N6022在预防和治疗主动脉夹层和主动脉瘤中的应用的制作方法

本发明属于主动脉夹层和主动脉瘤治疗技术领域，具体涉及亚硝基谷胱甘肽还原酶(gsnor)抑制剂n6022在预防和治疗主动脉夹层和主动脉瘤中的应用。

背景技术：

主动脉夹层与主动脉瘤是主动脉疾病中最严重的大血管疾病，其病理表现为主动脉的进行性扩张，由于其具有发病隐匿和破裂致死等特征已成为一个重大公共卫生问题。疾病早期血管中层发生退化、变性等结构异常改变，血管破裂前通常不表现特定的症状或体征,；随着瘤体直径的增加，破裂概率显著增加，并伴有内膜撕裂和假腔的形成，瘤体破裂后患者死亡率将高达90％，因此在破裂前进行早期预防和治疗显得尤为重要。

目前针对主动脉夹层和主动脉瘤的治疗方法仍以手术为主，但手术创伤大，截瘫等严重并发症的发生率及死亡率高达17％和26％；且对主动脉直径小于5.0cm的患者是否需要进行手术存在争议。临床使用药物包括肾上腺素β受体阻滞药、血管紧张素转换酶抑制药、他汀类药物等，这些药物只能通过控制血压、心率、血脂等指标来减缓疾病进程，且存在很多不良反应和副作用，尚未发现用于预防及治疗的特效药物。因此，需要更为安全有效的能够防治主动脉瘤和主动脉夹层的药物。

亚硝基谷胱甘肽还原酶(s-nitrosoglutathionereductase,gsnor)作为醇脱氢酶家族中一个特殊的蛋白酶，其在细胞内的主要作用是调节亚硝基谷胱甘肽(s-nitrosoglutathione,gsno)的代谢，进而影响着细胞内一氧化氮(nitricoxide,no)的稳态调节。亚硝基谷胱甘肽还原酶(gsnor)抑制剂n6022是一种特异的可逆的亚硝基谷胱甘肽还原酶抑制剂，研究表明n6022能够有效改善哮喘及过敏性气道炎症，并且n6022作为治疗慢性哮喘和囊性纤维病的一期、二期临床实验已经完成。近期有文献报道，n6022对治疗自身免疫性脑脊髓炎(eae)也有一定疗效。但是n6022是否能够改善主动脉夹层和主动脉瘤及其机制目前尚未有任何相关的研究和报道。

技术实现要素：

解决的技术问题：本发明提供一种n6022在预防和治疗主动脉夹层和主动脉瘤中的应用，通过对于gsnor的抑制作用，从而有效改善主动脉夹层和主动脉瘤疾病。该方法包含给主动脉夹层和主动脉瘤模型小鼠尾静脉注射n6022，预防主动脉夹层和主动脉瘤的发生及减少主动脉夹层和主动脉瘤的死亡率。

技术方案：n6022或其衍生物在制备治疗主动脉夹层和主动脉瘤药物中的应用。

n6022或其衍生物在制备预防主动脉夹层和主动脉瘤药物中的应用。

预防和治疗主动脉夹层和主动脉瘤药物，有效成分包括n6022或其衍生物。

有益效果：通过静脉注射n6022能抑制主动脉的病理性扩张，减少动脉夹层及主动脉瘤的发生率和死亡率；且n6022可以减少主动脉瘤体的破裂，减少管腔内壁内血肿的发生及血管壁过度胶原的沉积，维持血管壁弹力纤维的完整性，治疗主动脉夹层和主动脉瘤疾病。本发明开拓了n6022一个新的应用领域，对于防治主动脉夹层和主动脉瘤疾病，改善血管病变状况提供了有意义的参考。

附图说明

图1通过bapn饮水构建主动脉夹层小鼠模型图，同时分别尾静脉注射对照溶剂dmso，以及n6022(0.01mg/kg/day、0.1mg/kg/day、1mg/kg/day),其中a：在造模期间观察并统计主动脉夹层的死亡率图；b：主动脉大体图。

图2在造模期间观察并统计主动脉夹层的发生率及破裂率图。

图3通过angii渗透微泵构建主动脉瘤小鼠模型图，术后分别尾静脉注射对照溶剂dmso，以及n6022(0.1mg/kg/day),其中a：通过血管超声检测小鼠主动脉内径及瘤体形成情况；b：小鼠主动脉内径统计图，*<0.05；c：主动脉大体图。

