本发明涉及日化产品领域，具体涉及一种植物美白和抗氧化组合物及其日化品的制备与应用。
背景技术：
随着社会的发展及生活水平的提高，人们对皮肤白皙的需求日益增强。人体肤色的深浅主要取决于黑色素的含量及分布。黑色素主要由表皮基底层的黑素细胞形成，然后转移到基底细胞中，随着表皮细胞的移行被带到表皮全层，最后随角化细胞的脱落而脱失，黑素细胞的结构功能和数量直接影响皮肤中黑色素的含量。在皮肤代谢循环过程中，存在于黑素细胞组织中的酪氨酸在酪氨酸酶、多巴色素互变酶、二羟基吲哚酸(dhica)氧化酶作用下经多巴、多巴醌、多巴色素、二羟基吲哚等中间体逐步转变为真黑素或褐黑素。紫外线照射、环境污染、内分泌失调、遗传等因素均会导致黑素细胞代谢异常，黑素细胞分泌的黑色素增加使局部皮肤变黑，产生雀斑、黄褐斑、老年斑和炎症后色素沉着等人体色素沉着性疾病。
传统的美白活性成分过氧化氢、汞及其化合物以及酚类衍生物，能达到快速美白的功效，但是其具有细胞毒性、刺激性、致敏性等不良反应，目前己被禁用于化妆品中。目前，皮肤美白剂通常是以酪氨酸酶为作用靶点，通过抑制酪氨酸酶活性或者阻断酪氨酸生成黑色素的氧化途径，从而减少黑色素的生成，达到美白皮肤的效果。上市品种中，对酪氨酸酶抑制剂的研究较多，如氢醌、熊果苷、vc及其衍生物、曲酸等，但是随着化妆品行业的发展，具有较强细胞毒性的物质(如氢醌等)已很少采用，而vc不稳定易氧化，曲酸对皮肤刺激性较强。因此，寻找新一代天然、安全、高效的植物美白活性成分成为近几年国内外技术热点之一。
另一方面，由于紫外线诱导产生氧自由基而促进了酪氨酸酶的表达，使黑色素形成增多，而且酪氨酸酶作为生物体黑色素合成的关键酶及限速酶，是一种含铜氧化还原酶，在其催化黑色素合成的过程中，氧的存在是必需条件。因此，具有抗氧化作用的物质能通过减少氧自由基而阻断或减弱酪氨酸酶的活性，减少黑色素的合成，有助于肤色改善。同时，抗氧化还能减少各种外源性因素，如紫外线辐射、烟雾等产生的自由基，从而避免皮肤的胶原纤维氧化(呈现黄色)导致肤色偏黄。
根据实验研究证明，黄芩具有抗病毒、抗菌、抗氧化、消除自由基、抗过敏、保护神经元等多方面的药理作用；白梅花具有清除氧自由基、抗血小板凝聚、防止黑色素沉积、抗抑郁等功效；甘草具有抗炎、美白及抗氧化作用；桑叶具有降血糖、抗氧化、抗炎、抗肿瘤等功效；苦参具有抗氧化、抗过敏、抗炎、镇痛等功效。因此，由上述成分制备的植物美白和抗氧化组合物及其日化品具有较高实用价值和较广阔的市场前景。
技术实现要素：
本发明的目的旨在提供一种植物美白和抗氧化组合物及其日化品的制备与应用。
为了实现上述目的，本发明提供以下技术方案：
本发明所述的一种植物美白和抗氧化组合物及其日化品，其特征在于，所述的植物美白和抗氧化组合物包括如下重量份的组分：黄芩饮片0.5-30份、桑叶饮片0.1-40份、白梅花饮片0.5-30份、甘草饮片0.1-40份、苦参饮片0.5-30份。
所述的一种植物美白和抗氧化组合物及其日化品，其特征在于，该组合物的提取方法为：
分别取黄芩、桑叶和白梅花饮片，混合粉碎，加m:v比为3-20倍量的30-98％乙醇回流提1-3次，每次15-180分钟，提取液合并，过滤，滤液浓缩，备用。
取甘草饮片，粗粉，加m:v比为3-20倍量甲醇回流提取1-3次，每次回流15-180分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
取苦参饮片，粗粉，加m:v比为3-20倍量甲醇回流提取1-3次，每次回流15-180分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
将上述三种浓缩液混合，过大孔树脂柱，20-98％乙醇洗脱，洗脱液合并，干燥即得。
所述的一种植物美白和抗氧化组合物及其日化品，其特征在于，该组合物用于日化品中的重量份为0.001-20份。
所述的一种植物美白和抗氧化组合物及其日化品，其特征在于，该组合物制成的日化品为面膜、精华水、护肤乳、护肤凝胶、洁面乳、沐浴乳，优选面膜、精华水、护肤乳。
所述的一种植物美白和抗氧化组合物及其日化品，其特征在于，含该组合物的面膜的制备方法为：
