DOCK1抑制化合物及其用途
本发明涉及dock1抑制化合物及其用途。
背景技术：
在包括日本在内的发达国家中，癌症是主要的死亡原因。癌症患者的数量逐年增加。因此，癌症是现代医学亟待解决的问题。因此，为了开发新的抗癌剂，日本、欧洲和美国的制药公司积极地从事药物发现研究，包括寻找新的分子靶点。
dock1是低分子量g蛋白rac的激活剂。已知dock1通过rac激活来促进细胞骨架重组并调控各种不同的细胞应答，例如细胞运动性、形态变化、增殖和分化(非专利文献(npl)1)。在癌细胞中，dock1通过rac激活来调控侵袭性边缘形成和巨胞饮作用，并有助于侵袭性转移以及癌细胞的存活和生长(非专利文献(npl)1至非专利文献(npl)3)。因此，有效抑制dock1功能的化合物预期将有效地作为抑制侵袭性转移以及癌细胞的存活和生长的新型抗癌剂的活性成分。另一方面，作为dock家族的分子之一并具有与dock1非常相似的结构的dock2在免疫细胞中表达；该dock2在免疫细胞迁移和抗原刺激的应答中发挥必不可少的作用(非专利文献(npl)4和非专利文献(npl)5)。因此，为了使用抑制dock1功能的化合物作为抗癌剂，需要开发通过dock2对免疫系统的影响尽可能小的化合物，即对dock1具有更高选择性的化合物。
已知dock1在乳腺癌和神经胶质瘤中在酪氨酸激酶型受体信号的下游起作用，以增强癌细胞的侵袭性转移，并有助于癌症的恶性转化(非专利文献(npl)1和非专利文献(npl)2)。此外，本发明人的最新研究表明，即使在具有突变型rac的癌症中，dock1也参与侵袭性转移以及癌细胞的存活和生长(非专利文献(npl)6)。
ras是首先在人类中发现的致癌基因(1982年)。ras作为三种同工型存在：h-ras、k-ras和n-ras(非专利文献(npl)7和非专利文献(npl)8)。在ras基因中具有突变的癌症占所有人类癌症的三分之一。具体来说，在胰腺癌、结肠直肠癌、多发性骨髓瘤和肺癌中，以32至98％的高比率观察到ras基因的突变(npl7和npl8)。已显示突变型ras是从癌症初始(发生)到进展(发展)的重要驱动因素，而且对靶向突变型ras的药物发现的需求也非常高。然而，尽管自从发现突变型ras以来已经过去了30年以上的时间，但尚未开发出对具有突变型ras的癌症有效的治疗剂。因此，对解决此问题存在着迫切需要。靶向突变型ras的药物发现之所以困难的原因之一在于低分子量化合物结合到的表面结构极小，因此不适合作为药物发现的靶点。代替这种方法，靶向参与突变型ras的细胞内定位调控和信号转导途径的分子的药物发现方法被认为是有前途的。
使用作为具有突变型ras的癌细胞系的3ll小鼠肺癌细胞、dld-1人类结肠癌细胞和ht-1080人类纤维肉瘤细胞，本发明人已经阐明了dock1对于细胞侵袭应答、巨胞饮作用和在低营养条件下的存活来说是重要的(非专利文献(npl)3)。巨胞饮作用是其中细胞膜的一部分显著弯曲，允许细胞外液以及所述细胞外液中的蛋白质和其他组分进入所述细胞的现象。通过rac激活进行的细胞骨架重组对于这种巨胞饮作用来说是重要的。巨胞饮作用是在低营养条件下在癌细胞中供应生存所必需的营养物谷氨酰胺所需的过程(非专利文献(npl)9和非专利文献(npl)10)。
本发明人进一步显示，以前被开发作为dock1选择性抑制剂的tbopp(1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基磺酰基)吡啶-2(1h)-酮)抑制rac被dock1的激活，并阻断癌细胞侵袭应答、巨胞饮作用和在低谷氨酰胺条件下的存活，同时不影响免疫细胞迁移。本发明人在使用小鼠的动物实验中进一步证实了tbopp阻断癌症的侵袭性转移和增殖(非专利文献(npl)3和专利文献(ptl)1)。同样地，在具有活跃的突变型rac(p29s突变)的人类来源的黑素瘤和乳腺癌细胞系中，可以通过获得dock1的遗传缺失的治疗或用tbopp治疗来抑制这些癌细胞系的侵袭性应答和巨细胞饮作用(非专利文献(npl)6)。
引文表
专利文献
ptl1：wo1016/136985
非专利文献
npl1：genesdev.28:533-547(2014)
npl2：proc.natl.acad.sci.usa110:7434-7439(2013)
npl3：cellreports19:969-980(2017)
npl4：nature412:826-831(2001)
npl5：exp.cellres.319:2343-2349(2013)
npl6：biochem.biophys.res.commun.497:298-304(2018)
npl7：cancerresearch72:2457-2467(2012)
npl8：naturereviewsdrugdiscovery13:828-851(2014)
npl9：nature497:633-638(2013)
npl10：cellres.23:982-983(2013)
技术实现要素：
技术问题
本发明的目的是提供一种可用作抗癌剂的活性成分的化合物。优选地，本发明的目的是提供一种具有dock1抑制活性并在这种活性的基础上发挥抗癌活性的化合物。更优选地，本发明的目的是提供一种具有dock1抑制活性，在这种活性的基础上发挥抗癌活性，并对通过dock2的免疫系统几乎没有影响的化合物，即对dock1具有高度选择性的化合物。甚至更优选地，本发明的目的是提供一种与已知作为dock1选择性抑制剂的tbopp相比具有更高的dock1抑制作用(效能)、dock1/dock2选择性(选择性)和/或更高的抑制细胞侵袭应答的作用(细胞活性)的化合物。本发明的另一个目的是提供这些化合物作为dock1选择性抑制剂的用途以及这些化合物在它们的抗癌活性的基础上作为药剂的用途。
解决问题的方案
为了实现上述目的，本发明人反复进行了广泛研究。作为结果，本发明人发现除了dock1抑制活性之外还具有dock1选择性抑制和/或细胞侵袭应答抑制作用的多种化合物；并且证实了这些化合物中的一些在至少一种、优选两种或更多种、更优选所有这些作用中具有比通过tbopp获得的作用更高的dock1抑制作用、dock1/dock2选择性和细胞侵袭应答抑制作用。基于这些发现，通过进一步的继续研究完成了本发明。本公开提供根据以下实施方式的发明。
(i)具有dock1抑制活性的吡咯型化合物
(i-1)一种由下式(a)表示的化合物或其盐：
其中
x表示碳原子或氮原子；
y表示氧原子、羟基或烃基；
r1和r2是不同的，并各自表示氢原子或由下式(a-1)表示的基团：
(其中r6是吡咯烷基或苯基，并且n2是0或1)；
r3表示-co-r7(其中r7是烷氧基、烷基或烷基氨基)、1,3-噁唑基、烷基羟基、氢原子或氧原子；
r4表示氢原子、氧原子或其中一个或多个氢原子可能被一个或多个取代基代替的烃基；
r5表示卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基；并且
n1是0至5的整数；并且
在式(a)的化合物的骨架中，
每个单实线表示单键；
每个由实线和虚线组成的双线表示单键或双键；并且
双虚线表示没有键或双键。
(i-2)根据(i-1)所述的化合物，其中
在式(a)中，
x是碳原子；
y是氧原子、羟基或烃基；
r1和r2是不同的，并各自表示由式(a-1)表示的基团(其中r6是吡咯烷基并且n2是0)或氢原子；
r3是-co-r7(其中r7是烷氧基、烷基或烷基氨基)或氢原子；
r4是氢原子或其中一个或多个氢原子可能被一个或多个取代基代替的烃基；
r5是卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基；并且
n1是1至3的整数。
根据(i-2)所述的化合物也可以由下式(ax)表示：
其中
y表示氧原子、羟基或烃基；
r1和r2是不同的，并各自表示由下式(a-2)表示的基团：
或氢原子；
r3表示-co-r7(其中r7表示烷氧基、烷基或烷基氨基)或氢原子；
r4表示氢原子或其中一个或多个氢原子可能被一个或多个取代基代替的烃基；
r5表示卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基；
n1是1至3的整数；
在所述化合物的骨架中，由两条虚线组成的6-位与7-位之间的双线当y是氧原子或羟基时表示没有键，并且当y是烃基时所述双线表示双键；
在所述化合物的骨架中，由实线和虚线组成的7-位与8-位之间的双线当y是氧原子时表示双键，并且当y是羟基或烃基时所述双线表示单键；
在所述化合物的骨架中，由实线和虚线组成的8-位与9-位之间的双线当y是氧原子或羟基时表示单键，并且当y是烃基时所述双线表示双键。
在本说明书中，由上述式(ax)表示的一组化合物可以被合称为“化合物ax”。
(i-3)根据(i-1)所述的化合物，其中
在式(a)中，
x是碳原子；
y是氧原子或羟基；
r1是由式(a-1)表示的基团(其中r6是吡咯烷基并且n2是0)；
r2是氢原子；
r3是-co-r7(其中r7是烷氧基、烷基或烷基氨基)、1,3-噁唑基或烷基羟基；
r4是氢原子；
r5是卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基；并且
n1是1至3的整数；并且
在所述化合物的骨架中，
各自由实线和虚线组成的2-位与3-位之间的双线和4-位与5-位之间的双线表示双键；
由实线和虚线组成的7-位与8-位之间的双线当y是羟基时表示单键，并且当y是氧原子时所述双线表示双键；
各自由实线和虚线组成的5-位与6-位之间的双线和8-位与9-位之间的双线表示单键；
6-位与7-位之间的双虚线表示没有键，并且
r3通过单键结合到2-位。
根据(i-3)所述的化合物也可以由下式(aa)表示：
其中
y是氧原子或羟基；
r3是-co-r7(其中r7是烷氧基、烷基或烷基氨基)、1,3-噁唑基、烷基羟基或氢原子；
r5是卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基；
n1是1至3的整数；并且
在所述化合物的骨架中，由实线和虚线组成的7-位与8-位之间的双线当y是氧原子时表示双键，并且当y是羟基时所述双线表示单键。
在本说明书中，由上述式(aa)表示的一组化合物可以被合称为“化合物aa”。
(i-4)根据(i-1)所述的化合物，其中
在式(a)中，
x是碳原子；
y是氧原子；
r1是由式(a-1)表示的基团(其中r6是吡咯烷基并且n2是0)；
r2是氢原子；
r3是-co-r7(其中r7是烷氧基、烷基或烷基氨基)或1,3-噁唑基；
r4是氢原子；
r5是卤代烷基；并且
n1是1；并且
在所述化合物的骨架中，
各自由实线和虚线组成的2-位与3-位之间的双线、4-位与5-位之间的双线和7-位与8-位之间的双线表示双键；
各自由实线和虚线组成的5-位与6-位之间的双线和8-位与9-位之间的双线表示单键；
6-位与7-位之间的双虚线表示没有键；并且
r3通过单键结合到2-位。
根据所述(i-4)的化合物也可以由下式(aa1)表示：
其中
r3是-co-r7(其中r7是烷氧基、烷基或烷基氨基)或1,3-噁唑基；并且
r5是卤代烷基。
在本说明书中，由上述式(aa1)表示的一组化合物也可以被合称为“化合物aa1”。
(i-5)根据(i-1)所述的化合物，其中
在式(a)中，
x是碳原子；
y是羟基；
r1是由式(a-1)表示的基团(其中r6是吡咯烷基并且n2是0)；
r2是氢原子；
r3是-co-r7(其中r7是烷氧基、烷基或烷基氨基)或1,3-噁唑基；
r4是氢原子；
r5是卤代烷基；并且
n1是1的整数；并且
在所述化合物的骨架中，
各自由实线和虚线组成的2-位与3-位之间的双线和4-位与5-位之间的双线表示双键；
各自由实线和虚线组成的5-位与6-位之间的双线、7-位与8-位之间的双线和8-位与9-位之间的双线表示单键；
6-位与7-位之间的双虚线表示没有键；并且
r3通过单键结合到2-位。
根据(i-5)所述的化合物也可以由下式(aa2)表示：
其中
r3是-co-r7(其中r7是烷氧基、烷基或烷基氨基)或1,3-噁唑基；并且
r5是卤代烷基。
在本说明书中，由上述式(aa2)表示的一组化合物可以被合称为“化合物aa2”。
(i-6)根据(i-1)所述的化合物，其中在式(a)中，
x是碳原子；
y是烃基；
r1是羟基；
r2是由式(a-1)表示的基团(其中r6是吡咯烷基并且n2是0)；
r3是氢；
r4是其中一个或多个氢原子可能被一个或多个取代基代替的烃基；
r5是卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基；并且
n1是1至3的整数；并且
在所述化合物的骨架中，
各自由实线和虚线组成的2-位与3-位之间的双线和4-位与5-位之间的双线表示双键；
由实线和虚线组成的5-位与6-位之间的双线表示单键；
6-位与7-位之间的双虚线表示双键；
由实线和虚线组成的7-位与8-位之间的双线表示单键；并且
由实线和虚线组成的8-位与9-位之间的双线表示双键。
根据(i-6)所述的化合物也可以由下式(ab)表示：
其中
y是烃基；
r4是其中一个或多个氢原子可能被一个或多个取代基代替的烃基；
r5是卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基；
n1是1至3的整数；
由实线和虚线组成的6-位与7-位之间的双线表示双键；
由实线和虚线组成的7-位与8-位之间的双线表示单键；并且
由实线和虚线组成的8-位与9-位之间的双线表示双键。
在本说明书中，由上述式(ab)表示的一组化合物可以被合称为“化合物ab”。
(i-7)所述由式(a)表示并具有dock1抑制活性的吡咯型化合物(化合物a)包括选自下述化合物的任何化合物或其盐：
(a1)1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸甲酯(rt-22)，
(a2)2-(2-乙酰基-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-1-基)-1-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙烷(hs-16)，
(a3)1-(1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-基)丙-1-酮(hs-17)，
(a4)n,n-二甲基-1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-4-(吡咯烷-1)-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酰胺(rt-23)，
(a5)2-(2-(噁唑-2-基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-1-基)-1-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙-1-酮(rt-58)，
(a6)1-(2-羟基-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸甲酯(hs-6)，
(a7)2-(2-(羟基甲基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-1-基)-1-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙-1-醇(hs-14)，
(a8)2-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-6-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)吲嗪-8-基乙酸酯(hs-20)，和
(a9)3-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-((苯磺酰基)甲基)咪唑烷-2,4-二酮(rt-35)。
(ii)具有dock1抑制活性的取代的氮杂-脂环化合物
(ii-1)一种由下式(b)表示的化合物：
其中
ra是由下述式(b-1)至(b-4)表示的基团之一：
(其中re相同或不同，并各自表示卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基；m3是0至2的整数；并且m4是0至5的整数)，
rb是氢原子或氨基；
rc是氢原子或烷基；
rd是由下式(b-5)表示的基团：
(其中rf是氢原子、羟基、烷基、酰基氧基或烷氧基(其中所述烷氧基可连接到y以形成环)，并且rg是由下式(b-6)表示的基团或喹啉基：
(其中z是碳原子或氮原子，rh相同或不同，并各自表示卤素原子、卤代烷基、卤代烷硫基、烷基、烯基或烷基氨基；并且m5是1至3的整数))；或
rd是由下式(b-7)表示的基团：
y是氧原子、羟基或烷氧基(其中当rd是由式(b-5)表示的基团时，所述烷氧基可连接到由rf表示的烷氧基以形成环)；
m1意味着0或1；
m2意味着0或1；并且
式(b)中由虚线和实线组成的双线当y是氧原子时表示双键，并且当y是羟基或烷氧基时所述双线表示单键。
在本说明书中，由上述式(b)表示的一组化合物可以一起被称为“化合物b”。
(ii-2)根据(ii-1)所述的化合物，其中
在式(b)中，
m1和m2均为1；
y是氧原子；并且
ra是由下述式(b-1)至(b-4)表示的基团之一：
(其中re相同或不同，并各自表示卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基；m3是0至2的整数；并且m4是0至5的整数)，
rb和rc均为氢原子；
rd是由下式(b-5)表示的基团：
(其中rf是氢原子，并且rg是由下式(b-6)表示的基团：
(其中z是碳原子；rh相同或不同，并各自表示卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基；并且m5是1至3的整数))。
根据(ii-2)所述的化合物也可以由下式(ba)表示：
其中
ra是由下述式(b-1)至(b-4)表示的基团之一：
(其中re相同或不同，并各自表示卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基；m3是0至2的整数；并且m4是0至5的整数)，
rg是由下式(b-6)表示的基团：
(其中z是碳原子；rh相同或不同，并各自表示卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基；并且m5是1至3的整数)。
在本说明书中，由上述式(ba)表示的一组化合物可以被合称为“化合物b”。
(ii-3)根据ii-1所述的化合物，其中
在式(b)中，
m1和m2均为0；
rb是氢原子或氨基；
rc是氢原子或烷基；
rd是由下式(b-5)表示的基团：
(其中rf相同或不同，并各自表示氢原子、羟基、烷基、酰基氧基或烷氧基(其中所述烷氧基可连接到y以形成环)；
rg是由下式(b-6)表示的基团：
(其中z是碳原子或氮原子；rh相同或不同，并各自表示卤素原子、卤代烷基、卤代烷硫基、烷基、亚烷基或烷基氨基；m5是1至3的整数)或喹啉基；或
rd是由下式(b-7)表示的基团：
y是氧原子、羟基或烷氧基(其中当rd是由式(b-5)表示的基团时，所述烷氧基可连接到由rf表示的烷氧基以形成环)。
根据(ii-3)所述的化合物也可以由下式(bb)表示：
其中
rb是氢原子或氨基；
rc是氢原子或烷基；
rd是由下式(b-5)表示的基团：
(其中rf是氢原子、羟基、烷基、酰基氧基或烷氧基(其中所述烷氧基可连接到y以形成环)；rg是由下式(b-6)表示的基团或喹啉基：
(其中z是碳原子或氮原子；rh相同或不同，并各自表示卤素原子、卤代烷基、卤代烷硫基、烷基、烯基或烷基氨基；并且m5是1至3的整数))，或
rd是由下式(b-7)表示的基团：
y是氧原子、羟基或烷氧基(其中当rd是由式(b-5)表示的基团时，所述烷氧基可连接到由rf表示的烷氧基以形成环)。
在本说明书中，由式(bb)表示的一组化合物可以被合称为“化合物bb”。
(ii-4)所述由式(ba)表示并具有dock1抑制活性的取代的氮杂-脂环化合物包括选自下述化合物的任何化合物及其盐：
(b1)5-((4-(4-(蒽-9-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮(ks-47)，
(b2)1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-((4-(3’,4’,5’-三氟-[1,1’-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-54)，
(b3)5-((4-([1,1’:4’,1”:4”,1”’-四联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮(ks-44)，
(b4)5-((4-([1,1’-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮(ks-43)，
(b5)1-(2-氧代-2-(3’,4’,5’-三氟-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-((4-(3’,4’,5’-三氟-[1,1’-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-59)，
(b6)5-((4-(4-(9h-芴-2-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮(ks-46)，和
(b7)1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-((4-(4-(芘-1-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-45)。
(ii-5)所述由式(bb)表示并具有dock1抑制活性的氮杂-脂环化合物包括选自下述化合物的任何化合物及其盐：
(b8)1-(2-羟基-2-(3-羟基-3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-16)，
(b9)1-((2,2-二甲基-7-(3-(三氟甲基)苯基)-4h-苯并[d][1,3]二噁英-4-基)甲基)-5-(吡咯烷)-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-17)，
(b10)1-(2-氧代-2-(3’-((三氟甲基)硫基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-21)，
(b11)3-氨基-1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(rt-13)，
(b12)2-溴-1-(3-甲基-3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙-1-酮(ak-5)，
(b13)1-(2-(3-羟基-3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-15)，
(b14)1-(2-(3-甲氧基-3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-14)，
(b15)4-(2-(2-氧代-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-1(2h)-基)乙酰基)-3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-3-基-乙酸酯(ak-25)，
(b16)1-(2-(3-异丁氧基-3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-22)，
(b17)1-(1-(3-(己氧基)-3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)-1-氧代辛-2-基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-23)，
(b18)1-(2-氧代-2-(3-苯乙氧基-3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-24)，
(b19)1-(2-氧代-2-(3’-乙烯基-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-26)，
(b20)1-(2-(4’-(二甲基氨基)-3’-甲基-[1,1’-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-16)，
(b21)1-(2-氧代-2-(4-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-22)，
(b22)1-(2-氧代-2-(4-(喹啉-7-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-18)，
(b23)1-(2-氧代-2-(4-(喹啉-6-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-23)，和
(b24)1-(2-((3s,10r,13s,17s)-3-羟基-10,13-二甲基-2,3,4,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十四氢-1h-环戊并[a]菲-17-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-20)。
(iii)具有dock1抑制活性的吡咯型化合物或取代的氮杂-脂环化合物的应用
(iii-1)一种dock1选择性抑制剂，其含有选自根据(i-1)至(i-7)和(ii-1)至(ii-5)所述的化合物及其盐的至少一种化合物作为活性成分。
(iii-2)一种药物组合物，其包含选自根据(i-1)至(i-7)和(ii-1)至(ii-5)所述的化合物及其盐的至少一种化合物，以及可药用载体或添加剂。
(iii-3)根据(iii-2)所述的药物组合物，其用于治疗和/或预防癌症。
(iii-4)根据(iii-3)所述的药物组合物，其中所述癌症是侵袭性或转移性癌症.
