸α-亚麻酸(含量为53％)、多糖、维生素e及类黄酮，具有抗肿瘤、抗血栓、降血脂、营养脑细胞、调节植物神经等作用。在本发明中，所述辅酶q10制剂中选用椰子油、米糠油或亚麻籽油对辅酶q10进行调和，能够显著提升辅酶q10在人体内的吸收率。优选地，所述油脂由椰子油、米糠油和亚麻籽油组成，三者的重量比为2：(0.5～1.5)：(0.6～1.2)，优选为2：(0.8～1.2)：(0.9～1.1)，更优选为2:1:1。根据本发明一种优选的实施方式，所述抗氧化剂为天然抗氧化剂，选自茶叶提取物、果蔬类植物提取物或中草药提取物中的一种或多种。其中，所述茶叶提取物、果蔬类植物提取物和中草药提取物均为水提物。本发明人经过研究发现，在辅酶q10制剂中添加维生素e或d-柠檬烯等化学溶剂来稳定辅酶q10，往往会抑制辅酶q10在体内的吸收，且化学添加剂具有一定的潜在毒性，长期使用对人体不利。本发明中优选选用天然的抗氧化剂，能够显著提高制剂的安全性和稳定性。在进一步优选的实施方式中，所述抗氧化剂选自绿茶提取物、葡萄籽提取物、茄子提取物、绿豆皮提取物、荔枝提取物、白屈菜提取物、甘草提取物、丁香提取物或姜黄提取物中的一种或多种。其中，上述绿茶提取物、葡萄籽提取物、茄子提取物、绿豆皮提取物、荔枝提取物、白屈菜提取物、甘草提取物、丁香提取物及姜黄提取物均为市售可得的物质水提物。在更进一步优选的实施方式中，所述抗氧化剂选自葡萄籽提取物、茄子提取物、绿豆皮提取物或姜黄提取物中的一种或多种。根据本发明一种优选的实施方式，所述抗氧化剂选自葡萄籽提取物和/或姜黄提取物。在进一步优选的实施方式中，所述抗氧化剂为葡萄籽提取物和姜黄提取物，所述葡萄籽提取物和姜黄提取物的重量比为(1～4)：1，优选为(1.5～3)：1，更优选为2.5:1。其中，葡萄籽提取物中含有大量的前花青素pc，其抗氧化、清除自由基的能力是维生素e的约50倍，是维生素c的20倍。而姜黄为姜科植物姜黄的干燥根茎，已分离出的姜黄的活性成分有40多种，主要为挥发油和姜黄素类，其中，姜黄素能清除氧自由基而发挥抗氧化活性，对稳定细胞膜、提高超氧化物歧化酶活性等也有一定作用。本发明中，优选选择葡萄籽提取物和姜黄提取物作为抗氧化剂，在减少化学添加剂的同时显著提升了抗氧化的能力，且大大减少了抗氧化剂的成本。更优选地，所述葡萄籽提取物中的前花青素含量为95％，所述姜黄提取物中姜黄素的含量为8～30％。本发明人经过研究发现，在辅酶q10中加入乳化剂进行乳化，有利于辅酶q10的吸收。根据本发明一种优选的实施方式，所述乳化剂选自磷脂、聚山梨醇酯或蜂蜡中的一种。优选地，所述乳化剂选自磷脂或蜂蜡。在进一步优选的实施方式中，所述乳化剂选自蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂、磷脂酰胆碱、磷脂酸或蜂蜡中的一种。在更进一步优选的实施方式中，所述乳化剂选自大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂或蜂蜡中的一种。本发明人经过研究发现，在所述辅酶q10制剂中加入乳化剂，能够形成稳定的乳浊液，且能够使制剂中的辅酶q10在进入人体后便于吸收，提高了生物利用度。根据本发明一种优选的实施方式，所述活性中药组分由菟丝子、山茱萸、巴戟天、肉苁蓉、麦冬、何首乌、人参、鹿茸、枸杞子或黄芪中的一种或多种制得。本发明人经过研究发现，辅酶q10产品的消费人群中有部分比例的人利用辅酶q10的提高人体精力和活力的功能来辅助治疗少弱精子症，但是临床疗效不明显。