用于增加睑板腺脂质分泌的药剂的制作方法

交叉引用本申请要求2017年3月29日提交的第62/478,501号美国临时申请的权益，该临时申请通过引用以其全文并入本文。
背景技术：
：睑板腺是垂直排列在睫毛附近的眼睑内的腺体。眼睑眨动的力量导致油分泌到后睑缘。该油是眼泪的“持久力量”，其有助于防止眼泪快速蒸发。在患有睑板腺功能障碍(mgd)的患者中，由于泪膜中的油过多或过少，因而视力受到影响。睑板腺是位于眼睑中的大型皮脂腺，并且其有别于皮肤，未与毛发相关联。睑板腺产生泪膜的脂质层，其保护泪膜免于水相的蒸发。睑板腺孔口位于睑缘的上皮侧，并且距离粘膜侧只有几百微米。该腺体位于上眼睑和下眼睑二者上，且上眼睑上腺体的量更多。单个睑板腺由成簇的分泌腺泡组成，这些分泌腺泡在长的中央导管周围呈圆形排列，并且通过短的小导管与睑板腺连接。中央导管的末端部分内衬有向内生长的上皮，该上皮覆盖自由睑缘并形成短的排泄导管，该排泄导管在睑缘的后部、恰好在内部眼睑边界附近的粘膜皮肤接合处前方开口为孔口。由脂质组成的油性分泌物在分泌腺泡内合成。脂质分泌物在接近于体温时为液体，并且作为澄清流体(称为“睑脂”)递送到睑缘的皮肤。其在上下睑缘上形成浅储器，并且由胆固醇、蜡、胆固醇酯、磷脂以及少量甘油三酯、三酰基甘油和烃的复杂混合物组成。单独的睑板腺在上下眼睑中平行排列，且在整个睑板长度上呈单排。该腺体的范围大致对应于睑板的尺寸。睑缘是生理上重要的脂质分泌物(睑脂)的来源。眼睑睑板腺分泌物形成泪膜的外层。归因于该泪膜脂质层的功能是：(1)在眨眼过程中促进眼睑运动的润滑剂，(2)防止水性泪液蒸发的屏障，以及(3)阻隔微生物和有机物质如花粉进入的屏障。运动的眼睑将睑脂横跨眼表面进行散布，并将其与泪腺产生的泪水(at)混合。睑脂与at的混合和散布产生被称为泪膜(tf)的接近连续的结构，其覆盖整个眼表面并且用于多种目的，包括保护、润滑、营养和抗微生物等。tf也与视敏度有关，因为它提供了更平滑的眼表面，这改善了眼的光学性质。然而，tf并不均匀，鉴于脂质不容易形成水溶液并且倾向于通过形成明显疏水的富含脂质的亚相而分离，因此这并不令人惊讶。关于tf结构的经典观点假定了tf的三层组织结构。由于脂质通常比水密度小，因此它们积聚在水性亚相表面上，从而形成富含脂质的tf最外层(也称为泪膜脂质层或tfll)。在tfll下方是富含水溶性蛋白质、碳水化物、盐和其它或多或少亲水性的化合物的更亲水的水性层。据认为，最接近角膜上皮的是相对亲水的富含粘蛋白的糖萼层，该层主要由膜结合的粘蛋白形成。通过使用干涉测量法，tfll的深度估计约为40-90纳米，而发现水性层厚得多，约为4微米。重要的是认识到所有这三层都是柔软的动态结构，其中由于许多同时显现的因素而发生变化，例如，眼睑的机械运动，睑脂、泪水和粘蛋白的持续分泌，以及at蒸发及通过鼻导管的排出。如果眼睛被迫保持张开不眨眼，则人的tf将迅速变差、变薄并破裂——这种现象被称为泪膜破裂。以秒为单位测量人的泪膜破裂时间(tbut)。它长期以来一直被认为是评价眼表面健康的重要且客观的诊断参数。tbut广泛用于诊断干眼症的眼科实践，干眼症是一种多因素的病况(或疾病)，其发病和进展通常与tf，特别是tfll的恶化有关。当破裂发生时，角膜暴露于空气，导致患者不适。tf不完全覆盖眼表面也增加了由于过度脱水、磨损、刺激、炎症、感染等导致角膜上皮细胞受损的机会。tf不稳定的另一个原因是睑板腺不能分泌足够的必要质量的睑脂，例如由于与睑板腺炎症和/或阻塞有关的mgd所导致的。由睑板腺产生的脂质是泪膜表面脂质层的主要成分，该脂质层保护泪膜免于水相的蒸发，并且也被认为通过降低表面张力而使泪膜稳定。正如heiligenhaus等人(heiligenhaus等人,therapie.vonklin.monatsbl.augenheilkd.,1994,vol.204,第162–168页)的研究所报道的，相比于单独的水相的改变，脂质相的改变更多地指向mgd，在该研究中观察到76.7％的干眼症患者出现脂质缺乏，而仅11.1％的患者具有单独的水相改变。因此，睑脂脂质对维持眼表面健康和完整性至关重要。脂质是睑脂(也称为“睑板腺分泌物”)的主要成分。睑脂的生物化学组成极其复杂并且与皮脂大不相同。普遍认为脂质是人类和动物睑脂的主要成分。对于人类，已经在睑板腺分泌物中鉴定出超过90种不同的蛋白质。大量研究人员已经试图表征睑脂，并且研究人员已经回收了大范围的量的脂质(表1)，可能的原因是使用了不同的收集和分析技术。表1.睑脂中存在的每种脂质的类型和量。脂质极性量游离脂肪酸非极性0.0-10.4％蜡酯非极性28.0-68.0％胆固醇酯非极性0.0-39.0％二酯非极性2.3-17.6％游离甾醇非极性痕量-30.0％甘油单酯非极性痕量-2.6％甘油二酯非极性痕量-3.3％甘油三酯非极性痕量-9.0％脂肪酸酰胺非极性未知烃非极性痕量-7.5％磷脂极性0.0-14.8％鞘脂极性未知ω-羟基脂肪酸极性未知在未患mgd的受试者中，睑脂脂质是一滩澄清的油。在mgd中，所分泌的物质的量、性质和组成发生改变。因此，mgd的特征在于脂质缺乏。此外，在mgd中，所挤出的脂质的性质在外观上从澄清流体变为含有微粒物质的粘性流体及稠密不透明的牙膏样物质。睑板孔口可显现出升高至眼睑表面水平之上，这被称为填塞或凸起，并且是由末端导管的阻塞和粘度增加的睑板脂质的挤出而引起的。睑脂的脂质缺乏和粘度增加是mgd的重要致病因素，并且可见于大多数阻塞性mgd病例中。