本发明的有利效果
根据本发明，可以提供一种可用作抗癌剂的活性成分的化合物。具体来说，本发明的化合物具有dock1抑制活性，优选为dock1选择性rac活性抑制活性，并且可以在这种活性的基础上发挥抗癌作用。本发明的优选化合物的特征在于对dock1具有高选择性，并且对通过dock2的免疫系统几乎没有影响。本发明的更优选化合物与已知作为dock1选择性抑制剂的tbopp相比具有更高的dock1抑制作用(效能)、更高的dock1/dock2选择性(选择性)和/或更高的细胞侵袭应答抑制(细胞活性)；并且可以用作dock1选择性抑制剂并用作具有抗癌作用和很小副作用的药物。
附图说明
图1是示出了被本发明的化合物a所涵盖的9种代表性化合物的化学式、对dock1的抑制活性(在gef测定法中的ic50值)、dock1选择性抑制作用(dock1/dock2选择性)和对癌细胞侵袭应答的抑制作用(针对3ll细胞的细胞侵袭抑制活性)的表。
图2是示出了被本发明的化合物ba所涵盖的7种代表性化合物的化学式、对dock1的抑制活性(在gef测定法中的ic50值)、dock1选择性抑制作用(dock1/dock2选择性)和对癌细胞侵袭应答的抑制作用(针对3ll细胞的细胞侵袭抑制活性)的表。
图3-1是示出了被本发明的化合物bb所涵盖的代表性化合物的化学式、对dock1的抑制活性(在gef测定法中的ic50值)、dock1选择性抑制作用(dock1/dock2选择性)和对癌细胞侵袭应答的抑制作用(针对3ll细胞的细胞侵袭抑制活性)的表。
图3-2是示出了被本发明的化合物bb所涵盖的代表性化合物的化学式、对dock1的抑制活性(在gef测定法中的ic50值)、dock1选择性抑制作用(dock1/dock2选择性)和对癌细胞侵袭应答的抑制作用(针对3ll细胞的细胞侵袭抑制活性)的表。
图4的图示出的结果证实了作为本发明的代表性吡咯型化合物(化合物a)的rt-22和作为本发明的代表性取代氮杂-脂环化合物(化合物b)的ks-59的dock1选择性抑制作用(药理学试验1)。(a)的图示出了将在各种不同浓度的rt-22存在下rac被小鼠dock1dhr-2结构域或dock2dhr-2结构域激活的测量值作图的反应抑制曲线，取dmso(对照：不存在rt-22)的rac激活的测量值为100％。图中的数值从上方开始依次分别是小鼠dock1和dock2的ic50值(μm)。(b)的图示出了将在各种不同浓度的ks-59存在下rac被小鼠dock1dhr-2结构域或dock2dhr-2结构域激活的测量值作图的反应抑制曲线，取dmso(对照：不存在ks-59)的rac激活的测量值为100％。图中的数值从上方开始依次分别是小鼠dock1和dock2的ic50值(μm)。(c)的图示出了将在各种不同浓度的rt-22存在下rac被人类dock1dhr-2结构域或dock2dhr-2结构域激活的测量值作图的反应抑制曲线，取dmso(对照)的rac激活的值为100％。图中的数值从上方开始依次分别是人类dock1和dock2的ic50值(μm)。(d)的图示出了将在各种不同浓度的ks-59存在下rac被人类dock1dhr-2结构域或dock2dhr-2结构域激活的测量值作图的反应抑制曲线，取dmso(对照)的rac激活的值为100％。图中的数值从上方开始依次分别是人类dock1和dock2的ic50值(μm)。(e)的图示出了将在各种不同浓度的rt-22存在下rac被小鼠triodh-ph结构域或tiam1dh-ph结构域激活的测量值作图的反应抑制曲线，取dmso(对照)的rac激活的值为100％。图中的数值从上方开始依次分别是小鼠triodh-ph结构域和tiam1dh-ph结构域的ic50值(μm)。
图5-1的图示出的实验结果证实了作为本发明的代表性吡咯型化合物(化合物a)的rt-22、hs-6和hs-20以及作为本发明的代表性取代氮杂-脂环化合物(化合物b)的ks-59和rt-13的癌细胞侵袭抑制作用，并与已知的tbopp(ts-45)进行比较(药理学研究2)。(a)的图示出了在rt-22、ks-59或tbopp存在下小鼠肺癌细胞系(3ll)的定量侵袭潜力。(b)的图示出了在hs-6、hs-20、rt-13或tbopp存在下小鼠肺癌细胞系(3ll)的定量侵袭潜力。竖直轴表示细胞侵袭百分数(％)，取在对照试验(dmso)中侵入细胞的数目为100％。
图5-2(c)的图示出了在rt-22存在下小鼠胰腺癌细胞系(panc-02)的定量侵袭潜力。图5-2(d)的图示出了在rt-22存在下人类乳腺癌细胞系(mda-mb-157)的定量侵袭潜力。竖直轴表示细胞侵袭百分数(％)，取在对照试验(dmso)中侵入细胞的数目为100％。
图6示出了作为本发明的代表性吡咯型化合物(化合物a)的rt-22的巨胞饮作用抑制的实验结果(药理学试验3)。(a)是使用tmr-葡聚糖(用tmr标记的葡聚糖，红色)的摄入作为指标，基于小鼠肺癌细胞系(3ll)的巨胞饮活性的分析的荧光显微镜图像。细胞核用dapi染色(蓝色)。(b)的图示出了在(a)中的荧光显微镜图像的基础上定量的在rt-22存在下的巨胞饮活性。(c)是使用tmr-葡聚糖(用tmr标记的葡聚糖，红色)的摄入作为指标，基于小鼠胰腺癌细胞系(panc-02)的巨胞饮活性的分析的荧光显微镜图像。细胞核用dapi染色(蓝色)。(d)的图示出了在(c)中的荧光显微镜图像的基础上定量的在rt-22存在下的巨胞饮活性。竖直轴表示相对于被取为1的在对照试验(添加dmso)中细胞的葡聚糖摄入程度，在每种条件下的葡聚糖摄入程度。
图7的图示出的实验结果证实了作为本发明的代表性吡咯型化合物(化合物a)的rt-22对淋巴细胞迁移的影响(药理学试验4)。竖直轴表示在每种条件下迁移到下方腔室的细胞(向ccl21迁移的细胞)的数目，其被表示成在接种到transwell中的细胞总数中的百分数(％)。
图8的图示出的实验结果证实了对淋巴细胞(t细胞)的生活力的影响(药理学试验5)。
图9的图示出的实验结果证实了在皮下给药小鼠肺癌细胞系(3ll)的模型中，作为本发明的代表性吡咯型化合物(化合物a)的rt-22对肿瘤生长的抑制作用(药理学试验6)。在所述图中，竖直轴表示移植到小鼠中的肿瘤团块的体积，并且水平轴表示经过的天数。rt-22或作为对照的单独的溶剂使用微量输注泵连续给药(静脉内给药，i.v.)(对照组(仅仅溶剂)：n＝6；rt-22组：n＝5)。
具体实施方式
(1)取代基的解释
本说明书描述了由各种不同化学式表示的化合物，其中基团用符号表示。所述由符号表示的基团的含义和具体实例在下文解释。
除非另有规定，否则本发明的化合物中的“烷基”的实例通常包括具有1至6个碳原子的直链或支链烷基。此类烷基的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、己基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、3,3-二甲基丁基、1-乙基丁基、2-乙基丁基、1,1,2-三甲基丙基、1,2,2-三甲基丙基等。优选的实例包括具有1至4个碳原子的短链烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基和异丁基，更优选为具有1至2个碳原子的短链烷基，例如甲基和乙基。
除非另有规定，否则本发明的化合物中的“烯基”的实例包括在上述烷基中具有至少一个双键的基团。更具体来说，所述烯基的实例包括具有1至2个双键和2至6个碳原子的直链或支链烯基，优选为具有2至4个碳原子和1个双键的直链或支链烯基。此类烯基的实例包括但不限于乙烯基、烯丙基、丙烯基、异丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基和2-甲基烯丙基，更优选为乙烯基、烯丙基和丙烯基，甚至更优选为乙烯基。
本发明的化合物中的“烷氧基”是氢原子被具有1至6个碳原子(优选地1至4个碳原子)的烷基代替的羟基或氢原子被芳香族烃基代替的羟基。此类烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、1-丙氧基、2-丙氧基、1-丁氧基、2-丁氧基、2-甲基-1-丙氧基、2-甲基-2-丙氧基、1-戊氧基、2-戊氧基、3-戊氧基、2-甲基-2-丁氧基、3-甲基-2-丁氧基、1-己氧基、2-己氧基、3-己氧基、2-甲基-1-戊氧基、3-甲基-1-戊氧基、2-乙基-1-丁氧基、2,2-二甲基-1-丁氧基和2,3-二甲基-1-丁氧基，以及苯甲氧基、苯乙氧基等。优选的实例包括甲氧基、乙氧基、1-丙氧基、2-丙氧基、1-丁氧基、己氧基和苯乙氧基，更优选为甲氧基。在本发明的化合物中，所述烷氧基可能结合到另一个烷氧基以形成环。
本发明的化合物中的“烷氧基羰基”的“烷氧基”的实例包括上面提到的烷氧基。优选的实例包括甲氧基、乙氧基、1-丙氧基和2-丙氧基，更优选为甲氧基。
本发明的化合物中的“烷基氨基”是从氨的氢原子被烷基代替的伯胺或仲胺移除氢原子而获得的单价官能团(-nhr、-nrr’)。优选地，所述烷基氨基是通过从仲胺移除氢原子而获得的二烷基氨基(-nrr’)。由r或r’表示的烷基的实例包括上文提到的烷基。优选的实例包括具有1至4个碳原子的短链烷基，更优选为具有1至2个碳原子的短链烷基例如甲基和乙基。当所述“烷基氨基”是由-nrr’表示的二烷基氨基时，由r和r’表示的烷基可以相同或不同。所述由r和r’表示的烷基优选为相同的烷基，其选自具有1至4个碳原子的短链烷基，更优选为具有1至2个碳原子的短链烷基，特别优选为甲基。
本发明的化合物中的“烷基羟基”的实例包括将烷基例如上文提到的烷基的至少一个氢原子用至少一个羟基代替而获得的单价官能团。优选地，所述烷基羟基是通过将烷基的一个氢原子用羟基代替而获得的官能团(-r-oh)。所述烷基优选为具有1至4个碳原子的短链烷基，更优选为具有1至2个碳原子的短链烷基，特别优选为甲基。
本发明的化合物中的“卤素原子”的实例包括氟原子、氯原子、溴原子和碘原子。优选的实例包括氯原子、溴原子和氟原子，更优选为氟原子。
本发明的化合物中的“卤代烷基”的实例包括其中烷基例如上文提到的烷基的至少一个氢原子被至少一个卤素原子代替的单价官能团。所述卤素原子的实例包括但不限于上文提到的卤素原子，所述卤素原子优选为氯原子、溴原子或氟原子，更优选为氟原子(氟代烷基)。所述烷基优选为具有1至4个碳原子的短链烷基，更优选为具有1至2个碳原子的短链烷基，特别优选为甲基(卤代甲基)。被卤素原子代替的氢原子的数目不限于1，并且可以是2或更多。所述卤代烷基的实例包括其中甲基的1至3个氢原子被一个或多个卤素原子(x)代替的单卤代烷基(-ch2x)、二卤代烷基(-chx2)和三卤代烷基(-cx3)。优选地，所述卤代烷基是三卤代烷基。所述代替氢原子的卤素原子不必须是相同种类，并且可以是两种或更多种的组合。优选地，所述卤素原子是相同种类。在本发明的化合物中，所述卤代烷基更优选为三氟甲基。
本发明的化合物中的“卤代烷硫基”的实例包括其中烷硫基(也被称为烷基硫基)的氢原子被卤素原子代替的单价官能团。所述卤素原子的实例包括但不限于上文提到的卤素原子。优选的实例包括氯原子、溴原子和氟原子，更优选为氟原子(氟代烷硫基)。所述烷硫基的“烷基”的实例包括上文提到的烷基。优选的实例包括具有1至4个碳原子的短链烷基，更优选为具有1至2个碳原子的短链烷基，特别优选为甲基(卤代甲硫基)。被卤素原子代替的氢原子的数目不限于1，并且可以是2或更多。实例包括通过将甲硫基的三个氢原子中的1至3个氢原子用卤素原子(x)代替而获得的基团，例如单卤代烷硫基(-sch2x)、二卤代烷硫基(-schx2)和三卤代烷硫基(-scx3)。所述卤代烷硫基优选为三卤代烷硫基。所述代替氢原子的卤素原子不必定是相同种类，并且可以是两种或更多种的组合。优选地，所述卤素原子是相同种类。在本发明的化合物中，所述卤代烷硫基优选为三氟甲硫基。
本发明的化合物中的“酰基氧基”的酰基(烷酰基：r-co-)包括但不限于甲酰基、乙酰基、丙酰基、苯甲酰基和丙烯酰基。优选的实例包括甲酰基、乙酰基和丙酰基，更优选为甲酰基和乙酰基，特别优选为具有乙酰基作为酰基的乙酰氧基。
(2)具有dock1抑制活性的吡咯型化合物(化合物a)
根据本发明所述的具有dock1抑制活性的化合物包括由下式(a)表示的化合物及其盐。在本说明书中，此类化合物被合称为“化合物a”或“吡咯型化合物”。被称为“化合物a”或“吡咯型化合物”的化合物包括具有不完全是吡咯环但类似于吡咯环的含氮环状结构(苯并稠合的吡咯环、咪唑烷-2,4-二氧代团)的化合物。
在式(a)中，x表示碳原子或氮原子，优选为碳原子。在上式的环状骨架中，各自由实线和虚线组成的2-位与3-位之间的双线和4-位与5-位之间的双线当x是碳原子时表示双键，并且当x是氮原子时所述双线表示单键。
r1和r2是氢原子或由下式(a-1)表示的基团。当r1和r2中的一者是氢原子时，另一者是由(a-1)表示的基团。当y是烃基并且6-位与7-位之间的双虚线表示双键时，r1优选为氢原子，并且r2优选为由(a-1)表示的基团。当y是氧原子或羟基并且6-位与7-位之间的双虚线表示没有键时，r1优选为由(a-1)表示的基团，并且r2优选为氢原子。
在上述式(a-1)中，r6是吡咯烷基或苯基。所述吡咯烷基和苯基可以是未取代的，或者被1个取代基或2至4个取代基取代。当所述吡咯烷基或苯基具有一个或多个取代基时，所述取代基的实例包括卤素原子、具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、羟基、羧基、烷氧基羧基、氰基、cf3基团、cf3o基团、chf2o基团、cf3ch2o基团等。r6优选为未取代的吡咯烷基或苯基，更优选为未取代的吡咯烷基。在式(a-1)中，n2是0或1，并且优选为0。尽管没有特别限制，但当r6是吡咯烷基时，n2优选为0；并且当r6是苯基时，n2优选为1。
r3是-co-r7、1,3-噁唑基、烷基羟基、氢原子或氧原子。在上述式(a)中，环状骨架中2-位与r3之间由实线和虚线组成的双线当r3是氧原子时表示双键，并且当r3是取代基或氧原子之外的原子时所述双线表示单键。
r3优选为-co-r7。r7是烷氧基、烷基或烷基氨基。由r7表示的烷氧基如上文所述。优选的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、1-丙氧基和2-丙氧基，更优选为甲氧基。由r7表示的烷基也如上文所述。优选的实例包括但不限于具有1至4个碳原子的短链烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基和异丁基，更优选为甲基和乙基。由r7表示的烷基氨基如上文所述，并且优选为二烷基氨基。优选的二烷基氨基的具体实例包括但不限于具有1至4个碳原子的短链二烷基氨基，例如二甲基氨基、二乙基氨基、甲基乙基氨基、二丙基氨基和二丁基氨基，更优选为二甲基氨基。
所述由r3表示的1,3-噁唑基可以是1,3-噁唑-2-基、1,3-噁唑-4-基和1,3-噁唑-5-基中的任一者，优选为1,3-噁唑-2-基。所述由r3表示的烷基羟基如上文所述。优选的实例包括具有1至4个碳原子的短链烷基羟基，例如甲基羟基、乙基羟基、丙基羟基和丁基羟基，更优选为甲基羟基。
r4表示氢原子、氧原子或其中至少一个氢原子可能被至少一个取代基代替的烃基。r4优选为氢原子。在上式(a)的环状骨架中由实线和虚线组成的5-位与6-位之间的双线当r4是氧原子时表示双键，并且当r4是氧原子之外的原子时所述双线表示单键。当r4是其中至少一个氢原子可能被至少一个取代基代替的烃基时，所述取代基优选为酰基氧基。所述酰基氧基如上文所述。优选的实例包括甲酰氧基和乙酰氧基，更优选为乙酰氧基。其他取代基的实例包括但不限于卤素原子、羟基、氰基、cf3基团、cf3o基团、chf2o基团、cf3ch2o基团等。所述烃基优选为甲基。当r4是其中至少一个氢原子可能被至少一个取代基代替的烃基时，r4可以键合到由y表示的烃基(在后文描述)以形成环。在这种情况下，在式(a)的环状骨架中由两条虚线组成的6-位与7-位之间的双线表示双键。
y表示氧原子、羟基或烃基。优选地，y是氧原子或羟基，更优选为氧原子。其中y是氧原子或羟基的化合物的实例包括由上述化学式(aa)表示的化合物aa。化合物aa的实例包括其中y是氧原子的化合物aa1和其中y是羟基的化合物aa2。其中y是烃基的化合物的实例包括由上述化学式(ab)表示的化合物ab。
在上述式a中，由实线和虚线组成的7-位与8-位之间的双线当y是氧原子时表示双键，并且当y是氧原子之外的原子时所述双键表示单键。在上述式中，由实线和虚线组成的8-位与9-位之间的双线当y是氧原子或羟基时表示单键。当y是烃基时，y可以键合到作为如上所述其中一个或多个氢原子可能被代替的烃基的r4，以形成环。在这种情况下，在式(a)的环状骨架中，由实线和虚线组成的8-位与9-位之间的双线和由两条虚线组成的6-位与7-位之间的双线表示双键。
r5是卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基。所述卤素原子、卤代烷基和卤代烷硫基如上文所述。所述卤素原子优选为氟原子。所述卤代烷基优选为三卤代烷基。所述卤代烷硫基优选为三卤代烷硫基。所述卤代烷基的卤素原子和卤代烷硫基的卤素原子两者优选为氟原子。所述烷基的实例包括具有1至4个碳原子的短链烷基，优选为甲基和乙基，更优选为甲基。r5优选为卤代烷基，更优选为三卤代烷基，甚至更优选为三氟烷基，特别优选为三氟甲基。
n1是0至5的整数。当r5是卤素原子时，n1优选为1至3的整数。当r5是卤代烷基或卤代烷硫基时，n1优选为1。当n1是1时，r5可以位于苯环的间位、邻位或对位，优选为间位，更优选为3’-位。
根据本发明所述的化合物a的实例包括由化学式式ax表示的化合物ax作为优选的一组化合物。如下所示，本发明的化合物a可以根据r4是否为氢原子分成两组化合物。其中r4是氢原子的化合物可以被进一步分成其中y是氧原子的化合物和其中y是羟基的化合物。
(1)其中r4是氢原子的一组化合物(这些化合物的组被合称为“化合物aa”)，其中
(aa1)其中y是氧原子的一组化合物(这些化合物的组被合称为“化合物aa1”)；和
(aa2)其中y是羟基的一组化合物(这些化合物的组被合称为“化合物aa2”)。
(2)其中r4是氢原子之外的原子或原子团的一组化合物(这些化合物的组被合称为“化合物ab”)，其中
(ab1)其中r4是其中一个或多个氢原子可能被一个或多个取代基代替的烃基的一组化合物(这些化合物的组被合称为“化合物ab1”)；和
(ab2)其中r4是氧原子的一组化合物(这些化合物的组被合称为“化合物ab2”)。
下面更详细地描述这些组中的化合物。
(2-1)化合物aa
化合物aa由式(a)表示，其中r4是氢原子，y是氧原子或羟基，并且优选地x是碳原子；r1是由式(a-1)表示的基团(其中r6是吡咯烷基，并且n2是0)；r3是-co-r7(r7是烷氧基、烷基或烷基氨基)、1,3-噁唑基、烷基羟基或氢原子；r5是卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基；并且n1是1至3的整数)，在式(a)的骨架中，各自由实线和虚线组成的2-位与3-位之间的双线和4-位与5-位之间的双线表示双键；由实线和虚线组成的7-位与8-位之间的双线当y是氧原子时表示双键，并且当y是羟基时所述双线表示单键；各自由实线和虚线组成的5-位与6-位之间的双线和8-位与9-位之间的双线表示单键；6-位与7-位之间的双虚线表示没有键；并且r3通过单键结合到2-位。
化合物aa可以由下式(aa)表示：
其中y是氧原子或羟基；
r3是-co-r7(其中r7是烷氧基、烷基或烷基氨基)、1,3-噁唑基、烷基羟基或氢原子；
r5是卤素原子、卤代烷基或卤代烷氧基；
n1是1至3的整数；并且
在所述化合物的骨架中，由实线和虚线组成的7-位与8-位之间的双线当y是氧原子时表示双键，并且当y是羟基时所述双线表示单键。
如上所述，化合物aa可以根据y是氧原子还是羟基进行分类。其中y是氧原子的化合物aa1的实例优选地包括下述化合物。
化合物aa1
化合物aa1是指一组由式(a)表示的化合物，其中r4是氢原子，并且y是氧原子；并且优选地x是碳原子；r1是由式(a-1)表示的基团(其中r6是吡咯烷基，并且n2是0)；r3是-co-r7(其中r7是烷氧基、烷基或烷基氨基)或1,3-噁唑基；r5是卤代烷基；n1是1；在所述化合物的骨架中，各自由实线和虚线组成的2-位与3-位之间的双线、4-位与5-位之间的双线和7-位与8-位之间的双线表示双键；各自由实线和虚线组成的5-位与6-位之间的双线和8-位与9-位之间的双线表示单键；6-位与7-位之间的双虚线表示没有键；并且r3通过单键结合到2-位。
化合物aa1可以由下式(aa1)表示：
其中
r3是-co-r7(其中r7是烷氧基、烷基或烷基氨基)或1,3-噁唑基；并且
r5是卤代烷基。
所述由r7表示的烷氧基、烷基或烷基氨基的烷基如上文所述。优选的实例包括具有1至3个碳原子的短链烷基，更优选为甲基和乙基，甚至更优选为甲基。所述烷基氨基中烷基的数目可以是例如1或2。优选地，所述烷基氨基是具有两个烷基的二烷基氨基，更优选为二甲基氨基。所述由r3表示的1,3-噁唑基如上文所述，并且优选为1,3-噁唑-2-基。化合物aa1中的r3优选为-co-r7(其中r7是烷氧基，优选为甲氧基)或1,3-噁唑基(优选为1,3-噁唑-2-基)，更优选为-co-r7(其中r7是烷氧基，优选为甲氧基)。
所述由r5表示的卤代烷基的详细情况如上文所述。优选地，所述卤代烷基优选为具有2至3个卤素原子的烷基，更优选为三卤代烷基。所述卤素原子优选为氟原子。所述烷基优选为具有1至3个碳原子的短链烷基，优选为甲基或乙基，更优选为甲基。r5优选为三氟甲基。
所述具有dock1抑制活性的由上述式(aa1)表示的吡咯型化合物(化合物aa1)包括下述化合物及其盐：
(a1)1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸甲酯(rt-22：生产例1a)，
(a2)2-(2-乙酰基-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-1-基)-1-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙烷(hs-16：生产例4a)，
(a3)1-(1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-基)丙-1-酮(hs-17：生产例5a)，
(a4)n,n-二甲基-1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-4-(吡咯烷-1)-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酰胺(rt-23：生产例2a)，和
(a5)2-(2-(噁唑-2-基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-1-基)-1-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙-1-酮(rt-58：生产例3a)。
其中y是羟基的化合物aa2的优选实例包括下述化合物。
化合物aa2
化合物aa2是指一组由式(a)表示的化合物，其中r4是氢原子并且y是羟基，优选地x是碳原子；r1是由式(a-1)表示的基团(其中r6是吡咯烷基并且n2是0)；r3是-co-r7(其中r7是烷氧基)或烷基羟基；r5是卤代烷基；并且n1是1；在所述化合物的骨架中，各自由实线和虚线组成的2-位与3-位之间的双线和4-位与5-位之间的双线表示双键；各自由实线和虚线组成的5-位与6-位之间的双线、8-位与9-位之间的双线和7-位与8-位之间的双线表示单键；6-位与7-位之间的双虚线表示没有键；并且r3通过单键结合到2-位。
化合物aa2可以由下式(aa2)表示：
其中r3是-co-r7(其中r7是烷氧基)或烷基羟基；并且r5是卤代烷基。
所述由r7表示的烷氧基的烷基如上文所述。优选的实例包括具有1至3个碳原子的短链烷基，优选为甲基和乙基，更优选为甲基。这同样适用于所述由r3表示的烷基羟基的烷基。化合物aa2中的r3优选为-co-r7(其中r7是烷氧基，优选为甲氧基)。
所述由r5表示的卤代烷基的详细情况如上文所述。所述由r5表示的卤代烷基优选为具有2至3个卤素原子的烷基，更优选为三卤代烷基。所述卤素原子优选为氟原子。所述烷基优选为具有1至3个碳原子的短链烷基，优选为甲基或乙基，更优选为甲基。r5优选为三氟甲基。
所述由上式(aa2)表示并具有dock1抑制活性的吡咯型化合物(化合物aa2)包括下述化合物及其盐：
(a6)1-(2-羟基-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸甲酯(hs-6：生产例6a)，和
(a7)2-(2-(羟基甲基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-1-基)-1-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙-1-醇(hs-14：生产例7a)。
(2-2)化合物ab
如上所述，化合物ab包括其中r4是其中一个或多个氢原子可能被一个或多个取代基代替的烃基的“化合物ab1”和其中r4是氧原子的“化合物ab2”。
化合物ab1
其中r4是其中一个或多个氢原子可能被一个或多个取代基代替的烃基的化合物ab1包括下述化合物。
所述“其中一个或多个氢原子可能被一个或多个取代基代替的烃基”包括其一个或多个氢原子被任一个或多个官能团代替的-ch基团和含有–ch基团的原子团。r4优选为其中一个或多个氢原子被任一个或多个取代基代替的烃基。取代基的实例包括酰基氧基、卤素原子、羟基、氰基、cf3、cf3o、chf2o、cf3ch2o等，优选为酰基氧基，更优选为乙酰氧基。
化合物ab1的实例包括一组式(a)的化合物，其中r4是烃基；y是烃基，优选为-ch，并且y和作为烃基的r4键合以形成环。优选的实例包括一组化合物，其中x是碳原子；r1是氢原子；r2是由式(a-1)表示的基团(其中r6是吡咯烷基并且n2是0)；r3是氢原子；r5是卤代烷基；n1是1；在式(a)的骨架中，各自由实线和虚线组成的2-位与3-位之间的双线、4-位与5-位之间的双线、6-位与7-位之间的双线和8-位与9-位之间的双线表示双键；各自由实线和虚线组成的5-位与6-位之间的双线和7-位与8-位之间的双线表示单键；并且r3通过单键结合到2-位。
所述由r5表示的卤代烷基的详细情况如上文所述。所述由r5表示的烷基的优选实例是具有2至3个卤素原子的烷基，更优选为三卤代烷基。所述卤素原子优选为氟原子。所述烷基优选为具有1至3个碳原子的短链烷基，更优选为甲基。r5优选为三氟甲基。
具有dock1抑制活性的化合物ab1的实例包括下述化合物及其盐：
(a8)2-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-6-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)吲嗪-8-基-乙酸酯(hs-20：生产例8a)。
化合物ab2
其中r4是氧原子的化合物ab2的实例优选地包括下述化合物。
化合物ab2包括由式(a)表示的一组化合物，其中r4是氧原子，并且优选地x是氮；r1是由式(a-1)表示的基团(其中r6是苯基并且n2是1)；r2是氢原子；r3是氧原子；r5是卤代烷基；并且n1是1；并且在所述化合物的骨架中，各自由实线和虚线组成的5-位与6-位之间的双线和7-位与8-位之间的双线表示双键；各自由实线和虚线组成的2-位与3-位之间的双线、4-位与5-位之间的双线和8-位与9-位之间的双线表示单键；由实线和虚线组成的6-位与7-位之间的双线表示没有键；并且r3通过单键结合到2-位。
所述由r5表示的卤代烷基的详细情况如上文所述。优选地，所述卤代烷基是具有2至3个卤素原子的烷基，更优选为三卤代烷基。所述卤素原子优选为氟原子。所述烷基优选为具有1至3个碳原子的短链烷基，更优选为甲基。r5优选为三氟甲基。
具有dock1抑制活性的化合物ab2包括下述化合物及其盐：
(a9)3-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-((苯磺酰基)甲基)咪唑烷-2,4-二酮(rt-35：生产例9a)。
(3)具有dock1抑制活性的取代的氮杂-脂环化合物(化合物b)
本发明的具有dock1抑制活性的化合物包括由下式(b)表示的化合物及其盐。这些化合物在后文中被合称为“化合物b”或“取代的氮杂-脂环化合物”
其中m1是0或1，并且m2是0或1。
更具体来说，化合物b(取代的氮杂-脂环化合物)包括具有一个或多个取代基的吡咯烷化合物(m1＝0)和可能具有一个或多个取代基的哌啶化合物(m1＝1)。优选地，当m1是1时，m2是1；并且当m1是0时，m2是0。更具体来说，化合物b的优选实例包括具有取代基的哌啶化合物(m1＝1并且m2＝1)和没有取代基的吡咯烷化合物(m1＝0并且m2＝0)，更优选为具有取代基的哌啶化合物(取代的哌啶化合物)。
在上述式(b)中，ra是由下式(b-1)至(b-4)中的任一者表示的基团：
ra的优选实例包括但不限于由式(b-1)或(b-2)表示的基团。
在上述式(b-2)中，rd相同或不同，并各自表示卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基。所述卤素原子、卤代烷基和卤代烷硫基如上文所述。所述卤素原子优选为氟原子。所述卤代烷基优选为三卤代烷基。所述卤代烷硫基优选为三卤代烷硫基。所述卤代烷基的卤素原子和所述卤代烷硫基的卤素原子两者优选为氟原子(氟代烷基和氟代烷硫基)。烷基的实例包括具有1至4个碳原子的短链烷基，优选为甲基和乙基，更优选为甲基(卤代甲基)。rd优选为卤素原子，更优选为氟原子。
在上述式(b-2)中，m4是0至5、优选为0至3的整数。当所述rd是卤素原子时，m4优选为1至3，更优选为3。在上述式(b-2)中，m3是0至2的整数，更优选为0或2。
在上述式(b)中，rc是氢原子或烷基。所述烷基的详细情况如上文所述。具体实例包括具有1至6个碳原子的短链烷基，优选为具有3至6个碳原子的直链短链烷基。
在上述式(b)中，rd是由下式(b-5)或(b-7)中的任一者表示的基团：
在上述式(b-5)中，rf是氢原子、羟基、烷基、酰基氧基或烷氧基，并且rg是喹啉基或由下式(b-6)表示的基团：
(其中z是碳原子或氮原子；rh相同或不同，并各自表示卤素原子、卤代烷基、卤代烷硫基、烷基、烯基或烷基氨基；并且m5是1至3的整数)。
rd优选为由式(b-5)表示的基团。式(b-5)中的rf可以被分类成氢原子和氢原子之外的基团，并且优选为氢原子。在式(b-5)中，rg优选为由式(b-6)表示的基团，其中z是碳原子。尽管对rf和rg在苯环上的位置没有限制，但rf优选位于邻位处，并且rg优选位于间位或对位处，优选位于对位处。
式(b-5)和(b-6)中由rf或rh表示的烷基如上文所述。优选实例包括具有1至3个碳原子的短链烷基，更优选为甲基或乙基，甚至更优选为甲基。
式(b-5)中由rf表示的酰基氧基如上文所述。优选实例包括其中酰基是甲酰基、乙酰基或丙酰基的酰基氧基，更优选为其中酰基是乙酰基的乙酰氧基。
式(b-5)中由rf表示的烷氧基如上文所述。优选实例包括其氢原子被具有1至6个碳原子的烷基代替的羟基或其氢原子被芳香族烃基代替的羟基。其氢原子被具有1至6个碳原子的烷基代替的羟基的优选实例包括甲氧基、乙氧基、1-丙氧基、2-丙氧基、1-丁氧基和2-丁氧基。其氢原子被芳香族烃基代替的羟基的优选实例包括苯甲氧基和苯乙氧基，优选为苯乙氧基。当所述由rf表示的基团是烷氧基时，所述由rf表示的烷氧基可以键合到由y表示的烷氧基以形成环。
式(b-5)中由rg表示的喹啉基的优选实例包括但不限于喹啉基-6-基和喹啉基-7-基，更优选为喹啉基-7-基。
式(b-6)中由rh表示的卤素原子的实例包括上文提到的那些。优选实例包括氟原子、氯原子和溴原子，更优选为氟原子。当rh是卤素原子时，m5是1至3，优选为3。当存在两个或更多个卤素原子时，所述卤素原子可以相同或不同。rh在苯环上所处的位置的实例包括间位和/或对位。由rh表示的卤代烷基的详细情况如上文所述。所述卤代烷基的优选实例包括具有2至3个卤素原子的烷基，更优选为三卤代烷基。所述由rh表示的卤代烷硫基的详细情况如上文所述。所述卤代烷硫基的优选实例包括具有2至3个卤素原子的烷硫基，更优选为三卤代烷硫基。所述卤素原子优选为氟原子。所述烷基的优选实例包括具有1至3个碳原子的短链烷基，优选为甲基和乙基，更优选为甲基。当rg是三卤代烷基或三卤代烷硫基时，m5是1至3，优选为1。rh在苯环上所处的位置可以是例如间位和/或对位，优选为间位，特别是3’-位。
