可活化能量、伤口愈合及保护修复的牛樟芽胚组织萃取物的制作方法

本发明涉及植物萃取方法的技术领域，特别是涉及应用于牛樟芽胚组织萃取物的萃取方法，所制成的萃取物可作为医药品、化妆品、保养品、香氛或人体清洁用品等产品的原料者。

背景技术：

牛樟(学名：cinnamomumkanehiraehayata)为樟科樟属下的一个物种，又称「樟牛」。据调查，牛樟为中国台湾特有物种，在全岛海拔400至2000公尺的山林中生长。在中国台湾，牛樟有三大集中地：苗栗南庄大湖一带、南投东埔和社一带与台东关山富里一带。牛樟边材呈淡黄褐色，心材呈暗红褐色，质略柔软，常用于雕刻、制造器具或家具上。此外，牛樟枝叶也可加以蒸馏而得牛樟精油。由此可知，如何开发牛樟的新应用确实为从事相关技术领域人士积极解决的课题之一。

技术实现要素：

由于牛樟的茎节部位具有优异的生长机能，通常此部位会成为芽点，此芽点的细胞拥有快速分裂和分化以产生新芽的特性，并可使芽轴不断伸长，犹如动物的干细胞再生功能，如能撷取牛樟茎节芽点细胞进行萃取，所得的萃取物活性成份含量与活性效益高，然而目前牛樟相关的应用技术尚未见有针对牛樟开花株的茎节部位进行萃取或提炼等技术；故本案发明人提供一种牛樟芽点切割及萃取技术，以创造牛樟的新应用范畴，并获得活性成份含量高且效果佳的牛樟芽点萃取物。

于是，本发明的一目的即在提供一种牛樟开花株茎节芽点的萃取方法及其萃取物，主要提供牛樟茎节芽点的培育、切割及萃取的完整流程，且仅撷取并收集牛樟最具有活性成份的茎节芽点的再生植物细胞来进行萃取作业，所制成的萃取物具有活化能量、伤口愈合、保护修护、抗皱、抗氧化、抗发炎、美白及抗老化等功效。

本发明的另一目的即在提供一种牛樟开花株茎节芽点的萃取方法及其萃取物，以开花株其茎节芽点部位进行诱导培育，使长出再生新芽点后，且切割取得新芽点的新生植物组织，此茎节芽点诱导培育方式可获得大量的新生植物组织，而可符合大量生产的需求。

本发明的再一目的即在提供一种牛樟开花株茎节芽点的萃取方法及其萃取物，萃取方法在非高温下操作，以减少温度所造成的热损失，也可避免低沸点与有效物质挥发及保持芽点组织的生长活性。

本发明的更一目的即在提供一种牛樟开花株茎节芽点的萃取方法及其萃取物，经超音波萃取所制成的半成品萃取液，再进行过滤及去除溶剂作业，可获得活性及稳定性高的萃取物。

有鉴于此，本发明一方面揭露一种牛樟芽胚萃取物的用途，该萃取物是用于制备具活化能量、伤口愈合、保护修护、抗皱、抗氧化、抗发炎、美白及抗老化功效的组合物。

进一步地，本发明所揭露牛樟芽胚组织萃取物的萃取方法，其步骤为：(a)超音波萃取：将芽胚组织秤取100克，放入超音波萃取设备，在低温下，以芽胚组织重量5倍量的纯水为溶剂将芽胚组织覆盖浸泡，以制成半成品萃取液；以及(b)过滤及去除溶剂作业：将半成品萃取液经由抽真空的过滤作业后，再利用减压浓缩机将半成品萃取液进行去除溶剂作业，以制成萃取物。

进一步地，该芽胚组织为生长点的新生植物组织，而该生长点的新生植物组织的取得方法包含：

(i)收取芽点：收取牛樟树的穗条并进行培育作业使长出芽点；

(ii)撷取生长点组织：撷取芽点后，取出生长点组织；

(iii)去除壁膜：将各小片段的该生长点组织去除壁膜，成为该新生植物组织；以及

(iv)收集新生植物组织：收集预设数量的该生长点的新生植物组织。

本发明另一方面揭露一种牛樟芽胚组织萃取物的用途，该萃取物是用于制备具促进皮肤细胞活化能量与粒线体活化或再生、促进伤口愈合、保护及修护功能、促进胶原蛋白生成及抗发炎的组合物。

