调节菌群的含茶组方牙膏及其制备方法和应用与流程

本发明涉及口腔洁护技术领域，尤其是涉及一种调节菌群的含茶组方牙膏及其制备方法和应用。

背景技术：

以龋病为代表的口腔疾病是条件致病菌引发的感染性疾病，被who列为人类三大重点防治疾病之一。人体口腔微生态系拥有超过700种微生物，是仅次于肠道微生态系的复杂系统。随着基因组学和生物信息学的发展，越来越多的研究证实口腔微生物多以生物膜形式组成复杂群落，行使微生物生理学功能。而龋病的发生与口腔共生菌群结构失调密切相关，保持口腔清洁卫生、调控菌群平衡预防龋病的根本之策。

口腔洁护是日常保持口腔微环境健康的必要手段，除了采用科学的刷牙方法，洁护产品中的组分配伍平衡作用不可或缺。目前防龋产品主要有以下几类：一是含氟制剂(如含氟牙膏)，漱口不净或误吞，易导致氟过量摄入，有潜在健康危害；二是含抗菌药物的漱口液，因广谱灭菌、耐药性等副作用明显，长期持续使用易引起口腔菌群失调，成为多种口腔疾病的诱因。

有鉴于此，特提出本发明。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种调节菌群的含茶组方牙膏，该牙膏含有茶叶和茶树花中多种天然抑菌成分，通过配伍协同，使得获得的牙膏具有显著的抑菌作用，能够降低混合菌生物膜中的致龋菌(s.mutans、p.gingivalis)及其生物膜。

本发明提供的调节菌群的含茶组方牙膏，包括茶叶提取物和茶树花精油，其中，所述茶叶提取物包括茶氨酸、茶黄素和茶皂素，所述茶氨酸、茶黄素、茶树花精油和茶皂素的质量比为(1-2)：(2-3)：(0.5-1)：(1.5-4)。

进一步地，所述茶氨酸、茶黄素、茶树花精油和茶皂素的质量比为(1.2-1.5)：(2.5-3.0)：(0.8-1.0)：(2.0-3.0)。

进一步地，所述含茶组方牙膏还包括保湿剂、胶黏剂、甜味剂、防腐剂、表面活性剂、摩擦剂以及增稠剂中的至少一种；

优选地，所述含茶组方牙膏包括茶叶提取物1-5.5重量份和茶树花精油0.5-1重量份，还包括具有以下重量份的组分中的至少一种：保湿剂28-40份、胶黏剂0.2-0.3份、甜味剂0.15-0.5份、防腐剂0.03-0.05份、摩擦剂2-4份、以及增稠剂7-8份；

优选地，所述含茶组方牙膏包括茶叶提取物1-5.5重量份、茶树花精油0.5-1重量份、保湿剂28-40份、胶黏剂0.2-0.3份、甜味剂0.15-0.5份、防腐剂0.03-0.05份、摩擦剂2-4份、增稠剂7-8份以及余量的水，且各组分的重量份之和为100重量份。