因此，非常希望增强睑板腺的脂肪生成和脂质分泌，以克服脂质缺乏以及降低睑脂油组合物的粘度，这使得睑板腺的任何阻塞能够溶解。正如通过分子生物学和免疫组织化学所证实的，如在制备为涂片的挤出的病理性人睑脂中或在印迹细胞学和组织病理学中所见，高度粘性的睑脂与过角化的细胞材料混合。在动物模型的阻塞腺体内也观察到粘度增加。因此需要软化和溶解阻塞的脂质以疏通导管并恢复排泄出的脂质的正常流动。睑板腺功能障碍或mgd是干眼综合征的主要病因，并且其特征往往在于睑板腺没有将足够的脂质递送至眼睛表面。mgd也被称为后睑缘炎，是睑缘疾病最常见的形式。在早期阶段，患者通常无症状，但如果不加处理，mgd可引起或加重干眼症状和眼睑炎症。脂腺由于分泌物变稠而被堵塞。长期堵塞的腺体最终无法分泌油脂，导致泪膜永久变化和干眼症。mgd的症状包括眼睛干燥、灼热感、瘙痒、粘滞、溢泪、对光敏感、红眼和视力模糊。mgd是干眼综合征的主要病因。干眼综合征的发生是广泛的，仅在美国就影响着约两千万名患者。干眼综合征是由眼泪产生不足或水分从眼睛表面过度蒸发引起的眼表面病症。眼泪对于角膜健康至关重要，因为角膜不含血管，而是依赖于眼泪来提供氧气和营养物。眼泪和泪膜由脂质、水和粘液组成，并且破坏其中任何一种都可能引起干眼症。mgd与后睑缘炎不同义，后者描述了后睑缘的炎症状况。mgd可引起后睑缘炎，但mgd可能不总是与炎症或后睑缘炎相关。mgd的临床体征包括睑板腺脱离(dropout)、睑板腺分泌改变和眼睑形态改变。阻塞性mgd的特征在于以下所有或部分方面：1)慢性眼睛不适，2)睑板腺孔口周围的解剖学异常(其为以下一种或多种：血管充血，粘膜皮肤接合的前或后移位，睑缘的不规则性)，以及3)腺体分泌的阻塞或在性质上或量上的变化(适度指压导致的睑脂挤出物减少)。目前，mgd的标准治疗在某种程度上局限于加热眼睑以增加油脂产生并且通过温热的敷布融化已经在腺体中凝固的油，向靠近眼线的睑缘施加轻压，以及手动移除增稠的分泌物以及药物治疗剂如抗生素和抗炎剂。然而，这些治疗可能会让患者和眼科医师感到沮丧。按摩眼睑只能部分且暂时性地缓解睑板腺的阻塞，并且这可能是痛苦的。传统的温热敷布方法将热量施加到眼睑的外表面；因此热量通常效果有限。局部使用抗生素和皮质类固醇来抑制与mgd相关的睑缘的细菌定植和炎症已被证明可有效缓解mgd的症状和体征，然而，这种治疗的成功可能与改变的睑脂无关。抗生素，特别是四环素(包括多西环素、四环素和米诺环素)和阿奇霉素，用来抑制细菌定植并减少睑缘的炎症；然而，药物不耐性和长期治疗限制了口服抗生素的临床应用。眼睑保健被认为是mgd的主要治疗方法，并且由三个部分组成：1)施加热量，2)眼睑的机械按摩，以及3)清洁眼睑。眼睑加温程序通过融化病理上改变的睑板脂质而改善睑板腺分泌。通过温热的敷布或装置实现加温。机械眼睑保健包括采用擦拭、机械挤压和用多种眼睫毛和睑缘溶液清洁。任选地，还用低变应原性条皂、稀的婴儿洗发液或商品眼睑擦拭物清洁睑缘。睑板腺的物理挤压在医师诊室中进行或由患者在家中进行。该技术从抵靠眼球轻柔按摩眼睑到有力地将眼睑相互推挤或在眼睑内表面上的刚性物体与手指、拇指或眼睑外表面上的刚性物体(如玻璃棒、棉签(q-tip)或金属桨)之间推挤而各不相同。在挤压期间，眼睑内表面上的刚性物体保护眼球免遭通过眼睑传递的力的伤害，并且提供稳定的抵抗力，以增加施加于腺体上的力的大小。眼睑加温具有局限性，因为加温融化脂质，但不能应对角质化物质的移动。此外，由于角膜变形，眼睑加温引起短暂的视觉退化。机械眼睑保健也具有局限性，因为去除阻塞所需的力可能较大，导致患者的明显疼痛。机械眼睑保健的有效性受到该程序期间患者忍受相关疼痛的能力的限制。其它用于mgd的治疗也具有局限性。通过睑板腺挤压进行的睑板腺阻塞的物理疏通是改善睑板腺分泌和干眼综合征的可接受的方法。另外，睑板腺管道的探通已经用于疏通阻塞的管道。然而，这两种方法(挤压和探通)均受到该程序引起的疼痛、对腺体和管道结构的可能的物理损害以及它们的短暂效果(估计为数天和数周)的限制。总之，这些治疗中的每一种均具有不同的缺点，因而mgd的治疗仍存在挑战性。因此，需要这样的方法来改善患者的舒适性，其不会对睑板腺和管道造成伤害，将会降低对频繁就诊的依赖性并改善睑脂的分泌。新出现的mgd疗法包括使用粘液溶解剂和/或角质溶解剂。粘液溶解疗法的目标是通过优化粘液的粘弹性来促进生理清除，而角质溶解疗法旨在软化角蛋白(皮肤的主要成分)。尽管存在可能的mgd治疗选项，但仍然难以获得体征和症状的完全缓解。技术实现要素：一个实施方案提供了一种用于增加睑板腺的脂质分泌的方法，其包括向有需要的患者的睑缘局部施用眼用组合物，该眼用组合物包含眼科上可接受的载体和有效量的至少一种增加睑板腺中的脂肪生成或增加睑板腺的脂质分泌的药剂，其中所述药剂包含巯基基团。另一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂是布西拉明(bucillamine)。另一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂是具有以下提供的结构的化合物或其药学上可接受的盐：另一个实施方案提供了所述方法，其中所述眼科上可接受的载体包含至少一种眼科上可接受的赋形剂。另一个实施方案提供了所述方法，其进一步包括向所述患者施用角质溶解剂的步骤。另一个实施方案提供了所述方法，其中所述角质溶解剂选自过氧化苯甲酰、煤焦油、地蒽酚、水杨酸、二硫化硒、α-羟基酸、尿素、硼酸、视黄酸、乳酸、巯基乙酸钠或尿囊素。