方法一：分别取重量份0.001-1份的植物美白和抗氧化组合物、0.001-1份的冰片，加入1-30份的丙二醇、1-30份的二乙二醇单乙基醚、0.01-5份的氮酮、0.01-20份的聚山梨醇酯-80混合均匀后，加入0.01-20份的银耳多糖、0.01-20份的枸杞多糖、0.01-20份的茯苓多糖、0.01-2份的黄原胶、0.01-2份的防腐剂、0.01-2份的香精和适量水，充分搅拌混合均匀，分装，即得。
方法二：取重量份0.01-2份的植物美白和抗氧化组合物，加入1-30份的丙二醇、0.01-20份的聚山梨醇酯-80混合均匀后，加入0.01-5份的透明质酸钠、0.01-5份的水溶性神经酰胺、0.01-2份的卡波姆、0.01-2份的防腐剂、0.01-2份的香精、0.0001-0.1份的珠光粉和适量水，充分搅拌混合均匀，灌装，即得。
所述的一种植物美白和抗氧化组合物及其日化品，其特征在于，含该组合物的精华水的制备方法为：
方法一：分别取重量份0.001-20份的植物美白和抗氧化组合物、0.001-1份的冰片，加入1-30份的丙二醇、0.01-20份的聚山梨醇酯-80混合均匀后，加入0.01-20份的桑椹提取物、0.01-20份的石斛提取物、0.01-5份的防腐剂、0.01-2份的香精和适量水，充分搅拌混合均匀，分装，即得。
方法二：取重量份0.01-1份的植物美白和抗氧化组合物，加入1-30份的丙二醇、0.01-1份的乳木果油、1-20份的甘油、0.01-5份的聚甘油脂肪酸酯、0.01-20份的聚山梨醇酯-80、0.01-5份的辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯混合均匀后，加入0.001-1份的谷氨酸、0.001-1份的甘氨酸、0.001-1份的半胱氨酸、0.01-20份的peg-40氢化蓖麻油、0.01-5份的防腐剂、0.01-2份的香精和适量水，充分搅拌混合均匀，低温混合氮气，灌装，即得。
所述的一种植物美白和抗氧化组合物及其日化品，其特征在于，含该组合物的护肤乳的制备方法为：
方法一：分别取重量份0.05-5份的卡波姆980、0.05-5份的甘油混合均匀，加入0.1-10份的三乙醇胺调节ph值至中性，加入0.001-0.5份的植物美白和抗氧化组合物、1-10份的丙二醇、0.1-10份的聚山梨醇酯-80混合均匀后，再加入0.01-5份的乳木果油、0.1-10份的聚甘油脂肪酸酯、0.1-10份的辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、0.01-5份的防腐剂、0.01-3份的香精和适量水，均质乳化1-30分钟，灌装，即得。
方法二：分别取重量份0.05-2份的橄榄油、0.1-5份的异构十六烷、0.1-8份的c12-15醇苯甲酸酯、0.1-8份的棕榈酸异辛酯、0.1-5份的十六醇、0.1-5份的十八醇、0.1-10份的乳木果油，加热混合均匀，加入0.5-10份的植物美白和抗氧化组合物与1-30份的丙二醇、0.5-20份的二乙二醇单乙基醚、0.1-20份的聚山梨醇混合液，加热混合均匀，再加0.1-5份的枸杞提取物、0.1-5份的三七提取物、0.01-1份的透明质酸钠、0.5-10份的甘油、0.1-10份的油酸聚乙二醇甘油酯、0.1-10份的聚乙二醇酸甘油脂、0.01-5份的防腐剂、0.01-2份的香精和适量水，保持60-100℃均质乳化5-60分钟，冷却，灌装，即得。
所述的一种植物美白和抗氧化组合物及其日化品，其特征在于，该植物组合物日化品对l-酪氨酸酶有抑制作用，对氧自由基有清除效果，具有美白亮肤、延缓衰老、减少皱纹产生，调理肌肤功能的功效，适用于全身各部位的清洁和维护。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，应说明的是，以下实施例仅用以说明而非限制本发明的技术方案，尽管参照下述实施例对本发明进行了详细说明，但本领域技术人员应当理解，依然可以对本发明进行修改或者等同替换，而不脱离本发明的精神和范围的任何修改或局部替换，其均应涵盖在本发明的权利要求范围中。
实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