进一步地，所述茶树花精油被包埋剂包埋；

优选地，所述包埋剂包括环糊精、变性淀粉、壳聚糖、海藻酸钠、阿拉伯胶、明胶、纤维素类、高分子材料聚乙烯、聚甲基丙烯酸酯和聚乙烯醇中的至少一种；

优选地，所述包埋剂与所述茶树花精油的质量比为3:1-9:1(w/w)。

进一步地，所述保湿剂包括山梨醇、甘油、聚乙二醇、甜菜碱和葡糖胺聚糖中的至少一种；

优选地，所述胶黏剂包括羧甲基纤维素钠、海藻酸钠和壳聚糖中的至少一种；

优选地，所述甜味剂包括木糖醇和/或d-塔格糖；

优选地，所述甜味剂包括木糖醇和d-塔格糖，且木糖醇和d-塔格糖的质量比为(0.1-0.3)：(0.05-0.2)；

优选地，所述防腐剂包括苯甲酸钠和/或苹果酸钠；

优选地，所述摩擦剂包括摩擦型二氧化硅；

优选地，所述增稠剂包括增稠型二氧化硅。

一种前面所述的含茶组方牙膏的制备方法，包括：将茶叶提取物和茶树花精油混合，得到所述含茶组方牙膏；

优选地，将茶叶提取物和茶树花精油与保湿剂、胶黏剂、甜味剂、防腐剂、表面活性剂、摩擦剂以及增稠剂中的至少一种混合，得到所述含茶组方牙膏。

进一步地，包括：

将保湿剂和胶黏剂混合，得到混合物；

将茶叶提取物、任选地甜味剂、任选地防腐剂与水混合，得到混合溶液；

将所述混合溶液与混合物混合，得到胶体溶液；

在所述胶体溶液中加入茶树花精油，得到所述含茶组方牙膏；

优选地，在无气泡的所述胶体溶液中加入增稠剂和摩擦剂，得到膏体；

在所述膏体中加入茶树花精油，得到所述含茶组方牙膏。

进一步地，将保湿剂和胶黏剂混合，得到混合物；

将茶氨酸、茶黄素、任选地甜味剂、任选地防腐剂与水混合，得到混合溶液；

将所述混合溶液与混合物混合，得到胶体溶液；

在所述胶体溶液中加入茶皂素和茶树花精油，得到所述含茶组方牙膏；

优选地，在无气泡的所述胶体溶液中加入茶皂素、增稠剂和摩擦剂，得到膏体；

在所述膏体中加入茶树花精油，得到所述含茶组方牙膏。

进一步地，所述保湿剂是通过以下方法制备得到的：将山梨醇溶液与甘油混合后加热至44-46℃；

优选地，所述山梨醇溶液的质量浓度为65-75％；

优选地，所述制备方法还包括：对膏体与茶树花精油的混合物依次进行破碎和冷却分装，得到所述含茶组方牙膏。

一种前面所述的含茶组方牙膏在制备调节菌群的产品中的应用。

与现有技术相比，本发明至少可以取得以下有益效果：

本发明的调节菌群的含茶组方牙膏，该牙膏含有茶叶和茶树花中多种天然抑菌成分，使得获得的牙膏具有显著的抑菌作用，能够降低混合菌生物膜中的致龋菌(s.mutans、p.gingivalis)及其生物膜。本发明的发明人通过体外实验后发现，经过为期一个月的人群试用结果表明，通过诱导口腔菌斑和唾液中微生物的种类和丰度变化，口腔中与健康相关的微生物属streptococcus,actinomyces,rothia,fusobacterium,corynebacteriumandlautropia显著增加，而条件致病菌prevotella,selenomonas,haemophilus,capnocytophaga,granulicatellaandbergeyella明显下降，可见本发明的调节菌群的含茶组方牙膏对于口腔菌群的平衡具有良好的效果。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为实施例1中不同茶叶提取物组合对混合菌的抑制效果；

图2为试验例1中不同牙膏对混合菌膜内口腔微生物生长的影响；

图3和图4为试验例3中不同牙膏对受试者口腔微生物变化的影响。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

在本发明的一个方面，本发明提供了一种调节菌群的含茶组方牙膏，包括茶叶提取物和茶树花精油，其中，所述茶叶提取物包括茶氨酸、茶黄素和茶皂素，所述茶氨酸、茶黄素、茶树花精油和茶皂素的质量比为(1-2)：(2-3)：(0.5-1)：(1.5-4)，例如茶氨酸、茶黄素、茶树花精油和茶皂素的质量比可以为(1、1.5或者2等)：(2、2.5或3等)：(0.5、0.8或1等)：(1.5、2、2.5、3、3.5或4等)。