因此，本发明人经过研究，优选在所述辅酶q10中添加具有滋补肝肾、补气行血功能的活性中药组分，能够有效改善血液循环及营养神经，促进损伤组织的修复，活性中药组分与辅酶q10联合应用，能够在发挥中药药效的同时增强辅酶q10的功效。在进一步优选的实施方式中，所述活性中药组分由菟丝子、山茱萸、巴戟天、肉苁蓉、麦冬、何首乌或黄芪中的一种或多种制得。在更进一步优选的实施方式中，所述活性中药组分由菟丝子、山茱萸、巴戟天、麦冬或黄芪中的一种或多种制得。其中，所述菟丝子具有补肾益精填髓的作用；山茱萸、巴戟天能够滋补肝肾；麦冬的提取物麦冬皂苷具有对抗氧自由基、抑制氧化应激反应，提高sod活性等作用；黄芪能够补气升阳、益位固表。在本发明中，将上述活性中药组分添加至辅酶q10制剂中，能够利用活性中药组分促进生殖系统血液循环，有效促进睾丸营养物质分泌，为精子获能及运动提供充足营养物质；同时，利用辅酶q10及制剂中的其他组分保证精子具备完整的膜结构，以维持内外离子浓度平衡及避免免疫活性细胞的攻击、吞噬精子特异性抗原。在本发明中，所述辅酶q10与油脂的重量比为8：(80～150)，优选为8：:(90～130)，更优选为8：(100～120)，本发明经过研究发现，基于8重量份的辅酶q10，当油脂的加入量少于80重量份时，使得辅酶q10的溶解不完全，当油脂的加入量多于150重量份时，辅酶q10的溶解度不再增加，过多加入会造成资源浪费。基于8重量份的辅酶q10，所述抗氧化剂的加入量为5～20重量份，优选为7～15重量份，更优选为9～12重量份。本发明人经过研究发现，当抗氧化剂的加入量少于5重量份时，制剂中的辅酶q10成分容易被氧化，进而出现重结晶现象；当抗氧化剂的加入量多于20重量份时，会影响辅酶q10的吸收率和生物利用率。此外，基于8重量份的辅酶q10，所述活性中药组分的加入量为5～10重量份，优选为6～8重量份，当中药组分的加入量少于5重量份时，所述辅酶q10制剂增强睾丸生精和促进附睾营养物质分泌的功能不明显，当中药组分的加入量多于10重量份时，辅酶q10去除活性氧的功能减弱。本发明提供的辅酶q10制剂，组分中化学添加剂少，原料廉价易得，配伍简单，吸收率和生物利用度高。本发明的第二方面，提供了一种上述辅酶q10制剂的制备方法，包括以下步骤：步骤1，任选地，制备活性中药组分；步骤2，按照重量比例分别称取各原料组分，先将除油脂以外的原料组分混合，再将混合组分加入油脂中，得到混合料液；步骤3，将步骤2所得混合料液制备得到辅酶q10制剂。在本发明中，所述辅酶q10制剂为软胶囊剂。其中，由于本发明中所述的辅酶q10制剂为液状油性物，且易被氧化，将其制成软胶囊的剂型，可以使液状油性物直接封入胶囊，无需使用吸附、包结之类的添加剂，而且软胶囊完全密封，其厚度可防止氧进入，延长了产品存储期。具体地，进一步描述本发明所述的辅酶q10的制备方法：步骤1，任选地，制备活性中药组分。根据本发明一种优选的实施方式，所述活性中药组分由包括以下重量配比的原料组分制得：在进一步优选的实施方式中，所述活性中药组分由包括以下重量配比的原料组分制得：在更进一步优选的实施方式中，所述活性中药组分由包括以下重量配比的原料组分制得：根据本发明一种优选的实施方式，所述活性中药组分的制备方法包括以下步骤：步骤1-1，按重量配比称取各原料组分，混合后粉碎，加水反复煎煮2～3次。步骤1-2，合并各次的煎出液，进行浓缩，得到稠浸膏。其中，使所述稠浸膏的含水量为15～20％。步骤1-3，将上述浸膏进行冷冻干燥，得到干浸膏，然后粉碎，过筛，得到活性中药组分的混合干粉。