进一步地，该芽胚组织萃取物的制备方法包含：

(a)超音波萃取：将该芽胚组织秤取100克，放入超音波萃取设备，在低温下，以该芽胚组织重量5倍量的纯水为溶剂将该芽胚组织覆盖浸泡，以制成半成品萃取液；以及

(b)过滤及去除溶剂作业：将该半成品萃取液经由抽真空的过滤作业后，再利用减压浓缩机将该半成品萃取液进行去除溶剂作业，以制成该萃取物。

进一步地，该芽胚组织为生长点的新生植物组织，而该生长点的新生植物组织的取得方法包含：

(i)收取芽点：收取牛樟树的穗条并进行培育作业使长出芽点；

(ii)撷取生长点组织：撷取芽点后，取出生长点组织；

(iii)去除壁膜：将各小片段的该生长点组织去除壁膜，成为该新生植物组织；以及

(iv)收集新生植物组织：收集预设数量的该生长点的新生植物组织。

借由上述步骤，整个流程在非高温下进行，可避免低沸点与有效物质挥发及保持芽胚组织的生长活性，且所制成的萃取物具有活化能量、伤口愈合、保护修护、抗皱、抗氧化、抗发炎、美白及抗老化等功效。

此外，本发明所揭露上述制成萃取物的用途为用在制备具活化能量、伤口愈合、保护修护、抗皱、抗氧化、抗发炎、美白及抗老化功效的组合物，而此组合物可为医药品、化妆品、保养品、香氛或人体清洁用品。

另外，本发明所揭露上述制成萃取物的用途为用在制备具促进皮肤细胞活化能量与粒线体活化或再生的组合物，而此组合物可为医药品、化妆品、保养品、香氛或人体清洁用品。

附图说明

图1为本发明所揭露牛樟开花株茎节芽点的萃取方法的流程示意图；

图2为本发明所揭露的萃取物对细胞间隙的影响的细胞显微镜照片图；

图3为本发明所揭露的萃取物对质体dna型态的影响的dna胶体电泳结果图；

图4为本发明所揭露的萃取物对光产物cpd生成的影响的荧光侦测结果图。

具体实施方式

以下将以图式揭露本发明的多个实施方式，为明确说明起见，许多实务上的细节将在以下叙述中一并说明。然而，应了解到，这些实务上的细节不应用以限制本发明。也就是说，在本发明部分实施方式中，这些实务上的细节是非必要的。此外，为简化图式起见，一些习知惯用的结构与组件在图式中将以简单示意的方式绘示。

除非另有定义，本文所使用的所有词汇(包括技术和科学术语)具有其通常的意思，其意思是能够被本领域技术人员所理解。更进一步的说，上述的词汇在普遍常用的字典中定义，在本说明书的内容中应被解读为与本发明相关领域一致的意思。除非有特别明确定义，这些词汇将不被解释为理想化的或过于正式的意思。

请参照图1，本发明所提供的一种牛樟开花株茎节芽点的萃取方法，其步骤依序为：(a)收取芽点；(b)撷取生长点组织；(c)去除壁膜；(d)收集新生植物组织；(e)超音波萃取；(f)过滤及去除溶剂作业；及(g)制成萃取物；其中：

步骤(a)：收取牛樟树的穗条并进行培育作业使长出芽点。培育作业说明如下：采穗作业以2～3月间清晨或阴雨天进行为最佳(次佳时期为11～12月)，穗条选择以无侧芽、芽点多、成熟饱满富弹性者为佳，以冠层枝条最佳，中层枝条次之；穗条采取后立即浸泡于生长素与杀菌剂之混合液中以保持新鲜度及防止切口感染病菌，再以密封包装迅速运至阡插室处理，采取之插穗以当日能阡插完成为原则；阡插介质之成分以蛭石4:真珠石3:泥炭土2调配，并以杀菌剂稀释1500倍浸泡或淋湿；待充分吸收后盛入培育盆；在温室阡插时宜将基部修剪约45度的斜切口，长约10～12公分，带顶芽每枝须有3～4个芽点并保留4～5片叶，每片接去一半，再以生长素及杀菌剂之混合液浸泡15分钟后捞起晾干；再于插穗基部1～2公分处沾2000ppm之iba后，将1/2插入介质中并压紧且使叶片面向同一方向使叶片受水量均匀；阡插完成10日内，要勤于喷水，日后则视气候变化及插穗愈合程度适当调整，温室内空气保持流通温度控制在25℃左右，初期以70％之遮阴网遮阴以缓光合作用及新陈代谢之速度；为保持插穗之新鲜及促进愈合发根仍需补给生长素，一周需喷洒一次杀菌剂；阡插后20日开始愈合，约40日开始发根。