本发明的调节菌群的含茶组方牙膏，该牙膏含有茶叶和茶树花中多种天然抑菌成分，通过配伍协同，使得获得的牙膏具有显著的抑菌作用，能够降低混合菌生物膜中的致龋菌(s.mutans、p.gingivalis)及其生物膜。本发明的发明人通过体外实验后发现，经过为期一个月的人群试用结果表明，通过诱导口腔菌斑和唾液中微生物的种类和丰度变化，口腔中与健康相关的微生物属streptococcus,actinomyces,rothia,fusobacterium,corynebacterium和lautropia显著增加，而条件致病菌prevotella,selenomonas,haemophilus,capnocytophaga,granulicatella和bergeyella明显下降，可见本发明的调节菌群的含茶组方牙膏对于口腔菌群的平衡具有良好的效果。

在本发明的一些优选实施方式中，所述茶氨酸、茶黄素、茶树花精油和茶皂素的质量比为(1.2-1.5)：(2.5-3.0)：(0.8-1.0)：(2.0-3.0)。

在本发明的一些实施方式中，所述含茶组方牙膏还包括保湿剂、胶黏剂、甜味剂、防腐剂、表面活性剂、摩擦剂以及增稠剂中的至少一种。由此，利于改善牙膏的外观或者使用性能。

在本发明的一些实施方式中，所述含茶组方牙膏包括茶叶提取物1-5.5(例如可以为1、2、3、4、5或者5.5等)重量份和茶树花精油0.5-1(例如可以为0.5、0.6、0.7、0.8、0.9或者1等)重量份，还包括具有以下重量份的组分中的至少一种：保湿剂28-40(例如可以为28、30、34、36、38或者40等)份、胶黏剂0.2-0.3(例如可以为0.2、0.22、0.24、0.26、0.28或者0.3等)份、甜味剂0.15-0.5(例如可以为0.15、0.2、0.3、0.4或者0.5等)份、防腐剂0.03-0.05(例如可以为0.03、0.035、0.04、0.045或者0.05等)份、摩擦剂2-4(例如可以为2、2.5、3、3.5或者4等)份、以及增稠剂7-8(例如可以为7、7.5或者8等)份。

在本发明的一些实施方式中，所述含茶组方牙膏包括茶叶提取物1-5.5重量份、茶树花精油0.5-1重量份、保湿剂28-40份、胶黏剂0.2-0.3份、甜味剂0.15-0.5份、防腐剂0.03-0.05份、摩擦剂2-4份、增稠剂7-8份以及余量的水，且各组分的重量份之和为100重量份。由此，上述组分之间合理配伍，获得的牙膏具有显著的抑菌效果，可以有效调节口腔菌群。

在本发明的一些实施方式中，所述茶树花精油被包埋剂包埋。由此，通过包埋茶树花精油可以使得茶树花精油缓慢释放，提高了生物利用度，清新口腔作用持久。

在本发明的一些实施方式中，所述包埋剂与所述茶树花精油的质量比为3:1-9:1(w/w)(例如可以为3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1或者9:1等)。相对于上述质量比范围，当包埋剂与茶树花精油的质量比过大时，则导致包埋剂过量，当包埋剂与茶树花精油的质量比过小时，则导致部分茶树花精油不能被完全包埋。

需要说明的是，前面所述的茶树花精油的含量指的可以是纯茶树花精油的含量，也可以是被包埋剂包埋的茶树花精油的含量。

在本发明的一些实施方式中，所述包埋剂包括环糊精、变性淀粉、壳聚糖、海藻酸钠、阿拉伯胶、明胶、纤维素类、高分子材料聚乙烯、聚甲基丙烯酸酯和聚乙烯醇中的至少一种。

在本发明的一些实施方式中，所述保湿剂包括山梨醇、甘油、聚乙二醇、甜菜碱和葡糖胺聚糖中的至少一种；优选地，所述胶黏剂包括羧甲基纤维素钠、海藻酸钠和壳聚糖中的至少一种；优选地，所述甜味剂包括木糖醇和/或d-塔格糖；优选地，所述防腐剂包括苯甲酸钠和/或苹果酸钠；优选地，所述摩擦剂包括摩擦型二氧化硅；优选地，所述增稠剂包括增稠型二氧化硅。由此，上述材料来源广泛，利于改善牙膏的外观、味道或者使用性能。