其中，所述冷冻干燥在冻干机(alpha1-4，德国christ公司)中进行，在上述含水量为15～20％的稠浸膏中加入10％的甘露醇作为保护剂，在冻干机中-50℃中预冻10h，然后在-40℃下低温真空升华干燥14h，最后于30℃下真空解析干燥10h，制备得到冻干样品。其中，经冷冻干燥得到的干浸膏的含水量不超过5％，将得到的干浸膏粉碎过筛，所述过筛为过80～100目筛。本发明人经过研究发现，根据混悬液的沉降公式可知，在将干浸膏与油混合时，干浸膏的粒度越细，沉降速度越小，所得混悬液越稳定。步骤2，按照重量比例分别称取各原料组分，先将除油脂以外的组分混合，再将混合组分加入油脂中，得到混合料液。根据本发明一种优选的实施方式，在称取各个组分之前，先制备辅酶q10。在进一步优选的实施方式中，所述辅酶q10采用微生物发酵法制得，以红极毛杆菌作为发酵菌种。具体地，将红极毛杆菌以6％的接种量接种于发酵培养基(葡萄糖20g，kh2po40.6g，nahpo41.2g，(nh4)2so49g，mgso40.5g，水1000ml，ph7.0)，在25℃下，于200r/min的摇床上培养36h后取发酵菌体，收集发酵液，15000r/min离心15min，取菌体用蒸馏水充分洗涤，离心得到发酵菌体。其中，采用微生物发酵法培养出来的酶易控、得酶率较高、容易纯化、生物利用率较高。在更进一步优选的实施方式中，对所述制得的发酵菌体进行提纯，得到辅酶q10，所述提纯方法为二氧化碳超临界萃取技术。其中，所述发酵物的超临界萃取条件为：萃取温度为30℃，萃取压力为22mpa，萃取时间为1.5h，co2流量为4.0l/h，分离温度为50℃。由上述提纯方法提纯得到的辅酶q10纯度高达99.9％，活性高、易吸收，且能快速清除细胞垃圾。根据本发明一种优选的实施方式，将除油脂以外的各组分混合后，对混合组分进行粉碎，过筛后再加入到油脂中。在进一步优选的实施方式中，所述粉碎为超微粉碎，和/或所述过筛为过40～180目筛。本发明人经过研究发现，将固态组分粉碎成均一的小粒度细粉，有利于均匀分散在液态组分中，使得辅酶q10制剂更加稳定。在更进一步优选的实施方式中，将所述粉碎后的混合组分加入到油脂中，搅拌均匀。其中，若油脂包括多种组分，需要先将多种组分高速搅拌均匀，再与上述粉碎后的混合组分混合，所述搅拌速度为1000～2000rpm。步骤3，将步骤2所得混合料液制备得到辅酶q10制剂。根据本发明一种优选的实施方式，对步骤2所得混合料液进行研磨和脱气，以去除混合料液中的气泡。在进一步优选的实施方式中，所述研磨在胶体磨中进行，所述研磨次数为2～4次。在更进一步优选的实施方式中，所述脱气处理为对物料进行抽真空脱气，控制真空度≤-0.08mpa。根据本发明一种优选的实施方式，所述辅酶q10制剂为软胶囊剂，所述软胶囊的囊材包括明胶、甘油和纯化水，所述明胶、甘油和纯化水的重量比为(3.4～4.0)：(1.5～2.3)：(4.0～8.5)。其中，明胶为一种纯天然的蛋白质，由动物的皮或骨中提炼而成，富含营养物质。在进一步优选的实施方式中，所述辅酶q10软胶囊的囊材经加热、溶解及脱气后，制得胶皮溶液。其中，所述胶皮溶液的制备步骤为：首先将甘油和纯化水投入溶胶罐内，搅拌加热至55℃，然后投入明胶继续搅拌加热至60～80℃使其溶解，搅拌20～30min至明胶全部熔化，抽真空脱尽气泡后，制得胶皮溶液，过80～100目筛，放入保温容器内备用。根据本发明一种优选的实施方式，将处理后的混合料液与制得的胶皮溶液按照重量比(3.5～5.5)：1进行混合，然后压丸定型。