本发明属生物医学领域，涉及过敏原检测技术，具体涉及一种过敏原斑贴试验诊断盒及其制备方法，尤其是一种吸入性、食入性过敏原斑贴试验诊断盒及变应原及其制备方法。
背景技术：
现有技术公开了过敏即外来抗原解读为有害的物体如，细菌、花粉、尘螨、蟑螂、灰尘等产生的变态反应。变态反应使免疫细胞中的巨噬细胞活化，释放出组织胺和前列腺素，致使微血管扩张、血管通透性增加、发痒、平滑肌收缩和反射作用等的作用；临床表现的症状主要为过敏性鼻炎、过敏性哮喘、过敏性肠胃炎以及湿疹、荨麻疹、斑疹、丘症、划痕症、异位性皮炎、风团皮症、皮肤瘙痒等过敏性皮肤病。临床实践中的检测手段，包括血清中过敏原特异性ige的检测，皮肤点刺的体内过敏原检测方法等，但所述方法存在缺点，如，可能引起体内的免疫反应，检测时间长需要的血清相对比较多，等等；被检者不易接受。
有报道公开了微流控芯片技术(microfluidics)，以及蛋白质芯片(proteinarray)高通量的蛋白特征分析技术等，需特定的检测设备及系列生化检测流程等。
基于现有技术的基础与现状，本申请的发明人拟提供一种过敏原斑贴试验诊断盒及其制备方法，尤其是一种吸入性、食入性过敏原斑贴试验诊断盒及变应原及其制备方法。
技术实现要素：
本发明的目的在于基于现有技术的基础与现状，提供一种过敏原无创检测技术，具体是一种过敏原斑贴试验诊断盒及其制备方法，尤其是一种吸入性、食入性过敏原斑贴试验诊断盒及其制备方法。
通常，过敏患者的皮肤或粘膜接触致敏物质时，致敏物质通过皮肤或粘膜进入机体，并由抗原呈递细胞将抗原呈递给t淋巴细胞，使特异性t淋巴细胞活化，诱发炎症反应；
本发明采用柔软及弹性材质为斑贴试验载体，载体上设置测试斑贴点，测试斑贴点上包被所需检测的过敏原浸液膏，制成斑贴胶带以及斑贴试验诊断盒。
本发明的实施例中采用纸质或布质材质制备斑贴试验载体及制成斑贴胶带。
本发明中，将可疑的需被检测的致敏物质配置成特定浓度变应原浸液及浸液膏，加载于检测点并敷贴于人体遮盖部位，如后背、前臂屈侧等，经过一定时间，根据有否阳性反应确定受试物是否系致敏物质。
本发明中，所述的特定浓度变应原浸液包括花粉变应原，昆虫变应原，羽毛变应原，动物毛变应原，谷类变应原，蛋类变应原，肉类变应原，水产类变应原，乳类变应原，水果类变应原，干果及油料作物变应原，香烟烟变应原浸液，等；分别制成浸液膏后备用。
本发明制成的斑贴胶带包装成盒，制成斑贴试验诊断盒，包装规格为10人份/盒、50人份/盒、100人份/盒、200人份/盒。100人份/盒，4～30℃避光保存。
本发明提供了变应原提取液的配置方法，其包括：
1.缓冲盐水提取液(bufferedsalinesolutionph:8)
配方：
氯化钠a.r.5.0克
磷酸二氢钾a.r.0.36克
磷酸氢二钠a.r.7.0克
结晶酚a.r.4.0克
蒸馏水1000毫升
将上述药品混匀,在水浴锅中微热,待完全溶解后测定ph,如低于8或高于8,可用10n氢氧化钠或盐酸调节，室温下贮存备用。
或，
2.碳酸氢盐-盐水提取液[bicarbonatesalinesolutioncoca'ssolution)ph;8.2]