实施例1：
一种植物美白和抗氧化组合物的面膜液，该日化品的制备方法如下：
1、提取：
分别取重量份为0.5份的黄芩、10份的桑叶和30份的白梅花饮片，混合粉碎，加30％乙醇回流提3次，每次加3倍量溶剂，回流180分钟，提取液合并，过滤，滤液浓缩，备用。
取重量份为20份的甘草饮片，粗粉，加甲醇回流提取2次，每次加10倍量溶剂，回流100分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
取重量份为30份的苦参饮片，粗粉，加甲醇回流提取1次，每次加20倍量溶剂，回流15分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
将上述三种浓缩液混合，过大孔树脂柱，30％乙醇洗脱，洗脱液合并，干燥即得。
2、制备：
分别取重量份0.001份的植物美白和抗氧化组合物、0.001份的冰片，加入5份的丙二醇、0.1份的二乙二醇单乙基醚、0.5份的氮酮、2份的聚山梨醇酯-80混合均匀后，加入20份的银耳多糖、20份的枸杞多糖、20份的茯苓多糖、0.02份的黄原胶、0.1份的防腐剂、0.06份的香精和适量水，充分搅拌混合均匀，分装，即得。
实施例2：
一种植物美白和抗氧化组合物的果冻面膜，该日化品的制备方法如下：
1、提取：
分别取重量份为30份的黄芩、0.1份的桑叶和10份的白梅花饮片，混合粉碎，加60％乙醇回流提2次，每次加10倍量溶剂，回流100分钟，提取液合并，过滤，滤液浓缩，备用。
取重量份为40份的甘草饮片，粗粉，加甲醇回流提取1次，每次加20倍量溶剂，回流15分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
取重量份为0.5份的苦参饮片，粗粉，加甲醇回流提取3次，每次加3倍量溶剂，回流180分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
将上述三种浓缩液混合，过大孔树脂柱，50％乙醇洗脱，洗脱液合并，干燥即得。
2、制备：
取重量份2份的植物美白和抗氧化组合物，加入10份的丙二醇、5份的聚山梨醇酯-80混合均匀后，加入5份的透明质酸钠、0.01份的水溶性神经酰胺、0.1份的卡波姆、0.6份的防腐剂、0.1份的香精、0.01份的珠光粉和适量水，充分搅拌混合均匀，灌装，即得。
实施例3：
一种植物美白和抗氧化组合物的精华水，该日化品的制备方法如下：
1、提取：
分别取重量份为10份的黄芩、40份的桑叶和0.5份的白梅花饮片，混合粉碎，加98％乙醇回流提1次，每次加20倍量溶剂，回流15分钟，提取液合并，过滤，滤液浓缩，备用。
取重量份为0.1份的甘草饮片，粗粉，加甲醇回流提取3次，每次加3倍量溶剂，回流180分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
取重量份为15份的苦参饮片，粗粉，加甲醇回流提取2次，每次加10倍量溶剂，回流100分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
将上述三种浓缩液混合，过大孔树脂柱，70％乙醇洗脱，洗脱液合并，干燥即得。
2、制备：
分别取重量份20份的植物美白和抗氧化组合物、0.6份的冰片，加入30份的丙二醇、10份的聚山梨醇酯-80混合均匀后，加入0.01份的桑椹提取物、0.01份的石斛提取物、0.1份的防腐剂、0.6份的香精和适量水，充分搅拌混合均匀，分装，即得。
实施例4：
一种植物美白和抗氧化组合物的精华喷雾，该日化品的制备方法如下：
1、提取：
分别取重量份为15份的黄芩、20份的桑叶和15份的白梅花饮片，混合粉碎，加50％乙醇回流提2次，每次加10倍量溶剂，回流120分钟，提取液合并，过滤，滤液浓缩，备用。
取重量份为20份的甘草饮片，粗粉，加甲醇回流提取2次，每次加10倍量溶剂，回流100分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
取重量份为15份的苦参饮片，粗粉，加甲醇回流提取3次，每次加6倍量溶剂，回流80分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