一个实施方案提供了一种用于治疗睑板腺功能障碍的方法，其包括向有需要的患者的睑缘局部施用包含眼科上可接受的载体和治疗有效量的至少一种药剂的眼用组合物，其中所述药剂包含巯基基团。另一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂是布西拉明或其药学上可接受的盐。另一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂是具有以下提供的结构的化合物或其药学上可接受的盐：另一个实施方案提供了所述方法，其中所述眼科上可接受的载体包含至少一种眼科上可接受的赋形剂。另一个实施方案提供了所述方法，其进一步包括向所述患者施用角质溶解剂的步骤。另一个实施方案提供了所述方法，其中所述角质溶解剂选自过氧化苯甲酰、煤焦油、地蒽酚、水杨酸、二硫化硒、α-羟基酸、尿素、硼酸、视黄酸、乳酸、巯基乙酸钠或尿囊素。另一个实施方案提供了所述方法，其中所述睑板腺功能障碍的特征在于睑板腺的阻塞。另一个实施方案提供了所述方法，其中重复向患者的睑缘局部施用所述药剂，直至睑板腺阻塞得到基本消除。另一个实施方案提供了所述方法，其中定期重复向患者的睑缘局部施用所述药剂，以防止睑板腺阻塞的形成。附图说明本发明的新颖特征在所附权利要求书中具体阐述。通过参考以下对利用了本发明原理的说明性实施方案加以阐述的详细描述及附图，将会对本发明的特征和优点获得更好的理解，在附图中：图1是关于对照，在3d皮脂细胞上皮中的油红-o染色的图示；图2是关于1.0μm布西拉明，在3d皮脂细胞上皮中的油红-o染色的图示；图3是关于0.1μm布西拉明，在3d皮脂细胞上皮中的油红-o染色的图示；图4a是用布西拉明处理后，在mtt试验中的细胞活力的图示；图4b是用布西拉明处理后，hacat细胞增殖的图示；并且图4c是用布西拉明处理后，在人类皮肤模型系统中的离体评估中游离硫醇测定的图示。具体实施方式本文描述了通过施用增加睑板腺中的脂质产生、增加由睑板腺分泌的脂质的量和/或改变由睑板腺分泌的脂质的组成的含硫醇药剂来增强脂肪生成和/或脂质分泌的方法。本文所述的药剂包括例如供医师或其他训练有素的专业人员使用的用于急性治疗的药剂，以及例如供医师或其他训练有素的专业人员或患者使用的用于慢性治疗的药剂。本文描述了某些增强脂肪生成和脂质分泌的药剂；本文进一步提供了用于制备包含增强脂肪生成和脂质分泌的含硫醇药剂的组合物的方法以及它们在治疗患者的方法中的应用。本文可互换使用的术语“睑板腺功能障碍”和“mgd”是指睑板腺的慢性、弥漫性异常，其特征在于末端导管阻塞或腺分泌在性质或量上的变化，或其两者。mgd可导致泪膜粘度改变、眼刺激症状、炎症或眼表面疾病。mgd最突出的方面是睑板腺孔口和末端导管的阻塞以及睑板腺分泌物的改变。mgd也涉及睑板腺的功能异常，而“睑板腺疾病”描述了广泛的睑板腺病症，包括瘤形成和先天性疾病。根据本发明的原理，可以使用诱导脂肪生成和睑脂脂质分泌的含硫醇药剂，例如通过硫醇介导的脂质过度分泌机制治疗mgd。因此，药物诱导的细胞脂肪生成的激活代表了通过增强胆固醇合成和增加脂肪酸和甘油三酯的产生来治疗性处理睑板腺功能障碍的新方法，这通过降低睑脂脂质的熔点和粘度而导致睑脂脂质组成的改变，从而导致睑脂脂质更具流体外观。本文所述的增强脂肪生成和脂质分泌的含硫醇药剂可用作急性治疗(例如，由训练有素的专业人员或医师使用)或用作慢性治疗(例如，由患者掌控，或者由训练有素的专业人员或医师使用)。在某些实施方案中，使用本文所述的测定和方法来测试药剂(例如，如实施例中所述)。先前已报道，具有硫醇基团的药物会导致皮脂过量产生。据报道，含有硫醇基团的药物也会引起天疱疮，这是一种类似于脂溢性皮炎的皮肤病，其特征在于油性皮肤。黄嘌呤氧化还原酶(xor)是乳脂小滴分泌所必需的酶，已知以两种不同的、可相互转化的酶形式存在——硫醇还原形式(xd)和硫醇氧化形式(xo)，它们在酶性质和构象上不同。已显示乳腺组织和乳脂肪球膜(mfgm)含有能够将xd转化为xo的硫醇氧化酶。xor与顶端质膜之间的缔合由硫醇依赖性过程所介导，该过程涉及与嗜乳脂蛋白(乳腺中脂质小滴分泌所必需的mfgm中最丰富的蛋白质)、adph或其它膜蛋白形成二硫键交联，和/或xor的构象变化。xor的表达水平和顶端膜定位是分泌性乳腺上皮细胞的关键性质，并且xor的膜缔合在脂质分泌期间调节细胞质脂质小滴与顶端质膜的偶联。在一个方面，本发明提供了一种用于增加睑板腺的脂质分泌的方法，其包括向有需要的患者的睑缘局部施用眼用组合物，该眼用组合物包含眼科上可接受的载体和治疗有效量的至少一种增加睑板腺中的脂肪生成或增加睑板腺的脂质分泌的药剂，其中该药剂包含巯基基团。一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂是布西拉明或其药学上可接受的盐。另一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂是具有以下提供的结构的化合物或其药学上可接受的盐：在一个方面，本发明提供了一种用于增加睑板腺的脂质分泌的方法，其包括向有需要的患者的睑缘局部施用眼用组合物，该眼用组合物包含眼科上可接受的载体和治疗有效量的增加睑板腺中的脂肪生成或增加睑板腺的脂质分泌的药剂，其中该药剂包含巯基基团。一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂是布西拉明或其药学上可接受的盐。