配方：
氯化钠a.r.5.6克
碳酸氢钠a.r.275克
结晶酚a.r.4.0克
蒸馏水1000毫升
待药品完全溶解后测定并调节ph至8.2，室温下贮存备用。
上述提取液可选择使用。
本发明还提供了阳性对照，其中，
盐酸∶磷酸＝0.6∶1
盐酸组胺含组胺111/184＝0.6
磷酸组胺含组胺111/325＝0.34
每克磷酸组胺加28.5毫升蒸馏水；28.5毫升甘油
阴性对照：
50%生理盐水加50%甘油。
本发明的斑贴试验诊断盒使用时，将制成的变应原浸液膏加载于检测点并敷贴于人体遮盖部位，常用于在后背、前臂屈侧，经过一定时间，根据有否阳性反应确定受试物是否系致敏物质。
使用方法包括：试验部位：上背部脊柱两侧或前臂屈侧的正常皮肤；
将受检部位皮肤清洗干净（去除油脂），并擦干；去除斑贴胶带的保护纸，将含有低分子化合物的斑贴胶带自下向上贴牢、贴平并用手掌轻轻压几下，以便排出空气；斑贴试验时间：12～24小时；观察结果时间：贴敷后12～24小时，首先去除斑贴胶带，为避免检测点压迫皮肤所可能造成的反应，应在去除斑贴胶带至少30分钟后观察结果。
结果判断：
（问号）————可疑反应；仅有微弱的（不清楚的）红斑。
（＋）————弱（无疱的）阳性反应；红斑、浸润、可能有小红疹。
（＋＋）————强（水疱）阳性反应；红斑、浸润、丘疹非小水疱。
（＋＋＋）————极度的阳性反应；红肿并有大疱。
（－）————无反应。
（ir）————不同类型的刺激反应。
（nt）————未试验。
经使用，结果显示，所述斑贴胶带操作使用方便，安全性，准确性好，特定浓度变应原浸液膏受体温影响可转换成液状，液体吸收性好并能保证受检物的持续有效释放，受检的皮肤部位反应敏感性和准确性好，检测时间更短，适用于检测接触性皮肤过敏，如，不同原因接触引起的、多发生在表皮及粘膜上的变态反应性过敏或者接触性皮炎、湿疹等病因检查。
本发明提供了一种过敏原斑贴试验诊断盒及其制备方法，尤其是一种吸入性、食入性过敏原斑贴试验诊断盒及其制备方法。适用于检测接触性皮肤过敏，如，不同原因接触引起的、多发生在表皮及粘膜上的变态反应性过敏或者接触性皮炎、湿疹等病因检查，且使用方便，安全性，准确性好。
具体实施方式
实施例1花粉变应原浸液的制备
材料的收集及处理方法：
取法国梧桐、棕榈、蒿属、油菜、豚草、葎草、玉米等，苯、甲苯、乙醚各去脂一次约4-5小时,乙醚用量以没过花粉2-3倍为宜；
变应原浸液的制备方法：
1)蒿属、豚草、法国梧桐、棕榈、蒿属、油菜、豚草、葎草、玉米等去脂花粉按1:25比例(1克花粉加25毫升提取液)加入碳酸氢盐-盐水提取液;其余花粉均按1:20比例(1克花粉加20毫升提取液)加入碳酸氢盐-盐水提取液提取,在冰箱内提取72小时提取过程中每天振荡或搅拌2小时；
2)提取完成后,常压过滤澄清液体；花粉提取材料较粘稠可先使用离心法分离再用常压过滤,或使用布氏漏斗抽滤；
3)测定和校正ph，为7；
4）经消毒蔡氏滤器除菌过滤后，于无菌操作下分装于灭菌疫苗瓶中；
