本发明属于药物化学
技术领域：
，尤其涉及一种绿原酸组合物及其制备方法。
背景技术：
：绿原酸(chlorogenicacid)，又名咖啡单宁酸或咖啡鞣酸，是由咖啡酸(caffeicacid)与奎宁酸(金鸡纳酸，quinicacid)缩合形成缩酚酸，是植物体有氧呼吸代谢的产物。绿原酸化学名为5-氧-咖啡酰奎宁酸(5-o-caffeoylquinicacid)，分子式：c16h18o9，分子量：354.31，结构式如下所示。绿原酸是一种重要的生物活性物质，现有技术公开了其具有抗氧化、抗衰老、抗肌肉骨骼老化、抗肿瘤、抗炎、治疗免疫相关疾病、保护心脑血管等多种用途。绿原酸本身口服生物利用度较低，目前最好的给药方式为注射给药，但由于结构特点，存在如下较多的缺陷。绿原酸水中溶解度较低，其在25℃时水中溶解度仅达到约10mg/ml。导致当临床剂量用量大于100mg/人/次时，无法采用皮下、肌内等小体积给药途径；另外，绿原酸本身具有较强的酸性，其10mg/ml水溶液ph值约为2.5，导致注射给药会有严重的刺激性，带来了临床上较大的安全风险。为了提高绿原酸溶解度及减少刺激性问题，现有技术一般通过调节注射制剂的ph值增加绿原酸的溶解度并减少刺激性。按现有专利cn103446064b制备，采用亚硫酸氢钠作为抗氧剂，甘露醇作为支撑剂，磷酸盐作为ph调节剂，所得制剂的稳定剂较差。从现有技术来看，由于绿原酸结构中存在强酸性羧酸结构以及易发生水解失去生物活性的酯键，为了保证绿原酸的稳定性，减少刺激性，目前公开的注射制剂技术仅仅能将ph提高到在3.0左右，无法将ph值控制到人体更耐受的4.0～9.0的范围。且制剂样品需要在避光、低温条件下保存、运输极大限制了绿原酸的临床使用。技术实现要素：有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种绿原酸组合物及其制备方法，本发明提供的绿原酸组合物具有常温稳定性好，溶解度高、复溶体积小，人体更耐受的ph值等优点，适用于皮下/肌内给药的注射给药系统。该制剂能更好的满足生产、运输、使用过程中的安全性，为绿原酸临床应用提供了更有效的给药系统。本发明提供了一种绿原酸组合物，包括绿原酸与精氨酸。我们惊奇的发现，利用绿原酸在不同ph值溶解中溶解度不同的特点，在处方工艺中加入了能够提高溶液ph值的辅料精氨酸，可促进绿原酸解离，以提高配液浓度，较现有技术相比，溶液浓度提高了3～15倍，使同样大小的冻干设备可制备更多产品，提高了生产效率，同时复溶体积少，能够减少绿原酸的给药体积，还可减轻对人体的刺激。在本发明中，所述精氨酸为本领域技术人员熟知的药学上可接受的精氨酸即可，并无特殊的限制，本发明中优选为l-精氨酸。所述绿原酸与精氨酸的摩尔比优选为1：(0.05～1.1)，更优选为1：(0.1～1.1)，再优选为1：(0.3～1.1)，再优选为1：(0.5～1.1)，再优选为1：(0.5～1)，最优选为1：(0.5～0.96)；在本发明提供的一些实施例中，所述绿原酸与精氨酸的摩尔比优选为1：0.5；在本发明提供的一些实施例中，所述绿原酸与精氨酸的摩尔比优选为1：0.6；在本发明提供的一些实施例中，所述绿原酸与精氨酸的摩尔比优选为1：0.8；在本发明提供的一些实施例中，所述绿原酸与精氨酸的摩尔比优选为1：0.9；在本发明提供的另一些实施例中，所述绿原酸与精氨酸的摩尔比优选为1：0.98。本发明提供的绿原酸组合物的ph值优选为3.5～6，更优选为3.6～5.8，再优选为3.63～5.73。本发明提供的绿原酸组合物的剂型优选为冻干粉针剂；粉针属于注射剂，为确保注射剂的安全、有效与稳定，注射剂中除主药外，还可添加适当的物质以增加主药的溶解度、稳定性以及减少对机体的刺激等，这些物质统称为附加剂。