在进一步优选的实施方式中，所述定型温度为23～27℃，湿度为25～35％，通过静态干燥实现定型，干燥时间为20～28小时。在更进一步优选的实施方式中，对压丸定型的软胶囊进行洗丸、拣丸和包装，制得辅酶q10软胶囊成品。其中，采用浓度为90％以上的酒精对软胶囊表面的油渍进行清洗，然后挑选正型软胶囊封装。本发明所提供的辅酶q10制剂的制备方法，操作简单，条件易于控制，对设备的要求较低，适于大规模生产。本发明的第三方面，提供了所述辅酶q10制剂在辅助治疗男性少弱精子症方面的应用。本发明人发现，在男性少弱精子症的治疗过程中，常常选择口服辅酶q10产品，意图利用辅酶q10提高人体精力和活力的功能来提高精子活力，但是辅酶q10的生物利用度不高，临床疗效不显著。本发明人经过研究发现，少弱精子症多是气血生化不足所致，将具有补气行血功能的活性中药组分添加至辅酶q10制剂中，能够有效改善人体血液循环及营养神经，且能够促进辅酶q10在提高精子活力方面的功效。本发明将菟丝子、山茱萸、巴戟天、麦冬及黄芪中的有效成分添加至辅酶q10中组合使用，能够有效促进睾丸营养物质分泌，为精子获能及运动提供充足营养物质；同时，可以发挥辅酶q10保证精子具备完整膜结构的功能，提高辅酶q10的生物利用度，可用于辅酶治疗男性少弱精子症，临床应用前景良好。实施例以下通过具体实例进一步描述本发明，不过这些实例仅仅是范例性的，并不对本发明的保护范围构成任何限制。实施例中除辅酶q10以外的原辅料均为市场购得，均为食品级规格，其中，葡萄籽提取物购自陕西博林生物技术有限公司，前花青素的含量为95％；姜黄提取物购自西安瑞林生物科技有限公司，姜黄素含量为20％；大豆卵磷脂购自四川华源盛泰生物科技有限公司。动物试验中的sd大鼠购自凯学生物科技(上海)有限公司。实施例1(一)本实施例中辅酶q10制剂的原料包括以下重量配比的组分：(二)制备方法(1)称取3kg菟丝子、3kg山茱萸、4kg巴戟天、2kg麦冬和5kg黄芪，混合后粉碎，加入80升水浸泡30分钟后进行煎煮，过滤，药液备用；药渣再加水60升进行煎煮，过滤，药液备用；重复上述操作1次；将3次煎煮的药液合并在一起，然后再煎煮，使得药液浓缩至含水量为20％，得到稠浸膏；将稠浸膏中加入10％的甘露醇作为保护剂，在冻干机(alpha1-4，德国christ公司)中-50℃中预冻10h，然后在-40℃下低温真空升华干燥14h，最后于30℃下真空解析干燥10h，制备得到干浸膏(含水量4％)，粉碎后过100目筛，得到活性中药组分的干粉。(2)以红极毛杆菌作为发酵菌种，按6％的接种量接种于发酵培养基(葡萄糖20g，kh2po40.6g，nahpo41.2g，(nh4)2so49g，mgso40.5g，水1000ml，ph7.0)，在25℃下，于200r/min的摇床上培养36h后取发酵菌体，收集发酵液，15000r/min离心15min，取菌体用蒸馏水充分洗涤，离心得到发酵菌体；将发酵菌体进行二氧化碳超临界萃取提纯，条件为：萃取温度为30℃，萃取压力为22mpa，萃取时间为1.5h，co2流量为4.0l/h，分离温度为50℃，提纯得到的辅酶q10的纯度为99.9％；按照步骤(一)中的重量，将辅酶q10、乳糖、葡萄籽提取物、姜黄提取物、大豆卵磷脂和活性中药组分的干粉混合，然后进行超微粉碎，并过100目筛；将椰子油、米糠油和亚麻籽油混合，以1000rpm高速搅拌，混合均匀后加入上述过筛后的混合组分，搅拌均匀。