5)每瓶抽取1毫升样品进行细菌和霉菌灭菌检查；
6）取小白鼠5只,于每只腹腔注射0.5毫升花粉变应原原液，观察喂养一周，无死亡后即可应用；
7)无菌操作下抽取2毫升原液进行蛋白氮测定；
8)贴标签，上批号，填好制备记录单,放入零上4-6℃冰箱冷藏备用。
实施例2昆虫变应原浸液的制备
取蟑螂、蛾、家蝇、蚊等；
材料的处理方法：
1)将蟑螂、蛾、家蝇、蚊等材料灭活在室温下自然干燥,然后用组织捣碎机初步打碎；
2)加入丙酮去脂一次约4小时,倒掉带脂丙酮，取出材料，在毒气橱内待残余丙酮挥发干净后,再用组织捣碎机打碎,通过3号筛或4号筛，使成粉末状,最后再用乙醚去脂2次，约6-7小时；
3)将去脂材料放入玻璃瓶内密闭贮存，勿使受潮；
制备变应原浸液
1)各种昆虫去脂材料一律按1∶50比例(1克去脂昆虫干粉加50毫升提取液)加入碳酸氢盐-盐水提取液:
2)在冰箱内提取72小时,提取过程中每天振荡或搅拌2小时稀释后即可用；
3)常压过滤澄清液体后,测定和校正ph至7；
4)除菌过滤，分装于疫苗瓶中；
5)于每瓶抽取1毫升样品，分别接种于肉汤和沙氏培养基内进行细菌和霉菌检查；
6)各种昆虫变应原浸液在第一次应用于临床前均应作小白鼠毒性试验,蛾、蟑螂材料在每次更换批号后均应重新作毒性试验；
7)抽取样品,进行蛋白氮测定
8贴好标签,填写好制备记录单，放冰箱冷藏备用。
实施例3羽毛变应原浸液的制备
取鸡毛、鸭毛、鸽毛等；
材料的收集及处理方法
1)直接从家禽或鸽鸟身上采取用清水洗去羽毛上的污垢；
2)用剪刀尽可能将材料剪碎；
3)乙醚去脂1次，约4小时；
制备变应原浸液
1)取去脂剪碎羽毛按1∶15比例(1克材料加15毫升提取液)加入碳酸氢盐-盐水提取液；
2)放入冰箱提取72小时,提取过程中每天搅拌2小时；
3)取多层干净纱布用蒸馏水打湿，挤出汁液，进行常压过滤，澄清液体,测定和校正ph至7；
4)除菌过滤，分装于无菌疫苗瓶中；
5)抽取样品,进行细菌和霉菌灭菌检查；
6)第一次用于临床前应作小白鼠毒性试验；
7)抽取样品，进行蛋白氮测定；
8贴好标签，打上批号,填写好制备记录单，放入零上4-6℃冰箱中冷藏备用。
实施例4动物毛变应原浸液的制备
取猫毛、狗毛等；
材料的收集及处理方法：
1)用剪刀或剪毛器直接从动物身上采取,已经过加工或改制过的毛制品材料,不宜使用，动物皮屑可用梳、刷等工具采取；
2)用剪刀尽可能将材料剪碎；
3)乙醚去脂1次约4小时；
制备变应原浸液
1)去脂动物毛及皮屑均按1:15比例(1克材料加15毫升提取液)加入碳酸氢盐-盐水提取
液
2)在冰箱中提取72小时,提取过程中每天搅拌2小时
3)用多层纱布挤出汁液常压过滤澄清液体,测定和校正ph至7；
4)除菌过滤分装于疫苗瓶中；
5)抽取样品进行细菌和霉菌灭菌检查；
6)第一次用于临床前应作小白鼠毒性试验；
7)抽取样品进行蛋白氮测定；
8)贴标签上批号填写制备记录单放入零上4-6℃冰箱中冷藏备用
实施例5谷类变应原浸液的制备
取玉米、小麦、大麦、小米、大米等；
材料的收集及处理方法:
1)各种谷粒可用电动粉碎机粉碎再通过3号或4号筛;也可直接使用市售面粉