将上述三种浓缩液混合，过大孔树脂柱，98％乙醇洗脱，洗脱液合并，干燥即得。
2、制备：
取重量份0.4份的植物美白和抗氧化组合物，加入10份的丙二醇、1份的乳木果油、10份的甘油、1份的聚甘油脂肪酸酯、2份的聚山梨醇酯-80、1.5份的辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯混合均匀后，加入1份的谷氨酸、1份的甘氨酸、1份的半胱氨酸、3份的peg-40氢化蓖麻油、0.2份的防腐剂、0.5份的香精和适量水，充分搅拌混合均匀，低温混合氮气，灌装，即得。
实施例5：
一种植物美白和抗氧化组合物的护肤凝乳，该日化品的制备方法如下：
1、提取：
分别取重量份为5份的黄芩、5份的桑叶和10份的白梅花饮片，混合粉碎，加80％乙醇回流提3次，每次加8倍量溶剂，回流60分钟，提取液合并，过滤，滤液浓缩，备用。
取重量份为10份的甘草饮片，粗粉，加甲醇回流提取3次，每次加5倍量溶剂，回流120分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
取重量份为20份的苦参饮片，粗粉，加甲醇回流提取1次，每次加15倍量溶剂，回流180分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
将上述三种浓缩液混合，过大孔树脂柱，80％乙醇洗脱，洗脱液合并，干燥即得。
2、制备：
分别取重量份0.8份的卡波姆980、5份的甘油混合均匀，加入1.5份的三乙醇胺调节ph值至中性，加入0.5份的植物美白和抗氧化组合物、5份的丙二醇、0.5份的聚山梨醇酯-80混合均匀后，再加入5份的乳木果油、0.8份的聚甘油脂肪酸酯、1.2份的辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯、0.8份的防腐剂、1份的香精和适量水，均质乳化15分钟，灌装，即得。
实施例6：
一种植物美白和抗氧化组合物的护肤乳膏，该日化品的制备方法如下：
1、提取：
分别取重量份为1份的黄芩、0.5份的桑叶和1份的白梅花饮片，混合粉碎，加70％乙醇回流提3次，每次加20倍量溶剂，回流180分钟，提取液合并，过滤，滤液浓缩，备用。
取重量份为5份的甘草饮片，粗粉，加甲醇回流提取2次，每次加8倍量溶剂，回流90分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
取重量份为10份的苦参饮片，粗粉，加甲醇回流提取3次，每次加10倍量溶剂，回流60分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
将上述三种浓缩液混合，过大孔树脂柱，60％乙醇洗脱，洗脱液合并，干燥即得。
2、制备：
分别取重量份1份的橄榄油、0.5份的异构十六烷、2份的c12-15醇苯甲酸酯、2份的棕榈酸异辛酯、1.5份的十六醇、1.5份的十八醇、10份的乳木果油，加热混合均匀，加入2份的植物美白和抗氧化组合物与15份的丙二醇、5份的二乙二醇单乙基醚、5份的聚山梨醇混合液，加热混合均匀，再加5份的枸杞提取物、5份的三七提取物、1份的透明质酸钠、4份的甘油、7份的油酸聚乙二醇甘油酯、5份的聚乙二醇酸甘油脂、0.6份的防腐剂、0.1份的香精和适量水，保持75℃均质乳化60分钟，冷却，灌装，即得。
实施例7：
一种植物美白和抗氧化组合物的面膜液，该日化品的制备方法如下：
1、提取：
分别取重量份为15份的黄芩、20份的桑叶和15份的白梅花饮片，混合粉碎，加50％乙醇回流提2次，每次加10倍量溶剂，回流120分钟，提取液合并，过滤，滤液浓缩，备用。
取重量份为20份的甘草饮片，粗粉，加甲醇回流提取2次，每次加10倍量溶剂，回流100分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
取重量份为15份的苦参饮片，粗粉，加甲醇回流提取3次，每次加6倍量溶剂，回流80分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