步骤(b)：撷取芽点后，取出生长点组织。

步骤(c)：将各小片段的芽点组织去除壁膜，成为新生植物组织，其再生的途径为经由芽等器官形成新生植物胚胎；新生植物组织呈形状一致的圆形。

步骤(d)：收集预设数量芽点组织的新生植物组织。

步骤(e)：将收集的新生植物组织秤取100克，放入超音波萃取设备，在低温下，以新生植物组织重量5倍量的逆渗透纯水或灭菌的去离子水为溶剂将新生植物组织覆盖浸泡，置入超音波设备内，水温设定在50℃至60℃，功率设定为300瓦，时间设定为40分钟，以超声波震荡对芽点的新生植物组织进行萃取作业，以制成半成品萃取液。

步骤(f)：先将半成品萃取液经由抽真空的过滤作业；再利用减压浓缩机以45℃加热，以旋转速度80转/分，将半成品萃取液减压浓缩，进行去除溶剂作业；且重复此去除溶剂作业1至4次，以完整萃取。

步骤(g)：制成的萃取物具有总多酚及总黄酮等成份；所制成的萃取物，约5.4克，萃取率约5.4％；所制成的萃取物，可在冷冻干燥后在温度-20℃下保存冷藏；且所制成的萃取物可应用在医药品、化妆品、保养品、香精、香水或人体清洁用品等产品的原料。

借由上述步骤，可提供针对牛樟茎节芽点的培育、切割及萃取的完整流程，使整个流程在非高温下进行，可避免低沸点与有效物质挥发及保持芽点组织的生长活性，且所制成的萃取物添加在化妆保养产品中，具有活化能量、伤口愈合、保护修护、抗皱、抗氧化、抗发炎、美白及抗老化等功效，同时此茎节芽点诱导培育方式可获得大量的新生植物组织，而可因应大量生产的需求，并且具有高经济价值与高实用性。

为进一步了解本发明技术特征、运用技术手段及所预期达成的功效，兹将本发明使用方式加以说明叙述如下：

实施例1

本发明的牛樟茎节芽点萃取技术，主要针对牛樟的茎节部位具有优异生长机能的芽点部位，利用此芽点的细胞拥有快速分裂和分化以产生新芽并可使芽轴不断伸长的特性，拥有高生命力及活性的特质，且牛樟茎节芽点其再生的方式为经由芽胚等器官形成新生植物胚胎，犹如动物干细胞的再生功能；借此建立从芽点的培育、切割到萃取的一整套流程。再者，本发明可应用在所有品种的牛樟，以获得活性成份高的萃取物。

本发明的牛樟茎结芽点培育方法，请参照步骤(a)的收取芽点，本发明的培育方式依开花株的茎节部位，进行阡插培育。

本发明的牛樟茎节芽点切割撷取方法，请参照步骤(b)的撷取生长点组织及(c)的去除壁膜，除去壁膜，则可得圆形的新生植物组织，本发明只使用此新生植物组织进行萃取。

本发明的牛樟茎节芽点萃取方法，请参照步骤(e)超音波萃取，将前述所取的的新生植物组织，利用超音波高频恒速震荡、疏密有秩的特性，将超音波振动对液体瞬间造成「增压」及「减压」，推动介质，产生空穴效应(cavitation)。当萃取液中无数细小的真空气泡爆裂时，产生瞬间高温及强大冲击力，可将待萃取物的成份分离，而达到萃取效果。

本发明的牛樟开花株茎节芽点萃取方法，具有下列功效：

一、本发明主要提供针对牛樟茎节芽点的培育、切割及萃取的完整流程，且仅撷取并收集牛樟最具有活性成份的茎节芽点的再生植物组织，来进行萃取作业，所制成的萃取物活性成分含量高，品质优。

二、因本发明的萃取物具有优异的活性成份含量及质量，因此将本发明的萃取物添加在化妆保养品产品中，具有活化能量、伤口愈合、保护修护、抗皱、抗氧化、抗发炎、美白及抗老化等功效。

三、本发明以开花株其茎节芽点部位进行诱导培育，使长出再生新芽点后，且切割取得新芽点芽的植物新生组织，此茎节芽点诱导培育方式可获得大量的新生植物组织，而可因应大量生产的需求。

四、本发明在开花株其茎节芽点部位先进行培育以大量繁殖新芽点后，再切割出新生植物组织，此茎节芽点切割作业可去除其他茎梗叶部位，只使用具有较高生长活性含量的新生植物组织进行萃取，故具有去芜存菁的效果，进而可提升萃取物质量。