附加剂应安全无害，不影响主药的疗效和含量测定；常用的附加剂有：增溶剂、助溶剂、支撑剂、表面活性剂、抗氧剂、络合剂、惰性气体、防腐剂、ph值调节剂、等渗调节剂、止痛剂等。其中，增加主要化学稳定性的附加剂包括抗氧剂、金属络合剂与惰性气体等；增加注射剂物理稳定剂的附加剂包括絮凝剂、湿润剂及乳化剂等；增加主药溶解度的附加剂有增溶剂、助溶剂等；抑制微生物生长的附加剂有抑菌剂；增加机体适应性的附加剂主要有ph调节剂、等张调节剂、止痛剂等。本发明提供的绿原酸组合物，除绿原酸与精氨酸外，优选还包括药学上可接受的粉针剂用支撑剂和/或抗氧剂等辅料。所述支撑剂为本领域技术人员熟知的支撑剂即可，并无特殊的限制，本发明中优选为甘露醇、乳糖与甘氨酸中的一种或多种；所述抗氧剂为本领域技术人员熟知的抗氧剂即可，并无特殊的限制，本发明中优选为抗坏血酸、依地酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠中的一种或多种。冻干粉针属于注射用无菌粉末，临用前加入适当的溶剂(通常为灭菌注射用水)溶解成为注射剂，其按照容量大小可分为大容量注射剂(大于50ml)和小容量注射剂(小于20ml)，本发明提供的绿原酸冻干粉针优选适用于小容量注射剂，特别是皮下或肌内注射等更小的注射剂。根据临床治疗的需要，注射剂的给药途径主要有皮内注射、皮下注射、肌内注射、静脉注射、动脉注射、脊椎注射等，本发明提供的绿原酸冻干粉针组合物优选临床上适用于皮下/肌内注射或静脉注射给药。本发明还提供了一种上述绿原酸组合物的制备方法，包括：将绿原酸、精氨酸与水混合后，过滤除菌，冻干，得到绿原酸组合物。本发明对所有原料的来源并没有特殊的限制，为市售即可。其中，所述绿原酸、精氨酸均同上所述，在此不再赘述。将绿原酸、精氨酸与水混合；所述水优选为注射用水；混合使绿原酸与精氨酸完全溶解在水中即可；混合后溶液中绿原酸的浓度优选为1～20wt％，更优选为5～20wt％，再优选为8～15wt％，再优选为8～12wt％，最优选为10wt％。混合后，过滤除菌；过滤除菌是利用物理阻留的方法将溶液中的细菌除去，以达到无菌的目的；过滤除菌所用的器具是含有微小孔径的滤菌器；本发明中可使用常用的滤菌器如薄膜滤菌器、陶瓷滤菌器、石棉滤菌器或烧结玻璃滤菌器等，优选使用薄膜滤菌器；所述薄膜滤菌器中常用滤膜的孔径为0.45μm和0.22μm孔径，本发明中优选为0.22μm孔径的滤膜。过滤除菌后，优选灌装至西林瓶中，冻干，真空压塞，得到绿原酸冻干粉针组合物。在本发明中由于溶液中绿原酸浓度高，灌装量优选为0.5～1ml，更优选为0.5ml。因此无需使用20mm口径的西林瓶，使用13mm口径的西林瓶进行冻干即可；冻干即冷冻干燥，是指含水物料先经低温冻结成固体，然后在低温真空状态下，利用水的升华性能使其直接升华而干燥的方法。在本发明中冻干采用本领域技术人员熟知的方法即可，另外由于溶液中绿原酸浓度较高，因此使冷冻干燥的时间减少，冷冻干燥的具体程序-40℃预冻3h，抽真空，升温至-20℃开始升华，8h后进入二次干燥阶段。温度为20℃；二次干燥的时间为5～7h。通常冻干粉针剂质量标准中含水量在1％～4％，过高或高低均不利于产品的稳定；本发明得到的绿原酸冻干粉针组合物符合该质量标准。经无菌冻干成疏松块状物，临用前加入适当的溶剂(通常为灭菌注射用水)溶解得到注射剂；也可用0.9％氯化钠溶液或其他适宜的水溶液。为了进一步说明本发明，以下结合实施例对本发明提供的一种绿原酸组合物及其制备方法进行详细描述。