将上述三种浓缩液混合，过大孔树脂柱，98％乙醇洗脱，洗脱液合并，干燥即得。
2、制备：
分别取重量份1份的植物美白和抗氧化组合物、1份的冰片，加入20份的丙二醇、0.1份的二乙二醇单乙基醚、5份的氮酮、5份的聚山梨醇酯-80混合均匀后，加入0.01份的银耳多糖、0.01份的枸杞多糖、0.01份的茯苓多糖、1份的黄原胶、0.01份的防腐剂、0.1份的香精和适量水，充分搅拌混合均匀，分装，即得。
实施例8：
一种植物美白和抗氧化组合物的免洗面膜，该日化品的制备方法如下：
1、提取：
分别取重量份为5份的黄芩、5份的桑叶和10份的白梅花饮片，混合粉碎，加80％乙醇回流提3次，每次加8倍量溶剂，回流60分钟，提取液合并，过滤，滤液浓缩，备用。
取重量份为10份的甘草饮片，粗粉，加甲醇回流提取3次，每次加5倍量溶剂，回流120分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
取重量份为20份的苦参饮片，粗粉，加甲醇回流提取1次，每次加15倍量溶剂，回流180分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
将上述三种浓缩液混合，过大孔树脂柱，80％乙醇洗脱，洗脱液合并，干燥即得。
2、制备：
取重量份0.01份的植物美白和抗氧化组合物，加入5份的丙二醇、0.5份的聚山梨醇酯-80混合均匀后，加入0.01份的透明质酸钠、5份的水溶性神经酰胺、1份的卡波姆、1份的防腐剂、0.05份的香精、0.001份的珠光粉和适量水，充分搅拌混合均匀，灌装，即得。
实施例9：
一种植物美白和抗氧化组合物的护肤水，该日化品的制备方法如下：
分别取重量份为1份的黄芩、0.5份的桑叶和1份的白梅花饮片，混合粉碎，加70％乙醇回流提3次，每次加20倍量溶剂，回流180分钟，提取液合并，过滤，滤液浓缩，备用。
取重量份为5份的甘草饮片，粗粉，加甲醇回流提取2次，每次加8倍量溶剂，回流90分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
取重量份为10份的苦参饮片，粗粉，加甲醇回流提取3次，每次加10倍量溶剂，回流60分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
将上述三种浓缩液混合，过大孔树脂柱，60％乙醇洗脱，洗脱液合并，干燥即得。
2、制备：
分别取重量份5份的植物美白和抗氧化组合物、0.01份的冰片，加入10份的丙二醇、1份的聚山梨醇酯-80混合均匀后，加入20份的桑椹提取物、20份的石斛提取物、1份的防腐剂、0.1份的香精和适量水，充分搅拌混合均匀，分装，即得。
实施例10：
一种植物美白和抗氧化组合物的精华液，该日化品的制备方法如下：
1、提取：
分别取重量份为10份的黄芩、40份的桑叶和0.5份的白梅花饮片，混合粉碎，加98％乙醇回流提1次，每次加20倍量溶剂，回流15分钟，提取液合并，过滤，滤液浓缩，备用。
取重量份为0.1份的甘草饮片，粗粉，加甲醇回流提取3次，每次加3倍量溶剂，回流180分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
取重量份为15份的苦参饮片，粗粉，加甲醇回流提取2次，每次加10倍量溶剂，回流100分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
将上述三种浓缩液混合，过大孔树脂柱，70％乙醇洗脱，洗脱液合并，干燥即得。
2、制备：
取重量份10份的植物美白和抗氧化组合物，加入30份的丙二醇、0.01份的乳木果油、5份的甘油、1份的聚甘油脂肪酸酯、10份的聚山梨醇酯-80、3份的辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯混合均匀后，加入0.001份的谷氨酸、0.001份的甘氨酸、0.001份的半胱氨酸、1份的peg-40氢化蓖麻油、0.5份的防腐剂、0.1份的香精和适量水，充分搅拌混合均匀，低温混合氮气，灌装，即得。
实施例11：
一种植物美白和抗氧化组合物的护肤霜，该日化品的制备方法如下：
