本发明属于医药技术领域，特别涉及一种用改性高岭石稳定pickering双重乳液同时包封姜黄素和儿茶素的方法。
背景技术：
多酚类黄酮姜黄素具有许多药理活性包括抗炎特性、强大的抗氧化活性和铁螯合活性，被广泛用于多种癌症的化学预防剂。儿茶素是一种重要的酚类活性物质，具有抗菌、抗氧化、清除自由基等功能。有关研究表明姜黄素和儿茶素之间存在疾病预防和健康的协同作用，姜黄素和儿茶素的复合显示出通过诱导细胞凋亡而抑制细胞增殖的效果(manikandanetal.,synergisticanticanceractivityofcurcuminandcatechin:aninvitrostudyusinghumancancercelllines.microscrestech2012；75(2))，以及减少结直肠癌中的结直肠异常病变的作用(xuetal.,combinationofcurcuminandgreenteacatechinspreventsdimethylhydrazine-inducedcoloncarcinogenesis.foodchemtoxicol2010；48(1))。
但是姜黄素和儿茶素由于具有低稳定性从而影响其效力。姜黄素在水中溶解度低，在碱性条件下易降解，吸收不充分，并且迅速从体内被移除导致其生物利用度低。儿茶素的膜渗透性有限，消化降解(ph6-8)和肠道分泌转运蛋白介质也导致其生物利用度低。在使用过程中都需要特殊的包封和输送方法，乳液包封是解决上述问题的途径。
另外，儿茶素属于水溶性药物，姜黄素属于油溶性药物，导致这二者之间存在严重的动力学不匹配问题。过去人们主要关注开发载体系统来克服姜黄素和儿茶素之间的药物动力学错配问题，这些载体系统包括脂质体、乳剂、脂质体聚合物和蛋白质纳米粒子。虽然这些载体系统部分克服了药物动力学不匹配的问题，但是这些系统中的大多数是有局限的，姜黄素具有高度疏水性，可溶于脂质，而儿茶素是亲水的，不溶于脂质，因此适合儿茶素的载体不适合传递姜黄素，因此使用这些载体系统不能获得姜黄素和儿茶素的协同作用。双重乳液的外部连续相可以同时包封亲油性内相和亲水性内两个体系，因此可以分别将亲油性姜黄素和亲水性儿茶素分别包封于两个内相中，达到协同包封和输送的目的。
技术实现要素：
本发明的主要目的是为了克服儿茶素和姜黄素包封和输送过程中的药物动力学不匹配的问题，以及由表面活性剂稳定的乳液中表面活性剂对生物体的二次伤害和环境污染问题，提出用卵磷脂改性高岭石获得具有不同亲水亲油性特征并可分别用于稳定油包水型乳液(w/o)和水包油型乳液(o/w)。在此基础上制备w/o/w型双重pickering乳液，分别将亲油性姜黄素和亲水性儿茶素分别包封于两个内相中，并实现协同包封和输送姜黄素和儿茶素的方法。
该方法的主要特点在于：乳化剂是由卵磷脂改性的高岭石组成，而不是传统的表面活性剂。与表面活性剂相比，由固体颗粒稳定的pickering乳液形成的载药系统基于油-水界面上固体颗粒形成的独特刚性壳结构组织结构。在乳液稳定方面，改性的高岭石具有pickering颗粒和表面活性剂的双重优点，这种颗粒由于表面双亲性，比传统pickering颗粒更容易吸附到界面上。而且由于这种颗粒比表面活性剂分子大,在界面的吸附作用更牢固，形成的乳液也更稳定，从而对包封在其中的儿茶素和姜黄素形成更有效的保护，增强其协同作用的效果。
该发明的具体步骤为：
(1)卵磷脂改性高岭石制备：用无水乙醇溶解卵磷脂，配成质量浓度为3～4g/l的溶液，用zncl2调节ph至3.6～5.6；加入与无水乙醇等量的液体石蜡，于12000rpm转速下高速剪切分散10min形成油/醇乳液；将高岭石粉体缓慢加入，在室温下以12000rpm转速高速剪切分散10min后，于65～85℃磁力搅拌混合。通过控制卵磷脂用量和磁力搅拌混合过程的温度获得接触角分别为88°和130°的改性高岭石(汤琪等，中国专利申请2018115384160)。
(2)含姜黄素的油相(o)的制备：将0.1％的姜黄素溶解在由5ml中链甘油三酸酯(mct)组成的油相中，用高速剪切均化器以20000rpm速度均化20分钟。然后，使用超速离心机以14000rpm离心10分钟以分离未溶解的姜黄素。
(3)含有儿茶素的水相(w1)的制备:将儿茶素溶于5ml去离子水中形成浓度为750μg/ml的溶液，用高速剪切均化器以20000rpm速度均化20分钟。然后，使用超速离心机以14000rpm离心10分钟以分离未溶解的儿茶素。
(4)溶有儿茶素和姜黄素的w1/o乳液制备：将1％的改性高岭石(接触角为130°)作为乳化剂并均匀分散至由步骤(2)获得的5ml油相(o)中，用高速剪切均化器以8000rpm均化20分钟，再逐滴向其中加入5ml由步骤(3)获得的水相w1，继续以12000rpm均化5分钟获得w1/o乳液。