可以理解的是，摩擦型二氧化硅的颗粒粒径大于增稠型二氧化硅的颗粒粒径。

在本发明的一些实施方式中，所述甜味剂包括木糖醇和d-塔格糖，且木糖醇和d-塔格糖的质量比为(0.1-0.3)：(0.05-0.2)，例如木糖醇和d-塔格糖的质量比可以为(0.1、0.2或者0.3等)：(0.05、0.1、0.15或者0.2等)。相对于上述质量比范围，当木糖醇和d-塔格糖的质量比过大时，则甜度过高，口感舒适度降低，当木糖醇和d-塔格糖的质量比过小时，则茶叶提取物的收敛性较高，口感舒适度变差。

本发明的含茶组方牙膏，外观晶莹剔透、泡沫细腻、原料天然、温和不刺激，膏体ph值为6.84，符合《gb8372-2008牙膏》标准，茶叶提取物和茶树花精油具有显著的体外协同抑菌作用，同时降低菌斑(生物被膜)含量。人群实验表明，使用该牙膏1个月，口腔菌斑和唾液中的条件致病菌丰度有效减低。

在本发明的另一方面，本发明提供了一种前面述的含茶组方牙膏的制备方法，包括：将茶叶提取物和茶树花精油混合，得到所述含茶组方牙膏；优选地，将将茶叶提取物和茶树花精油与保湿剂、胶黏剂、甜味剂、防腐剂、表面活性剂、摩擦剂以及增稠剂中的至少一种混合，得到所述含茶组方牙膏。

在本发明的一些实施方式中，上述制备方法包括：

将保湿剂和胶黏剂混合，得到混合物；

将茶叶提取物、任选地甜味剂、任选地防腐剂与水混合，得到混合溶液；

将所述混合溶液与混合物混合，得到胶体溶液；

在所述胶体溶液中加入茶树花精油，得到所述含茶组方牙膏。

在本发明的一些实施方式中，在无气泡的所述胶体溶液中加入增稠剂和摩擦剂，得到膏体；在所述膏体中加入茶树花精油，得到所述含茶组方牙膏。

需要说明的是，茶叶提取物、茶树花精油、保湿剂、胶黏剂、甜味剂、防腐剂、表面活性剂、摩擦剂以及增稠剂与前面的描述一致，在此不再过多赘述。

在本发明的另一些实施方式中，上述制备方法包括：

将保湿剂和胶黏剂混合，得到混合物；

将茶氨酸、茶黄素、任选地甜味剂、任选地防腐剂与水混合，得到混合溶液；

将所述混合溶液与混合物混合，得到胶体溶液；

在所述胶体溶液中加入茶皂素和茶树花精油，得到所述含茶组方牙膏。

在本发明的一些实施方式中，在无气泡的所述胶体溶液中加入茶皂素、增稠剂和摩擦剂，得到膏体；在所述膏体中加入茶树花精油，得到所述含茶组方牙膏。

在本发明的一些实施方式中，所述保湿剂是通过以下方法制备得到的：将山梨醇溶液与甘油混合后加热至44-46℃(例如可为44℃、45℃或者46℃等)。由此，获得保湿剂的效果较佳。