2)乙醚去脂1次约4小时；
制备变应原浸液:
1)各种去脂粉状谷类均按1:10比例(1克材料加10毫升提取液)加入缓冲盐水提取液；
2)在冰箱内提取48小时,提取过程中每天振荡或搅拌2小时；
3)因液体粘稠,先使用布氏漏斗加滤纸抽滤再常压过滤；
4)测定和校正ph至7；
5)除菌过滤分装于疫苗瓶中；
6)抽取样品,进行细菌灭菌检查及蛋白氮测定；
7)贴标签打批号,填写制备记录单放入零上4-6℃冰箱中冷藏备用；
实施例6蛋类变应原浸液的制备
材料的收集及处理方法:
取鸡蛋等，
1)取鲜蛋用水冼净然后将蛋的两端各打一小洞使端朝下蛋白即从下面孔洞缓缓流出用量筒接取并记录液量,如引流不畅也可使用5毫升或10毫升空针(去掉针头)抽取蛋白；
2)制备蛋黄变应原必须把蛋白去除干净记录液量,蛋黄亦可制成粉状,方法是将蛋黄放于三角烧瓶内充分搅碎，然后加入适量的丙酮去脂，约2-3小时,丙酮浸泡过程中不断摇动烧瓶,去脂完毕,倾去带脂丙酮待蛋黄中残余丙酮挥发后，用打碎机打碎,最后用乙醚去脂1次约4小时,贮存备用；
制备变应原浸液:
1)蛋清按1:20比例(1毫升蛋清加20毫升提取液)加入缓冲盐水提取液稀释,不须提取,蛋黄去脂干粉按1:50比例加入缓冲盐水提取液提取48小时;
2)清蛋白溶液粘稠过滤困难,以使用减压过滤为宜；
3)测定和校正ph至6.5,蛋类制品在贮存过程中易产生絮状沉淀,因此调低ph有助于延缓沉淀物产生
其余步骤同前。
实施例7肉类变应原浸液的制备
取牛肉、鸡肉等；
材料的收集及处理方法：
1)取新鲜瘦肉,用清水洗净,去除脂肪和结缔组织,用刀剁碎或打碎机打碎；
2)交替使用丙酮、甲苯或二甲苯,乙醚反复去脂和自然于燥、打碎、过筛使最后制成通
过3号或4号筛的去脂干粉；
制备变应原浸液
1)各种肉类去脂粉剂均按1:25比例(1克材料加25毫升提取液)加入缓冲盐水提取液；
2)在冰箱内提取48小时,提取过程中每天振荡或搅拌2小时；
3)先用多层纱布滤除沉淀物,再常压过滤澄清液体；
4测定和校正ph至6.5,肉类制品在冷藏过程中易产生沉淀故将ph调低；
其余步骤同前。
实施例8制备水产类变应原浸液
取带鱼、海蟹、海虾等；
材料的收集及处理方法：
1取新鲜材料用水洗净,刮去鱼鳞及表皮组织去掉内脏和鱼骨虾、蟹、贝类要去除外壳；
2)用刀剁碎或打碎机打碎后,交替使用丙酮、甲苯或二甲苯、乙醚反复去脂和自然干燥，
打碎使最后制成通过3号筛或4号筛的去脂于粉；
制备变应原浸液：
1)肉类及水产类粉剂去脂材料均按1：25比例(1克材料加25毫升提取液)加入缓冲盐水提
取液;
其余步骤同前。
实施例9乳类变应原浸液的制备
取牛奶等；
材料的收集及处理方法：
1)使用未经加工、改制和巴氏灭菌的新鲜乳液,用离心法(2400-3200转/分)离心15分钟
此时乳液中的脂肪均浮于离心管表面用小药匙轻轻将脂肪层除掉；
2)取400毫升去脂乳液加入5毫升1%凝乳酶或乳胨片(1%凝乳酶或乳胨片配制方法;称
0.5克凝乳酶或乳胨片加入50毫升蒸馏水充分溶解后即成,勿搅拌或摇动,放入37℃恒温