图4通过显微器械剥离小鼠主动脉，分析天平检测主动脉重量与小鼠体重的比值，游标卡尺测量血管最大外径示意图，*<0.05。

图5通过主动脉石蜡包埋切片，h&e组织染色检测主动脉瘤体形态示意图。

图6通过主动脉石蜡包埋切片，masson组织染色检测主动脉壁胶原沉积情况示意图。

图7通过主动脉戊二醛固定，脱水，切片，投射电子显微镜检测弹力纤维断裂情况示意图。

具体实施方式

以下实施例进一步说明本发明的内容，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改和替换，均属于本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。以下实施例中所使用的试剂和材料均为市售产品。实例中所用n6022为市售产品，购买于selleck.cn，结构式如下所示：

实施例1：n6022对主动脉夹层发生及破裂的抑制作用

为了探索n6022对主动脉夹层发生及破裂情况的影响，我们选用spf级4周龄c57bl/6小鼠(购于南京医科大学医药实验动物中心)，随机分为五组：溶剂对照组(control+dmso)，主动脉夹层模型溶剂对照组(bapn+dmso)及三个不同n6022浓度(0.01mg/kg/day、0.1mg/kg/day、1mg/kg/day)主动脉夹层模型给药组。其中主动脉夹层模型是在小鼠4周时，通过在饮水中渗入β-氨基丙腈(bapn)1g/kg/day,同时尾静脉注射不同浓度的n6022(0.01mg/kg/day、0.1mg/kg/day、1mg/kg/day),每5天观察小鼠的生存情况，于4周后，分离小鼠主动脉，统计主动脉夹层的发生率及破裂率。

图1通过统计小鼠的生存情况，主动脉夹层小鼠尾静脉注射n6022(0.01mg/kg/day、0.1mg/kg/day、1mg/kg/day)可明显降低主动脉夹层所诱导的死亡；剥离主动脉大体图片显示尾静脉注射n6022可以明显抑制血管管腔内壁内血肿及血管破裂。

图2通过统计小鼠的主动脉夹层情况表明，n6022可明显降低主动脉夹层的发生率及主动脉夹层的破裂率。

实施例2：n6022对主动脉瘤瘤体形成及破裂的抑制作用

为了探索n6022对主动脉瘤模型小鼠瘤体形成及破裂情况的影响，我们选用了spf级8周雄性apoe^-/-小鼠(购于南京君科生物工程有限公司)，随机分为三组：溶剂对照组(saline+dmso)，主动脉瘤模型溶剂对照组(angii+dmso)及主动脉瘤模型给药组(angii+n6022)。即在小鼠8周龄时，通过背部皮下植入渗透微泵(alzet，usa，2004model)，对照组给予生理盐水，主动脉瘤模型溶剂对照组及主动脉瘤模型给药组给予angii(1000ng/kg/min)，并尾静脉注射对照溶剂dmso或n6022(0.1mg/kg/day)。每5天观察小鼠的死亡率，于4周时超声检测小鼠主动脉瘤瘤体形成情况。并且分离小鼠主动脉，分析天平称量并计算主动脉重量与体重得到比值，游标卡尺检测瘤体最大外径，统计主动脉瘤的发生率。

图3通过超声检测小鼠主动脉瘤体形成情况表明，尾静脉注射n6022(0.1mg/kg/day)的小鼠主动脉内径明显小于主动脉瘤小鼠，瘤体形成情况得到抑制；剥离主动脉大体图片显示尾静脉注射n6022可以明显抑制血管管腔内壁内血肿及瘤体破裂。

图4通过显微器械剥离小鼠主动脉，分析天平检测主动脉重量与小鼠体重的比值，游标卡尺测量血管最大外径，结果显示给药组(n60220.1mg/kg/day)血管重量和瘤体最大外径明显低于主动脉瘤小鼠。为了探索n6022对主动脉瘤模型小鼠主动脉壁形态、胶原沉积情况及主动脉壁完整性的作用，我们通过将上述各组小鼠主动脉进行石蜡包埋、切片，后进行h&e观察血管形态结构，masson染色检测胶原沉积及囊性纤维化情况。并取部分小鼠主动脉进行戊二醛固定及样本处理后利用透射电子显微镜观察主动脉血管壁弹力纤维的完整性。以上实验均说明n6022能抑制主动脉瘤主动脉壁组织形态学改变及病理性改变。

图5h&e组织染色结果表明，给药组(n60220.1mg/kg/day)可明显抑制主动脉的病理性扩张及瘤体形成。

图6masson组织结果表明，给药组(n60220.1mg/kg/day)可明显减少血管壁胶原沉积异常，并抑制血管壁发生囊性坏死和纤维化。

图7通过透射电子显微镜观察主动脉组织结果显示，给药组(n60220.1mg/kg/day)可明显减少血管壁弹力纤维的断裂情况及平滑肌细胞的凋亡。