(5)同时包封儿茶素和姜黄素的w1/o/w2乳液制备：以步骤(3)获得的w1/o乳液作为双重乳液的油相，以一定体积的去离子水作为双重乳液的水相(w2)，控制各项体积v(w1/o)：v(w2)＝4:6/5:5/3:7。将0.5％～1.0％的改性高岭石(接触角为88°)加入到w2水相中，然后用高速剪切均化器以8000rpm均化20分钟，再向其中逐滴加入步骤(4)获得的w1/o乳液相，继续以12000rpm均化5分钟形成w1/o/w2双重乳液乳液。
(6)协同包封性能：协同包封乳液中，姜黄素和儿茶素的包封效率达到94-98％。
具体实施方式
下面的实施例将进一步说明本发明，但对本发明没有限制，其中实施例1-3为在不同参数条件下制备的w/o/w乳液。
实施例1：
(1)溶有姜黄素的油相(o)：将0.1％的姜黄素溶解在由5ml中链甘油三酸酯(mct)组成的油相中，用高速剪切均化器以20000rpm均化20分钟。然后，使用超速离心机以14000rpm离心混合物10分钟以分离未溶解的姜黄素。
(2)溶有儿茶素的水相(w1):将儿茶素溶于5ml去离子水中形成浓度为750μg/ml的溶液，用高速剪切均化器以20000rpm均化20分钟。然后，使用超速离心机以14000rpm离心混合物10分钟以分离未溶解的儿茶素。
(3)溶有儿茶素和姜黄素的w1/o乳液：将1％的改性高岭石(接触角为130°)作为乳化剂并均匀分散至由步骤(1)形成的5ml油相(o)中，然后用高速剪切均化器以8000rpm均化20分钟，再逐滴向其中加入5ml由步骤(2)形成的水相w1，继续以12000rpm均化5分钟形成w1/o乳液。
(4)同时包封有儿茶素和姜黄素的w1/o/w2乳液：以步骤(3)形成的w1/o乳液作为乳化的油相，以一定体积的去离子水作为乳化的水相(w2)，v(w1/o)：v(w2)＝(4:6)，并将0.5％的改性高岭石(接触角为88°)的加至w2中然后用高速剪切均化器以8000rpm均化20分钟，再向其中逐滴加入步骤(3)形成的w1/o相后继续以12000rpm均化5分钟形成w1/o/w2乳液。
(5)双重乳液对儿茶素和姜黄素的协同包封率为94％。
实施例2
(1)溶有姜黄素的油相(o)：将0.1％的姜黄素溶解在由5ml中链甘油三酸酯(mct)组成的油相中，用高速剪切均化器以20000rpm均化20分钟。然后，使用超速离心机以14000rpm离心混合物10分钟以分离未溶解的姜黄素。
(2)溶有儿茶素的水相(w1):将儿茶素溶于5ml去离子水中形成浓度为750μg/ml的溶液，用高速剪切均化器以20000rpm均化20分钟。然后，使用超速离心机以14000rpm离心混合物10分钟以分离未溶解的儿茶素。
(3)溶有儿茶素和姜黄素的w1/o乳液：将1％的改性高岭石(接触角为130°)作为乳化剂并均匀分散至由步骤(1)形成的5ml油相(o)中，然后用高速剪切均化器以8000rpm均化20分钟，再逐滴向其中加入5ml由步骤(2)形成的水相w1，继续以12000rpm均化5分钟形成w1/o乳液。
(4)同时包封有儿茶素和姜黄素的w1/o/w2乳液：以步骤(3)形成的w1/o乳液作为乳化的油相，以一定体积的去离子水作为乳化的水相(w2)，v(w1/o)：v(w2)＝(5:5)，并将1.0％的改性高岭石(接触角为88°)加至w2中然后用高速剪切均化器以8000rpm均化20分钟，再向其中逐滴加入步骤(3)形成的w1/o相后继续以12000rpm均化5分钟形成w1/o/w2乳液。
(5)双重乳液对儿茶素和姜黄素的协同包封率为96％。
实施例3
(1)溶有姜黄素的油相(o)：将0.1％的姜黄素溶解在由5ml中链甘油三酸酯(mct)组成的油相中，用高速剪切均化器以20000rpm均化20分钟。然后，使用超速离心机以14000rpm离心混合物10分钟以分离未溶解的姜黄素。
(2)溶有儿茶素的水相(w1):将儿茶素溶于5ml去离子水中形成浓度为750μg/ml的溶液，用高速剪切均化器以20000rpm均化20分钟。然后，使用超速离心机以14000rpm离心混合物10分钟以分离未溶解的儿茶素。
(3)溶有儿茶素和姜黄素的w1/o乳液：将1％的改性高岭石(接触角为130°)作为乳化剂并均匀分散至由步骤(1)形成的5ml油相(o)中，然后用高速剪切均化器以8000rpm均化20分钟，再逐滴向其中加入5ml由步骤(2)形成的水相w1，继续以12000rpm均化5分钟形成w1/o乳液。
(4)同时包封有儿茶素和姜黄素的w1/o/w2乳液：以步骤(3)形成的w1/o乳液作为乳化的油相，以一定体积的去离子水作为乳化的水相(w2)，v(w1/o)：v(w2)＝(7:3)，并将0.8％的改性高岭石(接触角为88°)加至w2中然后用高速剪切均化器以8000rpm均化20分钟，再向其中逐滴加入步骤(3)形成的w1/o相后继续以12000rpm均化5分钟形成w1/o/w2乳液。
(5)双重乳液对儿茶素和姜黄素的协同包封率为98％。