五、本发明的开花株其茎节芽点的萃取方法，为在非高温下操作，其萃取过程中温度约50℃至60℃，以减少温度所造成的热损失，也可避免低沸点与有效物质挥发及保持芽点组织的生长活性，故可维持新生植物组织的活性含量。

六、本发明以超音波水萃取方法，且只使用逆渗透纯水，未有其他溶剂，故能改良传统溶剂萃取方法成本高且萃取过程危险的缺点，又可减少处理时间和溶剂使用量并得到高产率。

七、本发明经超音波萃取所制成的半成品萃取液，再进行过滤及去除溶剂作业，因本发明所使用的溶剂为无毒无菌的纯水，因此不会有使用醇类或醇类水溶液为溶剂的萃取方式的安全性问题，且本发明经此过滤及去除溶剂作业，可获得活性高及稳定性佳的萃取物。

实施例2

本发明的牛樟芽点萃取技术所制成的萃取物，进行与「人体皮肤细胞安全性相关试验」，其试验方式为「细胞存活度试验」，试验方法详述如下：人类皮肤角质株化细胞hacat及人类上皮层纤维母细胞hs68以1.0x10⁵个/ml密度种植在96孔盘中，然后在37℃保持湿度的5％二氧化碳浓度下培养至少24小时。之后，将不同浓度牛樟芽点萃取物加入培养24小时后，每孔细胞加入10μl的5mg/mlmtt溶液(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide)并在37℃作用4小时后，移除上清液，再加入100μl的dmso(即二甲基亚砜)溶解formazan(即甲臜)，震荡10分钟后，测量其波长570nm的吸光值以计算细胞存活率。此结果显示牛樟芽点萃取物(0.01、0.05、0.1、0.5mg/ml)作用人类皮肤角质株化细胞hacat后，细胞存活度分别为115.1±2.6％、116.2±1.8％、117.1±0.5％、87.1±0.3％。结果显示0.01至0.1mg/ml牛樟芽点萃取物对人类皮肤角质株化细胞无毒性，且具些微的促进增生作用。

实施例3

针对牛樟芽点的活性评估，本发明也建立相关测试方法，包括「粒线体再生试验」、「粒线体活化因子jc-1生成试验」、「伤口愈合试验」、「保护因紫外线及氧化伤害而造成的dna损伤试验」、「侦测dna损伤的环丁嘧啶二聚体(cyclobutanepyrimidinedimers，cpd)生成量试验」、「皮肤胶原蛋白生成试验」、「dpph(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)自由基清除试验」、「抑制发炎因子一氧化氮活性试验」，兹分别详细说明如下：

本发明的牛樟芽点萃取技术所制成的萃取物，进行「粒线体再生试验」，其试验方式如下：人类皮肤角质株化细胞hacat以1x10⁴个细胞/孔的密度培养在24孔盘，在37℃及5％co2培养箱中培养至少24小时，加入不同浓度牛樟芽点萃取物处理，置入培养箱作用24小时。达反应时间后，移除培养液，加入pbs(即磷酸缓冲盐溶液)清洗，加入paraforaldehyde(即多聚甲醛)固定细胞，使用1％tritonx-100作用5分钟，接着使用pbs清洗细胞，加入mitoview染剂及用hoechst33342stainingsolution染细胞核(作为定量细胞数)，使用荧光免疫分析仪(biotek，synergytm2，usa)测定粒线体(绿色，激发光：490nm，发射光：523nm)及细胞核荧光(蓝色，激发光：346nm，发射光：460nm)表现；(3)粒线体表现计算公式如下：

人类粒线体在体内有许多功能，最重要的功能为产生能量；然而，粒线体会随着年龄增加逐渐减少，因此粒线体质量与健康和老化有极大关系。如结果所示，人类皮肤角质株化细胞hacat经牛樟芽点(0.05和0.1mg/ml)作用24小时后，粒线体质量分别为106.2±1.5％和108.5±1.7％。结果显示牛樟芽点可促进人类皮肤角质株化细胞的粒线体再生。