在本发明的一些实施方式中，所述山梨醇溶液的质量浓度为65-75％(例如可以为65％、70％或者75％等)。

在本发明的一些实施方式中，所述制备方法还包括：对膏体与茶树花精油的混合物依次进行破碎和冷却分装，得到所述含茶组方牙膏。

在本发明的一些实施方式中，上述破碎的方式包括对膏体与茶树花精油的混合物进行研磨均质10min，使得得到的膏料细腻光亮。

在本发明的一些实施方式中，上述冷却分装的步骤包括：将破碎处理得到的膏料稳定静置2h，使物料充分膨胀，形成均相粘合体，灭菌分装。

在本发明的一些具体实施方式中，制备含茶组方牙膏的制备方法包括以下步骤：

a)制备保湿剂：以质量份计，取70％山梨醇溶液25-30份，取甘油3-5份，搅拌均匀，加热至45℃；

b)制备胶黏剂：取0.2-0.3份羧甲基纤维素钠缓慢加入a)中的保湿剂中，至完全溶解；

c)制备水溶液：取余量的去离子水，加入食品级甜味剂木糖醇0.1-0.3份、d-塔格糖0.05-0.2份，防腐剂苯甲酸钠0.03-0.05份，然后再加入按一定比例复配的功效组分(茶氨酸、茶黄素)0.5-2.5份，搅拌至完全溶解；

d)胶体溶液制备：待步骤b)所得胶黏剂冷却后，将c)所得的水溶液加入b)中，搅拌均匀；

e)加入混料：待步骤d)所得胶体溶液冷却无气泡后，缓慢加入摩擦型二氧化硅2-4份，增稠型二氧化硅7-8份和精制茶皂素07-1.2份的混料，得到膏体；

f)加入精油：在步骤e)所得的膏体中按一定比例加入茶树花精油0.5-1份；茶树花精油用环糊精包埋，环糊精和精油比例3:1-9:1；

g)研磨：将步骤f)所得的膏体研磨均质10min，使膏料细腻光亮；

h)冷却分装：稳定静置2h，使物料充分膨胀，形成均相粘合体，灭菌分装。

在本发明的另一些具体实施方式中，制备含茶组方牙膏的制备方法包括以下步骤：

a)制备保湿剂：以质量份计，取70％山梨醇溶液25-30份，取甘油3-5份，搅拌均匀，加热至45℃；

b)制备胶黏剂：取0.2-0.3份羧甲基纤维素钠缓慢加入a)中，至完全溶解；

c)制备水溶液：取余量的去离子水，加入食品级甜味剂木糖醇0.1-0.2份，防腐剂苯甲酸钠0.03-0.05份，然后再加入按一定比例复配的茶叶提取物0.1-0.4份，搅拌至完全溶解；优选地，茶氨酸：茶黄素：茶树花精油：茶皂素比例为1:2:0.5:1.5；