由rh表示的烯基的实例包括上文提到的那些。优选实例包括具有2或3个碳原子和1个双键的直链烯基。此类烯基的实例包括乙烯基、烯丙基和丙烯基，优选为乙烯基。由rh表示的烷基氨基的实例包括上文提到的那些。优选地，所述烷基氨基是通过从仲胺移除氢而获得的二烷基氨基。烷基的实例包括上文提到的那些。优选地，所述烷基是相同或不同种类的具有1至4个碳原子的短链烷基，更优选地可以相同或不同并且是甲基或乙基。所述二烷基氨基特别优选地是二甲基氨基。当rh是烷基、烯基和/或烷基氨基时，m5是1或2，优选为1。rh在苯环上所处的位置可以是例如间位和/或对位，优选为间位，特别是3’-位。
式(b-6)中由rh表示的基团相同或不同，并且优选地表示卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基，更优选为卤素原子或卤代烷基(优选为三卤代烷基)。当rh是卤素原子时，m5是1至3，优选为3。rh在苯环上所处的位置可以是例如间位和/或对位，优选为间位和对位，特别是3’-位至5’-位。当rh是卤代烷基或卤代烷硫基时，m5优选为1。rh在苯环上所处的位置可以是例如间位和/或对位，优选为间位，特别是3’-位。
在式(b-6)中，z优选为碳原子。
本发明的化合物b可以根据式(b)中的m1是1还是0分为两组，如下文所示。正如上文成熟的，在其中m1是1的一组化合物中，m2优选也是1。这组化合物可以被称为取代的哌啶化合物(化合物ba)。在其中m1是0的一组化合物中，m2优选也是0。这组化合物可以被称为吡咯烷化合物(化合物bb)。
化合物bb可以被进一步分为以下四组：
(1)其中m1是1并且m2是1的一组化合物(化合物ba)
(2)其中m1是0并且m2是0的一组化合物(化合物bb)
(bb1)其中y不是氧原子的一组化合物(化合物bb1)
(bb2)其中y是氧原子，rd是取代基(b-5)，并且rf不是氢原子的一组化合物(化合物bb2)。
(bb3)其中y是氧原子，rd是取代基(b-5)，并且rf是氢原子的一组化合物(化合物bb3)
(bb4)其中y是氧原子并且rd是取代基(b-7)的一组化合物(化合物bb4)。
下面更详细描述这些组的化合物。
(3-1)化合物ba
化合物ba是本发明的取代的氮杂-脂环化合物(化合物b)中的优选化合物。所述化合物优选地由下式(ba)表示。
在式(ba)中，ra是由下式(b-1)至(b-4)表示的基团中的任一者：
ra的优选实例包括但不限于由式(b-1)或(b-2)表示的基团。式(b-2)中的re、m3和m4如上文所解释。
在上述式(ba)中，re是氢原子，并且rg是由下式(b-6)表示的基团：
其中z是碳原子；rh相同或不同，并各自表示卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基；m5是1至3的整数。所述卤素原子、卤代烷基和卤代烷硫基如上文所解释。当rh是卤素原子时，m5是1至3，优选为3。rh在苯环上所处的位置可以是例如间位和/或对位，优选为间位，特别是3’-位至5’-位。当rh是卤代烷基或卤代烷硫基时，m5优选为1。rh在苯环上所处的位置可以是例如间位和/或对位，优选为间位，特别是3’-位。rh优选为氟原子或三卤代甲基(优选为三氟甲基)。
所述由上述式(b)、特别是式(ba)表示并具有dock1抑制活性的取代的氮杂-脂环化合物(化合物ba)包括下述化合物及其盐：
(b1)5-((4-(4-(蒽-9-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮(ks-47：生产例2b)；
(b2)1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-((4-(3’,4’,5’-三氟-[1,1’-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-54：生产例3b)；
(b3)5-((4-([1,1’:4’,1”:4”,1”’-四联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮(ks-44：生产例5b)；
(b4)5-((4-([1,1’-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮(ks-43：生产例7b)；
(b5)1-(2-氧代-2-(3’,4’,5’-三氟-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-((4-(3’,4’,5’-三氟-[1,1’-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-59：生产例4b)；
(b6)5-((4-(4-(9h-芴-2-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮(ks-46：生产例1b)；和
(b7)1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-((4-(4-(芘-1-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-45：生产例6b)。
(3-1)化合物bb
化合物bb的优选实例包括由下式(bb)表示的化合物bb：
其中rb是氢原子或氨基；
rc是氢原子或烷基；
rd是由下式(b-5)表示的基团：
(其中rf是氢原子、羟基、烷基、酰基氧基或烷氧基(其中所述烷氧基可连接到y以形成环)；rg是由下述(b-6)表示的基团或喹啉基：
(其中z是碳原子或氮原子；rh相同或不同，并各自表示卤素原子、卤代烷基、卤代烷硫基、烷基、烯基或烷基氨基；并且m5是1至3的整数))，或
rd是由下式(b-7)表示的基团：
y是氧原子、羟基或烷氧基(其中当rd是由式(b-5)表示的基团时，所述烷氧基可连接到由rf表示的烷氧基以形成环)。
如上所述，化合物bb可以根据y是否为氧原子来分类。其中y不是氧原子的化合物bb1的优选实例包括下述化合物。
化合物bb1
在式(bb)中，y是羟基或烷氧基；rb是氢原子；rc是氢原子；rd是由式(b-5)表示的基团(其中rf是羟基或烷氧基)；rg是由式(b-6)表示的基团(其中z是碳原子；rh相同或不同，并各自表示卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基；m5是1至3的整数)。式(bb)中由实线和虚线组成的双线表示单键。当y是烷氧基时，式(b-5)中的rf也是烷氧基，并且这两个烷氧基可以彼此键合以形成环。
所述化合物可以由下式(bb1)表示：
其中y是羟基或烷氧基；rf是羟基或烷氧基(其中所述烷氧基可连接到由y表示的烷氧基以形成环)；并且rg是由下式(b-6)表示的基团：
(其中rh相同或不同，并各自表示卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基；并且m5是1至3的整数)。
在所述式中，烷氧基、卤素原子、卤代烷基和卤代烷硫基如上文所述。
所述由上述式(bb1)表示并具有dock1抑制活性的取代的氮杂-脂环化合物(化合物bb1)包括下述化合物及其盐：
(b8)1-(2-羟基-2-(3-羟基-3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-16：生产例18b)；和
(b9)1-((2,2-二甲基-7-(3-(三氟甲基)苯基)-4h-苯并[d][1,3]二噁英-4-基)甲基)-5-(吡咯烷)-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-17：生产例19b)。
在化合物bb中，其中y是氧原子，rd是取代基(b-5)，并且rf不是氢原子的化合物bb2的优选实例包括下述化合物。
化合物bb2
在式(bb)中，y是氧原子；rd是由式(b-5)表示的基团(其中rf是羟基、烷基、酰基氧基或烷氧基)；并且优选地rb是氢原子；rc是氢原子或烷基；rg是由式(b-6)表示的基团(其中z是碳原子；rh相同或不同，并各自表示卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基；并且m5是1至3的整数)。式(bb)中由实线和虚线组成的双线表示双键。
化合物bb2可以由下式(bb2)表示：
其中
rc是氢原子或烷基；
rf是羟基、烷基、酰基氧基或烷氧基；
rg是由下式(b-6)表示的基团：
(其中rh相同或不同，并各自表示卤素原子、卤代烷基、卤代烷硫基、烷基、烯基或烷基氨基；并且m5是1至3的整数)。
在上述式中，所述烷基、酰基氧基、烷氧基、卤素原子、卤代烷基和卤代烷硫基如上文所述。
所述由上述式(bb2)表示并具有dock1抑制活性的取代的氮杂-脂环化合物(化合物bb2)包括下述化合物及其盐：
(b10)2-溴-1-(3-甲基-3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙-1-酮(ak-5：生产例15b)；
(b11)1-(2-(3-羟基-3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-15：生产例17b)；
(b12)1-(2-(3-甲氧基-3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-14：生产例16b)；
(b13)4-(2-(2-氧代-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-1(2h)-基)乙酰基)-3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-3-基)乙酸酯(ak-25：生产例23b)；
(b14)1-(2-(3-异丁氧基-3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-22：生产例20b)；
(b15)1-(1-(3-(己氧基)-3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)-1-氧代辛-2-基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-23：生产例21b)；和
(b16)1-(2-氧代-2-(3-苯乙氧基-3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-24：生产例22b)。
在化合物bb中，其中y是氧原子，rd是取代基(b-5)，并且rf是氢原子的化合物bb3的优选实例包括下述化合物。
化合物bb3
在上述式(bb)中，y是氧原子；rd是由式(b-5)表示的基团(其中rf是氢原子)，优选地rb是氢原子或氨基；rc是氢原子；并且rg是由式(b-6)表示的基团(其中z是碳原子或氮原子；rh相同或不同，并各自表示卤素原子、卤代烷基或卤代烷硫基；m5是1至3的整数)或喹啉基。式(bb)中由实线和虚线组成的双线表示双键。
化合物bb3可以由下式(bb3)表示：
其中rb是氢原子或氨基；
rg是由下式(b-6)表示的基团：
(其中z是碳原子或氮原子；rh相同或不同，并各自表示卤素原子、卤代烷基、卤代烷硫基；并且m5是1至3的整数)或喹啉基。
所述卤素原子、卤代烷基和卤代烷硫基如上文所述。式(bb3)中喹啉基的优选实例是其7-位或6-位被键合到苯核的喹啉基(喹啉-7-基和喹啉-6-基)。
所述由上述式(bb3)表示并具有dock1抑制活性的取代的氮杂-脂环化合物(化合物bb3)包括下述化合物及其盐：
(b17)1-(2-氧代-2-(3’-((三氟甲基)硫基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-21：生产例8b)；
(b18)3-氨基-1-(2-氧代-2-(3’-(三氟甲基)-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(rt-13：生产例14b)；
(b19)1-(2-氧代-2-(3’-乙烯基-[1,1’-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-26：生产例13b)；
(b20)1-(2-(4’-(二甲基氨基)-3’-甲基-[1,1’-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-16：生产例9b)；
(b21)1-(2-氧代-2-(4-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-22：生产例11b)；
(b22)1-(2-氧代-2-(4-(喹啉-7-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-18：生产例10b)；和
(b23)1-(2-氧代-2-(4-(喹啉-6-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-23：生产例12b)。
在化合物bb中，其中y是氧原子并且rd是取代基(b-7)的化合物bb4的优选实例包括下述化合物。
化合物bb4
在式(bb)中，y是氧原子；rd是由式(b-7)表示的基团，并且优选地rb是氢原子或氨基；并且rc是氢原子。式(bb)中由实线和虚线组成的双线表示双键。
化合物bb4可以由下式(bb4)表示：
其中rb是氢原子或氨基。优选地，rb是氢原子。
所述具有dock1抑制活性并由上述式(bb4)表示的取代的氮杂-脂环化合物(化合物bb4)包括下述化合物及其盐：
(b24)1-(2-((3s,10r,13s,17s)-3-羟基-10,13-二甲基-2,3,4,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十四氢-1h-环戊并[a]菲-17-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-20：生产例24b)。
在本发明中，上文描述的化合物a的盐或化合物b的盐可以是任何药理学上可接受的盐，并且没有特别限制，只要它是可药用盐即可。例如，此类盐包括下述盐的形式。例如在上述化合物中，具有酸性基团的化合物可以容易地与碱性化合物形成盐。此类碱性化合物的实例包括金属氢氧化物例如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙和氢氧化锂，以及碱金属碳酸盐例如碳酸氢钠和碳酸钠；以及碱金属醇盐例如甲醇钠和乙醇钾。在上述化合物中，具有碱性基团的化合物可以容易地与酸形成盐。此类酸的实例包括无机酸例如硝酸、盐酸、氢溴酸和硫酸，以及有机酸例如乙酸、甲磺酸、草酸、马来酸、延胡索酸、对甲苯磺酸、琥珀酸、苯甲酸和柠檬酸。这些盐可以以与游离形式的化合物相同的方式使用。
本发明的化合物包括异构体例如立体异构体和光学异构体。这些异构体也被包括在本发明的化合物a或化合物b的范围之内。
(4)生产方法
用于生产由上述化学式(a)表示的吡咯型化合物(化合物a)、由化学式(b)表示的取代的氮杂-脂环化合物(化合物b)和这些化合物的盐的方法没有特别限制。用于生产所述吡咯型化合物的方法可以参考后文描述的生产例中的生产例1a至7a和与其相关的参考例来进行。用于生产所述取代的氮杂-脂环化合物的方法也可以参考后文描述的生产例中的生产例1b至25b和与其相关的参考例来进行。然而，这些生产方法仅仅是实例，并且所述吡咯型化合物和取代的氮杂-脂环化合物也可以通过参考这些生产方法并在本领域技术人员的常用技术知识的基础上适当修改所述方法来生产。
通过上述方法产生的本发明的化合物可以利用已知的分离和/或纯化手段从反应混合物分离和纯化。此类分离和纯化手段的实例包括蒸馏、重结晶、溶剂萃取、柱层析、离子交换层析、凝胶层析、亲和层析、制备型薄层层析等方法。
(5)dock1选择性抑制剂
根据本发明所述的dock1选择性抑制剂的特征在于含有吡咯型化合物(化合物a)、取代的氮杂-脂环化合物(化合物b)或任何这些化合物的盐作为活性成分。
抑制dock1意味着抑制dock1的活性。这种活性没有特别限制，并且此类活性的实例包括抑制将rac-gdp转变成rac-gtp的活性(gef活性)的活性。所述化合物或dock1选择性抑制剂的gef活性可以通过在下文药理学试验例1中所示的方法或使用与其相似的已知方法来确认。
本文中指称的选择性抑制意味着dock1的活性比构成dock-a子家族的dock2的活性被抑制得更强。所述选择性抑制不限于仅抑制dock1。在这个意义上，所述dock1选择性抑制剂可能具有抑制构成子家族的dock5和/或dock2的活性的作用。
根据本发明所述的dock1选择性抑制剂可以由根据本发明所述的上述吡咯型化合物(化合物a)、取代的氮杂-脂环化合物(化合物b)或这些化合物中的任一者的盐构成。然而，所述dock1选择性抑制剂还可以含有本领域中常用的组分例如载体、赋形剂(增量剂)或添加剂，只要所述dock1选择性抑制活性不受损即可。所述dock1选择性抑制剂中包含的本发明的化合物的比例可以在1至100质量％的范围内适合地选择和调整，使得所述dock1选择性抑制剂可以具有dock1选择性抑制活性。例如，本发明的化合物的比例可以参考下述药物组合物中的添加剂和含量比适合地选择。
(6)药物组合物
根据本发明所述的药物组合物含有所述吡咯型化合物(化合物a)、取代的氮杂-脂环化合物(化合物b)或这些化合物中的任一者的可药用盐。所述取代的氮杂-脂环化合物(化合物b)优选为由式(ba)表示的化合物ba。所述可药用盐可以参考上文详细描述的那些可药用盐适合地选择。
根据本发明所述的药物组合物可以仅由上述本发明的化合物或其可药用盐构成。它也可以是通过下述方式制备的药物组合物：将本发明的化合物或其可药用盐与任何载体或添加剂合并；并根据例如给药途径或给药方法，通过已知方法将所述混合物配制成适合于所需应用的形式。
剂型的具体实例包括片剂、丸剂、粉剂、液体、悬液、乳液、颗粒剂、胶囊、栓剂、注射剂(例如液体、悬液等)等。
在本发明的药物组合物中，对本发明的化合物或其可药用盐的量没有特别限制。例如，所述量可以在每100质量％的所述药物组合物约0.001至99质量％，优选地约0.01至50质量％，更优选地约0.05至10质量％的范围内。
将要通过根据本发明所述的药物组合物治疗的疾病没有特别限制。所述目标疾病是例如癌症。待治疗的癌症类型的实例包括但不限于肺癌、乳腺癌、胰腺癌、结肠癌、胃癌、卵巢癌、神经胶质瘤、成胶质细胞瘤、黑素瘤、食管癌等。下文描述的实施例显示，由于本发明的化合物提供抑制癌细胞侵袭的作用，因此在癌症中，所述目标疾病优选为转移性癌症。
下文描述的实施例还确认了本发明的化合物抑制由癌细胞引起的巨胞饮的作用。因此，在癌症中，根据本发明所述的药物组合物优选地用于在其中观察到巨胞饮现象的癌症类型。
根据本发明所述的药物组合物被给药到的对象可以是患有上述疾病的患者或可能受到所述疾病影响的人。
本发明的药物组合物的剂量通常为以本发明的化合物或其可药用盐计每天约5mg至500mg，优选地约5mg至250mg，更优选地约5mg至100mg，甚至更优选地约5mg至50mg。
此外，根据本发明所述的药物组合物可以含有上文描述的dock1选择性抑制剂。在这种药物组合物中，所述dock1选择性抑制剂的含量、目标疾病、剂型、给药对象、剂量等可以如上文所述。
实施例
在下文中，参考关于本发明的化合物的生产例和药理学试验例进一步阐明本发明。然而，本发明不限于这些实施例。除非另有指明，否则下述生产例和药理学试验在室温(25±5℃)和大气压条件下进行。
生产例(i)通用方法
1dnmr谱在jeoljnm-la500、jeolecx500(500mhz，用于1hnmr)和jeolecs400(400mhz，用于1hnmr)谱仪上记录。化学位移相对于cdcl3中的δh7.26、dmso-d6中的δh2.50和丙酮-d6中的δh2.05处的残留溶剂峰，以百万分率(ppm)为单位记录，耦合常数(j)以赫兹(hz)为单位显示。下述缩略语被用于自旋多重性：s＝单重态，d＝双重态，t＝三重态，q＝四重态，m＝多重态，并且br＝宽峰。
电喷雾电离(esi)质谱在shimadzulcms-2020谱仪(用于lrms)和jeoljms-t100lcaccutof谱仪(用于hrms)上测量。柱层析使用硅胶60(球形)40-50μm(kantochemicals)或通过
化学品和溶剂从商业化来源获得。所有对湿度敏感的反应均在氩气气氛下进行。除非另有指明，否则所有新化合物均通过1hnmr被确定为纯度>95％。
(ii)取代的氮杂-脂环化合物(化合物ba：ks-43至ks-47、ks-54和ks-59；化合物ba：ks-21至ks-23、ks-16、ks-18和ks-26)的生产方法
参考例1
4-(4-溴苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的生产
所述标题化合物遵照已报道的硼酸-磺酰基腙偶联的程序(allwood,d.m.；blakemore,d.c.；brown,a.d.；ley,s.v.；j.org.chem.2014,79,328)来合成。
步骤1：在0℃下向4-甲氧基苯磺酰氯(413.3mg，2.0mmol，1.0equiv)在thf中的溶液(10ml，0.2m)逐滴添加水合肼(243μl，5.0mmol，2.5equiv)。将所述反应混合物在0℃搅拌，直至通过tlc观察到完全转化。将所述混合物用etoac稀释，用盐水洗涤，并在na2so4上干燥。在过滤后，在真空中除去所有挥发物，给出作为灰白色无定形固体的4-甲氧基苯磺酰肼(378mg，1.87mmol，93.4％得率)。波谱数据与文献中报道的一致(allwood,d.m.；blakemore,d.c.；brown,a.d.；ley,s.v.；j.org.chem.,2014,79,328)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.84(2h,d,j＝8.8hz),7.02(2h,d,j＝8.8hz),5.69(1h,brs),3.88(3h,s),3.59(2h,brs)；hrms(esi+)为c7h11n2o3s[m+h]+的计算值为203.0490，实测值为203.0481。
步骤2：向4-甲氧基苯磺酰肼(378.0mg，1.87mmol，1.0equiv)在meoh中的溶液(3.74ml，0.5m)添加1-boc-4-哌啶酮(372.6mg，1.87mmol，1.0equiv)。将所述反应混合物在室温搅拌，直至通过tlc观察到完全转化。在真空中除去溶剂，给出4-(2-((4-甲氧基-苯基)磺酰基)亚肼基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(914.4mg，100％得率)。该样品不需进一步纯化用于下一步骤。
步骤3：将4-(2-((4-甲氧基-苯基)磺酰基)亚肼基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(709.4mg，1.85mmol，1.0equiv)、p-溴苯基硼酸(557.3mg，2.78mmol，1.5equiv)和碳酸铯(904.2mg，2.78mmol，1.5equiv)在烘箱干燥的管中真空放置30min。将所述管用氩气回填，并添加干燥、脱气的1,4-二氧杂环己烷(7.5ml，0.25m)。将管密封并在110℃加热18h。然后，将得到的产物冷却至室温，用饱和碳酸氢钠水溶液(2ml)淬灭，并用ch2cl2萃取(5ml×3)。将合并的有机层在na2so4上干燥。在过滤后，在真空中除去所有挥发物。将得到的粗品混合物通过柱层析进行纯化(etoac/己烷＝10-33％)，给出作为无色油状物的4-(4-溴苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(209mg，0.615mmol，33.3％得率)。波谱数据与文献中报道的一致(allwood,d.m.；blakemore,d.c.；brown,a.d.；ley,s.v.；j.org.chem.,2014,79,328)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.41(2h,d,j＝8.5hz),7.06(2h,d,j＝8.5hz),4.23(2h,br),2.78(2h,brt,j＝12.3hz),2.59(1h,tt,j＝12.2,3.5hz),1.78(2h,brd,j＝13.1hz),1.58(2h,td,j＝12.7,4.3hz),1.47(9h,s)；hrms(esi+)为c16h22no2br[m+na]+的计算值为362.0726，实测值为362.0717。
参考例2
用于suzuki-miyaura反应的通用程序1(以4-(4-(9h-芴-2-基)苯基)哌啶-1-甲酸酯的合成为例)
将芳基溴化合物(在参考率1中获得的4-(4-溴苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯)(119.5mg，0.35mmol，1.0equiv)、乙酸钯(ii)(8.0mg，0.03mmol，10mol％)、三苯基膦(28.3mg，0.1mmol，30mol％)、碳酸钠(152.6mg，1.44mmol，4.0equiv)和硼酸化合物(151.0mg，0.7mmol，2.0equiv)在甲苯(8.0ml)、etoh(1.0ml)和脱气的水(2.2ml)的液体混合物中的混合物加热回流过夜。将反应混合物用盐水稀释，并用甲苯萃取。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将得到的残留物通过柱层析进行纯化(etoac/ch2cl2＝30％)，给出作为棕色固体的标题化合物4-(4-(9h-芴-2-基)苯基)哌啶-1-甲酸酯(55.0mg，0.12mmol，得率36.8％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.79-7.86(2h,m),7.76(1h,s),7.59-7.61(2h,m),7.55(1h,m),7.37-7.41(1h,m),7.28-7.33(3h,m),4.27(2h,br),3.96(2h,s),2.80-2.83(2h,m),2.67-2.73(1h,m),1.86(2h,brd,j＝12.6hz),1.63-1.71(2h,m),1.50(9h,s)。
参考例3
4-(4-(蒽-9-基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的生产
按照参考例2中描述的用于suzuki-miyaura反应的通用程序1，并代之以使用9-蒽基硼酸(178.0mg，0.8mmol，2.0equiv)作为硼酸化合物，得到作为棕色固体的标题化合物4-(4-(蒽-9-基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(52.1mg，0.119mmol，29.8％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.48(1h,s),8.02(2h,d,j＝8.6hz),7.66(2h,d,j＝9.0hz),7.45(2h,m),7.34-7.38(6h,m),4.31(2h,m),2.77-2.88(3h,m),1.97(2h,brd,j＝12.9hz),1.71-1.81(2h,m),1.51(9h,s)。
参考例4
4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的生产
将4-(4-溴苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(660.7mg，1.94mmol，1.0equiv)、乙酸钯(ii)(22.0mg，0.1mmol，5mol％)、amphos(39.0mg，0.15mmol，7.5mol％)、碳酸钾(1.00g,7.6mmol，4.0equiv)和3,4,5-三氟苯基硼酸(cas：143418-49-9：购自wakopurechemicalindustries,ltd.)(682.0mg，3.8mmol，2.0equiv)在甲苯(18ml)和脱气的水(1.8ml)的液体混合物中的混合物在100℃搅拌过夜。将所述反应混合物用水稀释，并用ch2cl2萃取。合并的有机层用水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(etoac/己烷＝2-18％)，给出4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(597.3mg，1.53mmol，78.9％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.43(2h,d,j＝8.5hz),7.27(2h,d,j＝8.5hz),7.17(2h,dd,j＝8.8,2.2hz),4.26(2h,m),2.79(2h,brt,j＝11.2hz),2.66(1h,tt,j＝12.1,3.5hz),1.82(2h,brd,j＝12.6hz),1.62-1.66(2h,m),1.48(9h,s)。
参考例5
用于boc去除的通用程序(以4-(4-(9h-芴-2-基)苯基)哌啶的合成为例)
将boc保护的胺化合物(参考例2中生产的4-(4-(9h-芴-2-基)苯基)哌啶-1-甲酸酯)(55.0mg，0.129mmol)和三氟乙酸(1.3ml)添加到ch2cl2(1.3ml)，并将所述混合物在室温搅拌2小时。缓慢添加3nnaoh水溶液，并用ch2cl2萃取标题有机化合物。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，给出作为棕色油状物的标题化合物4-(4-(9h-芴-2-基)苯基)哌啶(24.8mg，59％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.76-7.84(3h,m),7.55-7.63(4h,m),7.29-7.41(5h,m),3.96(2h,s),3.22(2h,brd,j＝12.1hz),2.75(2h,td,j＝12.1,2.2hz),2.65(1h,tt,j＝12.1,3.1hz),1.88(2h,brd,j＝12.1hz),1.68(2h,td,j＝12.1,4.0hz)。
参考例6
4-(4-(蒽-9-基)苯基)哌啶的生产
按照用于boc去除的通用程序并代之以使用在参考例3中生产的4-(4-(蒽-9-基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(52.1mg，0.119mmol))，得到作为棕色油状物的标题化合物4-(4-(蒽-9-基)苯基)哌啶(30.5mg，0.09mmol，75.9％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.48(1h,s),8.03(2h,brd,j＝8.5hz),7.68(2h,brd,j＝9.1hz),7.40-7.45(4h,m),7.35-7.36(4h,m),3.25(2h,brd,j＝10.3hz),2.61-2.84(4h,m),1.71-1.87(3h,m)。
参考例7
4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶的生产
按照用于boc去除的通用程序并代之以使用在参考例4中生产的4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(597.3mg，1.53mmol)，得到作为棕色油状物的标题化合物4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶(435.8mg，1.49mmol，97％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.43(2h,d,j＝8.0hz),7.29(2h,d,j＝8.5hz),7.14(2h,dd,j＝8.9,2.2hz),3.19(2h,brd,j＝12.1hz),2.73(2h,m),2.63(1h,tt,j＝12.1,3.5hz),1.83(2h,brd,j＝13.9hz),1.64(2h,m)。
参考例8
2-甲氧基吡啶-5-磺酰氯的生产
(a)在60min内向脱气的水(18.7ml)逐滴添加亚硫酰氯(3.1ml，42.6mmol，相对于胺4.26equiv)，同时维持混合物的温度在0℃。允许所述溶液在17h内升温至室温。向所述混合物添加氯化亚铜(i)(99mg，1.0mmol，0.1equiv)，并将得到的黄绿色悬液用冰浴冷却至-3℃。