本发明的牛樟芽点萃取技术所制成的萃取物，进行「粒线体活化因子jc-1生成试验」，其试验方式如下：细胞以1x10⁵个细胞/ml的密度种在24孔盘中24小时后加入萃取物培养，至培养时间24小时后移除上清液，pbs清洗后，置换新鲜培养液，加入5mg/ml的jc-1染剂在室温下反应一小时。移除培养液后，先以pbs清洗，再加入定量pbs，后在免疫酵素分析仪测定荧光量。jc-1为带正电的染剂，与健康细胞的粒线体上的负电荷结合后会发出橘红色光，而细胞受损会导致粒线体膜电位下降，使jc-1染剂无法被吸引则呈现绿光，因此数据以橘光和绿光的比例计算，比例越高表示细胞越健康。

依此结果，牛樟芽点(0.01、0.05和0.1mg/ml)作用后，jc-1表现(r/g值)分别为1.0、1.2和1.3。此结果显示牛樟芽点可促进粒线体活化因子jc-1的表现。

本发明的牛樟芽点萃取技术所制成的萃取物，进行「伤口愈合试验」，其试验方式如下：将插入式细胞培养容器置在24孔盘后，细胞以3x10⁵个细胞/ml的密度种在培养杯内并在37℃及5％co2培养箱中培养至少24小时。移除培养杯形成500±50μm宽的细胞间隙后，先对细胞进行20mj/cm²uvb照射再加入不同浓度牛樟芽点萃取物培养4小时。接着，在培养后第0、12、24及48小时观察细胞间隙变化并定量。

如图2所示，在培养后第48小时，以未经uvb(即户外紫外线)照射的细胞(控制组)形成的间隙宽度为100.0±1.5％，而仅经uvb照射的细胞形成的间隙宽度为90.0±1.0％，经uvb照射与牛樟芽点作用的细胞(0.05和0.1mg/ml)形成的间隙宽度分别缩小至58.3±0.5％与55.0±1.2％。此结果显示牛樟芽点可促进细胞生长并让细胞间隔变小，而可促进伤口愈合。

本发明的牛樟芽点萃取技术所制成的萃取物，进行「保护因紫外线及氧化伤害而造成的dna损伤试验」，其试验方式如下：将质体dnapuc119依序加入萃取物、pbs、0.5mm的feso4溶液、1mm的h2o2溶液轻轻混合均匀后，先进行20mj/cm²uv(即紫外线)照射然后在37℃反应1小时，接着将反应完的样品加入适量的6xloadingdye(即装载染液)，加至凝胶中的小孔，进行100v电泳。待dna跑至适当距离后取出凝胶，以冷光照相系统(avegene-spot)拍摄并以imagej计算机软件分析puc119的supercoiledform(sc)、linearform(lc)和opencircular(oc)的表现。

如图3所示，质体可受牛樟芽点萃取物(0.05、0.1、0.25、0.5、1mg/ml)保护，保有supercoiledform，免在受到氧化伤害及经uv伤害，证明萃取物具dna保护效能，具有保护质体dna不受自由基及uv伤害的功效。经uv及氧化伤害质体后supercoiledform定量为7.6％；而经牛樟芽点萃取物(0.5、1mg/ml)作用质体、及经uv及氧化伤害质体后supercoiledform定量分别为43.2％、59.6％，显示质体受到萃取物保护，免在受到uv及氧化伤害35.6％和52.0％的效能。

本发明的牛樟芽点萃取技术所制成的萃取物，进行「侦测dna损伤的环丁嘧啶二聚体生成量试验」，其试验方式如下：将1.5x10⁵个细胞/ml的密量培养在24孔盘中24小时后，加入萃取物培养4小时，抽干上清液进行50mj/cm²uvb照射，再加入含有萃取物的无血清培养液在培养箱中反应4小时，达反应时间后，移除上清液，pbs清洗，加入500μl的4％甲醛溶液，放置室温10分钟进行固定。接着移除甲醛，以pbs清洗两次，加入500μl的0.5％tritonx-100在冰上反应5分钟后移除，以pbs清洗两次。加入1ml的2mhcl溶液室温下作用30分钟，使细胞内dna变性，再以pbs清洗五次。之后加入1ml的20％fbs在37℃下30分钟进行blocking，以防非特异性蛋白结合，达时间后，再以pbs清洗五次。加入70μl的cpd(1：100)在37℃下均匀摇晃作用30分钟，再以pbs清洗五次。最后加入等量pbs，在激发光530nm，发射光630nm以酵素免疫分析仪测其吸光值。之后加入70μl的hoechst33342stainingsolution(10μg/ml，1：250)继续摇晃5分钟。在显微镜下观察确定染进细胞核内，立即以pbs清洗5次，利用荧光显微镜观察荧光表现。

cpd为一种光产物，可利用荧光侦测的特性进行试验。如图4所示，经过uvb照射后细胞受到伤害而碎裂并产生光产物堆积，cpd诱发为147.7％。皮肤细胞经牛樟芽点萃取物(0.05、0.1mg/ml)作用再经uvb照射后，仅有些许光产物产生，cpd诱发为82.5％和74.5％。此结果显示牛樟芽点萃取物具有保护细胞免在uvb伤害的效能。