d)胶体溶液制备：待步骤b)所得胶黏剂冷却后，将c)所得的水溶液加入b)中，搅拌均匀；

e)加入混料：待步骤d)所得胶体溶液冷却无气泡后，缓慢加入摩擦型二氧化硅2-4份，增稠型二氧化硅7-8份和表面活性剂0.7-1.2份的混料，得到膏体；

f)加入香精：在步骤e)所得的膏体中按一定比例加入茶树花精油0.5-1份；茶树花精油用环糊精包埋，环糊精和精油比例3:1-9:1；

g)研磨：将步骤f)所得的膏体研磨均质10min，使膏料细腻光亮；

h)冷却分装：稳定静置2h，使物料充分膨胀，形成均相粘合体，灭菌分装。

利用本发明的上述方法制备得到的调节菌群平衡的含茶组方牙膏，具有显著的抑菌功效，可应用于日常口腔护理。

一种前面所述的含茶组方牙膏在制备调节菌群的产品中的应用。

下面将结合实施例和对比例对本发明的技术方案进行进一步地说明。

实施例

需要说明的是，若无特殊说明，在下述实施例和对比例中各组分的含量均为重量份，例如实施例1中的茶氨酸17份指的是茶氨酸的含量为17重量份。

实施例1

分别取茶氨酸、茶黄素以及茶氨酸+茶黄素的复合物(茶氨酸与茶黄素质量比为1:2)各17份，分别在上述茶氨酸、茶黄素以及茶氨酸+茶黄素复合物中加入茶皂素2份以及包埋茶树花精油1份，分别配置为20.0mg/ml的三种母液(分别标记为茶氨酸+茶皂素+茶树花精油、茶黄素+茶皂素+茶树花精油、茶氨酸+茶黄素+茶皂素+茶树花精油)，对该三种母液分别依次倍比稀释获得溶解，按照倍比稀释法依次获得终浓度2.5mg/ml、1.25mg/ml、0.625mg/ml、0.3125mg/ml的含有茶叶提取物的bhi液体培养基溶液，将混合菌(s.mutans/s.sanguinis/p.gingivalis＝2:2:3)培养液按1％的浓度(其中，1％的浓度指的是按培养基的体积，加入1％重量份的混合菌液)分别加入上述含茶叶提取物的bhi培养基，以不含茶叶提取物的自然生长组为阴性对照，37℃厌氧(90％n2,5％co2,5％h2)培养12h，涂布培养48h，进行菌落计数，评价体外抑菌效果，结果见图1。

其中，包埋茶树花精油是通过以下方法制备得到的：环糊精为壁材，茶树花精油为芯材，芯材/壁材比例＝1:(3-5)，喷雾干燥，进风温度120℃，出风温度75℃，即得到包埋茶树花精油。

实施例2

调节菌群的含茶组方牙膏的制备方法包括以下步骤：

(1)制备保湿剂：以质量份计，取70％山梨醇溶液25份，甘油5份，混匀，加热至45℃；

(2)制备胶黏剂：取0.2份羧甲基纤维素钠缓慢加入(1)中，至完全溶解；

(3)制备水溶液：取余量去离子水，加入食品级甜味剂木糖醇0.2份，d-塔格糖0.1份，防腐剂苯甲酸钠0.05份，茶氨酸、茶黄素各0.5份，搅拌至完全溶解；

(4)制备胶体溶液：待步骤(2)所得胶黏剂冷却后，将(3)所得的水溶液加入(2)中，搅拌均匀；

(5)制备配料：取摩擦型二氧化硅4份，增稠型二氧化硅7份，精制茶皂素1份，混合使用；

(6)制备缓释精油组分：茶树花精油用环糊精包埋，环糊精和茶树花精油质量比为5:1，茶树花精油浓度为2.0mg/ml；

(7)制备牙膏膏体：将步骤(5)所得的配料加入步骤(4)已制备好的胶体溶液中，再加入步骤(6)所得的缓释精油配料0.5份，制得含茶组方牙膏。

实施例3

调节菌群的含茶组方牙膏的制备方法包括以下步骤：

(1)制备保湿剂：以质量份计，取70％山梨醇溶液25份，甘油5份，混匀，加热至45℃；

(2)制备胶黏剂：取0.2份羧甲基纤维素钠缓慢加入(1)中，至完全溶解；

(3)制备水溶液：取余量去离子水，加入食品级甜味剂木糖醇0.2份，d-塔格糖0.1份，防腐剂苯甲酸钠0.05份，茶氨酸0.3份、茶黄素0.7份，搅拌至完全溶解；

(4)制备胶体溶液：待步骤(2)所得胶黏剂冷却后，将(3)所得的水溶液加入(2)中，搅拌均匀；

(5)制备配料：取摩擦型二氧化硅4份，增稠型二氧化硅7份，精制茶皂素1份，混合使用；

(6)制备缓释精油组分：茶树花精油用环糊精包埋，环糊精和精油比例5:1，精油浓度为1.0mg/ml；

(7)制备牙膏膏体：将步骤(5)所得的配料加入步骤(4)已制备好的胶体溶液中，再加入步骤(6)所得的缓释精油配料0.5份，制得含茶组方功效牙膏。

实施例4

本实施例制备含茶组方牙膏的方法同实施例2，不同之处在于茶氨酸的含量为1.3重量份，茶黄素的含量为2重量份，茶树花缓释精油的含量为0.6重量份，茶皂素的含量为1重量份。