(3)将上述得到的混合料液置于胶体磨中研磨3次，再置于真空锅中，控制真空度-0.08mpa，脱去混合料液中的气体；按照重量比为3.5:2.0:5.0分别称取175g明胶、100g甘油和250g纯化水，先将甘油和纯化水投入溶胶罐内，搅拌加热至55℃，然后投入明胶继续搅拌加热至70℃使其溶解，搅拌20～30min至明胶全部熔化，抽真空脱尽气泡后，制得胶皮溶液，过80目筛后放入保温桶内备用；将处理后的混合料液与胶皮溶液按照重量比4.5:1进行混合，然后送入压丸机中压制出软胶囊，将温度设置为25℃，湿度为35％，静态干燥26小时后，将胶囊出丸；再利用浓度为92％的酒精洗去胶囊表面的油渍，挑选正型软胶囊封装，得到成品。本实施例中制得的辅酶q10软胶囊的规格为500mg/粒，其中，辅酶q10的含量为20mg/粒，活性中药组分的含量为20mg/粒。实施例2本实施例所用方法与实施例1相似，区别仅在于所述油脂包括叶子油和米糠油，所述椰子油和米糠油的加入量分别为200g和100g。实施例3本实施例所用方法与实施例1相似，区别仅在于所述抗氧化剂仅包括姜黄提取物，加入的量为30g。对比例对比例1本对比例所用方法与实施例1相似，区别仅在于原料中不含有活性中药组分，辅酶q10加入的量为48g。对比例2本对比例中所用制剂为按照实施例1(二)步骤(1)中所述方法和重量配比制得的活性中药组分。对比例3本对比例所用制剂为市售以维生素e为抗氧化剂的辅酶q10软胶囊。对比例4本对比例所用制剂为纯度为99.9％的市售辅酶q10。实验例实验例1稳定性检测取实施例1制得的辅酶q10软胶囊制剂(采用市场常见的60粒/瓶的药用塑料包装瓶)，置于光照强度为4000lx条件照射0、5、10和15天，采用高效液相色谱法考察光照对辅酶q10标示含量(％)的影响，结果如表1所示：表1光照对辅酶q10软胶囊稳定性的影响光照时间0天5天10天15天辅酶q10标示含量(％)99.8100.2100.199.7由表1可知，光照对辅酶q10软胶囊的影响不大，说明本发明所制得的辅酶q10软胶囊大大提高了辅酶q10的光稳定性。取实施例1制得的辅酶q10软胶囊制剂(采用市场常见的60粒/瓶的药用塑料包装瓶)，分别置于25℃、45℃和60℃的恒温箱中放置0天、5天、10天和15天，采用高效液相色谱法考察温度对辅酶q10标示含量(％)的影响，结果如表2～4所示：表225℃环境对辅酶q10软胶囊稳定性的影响时间0天5天10天15天辅酶q10标示含量(％)100.199.9100.299.8表345℃环境对辅酶q10软胶囊稳定性的影响时间0天5天10天15天辅酶q10标示含量(％)99.9100.299.799.8表460℃环境对辅酶q10软胶囊稳定性的影响时间0天5天10天15天辅酶q10标示含量(％)99.899.999.298.9由表2～4可知，辅酶q10软胶囊在高温环境下的稳定性较好，不易受温度影响。实验例2线粒体辅酶q10结合含量、atp合成酶活性及自由基损伤产物的检测采用动物试验来检测心肌线粒体结合辅酶q10的含量、atp酶活性和自由基损伤产物。(1)样品：本实验例所用制剂为本发明实施例1、对比例3和对比例4中的制剂。(2)动物来源：选取健康sd大鼠，在清洁级动物室中自由摄食饮水，室温控制在20℃～25℃，相对湿度40％～60％，适应性培养一周后，随机分为4组，每组7只。(3)选择剂量进行喂食：以辅酶q10含量计算，确定大鼠的喂食剂量为：40mg/kg，分别将实施例1、对比例3和对比例4中的制剂经口每日一次灌胃于大鼠，正常喂食对照组灌胃生理盐水，连续喂食5天。