1、提取：
分别取重量份为30份的黄芩、0.1份的桑叶和10份的白梅花饮片，混合粉碎，加60％乙醇回流提2次，每次加10倍量溶剂，回流100分钟，提取液合并，过滤，滤液浓缩，备用。
取重量份为40份的甘草饮片，粗粉，加甲醇回流提取1次，每次加20倍量溶剂，回流15分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
取重量份为0.5份的苦参饮片，粗粉，加甲醇回流提取3次，每次加3倍量溶剂，回流180分钟，提取液合并，过滤、滤液浓缩，备用。
将上述三种浓缩液混合，过大孔树脂柱，50％乙醇洗脱，洗脱液合并，干燥即得。
2、制备：
分别取重量份2份的橄榄油、5份的异构十六烷、0.1份的c12-15醇苯甲酸酯、0.1份的棕榈酸异辛酯、2份的十六醇、0.5份的十八醇、0.1份的乳木果油，加热混合均匀，加入6份的植物美白和抗氧化组合物与20份的丙二醇、10份的二乙二醇单乙基醚、10份的聚山梨醇混合液，加热混合均匀，再加0.1份的枸杞提取物、0.1份的三七提取物、0.1份的透明质酸钠、4份的甘油、5份的油酸聚乙二醇甘油酯、10份的聚乙二醇酸甘油脂、0.05份的防腐剂、0.5份的香精和适量水，保持75℃均质乳化60分钟，冷却，灌装，即得。
实施例12：
一种植物美白和抗氧化组合物的l-酪氨酸酶抑制和dpph自由基清除实验：
1、实验方法：
1.1l-酪氨酸酶抑制实验
本实验采用吸光光度法进行。在96孔板中加入100μl样品溶液，每孔加入50μl酪氨酸酶溶液室温避光反应10分钟，最后加入50μll-酪氨酸溶液。设3个复孔，每个样品2个稀释梯度，进行10倍倍比稀释(初筛后若样品具有明显的酪氨酸酶抑制作用，则每个样品4个稀释梯度，进行2倍倍比稀释进行复筛)。阴性对照用pbs代替样品，空白对照用pbs代替酪氨酸酶，其余操作均相同。充分混匀反应液，37℃避光孵育30分钟。用酶标仪读取492nm吸光光度值，δod值越低，表明样品对酪氨酸酶的抑制越强。计算酪氨酸酶抑制率和ic50。
1.2dpph自由基清除实验
本实验采用吸光光度法进行在96孔板内加入样品，设3个复孔，每个样品2个稀释梯度，进行10倍倍比稀释(初筛后若样品具有明显的dpph自由基清作用，则每个样品4个稀释梯度，进行2倍倍比稀释进行复筛)，每孔100μl，每孔加入0.1mdpph100μl。阴性对照用50％乙醇代替样品，空白对照用50％乙醇代替dpph，其余操作均相同。充分混匀反应液，室温避光孵育30分钟。用酶标仪读取517nm吸光光度值，δod值越低，表明样品对自由基的清除活性越高。计算dpph自由基清除率和ic50。
2、实验材料：
曲酸(sigma，货号：k3125-5g，批号：k3125)、trolox(sigma，货号：238813-1g，批号：bcbp2767v)、dpph(sigma，货号：d9132-1g，批号：stbf5255v)、l-酪氨酸(sigma，货号：v900426-100g，批号：bb0881v)、酪氨酸酶(sigma，货号：t3824-50ku，批号：slbj5647v)、磷酸二氢钠(西陇化工股份有限公司，批号：1202011)、磷酸氢二钠(西陇化工股份有限公司，批号：111021)、无水乙醇(利安隆博化(天津)医药有限公司货号：d4540-100ml，批号：20150205)、dmso(最终反应体系中，dmso的体积分数<1％)、multiskango酶标仪(thermo)、practum224-1cn电子天平(satorius)、gnp-9270隔水式恒温培养箱(上海精宏实验设备有限公司)、30～300μl排枪(thermo公司)、各量程移液枪(大龙公司)。
3、实验结果：
表1：酪氨酸酶抑制及抗dpph药效结果表
结果显示，1％dmso(溶媒对照)对试验系统无明显影响；曲酸(阳性对照)的ic50为39.93μg/ml；trolox(阳性对照)的ic50为6.11μg/ml；黄芩、桑叶、白梅花、甘草单独使用具有抗dpph自由基功效；桑叶、甘草、苦参单独使用具有l-酪氨酸酶抑制功效；将5味药材混合精制形成组合物l-酪氨酸酶抑制作用和抗dpph自由基作用均明显增加。