水浴中30分钟此时乳清与凝结变酸的奶分开;
3)用多层纱布过滤所得滤液为乳清含有白蛋白;留在纱布中的沉淀物为酪蛋白；
4)将含有白蛋白的乳清滤液加入三倍丙酮放入冰箱(室温下亦可)24小时乳白蛋白被沉淀出，用离心法(2400转/分)离心15分钟移走丙酮,待材料残余丙酮挥发干净,研磨成粉状，
最后用乙醚去脂1次约3-4小时,密闭贮存备用；
5)酪蛋白含脂较多需用丙酮、乙醚交替去脂3-4次并且每去一次脂均进行一次粉碎
后使成为通过3号或4号筛的粉状物；
制备变应原浸液
使用乳清滤液制备时按1：2比例(1毫升乳清加2毫升提取液)加入缓冲盐水提取液稀释
不须提取;使用乳白蛋白和酪蛋白去脂粉剂制备时均按1:50比例(1克粉剂材料加50毫升
提取液)加入缓冲盐水提取液,在冰箱中提取48小时,提取过程中每天振荡或搅拌2小时；
其余步骤同前。
实施例10水果类变应原浸液的制备
取苹果、草莓、香蕉、芒果等；
材料的收集及处理方法:
取新鲜水果,洗净后去掉外皮及核,用组织捣碎机打成果酱;
多汁水果亦可挤出其汁液制备；
制备变应原浸液：
打碎的果酱按1:1比例加入缓冲盐水提取液提取48小时;果汁按2:1(2毫升果汁加1毫
升提取液)加入汁液提取液稀释；
其余步骤同前。
实施例11干果及油料作物变应原浸液的制备
取花生、大豆等；
材料收集及处理方法：
1)取生的、未经加工的材料,带皮者必须去掉皮壳用打碎机打碎；
2)用甲苯、丙酮、乙醚交替去脂打碎使最后成为通过3号或4号筛的去脂干粉制备变应原浸液；
制备变应原浸液：
1)各种去脂粉剂均按1:25比例(1克材料加25毫升提取液加入缓冲盐水提取液；
2)在冰箱内提取48小时,提取过程中每天振荡或搅拌2小时；
3)常压过滤澄清液体,滤液如不清亮,可用分液漏斗加乙醚再去脂；
其余步骤同前。
实施例12香烟烟变应原浸液的制备
材料的收集及处理方法：
1)选取上、中、下三种质量的市售香烟混合使用；
2)准备香烟嘴或似香烟粗细的小玻璃管一个吸引器瓶(500或1000毫升)2个以及橡胶管、止血钳等。将烟嘴或小玻璃管与一根约5厘米长的橡胶管连接胶管的另一头连接在第个吸引器瓶塞上的弯玻璃管上,此为进口玻璃管内端通过瓶塞直插到瓶底;在瓶上的第二根弯玻璃管出口再接一根约35厘米左右橡胶管与第二个吸引器瓶塞上的弯玻璃管进口相连弯玻璃管内端亦插到瓶底;同时再取一根橡胶管,一头接第二个吸引器瓶上的另一弯玻璃管出口,一头接通真空泵；
制备变应原浸液:
1)按1:2比例(1支香烟加2毫升提取液)加入缓冲盐水提取液将提取液同时放入两个引器瓶内第一个瓶内的提取液量应多于第二瓶如第一个瓶内若加入100毫升第二个瓶内加入60毫升即可;
2)将香烟安在烟嘴或小玻璃管上打开真空泵点燃香烟烟雾则被吸进瓶内的提取液中每燃尽一支香烟关闭真空泵或用止血钳夹住胶管待翱翔在提取液内的香烟烟雾稳定后,再打开真空泵点燃下一支,以此类推直至将所需的香烟全部燃尽;
3)将两个瓶内的提取液倒在一起,混匀后常压过滤；
4测定和校正ph至7；
5除菌过滤。分装于疫苗瓶中；
6每瓶抽取1毫升样品分别作细菌和霉菌灭菌检查;