(b)在搅拌下向2-氨基-5-甲氧基吡啶(1.24g，10mmol，1.0equiv)添加盐酸(36％w/w，10.1ml)，同时用冰浴维持所述混合物的温度等于或低于30℃。使用冰浴将混合物冷却至0℃，并在45min内逐滴添加亚硝酸钠(0.75g，0.1mmol，0.01equiv)在脱气的水中的溶液(3.0ml)，同时将所述反应混合物的温度维持在0℃。将得到的浆液冷却至0℃并搅拌10min。
(c)将来自于步骤(b)的浆液冷却至0℃，并在95min内添加到从步骤(a)得到的溶液，同时将反应混合物的温度维持在0℃。随着反应进行，固体开始沉淀。在添加完成时，将所述反应混合物在0℃搅拌75min。将反应混合物用ch2cl2萃取，并用水和盐水洗涤。将得到的有机层在mgso4上干燥，过滤并真空浓缩，给出标题化合物2-甲氧基吡啶-5-磺酰氯。波谱数据与文献中报道的一致(hogan,p.j.；cox,b.g.；org.proc.res.dev.2009,13,875)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.82(d,j＝2.7hz,1h),8.10(dd,j＝9.0,2.7hz,1h),6.90(d,j＝9.0hz,1h),4.04(s,3h)。
参考例9
用于磺酰胺合成的通用程序(以5-((4-(4-(9h-芴-2-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)-2-甲氧基吡啶的合成为例)
向磺酰氯化合物(在参考例8中生产的2-甲氧基吡啶-5-磺酰氯)(15.8mg，0.0762mmol，1.0equiv)在ch2cl2(18.0ml)中的溶液添加仲胺化合物(在参考例5中得到的4-(4-(9h-芴-2-基)苯基)哌啶)(24.8mg，0.076mmol，1.0equiv)和三乙胺(10μl，0.076mmol，1.0equiv)。将所述混合物在室温搅拌2天。将反应混合物用etoac萃取，并将合并的有机层用水和盐水洗涤。将有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，给出作为棕色油状物的标题化合物5-((4-(4-(9h-芴-2-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)-2-甲氧基吡啶(49.0mg，100％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.61(1h,d,j＝2.2hz),7.91(1h,dd,j＝8.5,2.2hz),7.74-7.84(4h,m),7.56-7.61(4h,m),7.36-7.40(1h,m),7.31(2h,d,j＝7.1hz),6.86(1h,d,j＝8.0hz),3.95(3h,s),2.40-2.52(3h,m),1.89-1.95(6h,m)。
参考例10
5-((4-(4-(蒽-9-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)-2-甲氧基吡啶的生产
按照参考例9中描述的用于磺酰胺合成的通用程序并代之以使用在参考例6中生产的4-(4-(蒽-9-基)苯基)哌啶(30.5mg，0.09mmol，1.0equiv)作为仲胺化合物，得到作为棕色固体的标题化合物5-((4-(4-(蒽-9-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)-2-甲氧基吡啶(18.3mg，0.036mmol，40％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.64(1h,d,j＝2.7hz),8.49(1h,s),8.03(2h,d,j＝8.5hz),7.94(1h,dd,j＝8.5,2.7hz),7.63(2h,d,j＝8.5hz),7.43(2h,t,j＝8.0hz),7.30(2h,s),6.88(1h,d,j＝8.9hz),4.04(3h,s),2.45-2.64(3h,m),1.94-2.02(6h,m)。
参考例11
2-甲氧基-5-((4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶的生产
按照参考例9中描述的用于磺酰胺合成的通用程序并代之以使用在参考例7中生产的4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶(210mg，0.72mmol，1.0equiv)作为仲胺化合物，得到作为棕色油状物的标题化合物2-甲氧基-5-((4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶(248.8mg，0.538mmol，74.7％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.60(1h,d,j＝2.2hz),7.90(1h,dd,j＝8.5,2.7hz),7.42(2h,dd,j＝6.2,1.7hz),7.24(2h,d,j＝8.0hz),7.13-7.17(2h,m),6.85(1h,d,j＝8.9hz),4.02(3h,s),3.95-3.98(2h,m),2.36-2.50(3h,m),1.85-1.95(4h,m)。
参考例12
用于脱甲基化的通用程序(以5-((4-(4-(9h-芴-2-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)-吡啶-2(1h)-酮的合成为例)
向mecn(48ml)添加甲氧基吡啶化合物(在参考例9中得到的5-((4-(4-(9h-芴-2-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)-2-甲氧基吡啶)(37.8mg，0.0762mmol，1.0equiv)、碘化钾(63.2mg，0.381mmol，5.0equiv)和氯代三甲基甲硅烷(50.3μl，0.381mmol，5.0equiv)，并将得到的混合物在80℃搅拌3小时。添加10％na2s2o3水溶液，并用etoac萃取标题有机化合物。将合并的有机层用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，给出作为浅棕色油状物的标题化合物5-((4-(4-(9h-芴-2-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)-吡啶-2(1h)-酮(25.0mg，68％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.94(1h,m),7.29-7.85(9h,m),7.16-7.18(1h,m),7.02(1h,s),6.83-6.86(1h,m),6.64-6.67(1h,m),3.96(1h,m),3.84(2h,s),2.51-2.57(2h,m),1.82-1.95(6h,m)。
参考例13
5-((4-(4-(蒽-9-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮的生产
按照参考例12中描述的用于脱甲基化的通用程序并代之以使用在参考例10中得到的5-((4-(4-(蒽-9-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)-2-甲氧基吡啶(18.3mg，0.36mmol)作为甲氧基吡啶化合物，得到作为棕色固体的标题化合物5-((4-(4-(蒽-9-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(15.6mg，0.031mmol，87.3％得率)。
参考例14
5-((4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮的生产
按照参考例12中描述的用于脱甲基化的通用程序并代之以使用在参考例11中得到的2-甲氧基-5-((4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶(248.8mg，0.538mmol)作为甲氧基吡啶化合物，得到作为棕色固体的标题化合物5-((4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(19.8mg，0.044mmol，92％得率)。
参考例15
2-溴-1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮的生产
步骤1(用于suzuki-miyaura反应的通用程序2)：
将芳基溴化合物(1-(4-溴苯基)乙-1-酮，cas：99-90-1，购自tokyochemicalindustryco.,ltd.)(1.3g，6.6mmol，1.0equiv)、乙酸钯(ii)(5.3mg，0.023mmol，0.3mol％)、1,1’-双(二苯基膦)二茂铁(13mg，0.023mmol，0.3mol％)、磷酸钾(3.9g，18.4mmol，2.8equiv)和硼酸化合物((3-(三氟甲基)苯基)硼酸，cas：1423-26-3，购自wakopurechemicalindustries,ltd.)(1.75g，9.2mmol，1.4equiv)在甲苯(30ml)和脱气的水(3ml)的液体混合物中的混合物在100℃搅拌过夜。将所述反应混合物用水稀释并用etoac萃取。将合并的有机层用水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(etoac/己烷＝17％)，给出作为棕色固体的1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(1.62g，6.15mmol，93.1％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.03(2h,dd,j＝8.0,1.3hz),7.84(1h,s),7.77(1h,d,j＝7.6hz),7.63(3h,m),7.56(1h,t,j＝7.6hz),2.64(3h,s)。
步骤2：
将(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(1.62g，6.15mmol，1.0equiv)和溴化铜(ii)(2.7g，12.3mmol，2.0equiv)在etoac(30ml)和chcl3(30ml)的液体混合物中的混合物在85℃搅拌70min。将所述混合物真空浓缩并添加水。将所述有机化合物用etoac萃取。将合并的有机层用饱和na2s2o3水溶液和盐水洗涤。将有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(ch2cl2/己烷＝12-73％)，给出作为白色固体的标题化合物2-溴-1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(3.24mmol，74.9％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.57(2h,m),7.35(1h,s),7.28(1h,d,j＝7.6hz),7.20(2h,brd,j＝8.0hz),7.15(1h,d,j＝8.0hz),7.09(1h,t,j＝7.6hz),3.98(2h,s)。
生产例1b
用于取代的氮杂-脂环化合物(吡啶酮化合物)(化合物b)的烷基化反应的通用程序1(以5-((4-(4-(9h-芴-2-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮(ks-46)的合成为例)
向mecn(12ml)添加在参考例12中生产的5-((4-(4-(9h-芴-2-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)-吡啶-2(1h)-酮(25mg，0.0518mmol，1.0equiv)和二氮杂双环十一烯(dbu)(11.5μl，0.077mmol，1.5equiv)，并将混合物在80℃搅拌1小时。然后添加α-溴代酮化合物(在参考例15中生产的2-溴-1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮)(26.4mg，0.077mmol，1.5equiv)和四丁基碘化铵(9.6mg，0.0259mmol，0.5equiv)在mecn中的溶液(4ml)，并将所述混合物在80℃搅拌90min。向其添加饱和na2s2o3水溶液，并用etoac萃取标题有机化合物。将合并的有机层用水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(etoac/ch2cl2＝0-50％)，给出作为黄色固体的标题化合物5-((4-(4-(9h-芴-2-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮(ks-46)(0.0119mmol，23％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.12-8.14(m,2h),7.75-7.91(m,7h),7.56-7.70(m,7h),7.36(dd,j＝8.0hz,1h),7.27-7.30(m,3h),7.18(dd,j＝8.5hz,1h),6.68-6.70(m,1h),5.49(m,2h),5.29(s,2h),3.95(br,3h),2.64-2.67(m,3h),1.87-2.01(m,4h)；lrms(esi+)m/z767[m+na]+。
生产例2b
5-((4-(4-(蒽-9-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮(ks-47)的生产
按照生产例1b中描述的用于吡啶酮化合物的烷基化反应的通用程序1并代之以使用在参考例13中生产的5-((4-(4-(蒽-9-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(15.6mg，0.031mmol)作为吡啶酮化合物，得到作为浅棕色固体的标题化合物5-((4-(4-(蒽-9-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮(ks-47)(14.3mg，0.0189mmol，60％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.49(1h,s),8.13(2h,d,j＝8.5hz),8.03(2h,d,j＝8.5hz),7.95(1h,d,j＝2.7hz),7.88(1h,s),7.81(1h,d,j＝7.6hz),7.77(2h,d,j＝8.5hz),7.62-7.70(5h,m),7.32-7.47(8h,m),6.70(1h,d,j＝9.4hz),5.51(2h,s),3.91-4.02(2h,m),2.71-2.79(3h,m),2.14-2.20(2h,m),1.96-2.08(2h,m)；lrms(esi+)m/z757[m+h]+,779[m+na]+。
生产例3b
1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-((4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-54)的生产
按照生产例1b中描述的用于吡啶酮化合物的烷基化反应的通用程序1并代之以使用在参考例14中生产的5-((4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(19.8mg，0.044mmol)作为吡啶酮化合物，得到31mg作为浅黄色油状物的标题化合物1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-((4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-54)(31mg，0.044mmol，100％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.12(2h,d,j＝8.0hz),7.88(2h,m),7.81(1h,d,j＝7.4hz),7.76(2h,d,j＝8.0hz),7.62-7.66(2h,m),7.44(2h,d,j＝8.0hz),7.27(2h,d,j＝8.0hz),7.15(2h,t,j＝8.0hz),6.68(1h,d,j＝9.7hz),5.49(2h,s),3.94(2h,brd,j＝9.7hz),2.65-2.70(3h,m),1.98(2h,brd,j＝12.0hz),1.88-1.90(2h,m)。lrms(esi+)m/z710[m+h]+。
参考例16
1-(2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基)-5-((4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮的生产
按照生产例1b中描述的用于吡啶酮化合物的烷基化反应的通用程序1，并代之以使用在参考例14中生产的5-((4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(60mg，0.135mmol)作为吡啶酮化合物并使用2-溴-1-(4-溴苯基)乙-1-酮(37.5mg，0.135mmol)作为α-溴代酮化合物，得到作为棕色固体的标题化合物1-(2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基)-5-((4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(8.0mg，0.0124mmol，9.2％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.87(3h,dd,j＝8.5,2.2hz),7.68(2h,d,j＝8.5hz),7.63(1h,dd,j＝9.8,2.2hz),7.44(2h,d,j＝8.5hz),7.29(2h,s),7.14(2h,dd,j＝8.9,8.5hz),6.66(1h,d,j＝9.8hz),5.40(2h,s),3.92(2h,brd,j＝11.7hz),2.62(3h,m),1.86-1.97(4h,m)。
生产例4b
1-(2-氧代-2-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-((4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-59)的生产
将在参考例16中生产的1-(2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基)-5-((4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(8.0mg，0.0124mmol，1.0equiv)、乙酸钯(ii)(0.13mg，0.0006mmol，5mol％)、amphos(0.25mg，0.0009mmol，7.5mol％)、碳酸钾(7mg，0.0496mmol，4.0equiv)和3,4,5-三氟苯基-硼酸(4.4mg，0.0248mmol，2.0equiv)在甲苯(1ml)和脱气的水(0.1ml)中的混合物在100℃搅拌过夜。将反应混合物用水稀释并用etoac萃取。将合并的有机层用水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(etoac/己烷＝0-12％)，给出作为黄色无定形固体的标题化合物1-(2-氧代-2-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-((4-(3',4',5'-三氟-[1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-59)(3.7mg，0.0053mmol，42.8％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.09(2h,d,j＝8.5hz),7.89(1h,d,j＝2.6hz),7.65(3h,m),7.44(1h,d,j＝8.0hz),7.27(6h,m),7.14(2h,dd,j＝8.9,8.5hz),6.68(1h,d,j＝9.4hz),5.47(2h,s),3.94(2h,brd,j＝11.2hz),2.64-2.70(3h,m),1.88-2.01(4h,m)。lrms(esi+)m/z719[m+na]+。
参考例17
用于miyaura-ishiyama硼基化的通用程序(以2-([1,1':4',1”-三联苯]-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷的合成为例)
将芳基溴化合物(200mg，0.646mmol，1.0equiv)、乙酸钯(ii)(14.4mg，0.064mmol，10mol％)、1,1’-双(二苯基膦)二茂铁(35.5mg，0.064mmol，10mol％)、乙酸钾(126.8mg，1.29mmol，2.0equiv)和双(频哪醇基)二硼(197mg，0.776mmol，1.2equiv)在二氧杂环己烷(12ml)中的混合物在80℃搅拌3hr。将反应混合物用水稀释并用ch2cl2萃取。将合并的有机层用盐水洗涤。将有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(etoac/己烷＝0→18％)，给出作为棕色固体的标题化合物2-([1,1':4',1”-三联苯]-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(160.8mg，0.45mmol，69.8％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.82(2h,d,j＝8.5hz),7.56-7.64(8h,m),7.37-7.41(2h,m),7.29-7.31(1h,m),1.29(12h,s)。
参考例18
4-([1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的生产
按照参考例2中描述的用于suzuki-miyaura反应的通用程序1并代之以使用2-([1,1':4',1”-三联苯]-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(160.8mg，0.45mmol，0.63equiv)作为硼酸化合物，得到作为棕色固体的标题化合物4-([1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(20.3mg，0.0415mmol，9.2％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.26-7.72(16h,m),7.19-7.21(1h,m),4.26(4h,m),2.82(2h,m),2.63-2.70(1h,m),1.80-1.87(2h,m),1.61-1.67(2h,m),1.49(9h,s)。
参考例19
4-(4-(芘-1-基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的生产
按照参考例2中描述的用于suzuki-miyaura反应的通用程序1并代之以使用1-芘硼酸(177mg，0.72mmol，2.0equiv)作为硼酸化合物，得到作为棕色固体的标题化合物4-(4-(芘-1-基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(123.7mg，0.267mmol，69.4％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.18-8.21(4h,m),8.09(2h,s),7.96-8.03(3h,m),7.57(2h,d,j＝8.0hz),7.38(2h,d,j＝7.6hz),4.31(2h,m),2.75-2.88(3h,m),1.97(2h,brd,j＝12.6hz),1.68-1.80(2h,m),1.49(9h,s)。
参考例20
4-([1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的生产
按照参考例2中描述的用于suzuki-miyaura反应的通用程序2，并代之以使用4-(4-溴苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(34mg，0.1mmol，1.0equiv)作为芳基溴化合物并使用苯基硼酸(84.1mg，0.68mmol，2.0equiv)作为硼酸化合物，得到作为棕色固体的标题化合物4-([1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(108.3mg，0.32mmol，92.8％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.50-7.55(4h,m),7.36-7.41(2h,m),7.30-7.31(1h,m),7.26(1h,m),7.23(1h,m),4.23(2h,m),2.79(2h,m),2.62-2.69(1h,m),1.81(2h,brd,j＝12.6hz),1.58-1.64(2h,m),1.46(9h,s)。
参考例21
4-([1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4-基)哌啶的生产
按照参考例5中描述的用于boc去除的通用程序并代之以使用4-([1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(参考例18)(20.3mg，0.04mmol)，得到作为棕色固体的标题化合物4-([1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4-基)哌啶(17.9mg，0.04mmol，100％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.22-7.72(17h,m),3.18-3.22(2h,m),2.75-2.79(2h,m),2.61-2.69(1h,m),2.00-2.10(2h,m),1.64-1.66(2h,m)。
参考例22
4-(4-(芘-1-基)苯基)哌啶的生产
按照参考例5中描述的用于boc去除的通用程序并代之以使用4-(4-(芘-1-基)苯基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(参考例19)(123.7mg，0.268mmol)，得到作为棕色油状物的标题化合物4-(4-(芘-1-基)苯基)哌啶(95.6mg，0.264mmol，98.7％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.15-8.23(4h,m),8.09(2h,s),7.97-8.03(3h,m),7.57(2h,d,j＝7.6hz),7.40(2h,d,j＝7.6hz),3.23-3.36(2h,m),2.75-2.88(4h,m),1.98(2h,brd,j＝12.1hz),1.76-1.86(2h,m)。
参考例23
4-([1,1'-联苯]-4-基)哌啶的生产
按照参考例5中描述的用于boc去除的通用程序并代之以使用4-([1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(参考例20)(108.3mg，0.32mmol)，得到作为棕色油状物的标题化合物4-([1,1'-联苯]-4-基)哌啶(27mg，0.113mmol，35.5％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.53-7.57(4h,m),7.41-7.44(2h,m),7.30-7.32(3h,m),2.79-2.86(2h,m),2.69-2.71(1h,m),1.90(2h,brd,j＝12.6hz),1.73-1.82(2h,m)。
参考例24
5-((4-([1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-2-甲氧基吡啶的生产
按照参考例9中描述的用于磺酰胺合成的通用程序并代之以使用4-([1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4-基)哌啶(参考例21)(16.2mg，0.0415mmol，1.0equiv)作为仲胺化合物，得到作为棕色固体的标题化合物5-((4-([1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-2-甲氧基吡啶(16.4mg，0.0292mmol，70.5％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.55-8.62(1h,m),7.89-7.94(1h,m),7.16-7.72(17h,m),6.85-6.87(1h,m),4.02(3h,s),3.94-3.99(2h,m),2.38-2.48(3h,m),1.83-1.96(4h,m)。
参考例25
2-甲氧基-5-((4-(4-(芘-1-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶的生产
按照参考例9中描述的用于磺酰胺合成的通用程序并代之以使用4-(4-(芘-1-基)苯基)哌啶(参考例22)(95.6mg，0.264mmol，1.0equiv)作为仲胺化合物，得到作为棕色固体的标题化合物2-甲氧基-5-((4-(4-(芘-1-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶(123.7mg，0.267mmol，69.4％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.64(1h,m),8.15-8.21(4h,m),8.09(2h,s),8.01-8.02(3h,m),7.95-7.96(2h,m),7.56(2h,d,j＝8.0hz),7.32(2h,d,j＝8.1hz),6.87(1h,d,j＝8.5hz),4.04(3h,s),3.98(2h,m),2.54-2.58(1h,m),2.42-2.49(2h,m),1.98-2.03(4h,m)。
参考例26
5-((4-([1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-2-甲氧基吡啶的生产
按照参考例9中描述的用于磺酰胺合成的通用程序并代之以使用4-([1,1'-联苯]-4-基)哌啶(参考例23)(29.9mg，0.126mmol，1.0equiv)作为仲胺化合物，得到作为棕色固体的标题化合物5-((4-([1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-2-甲氧基吡啶(18.4mg，0.045mmol，35.7％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.73(1h,m),7.89-7.92(1h,m),7.51-7.54(4h,m),7.39-7.43(2h,m),7.32-7.34(1h,m),7.21-7.23(2h,m),6.85(1h,d,j＝8.5hz),4.01(3h,s),3.97(2h,m),2.38-2.52(3h,m),1.86-1.96(4h,m)。
参考例27
2-甲氧基-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶的生产