分别取4组中大鼠的心肌组织制备匀浆分离线粒体，测定相关指标，结果如表5所示表5由表5可知，补充外源辅酶q10能够显著提高大鼠线粒体中辅酶q10的结合含量和atp合成酶活性，从而有利于线粒体制造atp，但是同时也会使线粒体受到氧自由基的损伤。本发明实施例1中制得的辅酶q10制剂，相对于对比例3中的市售维生素e辅酶q10胶囊和对比例4中的辅酶q10制剂，能够明显提高线粒体结合辅酶q10含量和atp合成酶活性，且能够大大减轻补充辅酶q10引起的自由基损伤，能够有力地清除体内的氧自由基。实验例3血药浓度的检测(1)样品：本实验例所用制剂为本发明实施例1～3和对比例3中的制剂。(2)动物来源：选取健康sd大鼠，体重(250±25)g，在清洁级动物室中自由摄食饮水，室温控制在20℃～25℃，相对湿度40％～60％，适应性培养一周后，随机分为4组，每组5只。(3)选择剂量进行喂食：将上述大鼠禁食12h后，分别取实施例1～3和对比例3中的制剂进行灌胃，按照辅酶q10的含量计算，确定喂食剂量为40mg/kg，分别于给药后5min、15min、30min、60min、120min、240min、360min、480min后分别取血，处理后于-20℃条件下避光冷冻保存。对上述血浆样本处理后，以hplc-ms法测定血药浓度，得出实施例1～3和对比例3的平均血药浓度-时间的关系曲线，结果如图1所示。由图1可知，本发明实施例1中的制备的辅酶q10软胶囊的血峰浓度(cmax)大于实施例2和实施例3制备的软胶囊，更明显高于对比例3中的血峰浓度。本发明实施例1中制备的辅酶q10软胶囊的血药浓度-时间曲线下面积最高，血峰浓度最大，说明药物吸收总量最大，药效最强，生物利用度明显提高。实验例4精子活力提升的检测(1)样品：本发明实施例1和对比例1、2中的制剂。(2)动物分组及少弱精子症模型制备：选取健康9周龄健康雄性sd大鼠，在清洁级动物室中自由摄食饮水，室温控制在20℃～25℃，相对湿度40％～60％，适应性培养一周后，采用10mg/(kg·d)剂量的雷公藤多苷对雄性sd大鼠进行连续灌胃，灌胃时间为4周。将上述具有少弱精子症模型大鼠进行适应性饲养一周后，随机分为4组，每组为5只。(3)选择剂量喂食：按照辅酶q10含量计算，确定喂食剂量为40mg/(kg·d)，按此剂量分别将实施例1、对比例1和2中的制剂(对比例2中的活性中药组分的喂食量同于实施例1中辅酶q10的喂食量)经口每日一次灌胃于大鼠，对照组每天给予生理盐水灌胃(4ml/d)，连续给药30d。于末次灌胃24h后，采用1％戊巴比妥钠(0.04g/kg)富强注射麻醉、固定，行腹部备皮，75％乙醇溶液消毒皮肤。剪开阴囊皮肤及皮下组织，摘取左侧附睾组织，备测精液参数；打开腹腔，腹主动脉取血8～10ml置于ep管内，室温防止5min后，以3000r/min离心15min取血清，置于-20℃冰箱内保存待测。大鼠精液参数的检测：取左侧附睾放入盛有5ml已预热至37℃的pbs液无菌玻皿中，剪碎，摇匀，将含有精子的培养皿置于37℃、co2培养箱中，充分扩散5min，用无菌镊子将精子块分开并将附睾去除，用200目尼龙网过滤，取100μl精子滤液，加入1mlmedium199(m199)精子培养液中充分摇匀，37℃恒温水浴2min，取10μl加到预热的精子计数板上，置于37℃光学显微镜下选取6个视野，经精子动态检测系统检测精子浓度、精子活动率，结果如表6所示：表6不同制剂对大鼠精液参数的影响由表6可知，实施例1、对比例1和2制剂的施用均显著提升了大鼠的精子浓度和精子活动率，但是实施例1对大鼠精液中精子浓度和精子活动率的提升程度又显著高于对比例1和对比例2，说明本发明实施例1制备的辅酶q软胶囊在治疗少弱精子症的过程中具有显著作用，显著高于不添加活性中药组分的对比例2制剂和仅包括活性中药组分的对比例3制剂。