对比例1

本对比例制备含茶组方牙膏的方法同实施例2，不同之处在于茶氨酸的含量为0.1重量份，茶黄素的含量为2重量份，茶树花缓释精油的含量为0.6重量份，茶皂素的含量为1重量份。

对比例2

本对比例制备含茶组方牙膏的方法同实施例2，不同之处在于茶氨酸的含量为2重量份，茶黄素的含量为2重量份，茶树花缓释精油的含量为0.6重量份，茶皂素的含量为1重量份。

对比例3

本对比例制备含茶组方牙膏的方法同实施例2，不同之处在于茶氨酸的含量为1.3重量份，茶黄素的含量为0.1重量份，茶树花缓释精油的含量为0.6重量份，茶皂素的含量为1重量份。

对比例4

本对比例制备含茶组方牙膏的方法同实施例2，不同之处在于茶氨酸的含量为1.3重量份，茶黄素的含量为3重量份，茶树花缓释精油的含量为0.6重量份，茶皂素的含量为1重量份。

对比例5

本对比例制备含茶组方牙膏的方法同实施例2，不同之处在于茶氨酸的含量为1.3重量份，茶黄素的含量为2重量份，茶树花缓释精油的含量为0.1重量份，茶皂素的含量为1重量份。

对比例6

本对比例制备含茶组方牙膏的方法同实施例2，不同之处在于茶氨酸的含量为1.3重量份，茶黄素的含量为2重量份，茶树花缓释精油的含量为1重量份，茶皂素的含量为1重量份。

试验例1

将混合菌(s.mutans/s.sanguinis/p.gingivalis＝2:2:3)接种到立体牙片(直径4mm)上，置于含有bhi液体培养基(其中，bhi液体培养基的制备方法为：称量52.0gbhi加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15min)的24孔板中，37℃厌氧培养48h形成混合生物被膜。其中s.mutans、p.gingivalis为条件致病菌，s.sanguinis为口腔有益菌。

按实施例2、实施例4以及对比例1-6的方法制备牙膏，不同之处在于配方组含有茶叶提取物等配方组分，其他组则不含或为常规配方，分别取上述牙膏以及实施例2、实施例4以及对比例1-6获得的牙膏各1重量份用5重量份1×pbs缓冲液(100ml的10×pbs用去离子水稀释，1×pbs缓冲液的组成为：1.2％na2hpo4，0.18％nah2po4，8.5％nacl，ph＝7.4)搅拌溶解成浆液，将培养48h的混合菌膜(即上述混合生物被膜)转入含有上述牙膏的24孔板中，处理24h，结晶紫染色5min，用pbs将生物膜洗涤(不搅拌)3次，去除残留的牙膏浆液，595nm处测定吸光值，同步将细胞膜超声破碎离心后取沉淀，涂平板计数，结果见表1和图2(图2中配方组对应实施例2)。

表1混合生物膜生物量和膜内微生物生存力的定量分析

注：表1和图2中的a、b、c代表在p<0.05水平上有显著差异，下同。

试验例2

利用实施例2所得的含茶组方牙膏(标记为配方组)与含氟化钠牙膏(标记为含氟组)、对照组牙膏(标记为空白对照组，其中，对照组牙膏的具体组成见表5)，进行随机试用实验，实验前后分别取受试人员的唾液中变链菌进行分析，结果见表2。

表2受试人群使用不同牙膏实验前后唾液中s.mutans数量的变化

注：表2中的a、b、c代表在p<0.05水平上有显著差异。

试验例3

利用实施例3所得的含茶配方牙膏和对照组牙膏，进行为期1个月的人群使用实验，实验前后分别取受试人员的唾液和菌斑进行16srrna分析，结果见图3、图4、表3和表4。

表3使用配方组牙膏前后受试人群唾液中显著变化的微生物种属

表4使用配方组牙膏前后受试人群菌斑中显著变化的微生物种属

表5试验例2、3中对照组牙膏的具体组成

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。