向2-甲氧基吡啶-5-磺酰氯(11.46g，55.2mmol，1.0equiv)在ch2cl2(300ml)中的溶液添加吡咯烷(12.5ml，150mmol，2.8equiv)。将所述混合物在室温搅拌过夜。将得到的混合物用etoac萃取，并将合并的有机层用水和盐水洗涤。将有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(etoac＝100％)，给出作为浅黄色固体的2-甲氧基-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶(13.2g，54.5mmol，98.7％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.64(d,j＝2.7hz,1h),7.93-7.97(m,2h),6.84(d,j＝8.5hz,1h),4.01(s,3h),3.23-3.27(m,4h),1.78-1.82(m,4h)。
参考例28
3-((6-甲氧基吡啶-3-基)磺酰基)噻唑烷的生产
向2-甲氧基吡啶-5-磺酰氯(100mg，0.48mmol，1.0equiv)在ch2cl2(5.0ml)中的溶液添加噻唑烷(37.8μl，0.48mmol，1.0equiv)、n,n-二甲基-4-氨基吡啶(58.6mg，0.48mmol，1.0equiv)和三乙胺(10μl，0.076mmol，1.0equiv)。将所述混合物在室温搅拌过夜。将得到的混合物用etoac萃取，并将合并的有机层用水和盐水洗涤。将有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(meoh/etoac＝30％)，给出作为棕色固体的3-((6-甲氧基吡啶-3-基)磺酰基)噻唑烷(151mg，0.504mmol，77.7％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.64(d,j＝1.5hz,1h),7.94-7.96(m,1h),6.82(d,j＝8.0hz,1h),4.44-4.50(m,2h),4.01(s,3h),3.62-3.65(m,2h),2.77-2.81(m,2h)。
参考例29
5-((4-([1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮的生产
按照参考例12中描述的用于脱甲基化的通用程序并代之以使用5-((4-([1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-2-甲氧基吡啶(参考例24)(16.4mg，0.0292mmol)作为甲氧基吡啶化合物，得到作为棕色固体的标题化合物5-((4-([1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(10.7mg，0.0196mmol，67％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.95(1h,m),7.68-7.70(2h,m),7.53-7.57(3h,m),7.43-7.44(3h,m),7.16-7.33(12h,m),6.65-6.67(1h,m),3.91(2h,m),2.52-2.60(3h,m),1.86-2.04(4h,m)。
参考例30
5-((4-(4-(芘-1-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮的生产
按照参考例12中描述的用于脱甲基化的通用程序并代之以使用2-甲氧基-5-((4-(4-(芘-1-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶(参考例25)(109.8mg，0.206mmol)作为甲氧基吡啶化合物，得到作为棕色固体的标题化合物5-((4-(4-(芘-1-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(23.9mg，0.049mmol，23.9％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.62(1h,m),7.67-7.90(10h,m),7.50-7.54(4h,m),6.72(1h,d,j＝8.9hz),2.10-2.49(2h,m),1.86-1.92(7h,m)。
参考例31
5-((4-([1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮的生产
按照参考例12中描述的用于脱甲基化的通用程序并代之以使用5-((4-([1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-2-甲氧基吡啶(参考例26)(18.4mg，0.045mmol)作为甲氧基吡啶化合物，得到作为棕色固体的标题化合物5-((4-([1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(14.6mg，0.037mmol，82.2％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.93(1h,m),7.67-7.70(1h,m),7.52-7.56(4h,m),7.40-7.42(3h,m),7.33-7.34(2h,m),6.64(1h,d,j＝9.4hz),3.90-3.93(2h,m),2.54-2.60(3h,m),1.86-2.01(4h,m)。
参考例32
5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮的生产
按照参考例12中描述的用于脱甲基化的通用程序并代之以使用2-甲氧基-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶(参考例27)(4.2g，17.3mmol)作为甲氧基吡啶化合物，得到作为白色固体的标题化合物5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(3.9g，17.3mmol，100％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.96(d,j＝2.9hz,1h),7.73(dd,j＝9.5,2.9hz,1h),6.63(d,j＝9.5hz,1h),3.25-3.29(m,4h),1.86-1.89(m,4h)。
参考例33
5-(噻唑烷-3-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮的生产
按照参考例12中描述的用于脱甲基化的通用程序并代之以使用3-((6-甲氧基吡啶-3-基)磺酰基)噻唑烷(参考例28)(73.2mg，0.281mmol)作为甲氧基吡啶化合物，得到作为白色固体的标题化合物5-(噻唑烷-3-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(54.3mg，0.22mmol，78.4％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.00(d,j＝2.3hz,1h),7.71-7.73(m,1h),6.60(d,j＝9.7hz,1h),4.45(m,2h),3.62-3.65(m,2h),2.87-91(m,2h)。
生产例5b
5-((4-([1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮(ks-44)的生产
按照生产例1b中描述的用于吡啶酮化合物的烷基化反应的通用程序1并代之以使用5-((4-([1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(参考例29)(10.7mg，0.0196mmol)作为吡啶酮化合物，得到作为棕色油状物的标题化合物5-((4-([1,1':4',1”:4”,1”'-四联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮(ks-44)(3.5mg，0.0432mmol，22％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.12-8.14(2h,m),7.88-8.01(2h,m),7.81(1h,m),7.76(3h,d,j＝8.5hz),7.54-7.68(12h,m),7.41-7.43(2h,m),7.29-7.33(3h,m),7.21-7.26(2h,m),6.68-6.71(1h,m),5.49(2h,s),3.93(2h,m),2.64-2.67(3h,m),1.87-2.00(4h,m)。lrms(esi+)m/z809[m+h]+。
生产例6b
1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-((4-(4-(芘-1-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-45)的生产
按照生产例1b中描述的用于吡啶酮化合物的烷基化反应的通用程序1并代之以使用5-((4-(4-(芘-1-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(参考例30)(25.6mg，0.049mmol)作为吡啶酮化合物，得到作为浅棕色油状物的标题化合物1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-((4-(4-(芘-1-基)苯基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-45)(6.6mg，0.084mmol，17.2％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.09-8.23(7h,m),7.88-8.05(5h,m),7.76-7.83(3h,m),7.59-7.72(5h,m),7.49-7.54(1h,m),7.38-7.40(1h,m),7.30-7.33(1h,m),6.67-6.73(1h,m),5.47-5.50(2h,m),3.91-4.04(2h,m),2.58-2.73(3h,m),1.96-2.13(4h,m)。lrms(esi+)m/z803[m+na]+。
生产例7b
5-((4-([1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮(ks-43)的生产
向mecn(6ml)添加5-((4-([1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(参考例31)(14.6mg，0.037mmol，1.2equiv)、碳酸钾(9.1mg，0.066mmol，2.2equiv)、2-溴-1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(参考例15)(10.3mg，0.03mmol，1.0equiv)和四丁基碘化铵(6.8mg，0.0185mmol，0.6equiv)，并将所述混合物在80℃搅拌2.5小时。向所述混合物添加饱和na2s2o3水溶液，并使用etoac萃取有机化合物。将合并的有机层用水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(etoac/ch2cl2＝0-50％)，给出作为黄色固体的5-((4-([1,1'-联苯]-4-基)哌啶-1-基)磺酰基)-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮(ks-43)(8.9mg，0.0136mmol，36.6％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.12-8.14(2h,m),7.88-7.92(2h,m),7.76-7.81(3h,m),7.54-7.68(7h,m),7.41-7.43(2h,m),7.34-7.35(1h,m),7.28(1h,m),7.26(1h,m),6.68(1h,d,j＝9.8hz),5.49(2h,s),3.93-3.96(2h,m),2.61-2.70(3h,m),1.88-2.00(4h,m)；lrms(esi+)m/z657[m+h]+。
参考例34
1-(2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮的生产
向thf(110ml)添加5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(参考例32)(3.9g，17.3mmol，1.0equiv)和氢化钠(60％，在矿物油中，756mg，19.0mmol，1.1equiv)，并将所述混合物在60℃搅拌1小时。然后添加2,4′-二溴苯乙酮(5.78g，20.8mmol，1.2equiv)在thf(50ml)中的溶液，并将所述混合物在60℃搅拌90min。用ch2cl2从所述反应产物萃取有机化合物。将合并的有机层用水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(etoac/ch2cl2＝0-58％)，给出作为白色固体的1-(2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(3.49g，8.21mmol，47.4％得率)。
1hnmr(500mhz,丙酮):8.27(d,j＝2.6hz,1h),8.03-8.06(m,2h),7.80-7.82(m,2h),7.77(dd,j＝9.5,2.6hz,1h),6.55(d,j＝9.5hz,1h),5.69(s,2h),3.22-3.27(m,4h),1.82-1.87(m,4h)。
比较性生产例1
1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-(噻唑烷-3-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-35)的生产
按照生产例1b中描述的用于吡啶酮化合物的烷基化反应的通用程序1并代之以使用5-(噻唑烷-3-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(参考例33)(54.3mg，0.22mmol)作为吡啶酮化合物，得到作为黄色固体的标题化合物1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-(噻唑烷-3-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-35)(36.7mg，0.072mmol，65.5％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.09(2h,d,j＝8.5hz),7.97-7.98(1h,m),7.86(1h,s),7.80(1h,d,j＝7.6hz),7.74(2h,d,j＝8.5hz),7.61-7.67(3h,m),6.61(1h,d,j＝9.8hz),5.47(2h,s),4.49-4.50(m,2h),3.65-3.67(2h,m),2.96-2.99(2h,m)。
参考例35
1-(2-氧代-2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮的生产
根据用于miyaura-ishiyama硼基化的通用程序并代之以使用在参考例34中生产的1-(2-(4-溴苯基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(2.0g，4.7mmol)作为芳基溴化合物，得到作为浅黄色固体的标题化合物1-(2-氧代-2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(1.2g，2.55mmol，54.4％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.95(4h,m),7.88-7.89(1h,m),7.65-7.68(1h,m),6.63(1h,d,j＝9.8hz),5.45(2h,s),3.27-3.31(m,4h),1.90-1.91(m,4h),1.36(12h,s)。
参考例36
(3-溴苯基)(三氟甲基)硫烷的生产
步骤1：在室温下向3-溴苯硫醇(1.89g，10mmol，1.0equiv)在水与乙腈的液体混合物(水:乙腈＝1:5，30ml)中的溶液添加碘(1.27g，5mmol，0.5equiv)，所述反应立即完成。向其添加饱和na2s2o3水溶液，并用ch2cl2萃取有机化合物。将合并的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，给出作为无色固体的1,2-双(3-溴苯基)二硫烷(1.9g，100％得率)(zeynizadeh,b.；j.chem.res.2002,11,564)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.62(2h,s),7.35-7.40(4h,m),7.14-7.19(2h,m)。
步骤2：在室温下向三氟乙酸钾(913mg，6mmol，1.2equiv)在无水dmf(12.5ml)中的溶液添加在步骤1中得到的1,2-双(3-溴苯基)二硫烷(1.9g，5.0mmol，1.0equiv)。然后将所述混合物加热到140至145℃过夜。将该溶液倾倒在水中，并用etoac/己烷(4/1)萃取。将合并的有机层用水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，给出作为无色固体的标题化合物(3-溴苯基)(三氟甲基)硫烷(137.2mg，10.5％得率)(roques,n.j.fluor.chem.2001,107,311)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.82(1h,s),7.61-7.62(2h,m),7.30-7.32(1h,m)。
参考例37
4-溴-n,n,2-三甲基苯胺的生产
在搅拌下向碳酸钾(2.08g，15mmol，3.0equiv)在dmf(7.5ml)中的悬液添加4-溴-2-甲基苯胺(930mg，5mmol，1.0equiv)。逐步添加甲基碘(0.95ml，15mmol，3.0equiv)在dmf(7.5ml)中的溶液，并将所述混合物在70至75℃搅拌2小时。然后将反应混合物倾倒在水中，并用二乙醚萃取。将萃取物用水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，给出作为浅黄色固体的标题化合物4-溴-n,n,2-三甲基苯胺(338.7mg，1.58mmol，31.6％得率)(kolchina,e.f.；shekleina,n.v.；shelkovnikov,v.v.；russ.j.org.chem.2011,47,855)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.21-7.26(2h,m),6.84-6.87(1h,m),2.64(6h,s),2.27(3h,s)。
生产例8b
用于suzuki-miyaura反应的通用程序3(以1-(2-氧代-2-(3'-((三氟甲基)硫基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-21)的合成为例)
将芳基溴化合物(在参考例36中生产的1,2-双(3-溴苯基)二硫烷)(68.6g，0.267mmol，1.0equiv)、乙酸钯(ii)(6.0mg，0.026mmol，10mol％)、1,1’-双(二苯基膦)二茂铁(14.8mg，0.026mmol，10mol％)、磷酸钾(113.4mg，0.534mmol，2.0equiv)和二氧杂环戊硼烷化合物(在参考例35中生产的1-(2-氧代-2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮)(113.6mg，0.267mmol，1.0equiv)在二氧杂环己烷(3ml)和脱气的水(0.3ml)的液体混合物中的混合物在100℃搅拌过夜。将混合物用水稀释，并用etoac萃取。将合并的有机层用水洗涤。将有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(ch2cl2/etoac＝0-50％)，给出作为棕色胶状材料的1-(2-氧代-2-(3'-((三氟甲基)硫基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-21)(79.8mg，0.152mmol，57.2％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.09-8.10(2h,m),7.92-7.93(2h,m),7.73-7.75(3h,m),7.67-7.69(2h,m),7.53-7.57(1h,m),6.64(1h,d,j＝9.4hz),5.47(2h,s),3.29-3.32(m,4h),1.90-1.91(4h,m)。
生产例9b
1-(2-(4'-(二甲基氨基)-3'-甲基-[1,1'-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-16)的生产
按照生产例8b中描述的用于suzuki-miyaura反应的通用程序3，并代之以使用4-溴-n,n,2-三甲基苯胺(参考例37)作为芳基溴化合物(45mg)和1-(2-氧代-2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(参考例35)(55mg)作为二氧杂环戊硼烷化合物，得到作为黄色固体的标题化合物1-(2-(4'-(二甲基氨基)-3'-甲基-[1,1'-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-16)(17.5mg，0.0364mmol，34.4％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.03-8.04(2h,m),7.91(1h,m),7.66-7.72(3h,m),7.42-7.46(2h,m),6.64(1h,d,j＝9.7hz),5.46(2h,s),3.30(m,4h),1.90-1.91(4h,m)。
生产例10b
1-(2-氧代-2-(4-(喹啉-7-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-18)的生产
按照生产例8b中描述的用于suzuki-miyaura反应的通用程序3，并代之以使用7-溴喹啉(44mg，0.21mmol)作为芳基溴化合物和1-(2-氧代-2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(参考例35)(50mg，0.105mmol)作为二氧杂环戊硼烷化合物，得到作为浅棕色固体的标题化合物1-(2-氧代-2-(4-(喹啉-7-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-18)(35.7mg，0.0754mmol，71.1％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.97(1h,s),8.38(1h,s),8.19(1h,d,j＝8.0hz),8.12(2h,d,j＝8.0hz),7.90-7.94(4h,m),7.83(1h,d,j＝8.5hz),7.66(1h,d,j＝9.1hz),7.45(1h,m),6.63(1h,d,j＝9.1hz),5.49(2h,s),3.30(4h,m),1.90(4h,m)。
生产例11b
1-(2-氧代-2-(4-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-22)的生产
按照生产例9中描述的用于suzuki-miyaura反应的通用程序3并代之以使用2-溴-6-(三氟甲基)吡啶(71.9mg，0.31mmol)作为芳基溴化合物，得到作为棕色固体的标题化合物1-(2-氧代-2-(4-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-22)(34.9mg，0.071mmol，70％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.24-8.25(2h,m),8.12-8.13(2h,m),8.00-8.01(2h,m),7.91-7.92(1h,m),7.67-7.71(2h,m),6.65(1h,d,j＝9.7hz),5.48(2h,s),3.29-3.32(4h,m),1.90-1.92(4h,m)。
生产例12b
1-(2-氧代-2-(4-(喹啉-6-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-23)的生产
按照生产例8b中描述的用于suzuki-miyaura反应的通用程序2，并代之以使用6-溴喹啉(66.2mg，0.31mmol)作为芳基溴化合物和1-(2-氧代-2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(参考例35)(50mg，0.105mmol)作为二氧杂环戊硼烷化合物，得到作为黄色固体的标题化合物1-(2-氧代-2-(4-(喹啉-6-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-23)(33.9mg，0.071mmol，67.5％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.94-8.95(1h,m),8.20-8.22(2h,m),8.11-8.13(2h,m),8.07(1h,m),7.98-8.01(1h,m),7.94(1h,m),7.86-7.88(2h,m),7.65-7.68(1h,m),7.46-7.47(1h,m),6.63(1h,d,j＝9.4hz),5.49(2h,s),3.28-3.30(4h,m),1.90(4h,m)。
参考例38
4'-(2-(2-氧代-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-1(2h)-基)乙酰基)-[1,1'-联苯]-3-甲醛的生产
按照生产例8b中描述的用于suzuki-miyaura反应的通用程序2，并代之以使用3-溴苯甲醛(70mg，0.46mmol)作为芳基溴化合物和1-(2-氧代-2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(参考例35)(100mg，0.211mmol)作为二氧杂环戊硼烷化合物，得到作为白色固体的标题化合物4'-(2-(2-氧代-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-1(2h)-基)乙酰基)-[1,1'-联苯]-3-甲醛(19.7mg，0.0437mmol，18.6％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ10.12(1h,s),8.11-8.16(3h,m),7.91-7.93(3h,m),7.79-7.81(2h,m),7.67-7.70(2h,m),6.65(1h,d,j＝9.8hz),5.47(2h,s),3.30-3.31(4h,m),1.90-1.93(4h,m)。
生产例13b
1-(2-氧代-2-(3'-乙烯基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-26)的生产
将4'-(2-(2-氧代-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-1(2h)-基)乙酰基)-[1,1'-联苯]-3-甲醛(50mg，0.11mmol，1.0equiv)、甲基三苯基溴化鏻(46.4mg，0.13mmol，1.2equiv)和碳酸钾(23.5mg，0.17mmol，1.5equiv)在二氧杂环己烷(2ml)中的混合物在110℃搅拌过夜。在真空中除去溶剂。将残留物用etoac稀释。将所述混合物通过硅藻土过滤，并在真空中浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(ch2cl2/etoac＝0-100％)，给出作为黄色固体的标题化合物1-(2-氧代-2-(3'-乙烯基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ks-26)(6.8mg，0.0152mmol，13.8％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.08-8.09(2h,m),7.92(1h,m),7.75-7.77(2h,m),7.65-7.67(3h,m),7.43-7.52(6h,m),6.77(1h,d,j＝10.9hz),6.65(1h,d,j＝9.7hz),5.83(1h,d,j＝17.8hz),5.47(2h,s),5.33(1h,d,j＝10.9hz),3.30-3.31(4h,m),1.90-1.93(4h,m)。
生产例14b
用于3-氨基-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(rt-13)的生产方法
(1)5-溴-3-硝基吡啶-2(1h)-酮的生产
步骤1：将5-溴-2-甲氧基吡啶(95％纯度，507μl，4mmol)与48％hbr(8ml)一起在110℃加热4小时。在将反应混合物冷却至室温后，添加饱和碳酸氢钠水溶液并过滤。将滤液用水、2-丙醇和二乙醚洗涤。在分离有机层后，将水性层用etoac萃取，并将合并的etoac层在na2so4上干燥并过滤。然后蒸发掉溶剂，给出作为白色固体的5-溴-3-硝基吡啶-2(1h)-酮(542.3mg，77％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.50(2h,m),6.51(1h,m)。
步骤2：在0℃下向5-溴吡啶-2(1h)-酮(1.75g，10.1mmol)在硫酸中的溶液(10ml)添加硝酸(60-61％，3.5ml)。允许所述混合物升温至室温并搅拌3小时。将反应混合物倾倒在冰水中，并通过过滤收集得到的沉淀物。将得到的产物用水洗涤并在真空中干燥，给出作为白色固体的5-溴-3-硝基吡啶-2(1h)-酮(960mg，43％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ:8.57(s,1h),8.26(s,1h)。
(2)5-溴-3-硝基-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮的生产
将含有(1)中生产的5-溴-3-硝基吡啶-2(1h)-酮(601mg，2.7mmol，1.4equiv)和氢化钠(60％，在矿物油中，106mg，2.65mmol，1.4equiv)的烧瓶用氩气吹扫并填充，冷却至0℃，向其添加dmf(4ml)。将所述混合物在搅拌下升温至室温，添加2-溴-1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(640mg，1.9mmol，1.0equiv)(参考例15)并搅拌30min。在冷却至0℃后，添加1mhcl水溶液，并通过过滤收集不溶性物质。将沉淀物转移到etoac中并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(etoac/ch2cl2＝0-20％)，给出作为白色固体的标题化合物5-溴-3-硝基-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮(819mg，1.7mmol，90％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.47(1h,d,j＝2.2hz),8.10(2h,d,j＝8.0hz),7.87(1h,s),7.80(1h,d,j＝8.0hz),7.76(3h,m),7.68(1h,d,j＝8.0hz),7.61(1h,t,j＝8.0hz),5.50(2h,s)。
(3)2-(5-溴-2-氧代-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-1,2-二氢吡啶-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮的生产