另一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂是具有以下提供的结构的化合物或其药学上可接受的盐：在一个方面，本发明提供了一种用于增加睑板腺的脂质分泌的方法，其包括向有需要的患者的睑缘局部施用眼用组合物，该眼用组合物由眼科上可接受的载体和治疗有效量的增加睑板腺中的脂肪生成或增加睑板腺的脂质分泌的药剂组成，其中该药剂包含巯基基团。一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂是布西拉明或其药学上可接受的盐。另一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂是具有以下提供的结构的化合物或其药学上可接受的盐：在一个方面，本发明提供了一种用于增加睑板腺的脂质分泌的方法，其包括向有需要的患者的睑缘局部施用眼用组合物，该眼用组合物由眼科上可接受的载体和治疗有效量的增加睑板腺中的脂肪生成或增加睑板腺的脂质分泌的药剂组成，其中该药剂包含巯基基团，并且其中该眼科上可接受的载体包含至少一种眼科上可接受的赋形剂。一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂是布西拉明或其药学上可接受的盐。另一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂是具有以下提供的结构的化合物或其药学上可接受的盐：在一个方面，本发明提供了一种用于增加睑板腺的脂质分泌的方法，其包括向有需要的患者的睑缘局部施用眼用组合物，该眼用组合物由眼科上可接受的载体和治疗有效量的增加睑板腺中的脂肪生成或增加睑板腺的脂质分泌的药剂组成，其中该药剂包含巯基基团，并且其中该眼科上可接受的载体包含不超过两种眼科上可接受的赋形剂。一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂是布西拉明或其药学上可接受的盐。另一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂是具有以下提供的结构的化合物或其药学上可接受的盐：在一个方面，本发明提供了一种用于增加睑板腺的脂质分泌的方法，其包括向有需要的患者的睑缘局部施用眼用组合物，该眼用组合物由眼科上可接受的载体和治疗有效量的增加睑板腺中的脂肪生成或增加睑板腺的脂质分泌的药剂组成，其中该药剂包含巯基基团，并且其中该眼科上可接受的载体包含不超过三种眼科上可接受的赋形剂。一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂是布西拉明或其药学上可接受的盐。另一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂或其药学上可接受的盐是具有以下提供的结构的化合物或其药学上可接受的盐：在一个方面，本发明提供了一种用于增加睑板腺的脂质分泌的方法，其包括向有需要的患者的睑缘局部施用眼用组合物，该眼用组合物由眼科上可接受的载体和治疗有效量的增加睑板腺中的脂肪生成或增加睑板腺的脂质分泌的药剂组成，其中该药剂包含巯基基团，并且其中该眼科上可接受的载体包含不超过四种眼科上可接受的赋形剂。一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂是布西拉明或其药学上可接受的盐。另一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂或其药学上可接受的盐是具有以下提供的结构的化合物或其药学上可接受的盐：在某些实施方案中，上述方法进一步包括向患者施用角质溶解剂的步骤。在某些实施方案中，该角质溶解剂选自过氧化苯甲酰、煤焦油、地蒽酚、水杨酸、二硫化硒、α-羟基酸、尿素、硼酸、视黄酸、乳酸、巯基乙酸钠或尿囊素。在某些实施方案中，用于增加睑板腺的脂质分泌的方法，其包括向有需要的患者的睑缘局部施用眼用组合物，该眼用组合物包含眼科上可接受的载体和治疗有效量的至少一种增加睑板腺中的脂肪生成或增加睑板腺的脂质分泌的药剂，其中该药剂包含巯基基团，并且其中该药剂表现出脂肪生成作用和角质溶解作用。在一些情况下，所述表现出脂肪生成作用和角质溶解作用的药剂是布西拉明或其药学上可接受的盐。在一些情况下，所述表现出脂肪生成作用和角质溶解作用的药剂是以下提供的化合物或其药学上可接受的盐：在某些实施方案中，睑板腺功能障碍的特征在于睑板腺的阻塞。在某些实施方案中，重复向患者的睑缘局部施用所述药剂，直至睑板腺阻塞得到基本消除。在某些实施方案中，定期重复向患者的睑缘局部施用所述药剂，以防止睑板腺阻塞的形成。在某些实施方案中，上述方法导致由睑板腺产生的脂质的量的治疗有效增加。在某些实施方案中，上述方法导致由睑板腺分泌的脂质的量的治疗有效增加。在某些实施方案中，上述方法导致由睑板腺分泌的脂质的组成的改变。在某些实施方案中，上述方法导致由睑板腺分泌的脂质的粘度的改变，优选降低。在一些实施方案中，配制并涂敷活性剂，使得它们对眼睛表面是可接受的(即，不会对眼睛上皮表面造成过度刺激或破坏)，并且不破坏与所述组合物接触的脂质生成细胞。在一些实施方案中，以对施用所述药剂的医师或患者而言可接受且实用的持续时间和频率来涂敷所述组合物。