大鼠生殖激素水平的检测：将大鼠血清标本置于室温下融化待检，严格按照大鼠血清fsh、lh、ft和shbg放免试剂盒说明书要求进行生殖激素水平检测，结果如表7所示：表7不同制剂对大鼠生殖激素水平的影响其中，fsh为促卵泡成熟激素，lh为黄体生成激素，ft为游离睾酮，shbg为性激素结合球蛋白。由表7可知，实施例1、对比例1和2处理的大鼠的fsh、lh的含量较对照组，均呈降低趋势，尤其是经实施例1制剂处理过的大鼠，其血清中fsh和lh水平下降幅度最大。生物体外周血中fsh的水平可以反映睾丸内支持细胞的成熟状态及其功能，fsh值高于正常，提示睾丸支持细胞功能异常，血清lh和精子浓度的关系与fsh类似，精子浓度与fsh和lh呈负相关关系。本发明中，对少弱精子症的大鼠试用制剂后，fsh和lh的水平均低于对照组，说明施药后睾丸生精损伤减轻，其中，实施例1中制备的辅酶q10软胶囊的保护作用最明显。由表7还可以看出，实施例1、对比例1和2处理的大鼠的ft和shbg含量水平呈提高趋势，以实施例1中的提高程度最大。ft(游离睾酮)在周围组织转变为双氢睾酮，引起男性的大多数雄激素效应，是一种比睾酮更能精确地反映临床状况的指标；shbg发挥雄激素载体蛋白的转运功能、维持局部生殖激素浓度，还参与生精功能的调节。ft和shbg水平的提高，能够保障精子发生过程，起到生殖保护的作用。本发明实施例1中的辅酶q软胶囊制剂对ft和shbg水平的提升最明显，说明对治疗少弱精子症的效果最明显。实验例5辅酶q10制剂在治疗男性少弱精子症方面的有效性检测以150例在泌尿生殖男科门诊就诊的患者为研究对象(征得患者的同意)，平均年龄28岁；精液检查按照who《人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》的标准：精液量≥2.0ml，精子浓度＜20×106/ml，a级精子百分率＜25％且a+b级精子百分率＜50％；fsh、lh和ft水平在正常值范围；有规律性生活1年以上，未采取任何避孕措施女方未受孕；抗精子抗体阴性；排除各种内分泌、免疫性原因导致不育的，排除生殖系统炎症影响精液质量的，排除生殖器官器质性病变影响生育功能的，排除静脉曲张患者。将上述患者随机分为3组记为组1～组3，每组50人，各组患者的平均年龄、不育史等无显著统计学差异。将实施例1、对比例2和对比例4中的制剂分别给予组1～组3的患者服用，实施例1和对比例4的给药量为10mg/次，2次/天(按辅酶q10含量计)，对比例2的给药量为10mg/次，2次/天，连续服用3个月为1个疗程，服药期间禁止服用其他影响观察药物。治疗前、后分别进行计算机辅助分析(casa)精液样本。1个疗程结束后，统计3组患者的精液质量，结果如表8所示：表8治疗前后精液分析结果由表8可知，组1即服用本发明实施例1中制得的辅酶q10制剂的患者精液中的各个参数较治疗前由明显变化，组2和组3中的患者精液参数提升不明显。综上所述，本发明提供的辅酶q10制剂，能够有效清除体内的氧自由基，显著提高生物利用度，且能够有效保护生殖系统，提高精子浓度和精子活动率。以上结合具体实施方式和范例性实例对本发明进行了详细说明，不过这些说明并不能理解为对本发明的限制。本领域技术人员理解，在不偏离本发明精神和范围的情况下，可以对本发明技术方案及其实施方式进行多种等价替换、修饰或改进，这些均落入本发明的范围内。当前第1页12