步骤1：向上述(2)中生产的5-溴-3-硝基-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)吡啶-2(1h)-酮(220mg，0.457mmol，1equiv)在etoac(2ml)中的溶液添加sncl2(250.5mg，1.3mmol，3equiv)。将所述混合物在室温搅拌30min。然后，将所述溶液用冷水稀释并搅拌几分钟，然后添加固体k2co3。将混合物用etoac/thf萃取(3次)，用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩，给出粗品胺。所述粗品胺不需进一步纯化用于下一步骤。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.10(2h,d,j＝8.0hz),7.87(1h,s),7.80(1h,d.j＝7.4hz),7.73(2h,d,j＝8.5hz),7.67(1h,d,j＝8.0hz),7.59(1h,m),6.80(1h,d,j＝2.2hz),5.36(2h,s)。
步骤2：将上面得到的粗品胺(111mg，0.246mmol，1.0equiv)和邻苯二甲酸酐(427mg，0.27mmol，1.1equiv)在甲苯(2ml)中的混合物在100℃搅拌过夜。将所述混合物冷却至室温，并在真空中浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化(etoac/己烷＝30-50％)，给出作为白色固体的2-(5-溴-2-氧代-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-1,2-二氢吡啶-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(140mg，0.204mmol，82％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.09(2h,d,j＝8.0hz),7.90-7.92(2h,m),7.84(1h,s),7.78(1h,d,j＝8.0hz),7.75-7.76(2h,m),7.71(2h,d,j＝8.5hz),7.66(1h,d,j＝8.3hz),7.58-7.63(2h,m),7.56(1h,d,j＝2.2hz),5.43(2h,s)。
(4)2-(2-氧代-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1,2-二氢吡啶-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮的生产
磺酰胺通过下述已报道的程序来制备(shavnya,a.；coffey,s.b.；smith,a.c.；mascitti,v.；org.lett.2013,15,6226)。
步骤1：在试管中装入在(3)中生产的2-(5-溴-2-氧代-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-1,2-二氢吡啶-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(122mg，0.209mmol，1.0equiv)、焦亚硫酸钾(97.8mg，0.439mmol，2equiv)、四丁基溴化铵(75.4mg，0.233mmol，1.1equiv)、甲酸钠(31.3mg，0.459mmol，2.2equiv)、乙酸钯(2.3mg，0.01mmol，5mol％)、三苯基膦(8.2mg，0.031mmol，15mol％)、1,10-二氮杂菲(5.6mg，0.031mmol，15mol％)和dmso(0.5ml)。在将所述混合物通过在搅拌下用氩气鼓泡10min来脱气后，将混合物在80℃搅拌4.5h，然后冷却至室温。
步骤2：向在上述步骤1中得到的混合物添加吡咯烷(2.0equiv)在thf(0.5ml)中的溶液，并将所述混合物用冰浴冷却至0℃。在维持该温度的同时添加n-溴代琥珀酰亚胺(nbs)(74.3mg，418mmol，2.0equiv)。将反应混合物升温至室温并搅拌过夜。将所述混合物用盐水和水稀释，并用etoac萃取(3次)。将得到的萃取物(有机层)在na2so4上干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗品残留物通过柱层析进行纯化(etoac/ch2cl2＝0-10％)，给出作为白色固体的标题化合物2-(2-氧代-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1,2-二氢吡啶-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(40mg，0.0629mmol，30％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.10(2h,d,j＝8.0hz),7.91(2h,m),7.83(2h,s),7.72-7.77(4h,m),7.52-7.69(4h,m),5.43(2h,s),3.31(4h,m),1.94(4h,m)。
(5)3-氨基-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(rt-13)的生产
将2-(2-氧代-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1,2-二氢吡啶-3-基)异吲哚啉-1,3-二酮(22.3mg，0.035mmol)在甲酸(0.5ml)和甲磺酸(0.5ml)中的悬液在50℃搅拌5h。将反应混合物冷却至室温，向所述混合物添加冰和饱和nahco3水溶液。将得到的混合物用etoac萃取(2次)。将萃取物(有机层)在na2so4上干燥，过滤并在减压下浓缩。将粗品残留物通过柱层析进行纯化(etoac/己烷＝50-70％)，给出作为白色固体的标题化合物3-氨基-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(rt-13)(13.7mg，0.027mmol，77％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.11(2h,d,j＝1.7hz),7.87(1h,s),7.81(1h,d,j＝7.4hz),7.76(2h,d,j＝1.7hz),7.68(1h,d,j＝7.4hz),7.60(1h,t,j＝7.4hz),7.37(1h,d,j＝2.3hz)6.79(1h,d,j＝1.7hz),5.47(2h,s),3.28(4h,m),1.87(4h,m)。
参考例39
1-(3-甲基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮的生产
按照参考例15中描述的用于suzuki-miyaura反应的通用程序2并代之以使用1-(4-溴-2-甲基苯基)乙-1-酮(144.1μl，0.94mmol)和(3-(三氟甲基)苯基)硼酸(356.6mg，1.88mmol)，得到作为白色固体的标题化合物1-(3-甲基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(232.1mg，0.834mmol，89％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.84(brs,1h),7.81(d,j＝8.0hz,1h),7.78(d,j＝8.0hz,1h),7.64(d,j＝8.1hz,1h),7.58(dd,j＝8.1,8.1hz,1h),7.49(d,j＝8.0hz,1h),7.47(brs,1h),2.63(s,3h),2.625(s,3h)。
参考例40
用于通过溴化铜(ii)的溴化的通用程序(以2-溴-1-(3-甲基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮的合成为例)
将溴化铜(ii)(372.6mg，1.67mmol，2.0equiv)在无水etoac(2.0ml)中的混合物在高于80℃的温度下加热，向其添加苯乙酮化合物(参考例39中生产的1-(3-甲基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮)(232.1mg，0.83mmol，1.0equiv)在chcl3(2.0ml)中的溶液并搅拌过夜。将所述混合物过滤并用etoac洗涤。将滤液用水和盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化，给出作为白色固体的标题化合物2-溴-1-(3-甲基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(146.9mg，0.411mmol，49.0％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)：δ7.85(brs,1h),7.80(d,j＝8.6hz,1h),7.79(d,j＝8.3hz,1h),7.66(d,j＝8.3hz,1h),7.60(dd,j＝8.3,8.3hz,1h),7.52(m,3h),4.46(s,2h),2.63(s,3h)。
生产例15b
2-溴-1-(3-甲基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(ak-5)的生产
向无水thf(1.0ml)添加5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(19.6mg，0.09mmol，1.0equiv)和氢化钠(50％，在矿物油中，6.2mg，0.13mmol，1.1equiv)，并将混合物在40℃搅拌10min。然后向所述反应混合物添加2-溴-1-(3-甲基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(参考例40)(36.7mg，0.1mmol，1.2equiv)在thf(1.0ml)中的溶液，并将得到的混合物在40℃搅拌1hr。将反应混合物用水稀释，用etoac萃取，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化，给出作为无色油状物的标题化合物2-溴-1-(3-甲基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(ak-5)(7.6mg，0.015mmol，18.0％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.96(d,j＝9.8hz,1h),7.95(s,1h),7.86(s,1h),7.80(d,j＝8.1hz,1h),7.70-7.67(m,2h),7.62-7.57(m,2h),7.54(s,1h),6.66(d,j＝9.8hz,1h),5.34(s,2h),3.32(m,4h),2.62(s,3h),1.90(m,4h)；lrms(esi+)m/z527[m+na]+。
参考例41
1-(6-(3-(三氟甲基)苯基)吡啶-3-基)乙-1-酮的生产
按照参考例15中描述的用于suzuki-miyaura反应的通用程序2并代之以使用1-(6-溴吡啶-3-基)乙-1-酮(250.0mg，1.2mmol)作为芳基溴化合物和(3-(三氟甲基)苯基)硼酸(474.7mg，2.5mmol)作为硼酸化合物，得到作为黄色固体的标题化合物1-(6-(3-(三氟甲基)苯基)吡啶-3-基)乙-1-酮(286.3mg，1.08mmol，87.0％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.26(d,j＝2.3hz,1h),8.36(d,j＝2.8hz,1h),8.34(dd,j＝8.5,2.3hz,1h),8.26(brd,j＝8.4hz,1h),7.89(d,j＝8.5hz,1h),7.73(brd,j＝8.4hz,1h),7.64(dd,j＝8.4,8.4hz,1h)。
参考例42
2-溴-1-(6-(3-(三氟甲基)苯基)吡啶-3-基)乙-1-酮的生产
按照参考例40中描述的用于通过溴化铜(ii)的溴化的通用程序并代之以使用在参考例41中生产的1-(6-(3-(三氟甲基)苯基)吡啶-3-基)乙-1-酮(482.2mg，2.2mmol)作为苯乙酮化合物，得到作为棕色固体的标题化合物2-溴-1-(6-(3-(三氟甲基)苯基)吡啶-3-基)乙-1-酮(106.8mg，0.31mmol，29.0％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.29(d,j＝2.3hz,1h),8.40-8.33(m,2h),8.27(d,j＝6.4hz,1h),7.93(d,j＝8.7hz,1h),7.75(d,j＝7.8hz,1h),7.65(dd,j＝7.8,6.4hz,1h),4.47(s,2h)。
比较性生产例2
用于吡啶酮化合物的烷基化反应的通用程序2(以1-(2-氧代-2-(6-(3-(三氟甲基)苯基)吡啶-3-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-6)的合成为例)
将芳基溴化合物(参考例42中生产的2-溴-1-(6-(3-(三氟甲基)苯基)吡啶-3-基)乙-1-酮)(106.8mg，0.31mmol，1.5equiv)、5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(参考例32)(47.2mg，0.21mmol，1.0equiv)和碳酸钾(62.9mg，0.46mmol，2.2equiv)在无水mecn(13.8ml)中的悬液在室温搅拌过夜。将反应混合物用水稀释，用ch2cl2萃取，并用盐水洗涤。将有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化，给出作为橙色固体的标题化合物1-(2-氧代-2-(6-(3-(三氟甲基)苯基)吡啶-3-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-6)(56.1mg，0.114mmol，55.0％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ9.33(brs,1h),8.39(m,2h),8.27(brd,j＝6.4hz,1h),7.97(d,j＝8.6hz,1h),7.94(d,j＝2.9hz,1h),7.77(d,j＝8.5hz,1h),7.72-7.65(m,2h),6.67(d,j＝9.2hz,1h),5.45(s,2h),3.33(m,4h),1.93(m,4h)。
参考例43
1-(4-溴-2-甲氧基苯基)乙-1-酮的生产
向1-(4-溴-2-羟基苯基)乙-1-酮(200mg，0.9mmol，1.0equiv)在无水dmf(9ml)中的溶液添加碳酸钾(192.8mg，1.4mmol，1.5equiv)和甲基碘(115.9μl，1.9mmol，2.0equiv)，并将所述混合物在室温搅拌3.5h。将混合物倾倒在水中，并用etoac萃取。将萃取物(有机层)用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化，给出作为白色固体的标题化合物1-(4-溴-2-甲氧基苯基)乙-1-酮(238.4mg，1.0mmol，100％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.63(d,j＝7.4hz,1h),7.16(d,j＝1.8hz,1h),7.13(dd,j＝7.4,1.8hz,1h),3.92(s,3h),2.59(s,3h)。
参考例44
2-溴-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)乙-1-酮的生产
根据参考例40中描述的用于通过溴化铜(ii)的溴化的通用程序并代之以使用1-(4-溴-2-甲氧基苯基)乙-1-酮(参考例43)(311mg，1.4mmol)，得到作为浅黄色固体的标题化合物2-溴-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)乙-1-酮(387.2mg，1.26mmol，93.0％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.71(d,j＝8.1hz,1h),7.20(dd,j＝8.1,1.5hz,1h),7.15(d,j＝1.5hz,1h),4.55(s,2h),3.96(s,3h)。
参考例45
1-(2-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮的生产
根据生产例15b中描述的用于吡啶酮化合物的烷基化反应的通用程序2并代之以使用2-溴-1-(4-溴-2-甲氧基苯基)乙-1-酮(参考例44)(387.2mg，1.26mmol)作为芳基溴化合物，得到作为浅黄色固体的标题化合物1-(2-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(175mg，0.38mmol，46.0％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.87(d,j＝2.3hz,1h),7.78(d,j＝8.0hz,1h),7.65(dd,j＝9.2,2.3hz,1h),7.21(m,2h),6.62(d,j＝9.7hz,1h),5.31(s,2h),4.01(s,3h),3.29(m,4h),1.90(m,4h)。
生产例16b
1-(2-(3-甲氧基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-14)的生产
根据参考例15中描述的用于suzuki-miyaura反应的通用程序2并代之以使用1-(2-(4-溴-2-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(参考例45)(175mg，0.38mmol)作为芳基溴化合物和(3-(三氟甲基)苯基)硼酸(146mg，0.77mmol)作为硼酸化合物，得到作为白色无定形固体的标题化合物1-(2-(3-甲氧基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-14)(165mg，0.509mmol，82.0％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.01(d,j＝8.0hz,1h),7.91(d,j＝2.6hz,1h),7.85(brs,1h),7.79(d,j＝7.9hz,1h),7.69(d,j＝7.9hz,1h),7.66(dd,j＝9.5,2.6hz,1h),7.62(dd,j＝7.9,7.9hz,1h),7.28(dd,j＝8.0,1.8hz,1h),7.20(d,j＝1.8hz,1h),7.63(d,j＝9.5hz,1h),5.40(s,2h),4.10(s,3h),3.30(m,4h),1.91(m,4h)。
生产例17b
1-(2-(3-羟基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-15)的生产
将1-(2-(3-甲氧基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-14)(55.0mg，0.1mmol，1.0equiv)在无水ch2cl2(1.0ml)中的混合物冷却至-78℃，向其添加三溴化硼(11μl，1.1mmol，1.1equiv)，然后搅拌2h。向混合物进一步添加三溴化硼(20μl，2mmol，2.0equiv)，搅拌过夜并允许其升温至室温。在反应后，向所述混合物添加meoh，并在室温搅拌30min。在真空中除去溶剂。将得到的产物用etoac稀释，用水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化，给出作为白色无定形固体的标题化合物1-(2-(3-羟基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-15)(52.2mg，0.103mmol，97.0％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ11.53(s,1h),7.93(d,j＝2.3hz,1h),7.89(d,j＝8.6hz,1h),7.88(brs,1h),7.82(d,j＝8.0hz,1h),7.70(m,2h),7.62(dd,j＝8.0,8.0hz,1h),7.28(m,1h),7.24(d,j＝1.7hz,1h),6.68(d,j＝9.8hz,1h),5.49(s,2h),3.30(m,4h),1.89(m,4h)。
生产例18b
1-(2-羟基-2-(3-羟基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-16)的生产
将1-(2-(3-羟基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-15)(26.1mg，0.05mmol，1.0equiv)在无水meoh(0.5ml)中的混合物冷却至0℃，向其添加硼氢化钠(3.9mg，0.1mmol，2.0equiv)，然后搅拌1.5h。在反应后，在真空中除去溶剂。将得到的产物用水稀释，用ch2cl2萃取，用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化，给出作为白色固体的标题化合物1-(2-羟基-2-(3-羟基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-16)(10.8mg，0.021mmol，41.0％得率)。
1hnmr(500mhz,丙酮-d6)δ8.15(d,j＝2.9hz,1h),7.91(m,2h),7.73-7.69(m,3h),7.51(d,j＝8.0hz,1h),7.52(dd,j＝8.1,1.8hz,1h),6.54(d,j＝9.2h1z,1h),5.39(dd,j＝8.0,3.4hz,1h),4.54(dd,j＝13.5,3.5hz,1h),7.23(dd,j＝13.5,8.0hz,1h),3.16(m,4h),1.75(m,4h)。
生产例19b
1-((2,2-二甲基-7-(3-(三氟甲基)苯基)-4h-苯并[d][1,3]二噁英-4-基)甲基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-17)的生产
向1-(2-羟基-2-(3-羟基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(10.8mg，0.02mmol，1.0equiv)在无水丙酮(1ml)中的溶液添加2,2-二甲氧基丙烷(52μl，0.2mmol，20equiv)和对甲苯磺酸吡啶鎓(1mg，0.04mmol，0.2equiv)，并将所述混合物在室温搅拌12小时。将混合物倾倒在饱和nahco3水溶液中，并用etoac萃取。将萃取物用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化，给出作为白色固体的1-((2,2-二甲基-7-(3-(三氟甲基)苯基)-4h-苯并[d][1,3]二噁英-4-基)甲基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-17)(7.4mg，0.013mmol，70.0％得率)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.18(d,j＝2.2hz,1h),7.80(s,1h),7.74(d,j＝7.6hz,1h),7.63-7.60(m,2h),7.57-7.52(m,1h),7.38(d,j＝8.0hz,1h),7.22(dd,j＝8.0,1.8hz,1h),7.07(d,j＝1.3hz,1h),6.62(d,j＝9.8hz,1h),5.30-27(m,1h),4.94(dd,j＝13.5,1.8hz,1h),3.93(dd,j＝13.5,8.5hz,1h),3.24(m,4h),1.84(m,4h),1.59(s,3h),1.45(s,3h)。
生产例20b
1-(2-(3-异丁氧基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-22)的生产
向1-(2-(3-羟基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(37.8mg，0.07mmol，1.0当量)在无水dmf(0.75ml)中的混合物添加碳酸钾(41.3mg，0.3mmol，4.0equiv)和1-碘-2-甲基丙烷(34.4μl，0.3mmol，4.0equiv)，并将所述混合物在室温搅拌24小时。在反应后，将混合物用水稀释，用etoac萃取，用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化，给出作为无色油状物的1-(2-(3-异丁氧基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-22)(16.4mg，0.029mmol，44.0％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.01(d,j＝8.5hz,1h),7.91(d,j＝2.2hz,1h),7.83(s,1h),7.79(d,j＝7.4hz,1h),7.69-7.65(m,2h),7.62-7.59(m,1h),7.26(m,1h),7.17(m,1h),6.64(d,j＝9.7hz,1h),5.42(s,2h),4.03(d,j＝6.8hz,2h),3.31(m,4h),2.33-2.25(m,1h),1.91(m,4h),1.16(d,j＝6.8hz,6h)。
生产例21b
1-(1-(3-(己氧基)-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)-1-氧代辛-2-基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-23)的生产
向1-(2-(3-羟基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2-(1h)-酮(37.8mg，0.07mmol，1.0equiv)和碳酸钾(41.3mg，0.30mmol，4.0equiv)在无水dmf(0.75ml)中的溶液添加1-碘代己烷(44.1μl，0.3mmol，4.0equiv)，并将所述混合物在室温搅拌24小时。将混合物倾倒在水中，并用etoac萃取。将萃取物用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化，给出作为无色油状物的1-(1-(3-(己氧基)-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)-1-氧代辛-2-基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-23)(12.5mg，0.018mmol，26.4％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.01(d,j＝2.8hz,1h),7.85-7.81(m,2h),7.77(d,j＝8.0hz,1h),7.68(d,j＝8.0hz,1h),7.61-7.60(m,2h),7.23(d,j＝6.8hz,1h),7.13(s,1h),6.58(d,j＝4.0hz,1h),4.25-4.18(m,2h),3.31(m,4h),2.24(m,1h),2.01-2.00(m,2h),1.88(m,4h),1.39-1.22(m,18h),0.93(t,j＝6.8hz,3h),0.86(d,j＝6.8hz,3h)。
生产例22b
1-(2-氧代-2-(3-苯乙氧基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-24)的生产
向1-(2-(3-羟基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2-(1h)-酮(37.8mg，0.07mmol，1.0equiv)和碳酸钾(41.3mg，0.30mmol，4.0equiv)在无水dmf(0.75ml)中的溶液添加(2-碘乙基)苯(42.5μl，0.3mmol，4.0equiv)，并将所述混合物在室温搅拌24小时。将混合物倾倒在水中，并用etoac萃取。将萃取物用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化，给出作为白色无定形固体的1-(2-氧代-2-(3-苯乙氧基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-24)(12.8mg，0.020mmol，34.0％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.97(d,j＝8.0hz,1h),7.82(brs,1h),7.78(d,j＝8.0hz,1h),7.69-7.58(m,5h),7.33-7.30(m,3h),7.27(m,1h),7.25(m,1h),7.19(m,1h),6.60(d,j＝2.2hz,1h),4.92(s,2h),4.58(m,2h),3.29(m,6h),1.90(m,4h)。
生产例22b
4-(2-(2-氧代-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-1(2h)-基)乙酰基)-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-3-基乙酸酯(ak-25)的生产
向1-(2-(3-羟基-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-15)(37.8mg，0.07mmol，1.0equiv)和碳酸钾(41.3mg，0.30mmol，4.0equiv)在无水dmf(0.75ml)中的溶液添加乙酰氯(21.2μl，0.3mmol，4.0equiv)，并将所述混合物在室温搅拌24h。将混合物倾倒在水中，并用etoac萃取。将萃取物(有机层)用盐水洗涤，在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化，给出作为白色无定形固体的标题化合物4-(2-(2-氧代-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-1(2h)-基)乙酰基)-3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-3-基乙酸酯(ak-25)(16.2mg，0.029mmol，39.0％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.29(d,j＝8.6hz,1h),7.92(brs,1h),7.87(d,j＝2.3hz,1h),7.86(d,j＝11.0hz,1h),7.76(d,j＝1.2hz,1h),7.73-7.69(m,4h),7.66(dd,j＝6.0,6.0hz,1h),6.71(d,j＝9.7hz,1h),5.30(s,2h),3.35(m,4h),2.42(s,3h),1.75(m,4h)。
参考例46
2-溴-1-((3s,10r,13s,17s)-10,13-二甲基-3-((三甲基甲硅烷基)氧基)-2,3,4,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十四氢-1h-环戊并[a]菲-17-基)乙-1-酮的生产