例如，医师每周一次或每周两次涂敷本文所述的组合物持续数周以诱导由睑板腺分泌的脂质的量的增加，并且患者每天涂敷不同的组合物，或者患者每天使用更强效的组合物持续数周，随后，在之后每天使用效力较弱的组合物。在一些实施方案中，患者每天一次或数次涂敷该组合物。在一些实施方案中，涂敷方法根据药剂的浓度和/或脂质缺乏的程度而变化。在其它实施方案中，调整所述组合物的涂敷方法来增加在目标组织上的渗透或停留时间以增强治疗效果。在其它实施方案中，改变所述组合物的涂敷方法来增加在目标组织上的渗透或停留时间以使必需的涂敷时间长度最小化。在其它实施方案中，配制所述组合物(例如，通过调节粘度和/或皮肤粘附性)以增加与目标组织的接触，同时使与非目标组织(包括眼睛)的接触最小化，从而限制或减少任何不期望的附带活性。在某些实施方案中，对所述药剂和赋形剂的浓度进行优化，以递送最低有效浓度的药剂以实现治疗益处，同时使任何眼刺激或破坏或者对眼组织周围的刺激或破坏最小化。本文所述的方法和组合物是用于增加由睑板腺分泌的脂质的量、改变由睑板腺分泌的脂质的组成并且/或者降低由睑板腺分泌的脂质的粘度的手段，从而增强任何睑板腺阻塞的溶解并改善泪膜破裂时间(tbut)。在本发明方法中使用的组合物包含至少一种增强脂肪生成和脂质分泌的含硫醇药剂。在一些实施方案中，该药剂是引起睑脂产生增加的含硫醇药物。在一些实施方案中，该药剂是含硫醇药剂布西拉明或其药学上可接受的盐。另一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂是具有以下提供的结构的化合物或其药学上可接受的盐：一种用于增加睑板腺的脂质分泌的方法，其包括向有需要的患者的睑缘局部施用眼用组合物，该眼用组合物包含眼科上可接受的载体和有效量的至少一种增加睑板腺中的脂肪生成或增加睑板腺的脂质分泌的药剂，其中该药剂是布西拉明或其药学上可接受的盐。另一个实施方案提供了所述方法，其中所述药剂是具有以下提供的结构的化合物或其药学上可接受的盐：术语“维持治疗”或“维持剂量方案”是指针对被诊断为患有病症/疾病(例如mgd)的受试者或患者的治疗方案，以使其能够维持在给定状态下的健康，例如，缓解。在一个实施方案中，在维持治疗设置中使用的增强脂质分泌的含硫醇药剂是布西拉明或其药学上可接受的盐。在另一个实施方案中，提供了所述方法，其中所述药剂是具有以下提供的结构的化合物或其药学上可接受的盐：一个实施方案提供了一种通过施用包含增强脂质分泌的含硫醇药剂的局部组合物来增强有需要的患者中睑板腺的脂质分泌的方法，其中该组合物包含0.01％、0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1.0％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％、1.5％、1.6％、1.7％、1.8％、1.9％、2.0％、2.5％、5％或10％的增强脂质分泌的含硫醇药剂。在一些实施方案中，该组合物被配制为悬浮液、乳液、乳膏、洗液、凝胶或软膏。在一些实施方案中，该组合物作为薄层涂敷于干净的皮肤，最初每隔一天一次，然后随着耐受性发展逐渐增加到最多每天两次。在一些实施方案中，该组合物是软膏或糊剂。在一些实施方案中，该组合物开始为0.1％软膏。在7天后，浓度可增加到0.25％，随后每周倍增(必要时)至最大强度2％。在一些实施方案中，将软膏薄层每天一次涂敷于患处，持续2-4周。在一些实施方案中，将软膏在适当位置保留10-20分钟，之后彻底冲洗该区域。在一些实施方案中，增强脂质分泌的含硫醇药剂的浓度逐渐增加至最大5％，并且只要需要，治疗就持续进行。在其它实施方案中，本文所述的局部组合物与药学上合适或可接受的载体(例如，药学上合适(或可接受)的赋形剂，生理上合适(或可接受)的赋形剂，或生理上合适(或可接受)的载体)相组合。例如，在remington:thescienceandpracticeofpharmacy(gennaro,第21版.mackpub.co.,easton,pa(2005))中描述了示例性赋形剂。一个实施方案提供了一种通过施用包含增强脂质分泌的含硫醇药剂的局部组合物来治疗睑板腺功能障碍的方法。一个实施方案提供了一种通过施用包含与角质溶解剂组合的增强脂质分泌的含硫醇药剂的局部组合物来治疗睑板腺功能障碍的方法。在一些实施方案中，包含增强脂质分泌的含硫醇药剂的组合物的局部施用每周进行一次。在一些实施方案中，包含增强脂质分泌的含硫醇药剂的组合物的局部施用每周进行两次。在一些实施方案中，包含增强脂质分泌的含硫醇药剂的组合物的局部施用每隔一天进行一次。在一些实施方案中，包含增强脂质分泌的含硫醇药剂的组合物的局部施用每天进行一次。在一些实施方案中，包含增强脂质分泌的含硫醇药剂的组合物的局部施用每天进行若干次。在一些实施方案中，所述方法包括在急性治疗场景中的治疗。在另一个实施方案中，所述方法包括对未接受过类似或相同治疗的患者进行的治疗。在另一个实施方案中，所述方法包括在慢性治疗场景中的治疗。在另一个实施方案中，所述方法包括在维持治疗场景中的治疗。在急性治疗场景中，增强脂质分泌的含硫醇药剂的施用剂量可以高于在慢性治疗场景或维持治疗场景中使用的增强脂质分泌的含硫醇药剂的施用剂量。在急性治疗场景中，增强脂质分泌的含硫醇药剂可以不同于在慢性治疗场景中使用的增强脂质分泌的含硫醇药剂。在一些实施方案中，疗程在初始治疗阶段以急性治疗场景开始，随后过渡为慢性治疗场景或维持治疗场景。在某些临床形式中，患者可能需要由医师或医疗保健专业人员通过放置本文所述的一种治疗剂的更高浓度组合物而施用的初始治疗。