7)第一次用于临床前应作小白鼠毒性试验;
8)抽取样品作蛋白氮测定;
9)全部器械用毕先用95%酒精浸泡再用肥皂水刷洗,去掉器皿上的烟油。
实施例13屋尘变应原浸液的制备
取卧室灰尘、纺织厂棉尘等；
材料的收集及处理方法：
1)用毛刷、小条帚轻轻扫在干净器皿内,最好使用小型吸尘器收集。收集时应由对屋尘或工业粉尘不过敏的人代为进行,以防引起发病。较好的，由医务人员自行收集,以保证材料质量，如果是患者及其家属收集材料,应在材料包装上注明患者姓名、病历号和收集地点；尤其是,无论何人收集,均不能收集带有油质、蜡质的材料,尤其切忌收集放有有毒物质的地方的材料；
2)屋尘收集地点应取自柜顶、家具上和床垫、沙发内长时间积落的灰尘,而不是从地面扫起的尘土；若在弹旧棉花厂收集,应取机器旁弹落下来的灰尘；面粉厂、纺织厂中的工业粉尘,可扫取车间机器旁及地面积落下来的材料,尤其应收集较长时间积落的陈旧粉尘；
材料的处理方法：
1)材料取回实验室后,首先应检查是否合乎要求,如发现质量较差或有可疑物质,应予废弃；
2)对检查合格的材料,先在室温下干燥,然后通或3号或4号筛,去除杂质；
3)灰尘及工业粉尘依次用甲苯、无水乙醇或95%酒精、乙醚各去脂一次,约4-5小时，倒掉带脂溶剂，待材料中的残余溶剂挥发干净后,放入玻璃瓶中,贴好标签,注明材料名称,放阴凉、避光处密闭贮存备用,勿使受潮；
制备变应原浸液:
1)取去脂材料,按1:5比例(1克材料加5毫升提取液)加入碳酸氢盐-盐水提取液。放冰箱提取72小时，在提取过程中,每天振荡或用电动搅拌机搅拌2小时；
2)提取完成后,先用多层纱布过滤,弃去沉淀物,再用布氏漏斗加多层滤纸使用负压抽滤,澄清液体；
3)称量和记录滤液数量,放入透析囊中透析24小时，使用碳酸氢盐-盐水提取液作为透析用溶液,每6小时更换溶液一次，透析完毕,再称量滤液量,如因盐析作用多出原量,应再将滤液倒入透析囊内,在室温下进行浓缩,直至达到原量；
4)测定和校正ph,使之达到7；
5)经消毒蔡氏滤器除菌过滤后,于无菌操作下分装于灭菌疫苗瓶中；
6)每瓶抽取1毫升样品,在无菌操作下,分别接种于庖内培养基(或肉汤培养基)和沙氏培养基内,进行细菌和霉菌灭菌检查；
7)灭菌检查阴性后,作小白鼠毒性试验，取5只17-22克的小白鼠,于每只腹腔注射0.5毫升屋尘或粉尘变应原原液,观察喂养一周,无死亡后即可应用；
8)无菌操作下抽取样品2毫升原液,进行蛋白氮测定；
9)贴好标签,打上批号,填写好制备记录单,放入零上4-6℃冰箱冷藏备用。
实施例14真菌变应原浸液的制备
取青霉菌、酵母菌等；
实验室收集及处理方法：
1)取实验室保藏菌种,先制片镜下鉴定菌种有无污染、变异或不育，。如无上述情况,于无菌操作下接种至液体培养基或固体培养基内，液体培养基用于接种丝状致敏真菌;固体培养基可用于接种少数强产毒真菌和致病真菌,防止污染；
2)于室温下进行培养，培养天数可视菌苔生长快慢而定,一般以孢子生长达到高峰为宜，在生长过程中,如发现有细菌或其它真菌污染,一律废弃；