步骤1：将烧瓶中的无水thf(4.0ml)和二异丙胺(221μl，1.6mmol，2.5equiv)冷却至-3℃，向其添加正丁基锂(己烷中的2.6m溶液，618μl，1.6mmol，2.5equiv)，然后搅拌40min。将所述溶液冷却至-78℃，向其添加无水thf(2.3ml)中的1-((3s,10r,13s,17s)-3-羟基-10,13-二甲基-2,3,4,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十四氢-1h-环戊并[a]菲-17-基)乙-1-酮(200mg，0.6mmol，1.0equiv)，并将所述混合物搅拌40min。然后，向所述溶液添加三甲基甲硅烷基氯(201μl，1.6mmol，2.5equiv)，将混合物搅拌过夜并允许升温至室温。在反应后，将反应混合物通过少量硅胶过滤，并且不需进一步纯化继续进行下一步骤。
步骤2：向上述在步骤1中得到的粗品混合物(291mg，0.63mmol，1.0equiv)在无水dmf(6.3ml)中的溶液添加nbs(123.6mg，0.69mmol，1.1equiv)，并将所述混合物在室温搅拌90min。在真空中除去溶剂。将得到的产物用水稀释，并用ch2cl2和etoac萃取。将萃取物(有机层)在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化，给出作为白色固体的标题化合物2-溴-1-((3s,10r,13s,17s)-10,13-二甲基-3-((三甲基甲硅烷基)氧基)-2,3,4,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十四氢-1h-环戊并[a]菲-17-基)乙-1-酮(121.6mg，0.026mmol，41.0％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ5.32(m,1h),3.93(d,j＝13.2hz,1h),3.90(d,j＝13.2hz,1h),3.48(m,1h),2.83(dd,j＝8.6,8.6hz,1h),2.32-2.15(m,3h),2.04-1.94(m,2h),1.85-1.69(m,4h),1.65-1.42(m,6h),1.28(m,1h),1.18(m,1h),1.08(m,1h),1.04-0.95(m,1h),0.99(s,3h),0.65(s,3h),0.12(s,8h)。
生产例24b
1-(2-((3s,10r,13s,17s)-3-羟基-10,13-二甲基-2,3,4,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十四氢-1h-环戊并[a]菲-17-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-20)的生产
将2-溴-1-((3s,10r,13s,17s)-10,13-二甲基-3-((三甲基甲硅烷基)氧基)-2,3,4,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十四氢-1h-环戊并[a]菲-17-基)乙-1-酮(参考例46)(121.6mg，0.26mmol，1.5equiv)、5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(参考例32)(39.6mg，0.17mmol，1.0equiv)和碳酸钾(62.9mg，0.46mmol，2.2equiv)在无水mecn(12ml)中的悬液在室温搅拌过夜。向所述混合物添加无水ch2cl2(2.5ml)，并将所述混合物搅拌24hr。在真空中除去溶剂。将得到的化合物用水稀释，用ch2cl2萃取，并用盐水洗涤。将得到的有机层在na2so4上干燥，过滤并真空浓缩。将残留物通过柱层析进行纯化，给出作为白色固体的标题化合物1-(2-((3s,10r,13s,17s)-3-羟基-10,13-二甲基-2,3,4,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十四氢-1h-环戊并[a]菲-17-基)-2-氧代乙基)-5-(吡咯烷-1-基-磺酰基)吡啶-2(1h)-酮(ak-20)(58.8mg，0.095mmol，62.0％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.77(d,j＝2.6hz,1h),7.62(dd,j＝9.5,2.6hz,1h),6.59(d,j＝9.5hz,1h),5.35(m,1h),4.96(d,j＝17.2hz,1h),4.50(d,j＝17.2hz,1h),3.53(m,1h),3.27(m,4h),2.66(dd,j＝8.6,8.6hz,1h),2.33-2.17(m,4h),1.99(m,1h),1.90-1.82(m,6h),1.81-1.71(m,2h),1.63-1.44(m,7h),1.34-1.18(m,1h),1.11(ddd,j＝13.2,13.2,3.4hz,1h),1.01(s,3h),0.70(s,3h)。
参考例47
4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸甲酯的生产
在0℃下向氯磺酸(5.6ml，0.08mol)添加1h-吡咯-2-甲酸甲酯(1.29g，0.01mol)，并将反应混合物在室温搅拌4h。在冷却至0℃后，通过添加冰和水将反应淬灭。将混合物过滤，给出作为灰白色固体的4-(氯磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸甲酯，其不需进一步纯化用于下一步骤。在室温下向上述过滤物(4-(氯磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸甲酯)在无水ch2cl2(20ml)和无水thf(10ml)中的搅拌的溶液添加吡咯烷(25ml)。将所述混合物搅拌24h，然后浓缩。将残留物通过在硅胶上的柱层析进行纯化，给出作为白色固体的标题化合物4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸甲酯(1.77g，在2个步骤中67％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ9.65(brs,1h),7.42(dd,j＝2.9,1.8hz,1h),7.14(dd,j＝1.8,1.8hz,1h),3.88(s,3h),3.23(m,4h),1.78(m,4h)。
参考例48
4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸的生产
将4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸甲酯(参考例47)(561mg，2.17mmol)在meoh(10ml)和2mkoh水溶液(10ml)中的溶液在回流下搅拌3h。将混合物用ch2cl2和chcl3洗涤，然后用2mhcl水溶液处理，并用etoac萃取。将合并的萃取物浓缩，给出作为白色固体的标题化合物4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸(349mg，66％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.48(brs,1h),7.47(brs,1h),7.24(brs,1h),3.25(m,4h),1.80(m,4h)。
参考例49
4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酰胺的生产
将4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸(参考例48)(561mg，2.17mmol)在socl2(10ml)中的溶液在60℃搅拌2h。在冷却至室温后，将反应混合物浓缩，给出作为白色固体的4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-羰基氯(347mg，92％得率)，其不需进一步纯化用于下一步骤中。在0℃下向4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-羰基氯(50.2mg，0.19mol)在thf(0.4ml)中的搅拌的溶液添加28％nh3水溶液(0.15ml)。将反应混合物在室温搅拌24h，然后浓缩。将残留物通过在硅胶上的柱层析进行纯化，给出作为白色固体的标题化合物4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酰胺(28.9mg，62％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.42(m,1h),6.88(m,1h),3.23(m,4h),1.79(m,4h)。
参考例50
n,n-二甲基-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酰胺的生产
对4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸(参考例48)(10.9mg，0.05mol)在socl2(0.25ml)中的溶液进行与参考例49中相同的处理，给出作为白色固体的4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-羰基氯。对4-(吡咯烷-1-基磺酰基)-1h-吡咯-2-羰基氯和50％me2nh3水溶液(0.02ml)在无水thf(0.25ml)中的溶液进行与参考例49中相同的处理，给出作为白色固体的标题化合物n,n-二甲基-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酰胺(9.9mg，82％得率)，
1hnmr(500mhz,丙酮-d6)δ11.34(brs,1h),7.45(m1h),6.87(m,1h),3.16(m,4h),2.84(s,6h),1.72(m,4h)。
参考例51
2-(4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-基)噁唑的生产
在室温下向4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酰胺(参考例49)(28.9mg，0.12mol)在n-甲基吡咯烷酮(0.6ml)中的搅拌的溶液添加2-溴-1,1-二甲氧基乙烷(0.09ml，0.60mol)和tsoh·h2o(1.4mg，cat.)。将所述反应混合物在110℃搅拌19h。在冷却至室温后，将反应混合物用饱和nahco3水溶液稀释并用etoac萃取。将合并的萃取物(有机层)用水洗涤，在na2so4上干燥并浓缩。将残留物通过在硅胶上的柱层析进行纯化，给出作为黄色固体的标题化合物2-(4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-基)噁唑(12.0mg，38％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ10.71(brs,1h),7.68(s,1h),7.42(dd,j＝2.9,2.3hz,1h),7.20(s,1h),7.14(dd,j＝2.3,2.3hz,1h),3.26(m,4h),1.79(m,4h)。
参考例52
n-甲氧基-n-甲基-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酰胺的生产
(a)在-78℃下向双-(三甲基甲硅烷基)-胺(4.4ml，21.0mmol)在无水thf(8.0ml)中的搅拌的溶液添加nbuli(己烷中的2.6m溶液，7.6ml，20.1mmol)。将反应混合物在0℃搅拌30min。
(b)在-78℃下向4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸酯(646.0mg，2.5mmol)在无水thf(8.0ml)中的搅拌的溶液添加n,o-二甲基羟胺盐酸盐(317.6mg，3.3mmol)。
(c)向来自于步骤(b)的溶液添加来自于步骤(a)的溶液。将所述混合物在-78℃搅拌40min，用饱和nahco3水溶液稀释，并用etoac萃取。将合并的萃取物(有机层)用盐水洗涤，在na2so4上干燥并浓缩。将残留物通过在硅胶上的柱层析进行纯化，给出作为白色固体的标题化合物n-甲氧基-n-甲基-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酰胺(675.2mg，92％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.42(m,1h),7.13(m,1h),3.80(s,1h),3.37(s,1h),3.23(m,4h),1.78(m,4h)。
参考例53
1-(4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-基)丙-1-酮的生产
在室温下向n-甲氧基-n-甲基-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酰胺(参考例52)(167.8mg，0.58mmol)在无水thf(4.0ml)中的溶液添加乙基溴化镁(et2o中的3.0m溶液，1.74ml，5.22mmol)。将反应混合物搅拌7.5h，用饱和nahco3水溶液稀释，并用etoac萃取。将合并的萃取物(有机层)用盐水洗涤，在na2so4上干燥并浓缩。将残留物通过在硅胶上的柱层析进行纯化，给出作为白色固体的标题化合物1-(4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-基)丙-1-酮(129.9mg，88％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ9.61(brs,1h),7.45(m,1h),7.12(m,1h),3.24(m,4h),2.83(q,j＝7.0hz,2h),1.80(m,4h),1.22(t,j＝7.0hz3h)。
参考例54
1-(4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-基)乙-1-酮的生产
在0℃下向搅拌的氯磺酸(2.0ml，30mmol)添加1-(1h-吡咯-2-基)乙-1-酮(545.7mg，5.0mmol)。将反应混合物在室温搅拌1.5h。在冷却至0℃后，通过添加冰和水将反应淬灭。将反应混合物过滤，给出作为浅粉色粉末的5-乙酰基-1h-吡咯-3-磺酰氯，其不需进一步纯化用于下一步骤中。在室温下向5-乙酰基-1h-吡咯-3-磺酰氯在ch2cl2(8ml)中的溶液添加吡咯烷(0.8ml，9.7mmol)。将混合物在室温搅拌14h，然后将混合物浓缩。将残留物通过在硅胶上的柱层析进行纯化，给出作为白色粉末的标题化合物1-(4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-基)乙-1-酮(398.5mg，2个步骤中32％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.46(d,j＝1.43hz,1h),7.12(brs,1h),3.25(m,4h),2.47(s,1h),1.81(m,4h)。
生产例1a
1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯2-甲酸甲酯(rt-22)的生产
将4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸甲酯(参考例47)(12.9mg，0.050mmol)、2-溴-1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(参考例15)(18.2mg，0.055mmol)和碳酸钾(21.8mg，0.158mmol)在无水mecn(0.25ml)中的溶液在室温搅拌7.5h。然后将反应混合物用水稀释并用etoac萃取。将合并的萃取物(有机层)在na2so4上干燥并浓缩。将残留物通过在硅胶上的柱层析进行纯化，给出作为浅黄色无定形固体的标题化合物1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸甲酯(rt-22)(19.3mg，74％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.10(d,j＝8.3hz,2h),7.87(s,1h),7.81(d,j＝8.0hz,1h),7.77(d,j＝8.3hz,2h),7.68(d,j＝8.0hz,1h)7.26(dd,j＝8.0,8.0hz1h),7.32(brs,1h),7.28(d,j＝1.7hz,1h),5.83(s,2h),3.77(s,3h),3.28(m,4h),1.83(m,4h)。
生产例2a
n,n-二甲基-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酰胺(rt-23)的生产
将n,n-二甲基-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酰胺(参考例50)(9.9mg，0.037mmol)、2-溴-1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(参考例15)(14.2mg，0.042mmol)和碳酸钾(13.6mg，0.098mmol)在无水mecn(0.20ml)中的溶液进行与生产例1a中相同的处理，给出作为白色固体的标题化合物n,n-二甲基-1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酰胺(rt-23)(15.0mg，77％得率)。
生产例3a
2-(2-(噁唑-2-基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-1-基)-1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(rt-58)的生产
将2-(4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-基)噁唑(参考例51)(12.0mg，0.045mmol)、2-溴-1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(参考例15)(29.6mg，0.086mmol)和碳酸钾(21.6mg，0.156mmol)在无水mecn(0.40ml)中的溶液进行与生产例1a中相同的处理，给出作为黄色油状物的标题化合物2-(2-(噁唑-2-基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-1-基)-1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(rt-58)(9.9mg，42％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.13(d,j＝8.3hz,2h),7.89(s,1h),7.83(d,j＝7.7hz,1h),7.77(d,j＝8.3hz,2h),7.69(d,j＝7.7hz,1h),7.63(dd,j＝7.7,7.7hz,1h),7.57(s,1h),7.30(d,j＝1.4hz,1h),7.16(d,1.4hz,1h),7.00(s,1h),6.05(s,2h),3.30(m,4h),1.83(m,4h)。
生产例4a
2-(2-乙酰基-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-1-基)-1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙烷-1-酮(hs-16)的生产
将1-(4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-基)乙-1-酮(参考例54)(24.4mg，0.10mmol)、2-溴-1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(参考例15)(40.4mg，0.12mmol)和碳酸钾(21.1mg，0.15mmol)在无水mecn(0.50ml)中的溶液进行与生产例1a中相同的处理，给出作为黄色油状物的标题化合物2-(2-乙酰基-4-(吡咯烷-1-基磺酰基)-1h-吡咯-1-基)-1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙烷-1-酮(hs-16)(47.9mg，95％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.10(d,j＝8.3hz,2h),7.87(s,1h),7.81(d,j＝7.9hz,1h),7.76(d,j＝8.3hz,2h),7.69(d,j＝8.3hz,1h),7.62(dd,j＝7.9,7.9hz,1h),7.33(d,j＝1.6hz,1h),7.29(d,j＝1.6hz,1h),5.80(s,2h),3.29(m,4h),2.45(s,3h),1.86(m,4h)。
生产例5a
1-(1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-基)丙-1-酮(hs-17)的生产
将1-(4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-基)丙-1-酮(生产例4a)(26.1mg，0.10mmol)、2-溴-1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(参考例15)(37.8mg，0.11mmol)和碳酸钾(22.3mg，0.16mmol)在无水mecn(1.0ml)中的溶液进行与生产例1a中相同的处理，给出作为黄色油状物的标题化合物1-(1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-基)丙-1-酮(hs-17)(50.9mg，50.9％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.10(d,j＝8.2hz,2h),7.87(s,1h),7.81(d,j＝7.9hz,1h),7.76(d,j＝8.2hz,2h),7.69(d,j＝7.9hz,1h),7.62(dd,j＝7.9hz,1h),7.32(d,j＝1.5hz,1h),7.30(d,j＝1.5hz,1h),5.83(s,2h),3.28(m,4h),2.84(q,j＝7.4hz,2h),1.85(m,4h),1.12(t,j＝7.4hz,3h)。
生产例6a
1-(2-羟基-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸甲酯(hs-6)的生产
在0℃下向1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸甲酯(rt-22)(生产例1a)(129.6mg，0.25mmol)在无水meoh(2.5ml)中的溶液添加硼氢化钠(14.8mg，0.39mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h，用饱和nh4cl水溶液稀释，并用etoac萃取。将合并的萃取物(有机层)用盐水洗涤，在na2so4上干燥并浓缩。将残留物通过在硅胶上的柱层析进行纯化，给出作为浅黄色固体的标题化合物1-(2-羟基-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸甲酯(hs-6)(92.5mg，72％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.81(s,1h),7.75(d,j＝7.7hz,1h),7.62-7.55(m,4h),7.49(d,j＝7.7hz,2h),7.25(brs,1h),7.22(brs,1h),5.14(brd,j＝3.9hz,1h),4.85(dd,j＝14.0,3.9hz,1h),4.32(dd,j＝14.0,7.7hz,1h),3.87(s,3h),3.16(m,4h),1.75(m,4h)。
生产例7a
2-(2-(羟基甲基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-1-基)-1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-醇(hs-14)的生产
在4℃下向1-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-2-甲酸甲酯(rt-22)(生产例1a)(120.0mg，0.23mmol)在无水thf(2.0ml)中的溶液添加氢化锂铝(8.5mg，0.22mmol)。将反应混合物在相同温度下搅拌1.5h，然后向反应混合物添加氢化锂铝(4.5mg，0.22mmol)并混合。在2小时内，再次添加氢化锂铝(3.3mg，0.09mmol)。将反应混合物在0℃搅拌0.5h，用饱和nh4cl水溶液稀释，并用etoac萃取。将合并的萃取物(有机层)用盐水洗涤，在na2so4上干燥并浓缩。将残留物通过在硅胶上的柱层析进行纯化，给出作为浅黄色固体的标题化合物2-(2-(羟基甲基)-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-1-基)-1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-醇(hs-14)(104.9mg，91％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.80(s,2h),7.75(d,j＝7.6hz,1h),7.63-7.52(m,4h),7.45(d,j＝8.2hz,2h),7.15(d,j＝1.7hz,1h),6.38(d,j＝1.7hz,1h),5.08(m,1h),4.58(d,j＝13.8hz,1h),4.53(d,j＝13.8hz,1h),4.25(dd,j＝15.1,3.4hz,1h),4.13(dd,j＝15.1,10.1hz,1h),3.16(m,4h),1.74(m,4h)。
生产例8a
2-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-6-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)吲嗪-8-基乙酸酯(hs-20)的生产
在0℃下向2-(2-乙酰基-4-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-1h-吡咯-1-基)-1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(hs-16)(生产例4a)(17.9mg，0.035mmol)在无水thf(0.7ml)中的溶液添加氢化钠(4.8mg，0.11mmol)。将反应混合物在室温搅拌2.5h，然后向反应混合物添加乙酸酐(6.6μl，0.07mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h，用水稀释并用etoac萃取。将合并的萃取物(有机层)用盐水洗涤，在na2so4上干燥并浓缩。将残留物通过在硅胶上的柱层析进行纯化，给出作为白色固体的标题化合物2-(吡咯烷-1-基-磺酰基)-6-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)吲嗪-8-基乙酸酯(hs-20)(57％得率)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.07(brs,1h),7.87(brs,1h),7.82-7.80(m,2h),7.70(d,j＝8.5hz,2h),7.62(d,j＝8.5hz,2h),7.60(m,2h),7.03(d,j＝1.1hz,2h),6.71(brs,1h),3.30(m,4h),2.44(s3h),1.78(m,4h)。
生产例9a
3-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-((苯磺酰基)甲基)咪唑烷-2,4-二酮(rt-35)的生产
(1)(5r,5'r)-5,5'-(二硫烷二基双(亚甲基))双(咪唑烷-2,4-二酮)的生产
在室温下向l-(–)-胱氨酸(2.00g，8.32mmol)在水中的搅拌的溶液(10ml)添加氰酸钠(1.21g，18.6mmol)。将反应混合物在100℃搅拌1h。在冷却至室温后，向反应混合物添加浓盐酸水溶液(7ml)，并将所述混合物在100℃搅拌1h。将反应混合物冷却至0℃，给出作为白色固体的标题化合物(5r,5'r)-5,5'-(二硫烷二基双(亚甲基))双(咪唑烷-2,4-二酮)(1.77g，73％得率)。
1hnmr(500mhz,dmso-d6)δ10.78(s,2h),8.06(s,2h),4.35(m,1h),3.15(dd,j＝14.0,4.6hz,2h),3.02(dd,j＝14.0,4.6hz,2h)。
(2)5-亚甲基-3-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)咪唑烷-2,4-二酮的生产
将(5r,5'r)-5,5'-(二硫烷二基双(亚甲基))双(咪唑烷-2,4-二酮)(28.2mg，0.097mmol)、2-溴-1-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙-1-酮(参考例15)(71.2mg，0.207mmol)和碳酸钾(40.8mg，0.295mmol)在无水dmf(0.5ml)中的溶液在室温搅拌9h。然后将反应混合物用水稀释，并用etoac萃取。将合并的萃取物(有机层)在na2so4上干燥并浓缩。将残留物通过在硅胶上的柱层析进行纯化，给出作为无色油状物的标题化合物5-亚甲基-3-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)咪唑烷-2,4-二酮(27.8mg，38％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.08(d,j＝8.3hz,2h),7.87(s,1h),7.83(brs,1h),7.81(d,j＝8.0hz,1h),7.74(d,j＝8.3hz,2h),7.68(d,j＝8.0hz,1h),7.61(dd,j＝8.0,8.0hz,1h),5.52(d,j＝1.7hz,1h),5.05(s,2h),5.02(d,j＝1.7hz,1h)。
(3)3-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-((苯磺酰基)甲基)咪唑烷-2,4-二酮(rt-35)的生产
在60℃下向5-亚甲基-3-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)咪唑烷-2,4-二酮(27.8mg，0.074mmol)在无水dmf(0.3ml)中的搅拌的溶液添加二水苯亚磺酸钠(61.0mg，0.37mmol)。将反应混合物在相同温度下搅拌7.5h。在冷却至室温后，通过添加乙酸(0.05ml)将反应淬灭，并将反应混合物在室温搅拌1.5h并过滤，给出作为浅黄色固体的残留物。将残留物通过在硅胶上的柱层析进行纯化，给出作为白色固体的标题化合物3-(2-氧代-2-(3'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-5-((苯磺酰基)甲基)咪唑烷-2,4-二酮(rt-35)(6.6mg，17％得率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.04(d,j＝8.6hz,2h),7.98(d,j＝7.4hz,2h),7.86(s,1h),7.81-7.72(m,4h),7.69-7.59(m,4h),6.36(s,1h),4.98(s,2h),4.66(d,j＝11.2hz,1h),3.76(dd,j＝13.7,1.2hz,1h),3.42(dd,j＝13.7,11.2hz,1h)；
esi-msm/z515.0[m-h]-.