在需要更高浓度组合物的情况下，其涂敷可能需要眼部防护或其它措施以使眼表面或周围组织的刺激或破坏的影响最小化。在这样的程序后，可给予患者带回家的活性剂的不同组合物，以便定期涂敷于睑缘以维持睑板腺的通畅。根据组合物活性和期望的治疗结果概况，这样的涂敷可以每天两次、每天一次、每周一次或每月一次进行。本文所述的治疗方法的一个方面是组合物的局部施用位置。在一个实施方案中，施用包含增强脂质分泌的含硫醇药剂的组合物，使得不对眼产生刺激。在一个实施方案中，将包含增强脂质分泌的含硫醇药剂的组合物施用于睑缘。本文所述的治疗方法的另外一个实施方案是，使用为眼提供的保护性元件来避免对眼的刺激。虽然本文所述的组合物通常为非刺激性的，但在一些实施方案中(例如，高浓度药剂或当用于敏感的眼睛时)，保护性元件为患者提供了附加的安全层和舒适性。在一个实施方案中，在施用包含增强脂质分泌的含硫醇药剂的组合物的同时，将眼防护物放置在眼上，以减少药剂与角膜和/或结膜的接触，从而减少发生对眼的刺激。在一些实施方案中，眼防护物是接触镜或眼遮盖物。在一些实施方案中，该眼遮盖物包含自粘附物。在一个实施方案中，在施用包含增强脂质分泌的含硫醇药剂的组合物的同时，将眼睑拉离眼球，以减少药剂与角膜和/或结膜的接触，从而减少发生对眼的刺激。如本文中所用的，除非上下文另有明确说明，否则单数形式“一个”、“一种”和“该”包括复数指代物。因此，例如，提及“一种药剂”包括多种这样的药剂，并且提及“该细胞”包括提及一个或多个细胞(或多种细胞)以及本领域技术人员已知的其等同物，等等。当本文针对物理性质如分子量或化学性质如化学式使用某范围时，意欲包括该范围及其中具体实施方案的所有组合和子组合。当术语“约”涉及数值或数值范围时，其意指所提及的数值或数值范围是在实验变异性内(或在统计学实验误差内)的近似值，因此数值或数值范围可在规定数值或数值范围的1％至15％之间变化。术语“包含”(及相关术语，如“含有”或“具有”或“包括”)并非意在排除以下情形：在其它某些实施方案中，例如，本文所述的任何物质组成、组合物、方法或过程等的实施方案可由所描述的特征“组成”或“基本由所述特征组成”。术语“布西拉明”是指具有以下结构的化合物：如本文所用的，术语“眼科上可接受的载体”是指当根据本发明的教导涂敷时不会对生物体的眼睛造成显著刺激并且不消除由其承载的药剂的药理活性和性质的载体。眼科上可接受的载体通常是无菌的，基本上不含异物颗粒，并且ph通常在5-8的范围内。优选地，ph尽可能接近泪液的ph(7.4)。例如，眼科上可接受的载体是无菌的等渗溶液，如等渗氯化钠或硼酸溶液。这类载体通常是含有氯化钠或硼酸的水溶液。也可用磷酸盐缓冲盐水(pbs)溶液。如本文所用的，术语“有效量”是指实现特定条件，如增加睑板腺的脂质分泌、降低由睑板腺分泌的脂质的熔点或降低由睑板腺分泌的脂质的粘度所需的量。如本文所用的，术语“治疗有效量”是指有效治疗、预防、缓解或改善疾病症状的治疗有效化合物或其药学上可接受的盐的量。术语“治疗有效化合物”是指有效治疗、预防、缓解或改善疾病症状的化合物。如本文所用的，术语“巯基基团”是指-sh官能团。如本文所用的，术语“硫醇基团”是指-c-sh或r-sh基团，其中r代表烷烃、烯烃或其它含碳的原子基团。如本文所用的，术语“眼科上可接受的赋形剂”是指当根据本发明的教导涂敷时不会对生物体的眼睛造成显著刺激并且不消除由其承载的药剂的药理活性和性质的载体。如本文所用的，术语“角质溶解剂”是指松弛和去除皮肤角质层或改变皮肤角蛋白层结构的化合物。如本文所用的术语“治疗”或“处理”包括在慢性或急性治疗场景中降低、缓解、减退、改善、减轻或减少与mgd相关的症状。在一个实施方案中，治疗包括增加脂质产生。在一个实施方案中，治疗包括增加脂质分泌。在一个实施方案中，治疗包括降低所分泌的脂质的粘度。术语“复发”或“减少复发”是指在慢性治疗场景中mgd症状的回复。术语“疏通”是指(至少部分地)清通阻塞的睑板腺管道或孔口并且/或者维持睑板腺管道或孔口的通畅。如本文所用的，术语“增强脂质分泌的含硫醇药剂”是指导致睑脂细胞(meibocytes)分化增加或睑脂细胞增殖增加或者增加由睑板腺分泌的脂质的量或改变睑脂脂质组成的含硫醇药剂。如本文所用的，术语“睑脂脂质”是指由睑板腺分泌的脂质。术语“洗液”描述了乳液液体剂型。该剂型通常用于外部涂敷于皮肤(usfdadrugnomenclaturemonograph，编号c-drg-00201)。术语“乳膏”描述了乳液半固体剂型，通常含有>20％的水和挥发物和/或<50％的烃、蜡或多元醇作为媒介物。乳膏比洗液更具粘性。该剂型通常用于外部涂敷于皮肤(usfdadrugnomenclaturemonograph，编号c-drg-00201)。术语“软膏”描述了半固体剂型，通常含有<20％的水和挥发物和/或>50％的烃、蜡或多元醇作为媒介物。该剂型通常用于外部涂敷于皮肤或粘膜(usfdadrugnomenclaturemonograph，编号c-drg-00201)。术语“溶液”描述了澄清、均质的液体剂型，其含有溶解于溶剂或相互混溶的溶剂混合物中的一种或多种化学物质(usfdadrugnomenclaturemonograph，编号c-drg-00201)。术语“悬浮液”是指含有大到足以沉降的固体颗粒的非均质混合物。“药学上可接受的盐”包括酸加成盐和碱加成盐。