本发明的牛樟芽点萃取技术所制成的萃取物，进行「皮肤胶原蛋白生成试验」，其试验方式如下：将3t3l-1细胞以2x10⁵个细胞/ml密度培养在3公分盘中24小时后，移除上清液再加入含有不同浓度牛樟芽点萃取物的无血清培养液培养48小时，pbs清洗后，刮除细胞，离心1200rpm、5分钟，再去除上清液。利用sircolsolublecollagencollagneassaykit(即西科尔可溶胶原酶检测试剂盒)进行胶原蛋白测定，为先将100μl细胞液混合1ml的sircoldyereagent(即西科尔染料试剂)，再在室温下均匀摇晃30分钟，再离心12000rpm、10分钟，直接倒掉上清液，再加入750μlice-coldacid-saltwashreagent(即冰冷酸洗盐试剂)，再离心12000rpm、10分钟，将dyereagent(即染料试剂)完全去除干净。之后加入250μl的alkalireagent(即碱性试剂)混合均匀，取100μl至96孔盘，在555nm下以酵素免疫分析仪测吸光值。

胶原蛋白为保持肌肤弹性及抗皱的重要因子，其合成量受到年龄的影响，因此若能适时促进胶原蛋白的合成量，可避免肌肤生成皱纹、失去弹力光泽的情形。依此结果，经过牛樟芽点萃取物(0.05和0.1mg/ml)作用后，可促进纤维母细胞中胶原蛋白的生成量约108.4±1.4％及117.3±0.1％。此结果显示牛樟芽点萃取物对在促进胶原蛋白生成量具有优异的效果。

本发明的牛樟芽点萃取技术所制成的萃取物，进行「dpph(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)自由基清除试验」，其试验方式如下：将牛樟芽点萃取物配置成不同浓度，分别加入90μl新鲜配置的100μm的dpph自由基乙醇溶液后一起添加至96孔盘中反应，以酵素免疫分析仪检测517nm吸光值。试验标准品为aa，dpph自由基清除率公式如下：

依此结果，牛樟芽点(0.05、0.1、0.5和1.0mg/ml)清除dpph自由基能力分别为68.7±1.2％、81.9±0.2％、96.3±0.8％和98.2±1.2％。

本发明的牛樟芽点萃取技术所制成的萃取物，进行「抑制发炎因子一氧化氮活性试验」，其试验方式如下：取2μl牛樟芽点萃取物(0.05、0.1和0.5mg/ml)各别加入98μl的25mm硝普钠(sodiumnitroprusside，snp)snp反应120分钟，之后加入100μl的griessreagent(即格里斯试剂)反应10分钟，以酵素免疫分析仪检测546nm吸光值。

snp本身是一氧化氮捐献体的一种，与氧反应会形成亚硝酸(nitrite)，亚硝酸再与griessreagent反应会变成粉红色溶液，在波长546nm具有特定吸光值。若样品能抑制一氧化氮生成的速率而减少亚硝酸产生，其吸光值会降低；吸光值越低，表示样品清除一氧化氮自由基的能力越强。依上述分析结果，牛樟芽点萃取物(0.05、0.1和0.5mg/ml)清除一氧化氮自由基能力分别为20.7±3.1％、23.8±1.4％和32.3±3.0％。

综合上述，本发明是提供一种针对牛樟芽点切割及萃取技术，从培育、切割及萃取的完整流程，其利用牛樟茎节芽点细胞会不断分裂和分化的再生特性，拥有高生命力及活性的特质，在非高温下进行，可避免低沸点与有效物质挥发及保持芽点组织的生长活性，且所制成的萃取物质量佳，使用在化妆保养产品中，可提升活化能量、伤口愈合、保护修护、抗皱、抗氧化、抗发炎、美白及抗老化等功效，且茎节芽点诱导培育方式可因应大量生产的需求，又配合过滤及去除溶剂作业可获得活性及稳定性高的萃取物，据以获得实用性高与经济价值高的牛樟活性萃取物，以使整体确具产业实用性及成本效益。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明做任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭露如上，然而并非用以限定本发明，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述揭示的技术内容做出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所做的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。