将按照上述方法生产的化合物(包括33种不同类型的本发明的化合物)作为测试化合物，按照下述方法进行各种不同的药理学试验。药理学试验1：体外gef测定法
dock-a子家族的成员dock1和dock2两者均通过经它们的dhr-2结构域催化rac的gtp-gdp交换反应而激活rac。因此，在这个药理学试验中，通过使用对应于来自小鼠和人类的dock1或dock2的dhr-2结构域的多肽片段，在体外gef测定法中评估了本发明的化合物对rac被dock1或dock2的激活的抑制作用。所述体外gef测定法使用标记的gtp(bodipy-fl-gtp,invitrogen)来进行，所述标记的gtp具有在结合到rac时提高荧光强度的性质。
所述对应于dock1或dock2的dhr-2结构域的多肽片段通过在大肠杆菌arcticexpress(de3)细胞中表达为n-端组氨酸-sumo标签融合的重组蛋白，然后在镍-nta柱上通过亲和柱层析纯化来制备。
rac通过在大肠杆菌bl21(de3)细胞中表达为n-端gst标签融合的重组蛋白，然后在谷胱甘肽-琼脂糖凝胶柱上通过亲和柱层析纯化来制备。
将每种所述对应于dock1或dock2的dhr-2结构域的多肽片段和溶解在dmso中的预定浓度的每种测试化合物(本发明的化合物：33种化合物；和比较性化合物：tbopp)在反应溶液a(ph7.0)中在室温下避光温育20分钟，所述溶液含有20mmmes-naoh，150mmnacl，10mmmgcl2和20μmgdp，由此制备gef预处理的产物。在所有测试样品中将dmso的终浓度调整到1质量％。对于对照试验来说，通过使用不含测试化合物的dmso代替上面使用的其中溶解有每种测试化合物的dmso以相同的方式温育，制备了gef预处理的产物(对照)。
分开地，将rac添加到反应溶液a(ph7.0)至浓度为15μm，并将其在冰上放置30min以形成gdp-rac复合物。向100μl含有如此制备的gdp-rac复合物的反应溶液a添加bodipy-fl-gtp至浓度为3.6μm，并在30℃平衡2分钟。在平衡后，添加50μl如上所述制备的gef预处理的产物，并在30℃下反应。
使用enspire荧光分光光度计(perkinelmer)(激发波长：488nm，荧光波长：514nm)监测反应溶液中bodipy-fl-gtp的荧光强度变化。对测量值进行校正，使得反应开始时(0sec)的荧光强度为0。然后通过使用graphpadprism5(graphpadsoftware)将计算校正值在y-轴上并将时间(t)在x-轴上作图获得近似曲线(双曲线)，并将t＝0至10秒时的斜率定义为鸟嘌呤核苷酸交换反应的初始速度。取仅添加溶剂(dmso)的对照的初始反应速度为100％来计算ic50值。
在所述得到的结果的基础上，图1、图2、图3-1和图3-2的a和b列显示了评估每种测试化合物对rac被dock1(dhr-2结构域)激活的抑制作用(ic50值)和dock1选择性抑制作用(dock1/dock2选择性)的结果。所述对rac被dock1(dhr-2结构域)激活的抑制作用(ic50值)从使用在各种不同浓度的测试化合物存在下rac被dock1dhr-2结构域激活的值作图的反应抑制曲线来确定，取对照的值为100％。所述dock1选择性抑制作用通过将每种测试化合物对rac被dock1(dhr-2结构域)激活的抑制作用与对rac被dock2(dhr-2结构域)激活的抑制作用进行比较来确定，并且可以通过用代表对rac被dock2激活的抑制作用的ic50值除以代表对rac被dock1激活的抑制作用的ic50值来确定。值越高表明dock1选择性抑制作用越高。另外，通过使用已知的dock1选择性抑制剂tbopp代替本发明的化合物，以与上述相同的方式进行了比较性对照实验。作为结果，在所述实验条件下，对rac被dock1(dhr-2结构域)激活的抑制作用(ic50值)为8.4μm，并且dock1选择性抑制作用(dock1/dock2选择性)为2.6。
如图1、图2、图3-1和图3-2中所示，本发明的化合物均被确认对dock1具有高抑制作用，特别是高dock1选择性抑制作用。此外，如图1中所示，除了hs-14之外，被化合物a涵盖的所有其他化合物均具有比tbopp更高的dock1抑制活性。特别地，rt-22、hs-16、rt-23、rt-58、hs-6、hs-14和hs-20被确认显示出针对dock1比针对dock2更高的选择性抑制活性。与tbopp相比，hs-14显示出略低的dock1抑制活性，但显示出更高的针对dock1的选择性抑制活性。此外，如图2中所示，被化合物ba涵盖的所有化合物均显示出比tbopp更高的dock1抑制活性。特别地，ks-47、ks-54、ks-43、ks-59和ks-46显示出针对dock1比针对dock2更高的选择性抑制活性。此外，如图3-1和3-2中所示，除了ak-16和rt-13之外，被化合物bb涵盖的所有其他化合物均显示出比tbopp更高的dock1抑制活性；并且在这些化合物中，ak-17、ak-5、ak-15、ak-23和ak-24显示出针对dock1比针对dock2更高的选择性抑制活性。与tbopp相比，ak-16显示出略低的dock1抑制活性，但显示出更高的针对dock1的选择性抑制活性。
作为测试化合物的代表性实例，图4(a)至4(e)示出了评估rt-22(生产例1a)和ks-59(生产例4b)的dock1选择性抑制作用的结果。图4(a)的图示出了对在各种不同浓度的rt-22存在下rac被小鼠dock1dhr-2结构域(-●-)和dock2dhr-2结构域(-▲-)激活的值作图的反应抑制曲线，取添加dmso(对照)获得的值为100％。所述图中的数值从上方开始依次分别是小鼠dock1和dock2的ic50值。图4(b)的图示出了对在各种不同浓度的ks-59存在下rac被小鼠dock1dhr-2结构域(-●-)和dock2dhr-2结构域(-▲-)激活的值作图的反应抑制曲线，取添加dmso(对照)获得的值为100％。所述图中的数值从上方开始依次分别是小鼠dock1和dock2的ic50值。图4(c)的图示出了对从在各种不同浓度的rt-22存在下以与上述相同的方式使用人类dock1dhr-2结构域(-●-)和dock2dhr-2结构域(-▲-)进行的实验获得的值作图的反应抑制曲线。所述图中的数值从上方开始依次分别是dock1和dock2的ic50值。图4(d)的图示出了对从在各种不同浓度的ks-59存在下以与上述相同的方式使用人类dock1dhr-2结构域(-●-)和dock2dhr-2结构域(-▲-)进行的实验获得的值作图的反应抑制曲线。所述图中的数值从上方开始依次分别是dock1和dock2的ic50值。图4(e)的图示出了对在各种不同浓度的rt-22存在下rac被小鼠triodh-ph结构域(-●-)和tiam1dh-ph结构域(-▲-)激活的值作图的反应抑制曲线，取添加dmso(对照)获得的值为100％。所述图中的数值从上方开始依次分别是小鼠triodh-ph结构域和tiam1dh-ph结构域的ic50值。
这些结果证实了本发明的化合物对rac被dock1的激活显示出高抑制作用，同时对rac被dock2的激活显示出显著更低的抑制作用，表明本发明的化合物对rac被dock1的激活表现出选择性抑制作用。所述结果还证实，除了dock2之外，本发明的化合物不影响其他gef家族成员。
药理学试验2：细胞侵袭抑制测定法
在这个药理学试验中，使用小鼠肺癌细胞系(3ll细胞)、小鼠胰腺癌细胞系(panc02细胞)和人类乳腺癌细胞系(mda-mb-157细胞)评估了每种试验化合物对细胞侵袭应答的抑制作用。在这些细胞系中，小鼠肺癌细胞系(3ll)是具有突变型ras(k-ras(g12c))的癌细胞系，人类乳腺癌细胞系(mda-mb-157)是具有突变型rac(rac1(p29s))的癌细胞系。所述实验在bdbiocoat基质胶侵袭腔室(bdbiosciences)中进行。
具体来说，将在底部具有基质胶包被的膜插片(8μm孔眼)的上部腔室用dmem(无血清培养基)平衡120分钟。然后将300μl癌细胞系在dmem(无血清)中的悬液置于上部腔室中，同时将500μldmem(含有10质量％的fcs)置于下部腔室中。向上部和下部腔室中的两种培养基添加以预定浓度溶解在dmso中的每种测试化合物。作为对照，向上部和下部腔室中的两种培养基添加单独的dmso。在所有实验中，培养基中的最终dmso浓度被调整到0.2质量％。
将所述得到的产物在5％co2和37℃下培养22小时(3ll和panc02细胞)或48小时(mda-mb-157细胞)。然后，取下上部腔室并除去培养基。然后使用棉拭子除去保留在上部腔室中的非侵入细胞，并将保留在上部腔室底部外侧的细胞(已侵入到基质胶中并通过膜插片的细胞)用diff-quick(sysmex)染色。在染色后，使用解剖刀切下带有基质胶的膜插片以制备载片，并在光学显微镜下对侵入细胞的数目进行计数。
结果在细胞侵袭百分数(％：侵袭)和抑制百分数(％：抑制)的基础上评估。细胞侵袭百分数通过取在只添加dmso的对照试验中侵入细胞的数目为100％，将在每种测试化合物存在下侵入细胞的数目转变成百分率来获得；并且抑制百分数通过从100中扣除细胞侵袭百分数来获得。
结果示出在图1、图2、图3-1和图3-2的c列中。图1、图2、图3-1和图3-2中的c列示出了每种测试化合物(33种)针对小鼠肺癌细胞系(3ll细胞)的细胞侵袭抑制百分数(％：抑制)。也使用已知的dock1选择性抑制剂tbopp代替本发明的化合物以相同的方式进行了比较性对照实验，其产生95％的细胞侵袭抑制百分数。作为测试化合物的代表性实例，图5-1(a)(b)和5-2(c)(d)示出了rt-22(生产例1a)、ks-59(生产例4b)、hs-6(生产例6a)、hs-20(生产例8a)和rt-13(生产例14b)的癌细胞侵袭抑制作用的结果，并与tbopp的侵袭抑制作用进行比较。图5-1(a)的图示出了rt-22和ks-59对小鼠肺癌细胞系(3ll细胞)的作用。图5-1(b)的图示出了hs-6、hs-20和rt-13对小鼠肺癌细胞系(3ll细胞)的作用。图5-2(c)的图示出了rt-22对小鼠胰腺癌细胞系(panc02细胞)的作用。图5-2(d)的图示出了rt-22对人类乳腺癌细胞系(mda-mb-157细胞)的作用。在所有图中，竖直轴表示细胞侵袭百分数(％)，取对照试验中侵入细胞的数目为100％。
如图1、图2、图3-1和图3-2中所示，本发明的化合物均被证实对癌细胞具有高的细胞侵袭抑制百分数。此外，如图1、图2、图3-1和图3-2中所示，证实了具体来说被化合物a所涵盖的化合物中的rt-22、hs-16、hs-17、rt-58和hs-6，除了ks-43之外的被化合物ba所涵盖的化合物，以及被化合物bb所涵盖的化合物中的ks-21、rt-13、ks-16、ks-22、ks-18和ks-23，具有比tbopp更高的细胞侵袭抑制百分数。
这些结果证实了本发明的化合物在抑制癌细胞的侵袭潜力方面显示出高活性。具体来说，被化合物a涵盖的rt-22和被化合物b涵盖的ks-59被证实显示出均比tbopp更高的dock1抑制活性、dock1选择性抑制活性和癌细胞侵袭抑制作用。
药理学试验3：癌细胞中巨胞饮的抑制
巨胞饮作用是其中细胞摄取与细胞外液一起的各种不同物质并同时拉伸细胞膜的现象。已知通过rac活性重塑肌动蛋白细胞骨架是重要的。最近已揭示，致癌性ras利用巨胞饮作用刺激细胞外高分子量蛋白的摄取，将其用作谷氨酰胺供应的来源，这对于癌细胞在营养不良环境中的存活和生长来说发挥必不可少的作用；因此，巨胞饮作用作为新的癌症治疗靶点已受到广泛关注(npl9和10)。
因此，这项药理学试验在小鼠肺癌细胞系(3ll细胞)和小鼠胰腺癌细胞系(panc02细胞)中评估了本发明的化合物对作为靶的巨胞饮的抑制作用。具体来说，将150μl的小鼠肺癌细胞系(3ll)或小鼠胰腺癌细胞系(panc02)(4×104个细胞)接种在纤连蛋白包被的玻璃底培养皿的玻璃部分上。在37℃培养16小时后，将培养基更换为dmem(无血清)并继续培养24小时，以使所述细胞血清饥饿。随后，将培养基更换为2ml只含dmso(对照)或含有其中溶解有每种测试化合物的dmso的无血清培养基，然后培养1小时用于预处理。dmso的终浓度被调整到0.2质量％。
将单独的dmso(对照)或其中溶解有预定浓度的每种测试化合物的dmso以与上述相同的方式添加到含有tmr-葡聚糖(终浓度：500μg/ml)的dmem(含有10质量％的fbs)，并将由此获得的培养基(180μl)添加到如上所述预处理的癌细胞，然后在37℃温育1小时。然后通过在室温下在4％聚甲醛溶液中温育60分钟，将所述癌细胞固定。在用pbs清洗3次后，通过在室温下温育5分钟将细胞核用dapi(1/3000稀释)染色，然后用pbs清洗4次。随后，使用共聚焦激光点扫描显微镜(zeisslsm510meta)进行观察。被癌细胞摄取的tmr-葡聚糖被观察为细胞质中的斑点。巨胞饮活性在每个细胞的tmr-葡聚糖斑点数目的基础上测量。
结果在每种测试化合物的巨胞饮活性(每个细胞的tmr-葡聚糖摄取的数目)相对于被取为1的对照试验(只添加dmso)的巨胞饮活性的基础上显示。作为测试化合物的代表性实例，图6a至6d示出了对于rt-22(生产例1a)来说，在小鼠肺癌细胞系(3ll细胞)(图6(a)和6(b))和小鼠胰腺癌细胞系(panc02细胞)(图6(c)和6(d))中巨胞饮活性的测量结果。
这些结果证实了rt-22和本发明的其他化合物在癌细胞中对巨胞饮活性具有抑制作用。
药理学试验4：对t淋巴细胞迁移的评估
淋巴细胞迁移在免疫应答中发挥关键作用。t细胞被趋化因子例如ccl21的刺激通过rac激活来诱导肌动蛋白细胞骨架重塑。这驱动所述细胞向趋化因子的来源迁移。为了在淋巴细胞中激活rac，dock2的作用是不可或缺的，因此dock2缺乏的t细胞的迁移显著受损(npl4)。相反，dock1在t细胞中不表达，并且淋巴细胞迁移不依赖于dock1的功能。因此，为了在细胞水平上验证本发明的化合物的dock1选择性，证实本发明的化合物对淋巴细胞迁移的影响是有用的。
鉴于以上所述，研究了充当本发明的化合物的代表的rt-22(生产例1a)对淋巴细胞迁移的影响。具体来说，将小鼠脾细胞(1×107个细胞/ml)首先在含有0.5质量％bsa的rpmi-1640(transwell培养基)中在37℃预培养1小时，所述培养基添加有单独的dmso或其中溶解有预定浓度的每种测试化合物的dmso。随后，向24孔板添加500μl含有300ng/mlccl21和其中溶解有预定浓度的每种测试化合物的dmso的transwell培养基。然后将其中以1×106个细胞/100μl的量装载有所述预培养的小鼠脾细胞的transwell插片(corning，孔眼尺寸：5μm)放置在孔中。
在37℃温育2小时后，收集迁移到下部腔室的细胞，并用pe标记的抗thy1.2抗体(53-2-1,bdpharmingen)和apc标记的抗b220抗体(ra-6b2,ebioscience)染色。迁移的细胞的百分率(％)通过用下部腔室中thy1.2+细胞(t细胞)的数目除以放置在transwell插片中的thy1.2+细胞(t细胞)的数目来计算。
图7示出了rt-22的结果。图7清楚地表明，rt-22对ccl21刺激的t细胞的迁移没有影响。换句话说，在细胞水平上证实了rt-22和本发明的其他化合物选择性抑制rac被dock1的激活。这表明本发明的化合物可用作抗癌剂的活性成分，具有较少的副作用。
药理学试验5：对淋巴细胞生活力的影响
如上文所述，为了在细胞水平上验证本发明的化合物的dock1选择性，证实本发明的化合物对淋巴细胞生活力的影响是有用的。因此，研究了充当本发明的化合物的代表的rt-22(生产例1a)对淋巴细胞生活力的影响。
具体来说，将1×106个小鼠脾细胞悬浮在100μl含有0.5％bsa的rpmi-1640培养基中，并向其添加其中溶解有预定浓度的每种测试化合物的dmso或单独的dmso至dmso终浓度为0.2％。在37℃培养1小时后，添加2μl碘化丙啶染色溶液(bdpharmingen)，并在冰上温育30分钟，然后进行流式细胞术分析。将阴性细胞视为活细胞，计算在每种条件下活细胞的百分率(％)。
图8示出了rt-22的结果。图8清楚地表明rt-22对t细胞的生活力也没有影响。这也表明rt-22和本发明的其他化合物可用作抗癌剂的活性成分，具有更少的副作用。
药理学试验6：小鼠肺癌细胞生长的抑制
将小鼠肺癌细胞系(3ll)悬浮在200μlpbs(-)中，并移植(每只小鼠5×105个细胞)到c57bl/6小鼠(6周龄)的背部皮下区中。向pbs/cremophorel/乙醇的6:1:1混合物添加作为本发明的化合物的代表的rt-22至浓度为0.25mg/300μl，并将得到的混合物装载到在移植的前一天皮下植入的smp-300微量输注泵(iprecio)上，以进行连续静脉内给药(n＝5只小鼠)。对照组只给药相等体积的溶剂(pbs/cremophorel/乙醇的6:1:1混合物)(n＝6只小鼠)。在从给药开始4周的时间段内随时间测量肿瘤团块的横向和纵向直径，并根据下述公式计算肿瘤体积(v)：v＝π/6x√((横向直径×纵向直径)3)。
图9的图示出了关于在皮下移植小鼠肺癌细胞系(3ll)的模型中作为本发明的化合物的代表的rt-22(生产例1a)对肿瘤生长的抑制作用的结果。正如可以从图9看到的，证实了与对照组相比rt-22的给药明显减小肿瘤组织尺寸；并且在第26天至第29天，肿瘤尺寸减小到对照组的64至69％。使用浓度为0.25mg/300μl的已知为对小鼠肺癌细胞的生长具有抑制作用的dock1选择性抑制剂的tbopp进行了类似的实验。在第26天至第29天，与对照组相比肿瘤尺寸仅减小21-24％，表明作为本发明的化合物的rt-22与tbopp相比在抑制肿瘤生长方面更加有效。
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