本文所述的细胞周期蛋白依赖性激酶(cdk)化合物的任何一种抑制剂的药学上可接受的盐旨在涵盖任何和所有药学上合适的盐形式。本文所述化合物的优选的药学上可接受的盐是药学上可接受的酸加成盐和药学上可接受的碱加成盐。“药学上可接受的酸加成盐”是指保留游离碱的生物学有效性和性质的那些盐，其在生物学上或其它方面都不是不希望的，并且是与诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、氢碘酸、氢氟酸、亚磷酸等无机酸形成的。还包括与有机酸形成的盐，该有机酸例如是脂肪族一元和二元羧酸、苯基取代的链烷酸、羟基链烷酸、链烷二酸、芳香族酸、脂肪族和芳香族磺酸等，并且包括例如乙酸、三氟乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。因此，示例性的盐包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、硝酸盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、三氟乙酸盐、丙酸盐、辛酸盐、异丁酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、苯乙酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐等。还考虑了氨基酸的盐如精氨酸盐、葡糖酸盐和半乳糖醛酸盐(参见，例如，berges.m.等人,"pharmaceuticalsalts,"journalofpharmaceuticalscience,66:1-19(1997))。在一些实施方案中，碱性化合物的酸加成盐是根据技术人员熟悉的方法和技术，通过使游离碱形式与足量的所需酸接触以产生盐而制备的。“药学上可接受的碱加成盐”是指保留游离酸的生物学有效性和性质的那些盐，其在生物学上或其它方面都不是不希望的。这些盐是通过将无机碱或有机碱添加到游离酸中而制备的。在一些实施方案中，药学上可接受的碱加成盐用金属或胺，如碱金属和碱土金属或有机胺形成。衍生自无机碱的盐包括但不限于钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰、铝盐等。衍生自有机碱的盐包括但不限于以下物质的盐：伯胺、仲胺和叔胺，取代胺，包括天然存在的取代胺，环胺和碱性离子交换树脂，例如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、二乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、2-二乙基氨基乙醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、n,n-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、海巴明(hydrabamine)、胆碱、甜菜碱、乙二胺、亚乙基二苯胺、n-甲基葡糖胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、n-乙基哌啶、多胺树脂等。参见berge等人，同上。实施例实施例1：在皮脂细胞的3d模型培养物中体外评价含硫醇化合物对脂质合成的影响。由于睑板腺的分泌细胞(睑脂细胞)与皮脂腺的分泌细胞(皮脂细胞)具有相似性，这可从它们的类似结构、类似功能及其联合胚胎发育(knop2011_iovs)上得到验证，因此含硫醇脂质对脂质产生的影响可以在皮脂细胞的3d模型培养物中进行评价。另见：barrault2012,immortalizedsebocytescanspontaneouslydifferentiateintoasebaceous-likephenotypewhenculturedasa3depithelium,exp.derm,21:299-319。在皮脂细胞的3d模型培养物中评价不同化合物对脂质合成的影响。候选药物是包含硫醇基团的化合物。二硫化硒(分散在羧甲基纤维素-cmc中的ses2)作为阳性对照。由于皮脂细胞分化与脂质合成及积聚增加相关，因此通过量化3d皮脂细胞培养物(人细胞系-sebo662)中的脂质积聚来评价增殖和分化。通过用油红染色进行脂质染色来评价脂质积聚。将皮脂细胞sebo662培养成三维(3d)上皮并分化成皮脂样表型。用测试化合物处理或不处理(对照)皮脂细胞并孵育14天。所有实验均进行3次。孵育后，将组织速冻。使用油红-o溶液对甲醛固定的冷冻切片进行染色并使用苏木精进行复染。对于每种测试条件，使用配备有照相机的光学显微镜观察切片。每个重复样品拍摄5张照片，每个处理条件获得15个值。通过计算脂质小滴表面积来对每个样品中的脂质含量进行定量。对测试化合物与对照的脂质小滴表面积之间的所有数据点进行定量比较。结果：图1是关于对照，在3d皮脂细胞上皮中的油红-o染色的图示。图2是关于1.0μm布西拉明，在3d皮脂细胞上皮中的油红-o染色的图示。图3是关于0.1μm布西拉明，在3d皮脂细胞上皮中的油红-o染色的图示。定量比较在两种测试浓度下，0.01μm和0.1μm的二硫化硒(ses2)引起在3d皮脂细胞的上部区域中脂质积聚的统计学显著增加(分别为对照的282％和348％)。以0.1μm和1μm测试的布西拉明引起在3d皮脂细胞的上部区域中脂质积聚的统计学显著增加(分别为对照的172％和214％)。