3)待长成后,液体培养物可先摇动烧瓶,将孢子层打湿,避免倒出时孢子四处飞散，然后连同培养基将菌苔倒入3号筛,筛子放于水池内,用清水洗去菌苔上的残余培养基；
4)控去水分,将培养物浸泡在95%酒精内4小时灭活；
5)如果培养物使用的是固体培养基培养,则在长成后于每瓶内倒入少量甲苯或丙酮,1-2小时后,可以杀死和洗下瓶中的培养物；
6)倒掉酒精,将灭活菌苔摊开晾晒,使其自然干燥，固体培养基中的培养物连同甲苯或丙酮一同倒出,任其自然挥发后再收集培养物；
7)将干燥后的培养物放入组织捣碎机中打碎,使成粉末；
8)甲醇、乙醚各去脂一次,约4-5小时。密闭贮存备用；
制备变应原浸液：
1)所有真菌一律按1:25比例(1克去脂真菌干粉加25毫升提取液)加入碳酸氢盐-盐水提取液；
2)在冰箱中提取72小时，提取过程中每天振荡或搅拌2小时；
3)常压过滤,澄清液体；
4)测定和校正ph,使之达到7；
5)应用消毒除菌滤器除菌，分装于无菌疫苗瓶中；
6)每瓶抽取1毫升样品,分别接种于肉汤培养基和沙氏培养基内,进行细菌和霉菌灭菌检查；
7)各种真菌在第一次应用临床前,均应作小白鼠毒性试验；
8)抽取样品进行蛋白氮测定；
9)贴标签,上批号,填写制备记录,放入零上4-6℃冰箱贮存备用。
实施例15尘螨变应原浸液的制备
取户尘螨(实验室培养），
材料处理的方法：
1)丙酮灭活、清洗后,用多层纱布滤除丙酮，取留在纱布中的含螨材料,涂片镜检,以螨的含量在80%以上为合格；
2)将经镜检合格的材料,加入乙醚去脂一次(约4小时),即可密闭贮存备用；
变应原漫液的制备方法：
1)取去脂尘螨干粉按1:50比例(1克材料加50毫升提取液)加入碳酸氢盐-盐水提取液；
2)在冰箱内提取72小时。提取过程中,每天振荡或搅拌2小时；
3)常压过滤澄清液体；
4)测定和校正ph至7；
5)除菌过滤,分装于无菌疫苗瓶中；
6)抽取样品,进行细菌和霉菌灭菌检查；
7)第一次用于临床前,应作小白鼠毒性试验；
8)无菌抽取样品,进行蛋白氮测定；
9)贴标签,上批号,填写制备记录单,放入零上4-6℃冰箱冷藏备用。
实施例16纤维及谷类皮壳变应原浸液的制备
取棉絮、蚕丝等；
材料的收集方法：
1)蚕丝必须使用未经加工和改制的材料,通常均用蚕茧制备，因丝棉及丝制品已经过了热处理,不宜使用；
2)棉絮需选取新材料,提取其纤维中的有效成分，而使用日久的旧材料内含有大量的有机灰尘和各种微生物、螨等,已成为由多种成分构成的混合物，用该浸出液皮试所得的结果,不能作出对上述材料过敏的结论，如变应原浸液使用的是旧材料制备,需加以注明，脱脂棉不能用于棉絮材料提取；
制备变应原浸液：
1)各种纤维及谷类皮壳均按1:15比例(1克材料加15毫升提取液)加入碳酸氢盐-盐水提取液；
2)在冰箱内提取72小时，提取过程中每天搅拌2小时；
3)用多层纱布挤出汁液,常压过滤澄清液体，测定和校正ph至7；
4)除菌过滤,分装于疫苗瓶中；
5)抽取样品,进行细菌和霉菌灭菌检查；
6)第一次用于临床前,应作小白鼠毒性试验；
7)抽取样品进行蛋白氮测定；
8)贴标签,上批号,填写制备记录单,放入零上4-6℃冰箱中冷藏备用。