具体实施方式下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。以下实施例中所用的试剂均为市售。对比例1参考专利cn103446064b的处方及工艺如下：组分用量(1000支)绿原酸7.5g(7.5mg/支)亚硫酸氢钠0.5g甘露醇20g水加至500ml取处方量90％的注射用水，冷却至室温(25℃)；加入称取处方量原辅料，充分搅拌至完全溶解，加磷酸氢二钠调节ph至3.3，补水至全量。经0.22μm滤膜过滤除菌；0.5ml/支灌装至3ml西林瓶中，放入冻干机中冻干，-40℃预冻3小时，系统抽真空，升温至-20℃开始升华，升华干燥时间约8小时；水份大部分升华后，提高板层温度，进入二次干燥阶段，20℃干燥6小时；二次干燥后，维持真空状态压塞；系统恢复常压，出箱。对比例2使用葡甲胺作为ph调节剂：组分用量(1000支)绿原酸50g葡甲胺26g水加至500ml取处方量90％的注射用水，冷却至室温(25℃)加入称取处方量原辅料，充分搅拌至完全溶解，补水至全量。经0.22μm滤膜过滤除菌，0.5ml/支灌装至2～3ml西林瓶中，加冻干塞。放入冻干机中冻干，-40℃预冻3小时，系统抽真空，升温至-20℃开始升华，升华干燥时间约8小时；水份大部分升华后，提高板层温度，进入二次干燥阶段，20℃干燥6小时；二次干燥后，维持真空状态压塞；系统恢复常压，出箱。对比例3使用乙醇胺作为ph调节剂：取处方量90％的注射用水，冷却至室温(25℃)。加入称取处方量原辅料，充分搅拌至完全溶解，补水至全量。经0.22μm滤膜过滤除菌，0.5ml/支灌装至2～3ml西林瓶中，加冻干塞。放入冻干机中冻干，-40℃预冻3小时，系统抽真空，升温至-20℃开始升华，升华干燥时间约8小时；水份大部分升华后，提高板层温度，进入二次干燥阶段，20℃干燥6小时；二次干燥后，维持真空状态压塞；系统恢复常压，出箱。实施例冻干粉针组合物包括绿原酸与精氨酸，具体组分见下表：取处方量90％的注射用水，冷却至室温(25℃)；加入称取处方量原辅料，充分搅拌至完全溶解，补水至全量。经0.22μm滤膜过滤除菌，0.5ml/支灌装至2～3ml西林瓶中，加冻干塞。放入冻干机中冻干，-40℃预冻3小时，系统抽真空，升温至-20℃开始升华，升华干燥时间约8小时；水份大部分升华后，提高板层温度，进入二次干燥阶段，20℃干燥6小时；二次干燥后，维持真空状态压塞；系统恢复常压，出箱。对实施例1～5及对比例1～3中得到冻干粉针产品进行检测；产品评价指标：纯度、ph值、外观、复溶速度。纯度测定方法：ph值测定方法：取冻干前溶液直接测定复溶速度：取样品1支，加入1ml注射用水，记录完全溶解的时间。实施例1～5及对比例1～3中得到冻干粉针产品的纯度、ph值、外观、复溶速度的检测结果见下表。对实施例1～5及对比例1～3中得到冻干粉针产品进行稳定性试验：对各样品进行影响因素试验，分别放置于60℃、40℃、光照条件下10天后，检测样品纯度，结果如下：由上表可知，加入精氨酸调节ph值后，冻干制剂稳定性明显优于对比例，特别是在高ph值以及高温条件下稳定性尤为明显，本发明提供的绿原酸冻干粉针组合物完全可以解决现有技术的相关问题。在同等ph条件下，加入精氨酸的样品稳定性远好于使用其他有机碱性化合物。本发明提供的绿原酸冻干粉针组合物具有常温稳定性好，无需冷藏；溶解度高、复溶体积小，临床上可使用更小的注射体积；ph值更接近人体耐受范围，刺激性小的优点。该绿原酸冻干粉针组合物适用于皮下/肌内给药的注射给药系统，能更好的满足生产、运输、使用过程中的安全性，为绿原酸临床应用提供了更有效的给药系统组合物。当前第1页12