在0.01μm的浓度下，观察到皮脂产生的非显著增加(115％)。结论浓度为0.1μm和1μm的布西拉明对3d皮脂细胞模型中的脂质合成具有显著的刺激作用。实施例2：布西拉明的角质溶解作用的评价最初进行剂量响应和时程分析，以评价布西拉明对hacat细胞活力的影响。然后，通过brdu掺入进一步评价所选择的无毒性浓度，以确定测试物降低角质形成细胞增殖速率的能力。另外，在从人类皮肤获得的角质层上测试了测试物还原硫醇部分并因此减轻睑板腺阻塞的能力。剂量响应和时程分析在加湿条件下，于37℃和5％co2下，将细胞在添加或不添加六种浓度的测试物的情况下孵育24、48和72小时。在每个孵育期结束时，通过mtt试验测量细胞活力。从所有测量值中减去空白对照。结果在图4a中提供。hacat更新率测定通过使用brdu测定检查用测试物处理后的hacat细胞的增殖速率。通过elisa酶标仪记录更新率的比色评价。结果在图4b中提供。人类皮肤模型系统中的离体评估人类皮肤器官培养物从接受整形手术的健康受试者获得。该研究在手术当天开始。为了从样品混合物中分离出游离硫醇，将样品与等体积的tca(三氯乙酸)一起孵育5min。然后，将试管在室温下以10,000rpm离心15min。评价沉淀物。结果在图4c中提供。结论体内—布西拉明通过降低角质形成细胞的更新率显示出抑制角化(keratostatic)的功效。离体—布西拉明通过还原硫醇部分以减轻睑板腺阻塞的能力显示出角质溶解功效，并且在该测定中显示出显著作用，并且在无毒性浓度下使游离硫醇部分增加了大约6倍。实施例3：包含增强脂质分泌的含硫醇药剂的药物组合物的制备。将2.5克布西拉明与10克液体石蜡和87.5克白色软矿脂混合，并在不断搅拌下加热至约60℃直至获得均匀混合物，并将其冷却至室温。将2.5克布西拉明与2.5克胆固醇、10克液体矿脂和85克凡士林混合。在混合下将该混合物加热，直到所有成分在约80℃下熔化并获得均匀性，然后冷却至室温。将2.5克布西拉明与5克角鲨烯和97.5克凡士林混合，并在混合下加热至约60℃以获得均匀性，然后冷却至室温。将2.5克布西拉明与10克矿物油、10克角鲨烯、10克癸酸/辛酸甘油三酯、10克微晶蜡、10克氢化植物油和3克羊毛脂加上凡士林共100克进行混合。在混合下将该混合物加热至约80℃-90℃，直至获得均匀性，然后冷却至室温。将2.5克布西拉明与3克胆固醇和10克磷脂混合并溶解于乙醇丙酮混合物中。该混合物在真空下干燥，并在剧烈搅拌下与1000ml盐溶液混合，之后高压均质化，以产生非常精细的脂质体分散体。将2.5克布西拉明与5克氢化植物油和5克矿物油混合，并在搅拌下加热至约80℃，直到所有成分均熔化。在剧烈混合和高剪切均质化下加入87.5克预热至80℃的水溶液，其包含1％吐温80和2％磷脂。在剧烈混合下加入0.8克黄原胶(xantural3000tm)，并将混合物冷却至室温以获得固体脂质分散体。将2.5克布西拉明溶解于无菌注射用水中，加入1.2克黄原胶和0.8克氯化钠，并搅拌该混合物以产生澄清的凝胶。实施例4：增加睑板腺中的脂质产生。该研究的目的是评价增强脂质分泌的制剂对增加由睑板腺产生的脂质的量的影响。将一薄层增强脂质分泌的含硫醇药剂涂敷于受试者的下眼睑，并且在涂敷该药剂之前和之后测定由睑板腺产生的脂质的量。确定睑板腺中脂质产生水平的示例性方法是在存在及不存在含硫醇药剂的情况下培养人睑板腺上皮细胞1天、3天、5天和7天，然后通过用lipidtox绿色中性脂质染色剂和lysoreddnd-99(设计用于标记溶酶体的荧光技术)对细胞进行染色来确定细胞脂质和溶酶体积聚的量级。另外，检查含硫醇药剂是否增加人睑板腺上皮细胞中极性和中性脂质物质的合成，在具有或不具有含硫醇药剂的培养基中培养细胞7天，然后处理细胞以供鉴定磷脂以及蜡和胆固醇酯。后两种是人睑脂中的主要脂质。分析包括使用高效薄层色谱法以及对采用imagej染料的染色强度的定量。另一种已知的替代方法采用油红o和尼罗红染色。通过使用尼罗红染料确定脂质积聚的程度。该染料将产生与已经积聚的脂质的量成比例的荧光信号。实施例5：增加睑板腺的脂质分泌。该研究的目的是评价增强脂质分泌的制剂对增加由睑板腺分泌的脂质的量的影响。将一薄层增强脂质分泌的含硫醇药剂涂敷于受试者的下眼睑，并且在涂敷该药剂之前和之后测定由睑板腺分泌的脂质的量。确定睑板腺的脂质分泌水平的示例性方法是使用“睑板腺测量仪(meibometer)”仪器来量化睑缘上的睑板脂质，这是一种光学分光光度计，其具有贴在睑缘上的胶带以测量所分泌的睑脂的量(chew等人,currenteyeresearch,vol.12(3),第247-254页,1993)。实施例6：mgd患者的治疗。该研究的目的是评价增强脂质分泌的制剂对治疗mgd或其至少一种症状的作用。将一薄层增强脂质分泌的含硫醇药剂涂敷于mgd患者的下眼睑，并且在涂敷该药剂之前和之后测定mgd或其至少一种症状的严重程度。用于评估和监测mgd或其至少一种症状的严重程度的示例性方法包括但不限于患者问卷调查、睑板腺挤压、泪膜稳定性破裂时间，以及确定通过手指挤压可见的通畅(patent)腺体的数目。用于评估mgd症状的其它方法包括但不限于shirmer试验、眼表面染色、眼睑形态学分析、睑板腺成像、睑板腺测定法(meibometry)、干涉测定法、蒸发测定法、泪液脂质组成分析、荧光光度测定法、睑板腺测量法(meiscometry)、摩尔渗透压浓度分析、泪膜动力学指数、蒸发和泪液更新。当前第1页1 2 3