本发明涉及降糖技术领域，尤其是涉及降糖组合物及其制备方法和应用。
背景技术：
糖尿病是最常见的内分泌性疾病之一。它严重威胁人类健康，是继肿瘤、心血管疾病之后第三大慢性非传染性疾病，也是当前世界各国需要共同面对的公共健康问题。现有的糖尿病的治疗方法包括两大类，药疗和食疗。口服降糖药物、皮下注射胰岛素等药物治疗的方式虽然降血糖作用强、起效快，但往往缺乏整体的协调性、具有明显的副作用，并且成本较高，不利于糖尿病患者的长期使用。饮食疗法则是治疗各型糖尿病的基础，能降低血糖、减轻胰岛细胞的负担，与药物治疗同等重要，可减少和延缓并发症的发生。而无论是药疗还是食疗，都需要针对生物体从糖分的摄入到代谢中的一个或几个生理过程进行调整。
葡萄糖苷酶是生物体内糖代谢途径中的重要成员之一。根据水解糖苷键的类型不同，又可以分为α-葡萄糖苷酶和β-葡萄糖苷酶。其中，α-葡萄糖苷酶是一种存在于小肠黏膜细胞刷状缘的葡萄糖苷酶，它直接参与淀粉和糖原的代谢途径，对双糖具有水解作用，可促使进入小肠的碳水化合物形成单糖，被机体吸收。α-葡萄糖苷酶抑制剂可抑制糖的吸收，口服降糖药物中就有相关抑制剂产品，如阿卡波糖、伏格列波糖等。这些由抑制剂组成的降糖药通过抑制小肠黏膜α-葡萄糖苷酶的活性来延缓碳水化合物的吸收，降低餐后高血糖，从而达到治疗糖尿病的目的。
目前，化学或生物合成α-葡萄糖苷酶抑制剂或其它具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的产品的成本较高。因此，从天然产物中筛选具有抑制α-葡萄糖苷酶酶活的制剂，是治疗糖尿病以及降糖食品开发的热点。大量研究显示部分药食两用的食品如桑叶、玉竹、人参等对α-葡萄糖苷酶具有一定的抑制作用，虽然多与其他药食两用或者中药组方使用，但实际的降糖效果差强人意。所以，有必要尝试通过复配获得抑制α-葡萄糖苷酶酶活效果更好的降糖组合物。
技术实现要素：
本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种抑制α-葡萄糖苷酶酶活效果更好的降糖组合物及其制备方法和应用。
第一方面，本发明的一个实施例提供了一种降糖组合物，该降糖组合物由包括以下的原料制成：番石榴、桑叶、黑芝麻和玉竹。
本发明实施例的降糖组合物至少具有如下有益效果：
番石榴、桑叶、黑芝麻和玉竹均可降低α-葡萄糖苷酶活性，改善糖代谢紊乱。而本方案利用不同药物之间相互作用以促进彼此之间的药效协同。与番石榴、桑叶、黑芝麻、玉竹的单方相比，本实施例所提供的降糖组合物能够更加有效地控制α-葡萄糖苷酶活性，从而达到降低血糖的目的。
根据本发明的一些实施例的降糖组合物，由包括以下重量份的原料制成：番石榴8～12份、桑叶2～7份、黑芝麻2～5份、玉竹1～3份。番石榴、桑叶、黑芝麻和玉竹这四种原料，通过组分配比的优化，可以进一步提供组合物对α-葡萄糖苷酶的酶活抑制的功效。
根据本发明的一些实施例的降糖组合物，由包括以下重量份的原料制成：番石榴8～12份、桑叶3～6份、黑芝麻3～4份、玉竹1～3份。
根据本发明的一些实施例的降糖组合物，由包括以下重量份的原料制成：番石榴8～12份、桑叶4～5份、黑芝麻3～4份、玉竹1～3份。对组分配比的进一步优化，可以使组合物对抑制酶活的效果获得显著的提升。
第二方面，本发明的一个实施例提供了一种降糖组合物在制备食品、药品中的应用。利用该降糖组合物，可以作为食品、药品的活性成分使用，使得该食品、药品能够获得高效的α-葡萄糖苷酶酶活抑制效果。
根据本发明的一些实施例的应用，食品、药品用于抑制α-葡萄糖苷酶活性。
根据本发明的一些实施例的应用，食品、药品用于降低血糖。
第三方面，本发明的一个实施例提供了一种降糖组合物的制备方法，该制备方法包括以下步骤：
s1：取番石榴、桑叶、黑芝麻和玉竹，干燥后粉碎过筛；
s2：筛下物加入溶剂提取，得到提取液；
s3：提取液干燥即得。
通过该方法制得的组合物具有较好的抑制α-葡萄糖苷酶酶活的效果，能够用于降低血糖。
根据本发明的一些实施例的制备方法，提取所用溶剂为去离子水。
根据本发明的一些实施例的制备方法，s2的具体步骤如下：s2：筛下物加入去离子水在70～100℃条件下提取，得到提取液。该提取温度可以保证原料中活性成分的提取效率，同时不会因温度过高而破坏其中活性成分的生物活性。
根据本发明的一些实施例的制备方法，s2的具体步骤如下：s2：筛下物加入质量比10～20倍的去离子水，在70～100℃条件下提取，得到提取液。
根据本发明的一些实施例的制备方法，s2中，去离子水提取可以重复多次，从而尽可能将其中的活性成分提取出来，提高组合物的功效。
根据本发明的一些实施例的制备方法，s1中的干燥方法可以选择自然风干、低温烘干、冷冻干燥等方法。
根据本发明的一些实施例的制备方法，s3中的干燥方法可以选择浓缩干燥、低温烘干、冷冻干燥等方法。
根据本发明的一些实施例的制备方法，s1中筛选所用的筛孔直径为800～1000μm。
第四方面，本发明的一个实施例提供了一种制剂，该制剂包括上述的降糖组合物和可接受的辅料。以上述降糖组合物作为活性成分的制剂能够实现对α-葡萄糖苷酶酶活的高效抑制作用，从而延缓碳水化合物的吸收，降低餐后高血糖，达到辅助治疗糖尿病的目的。
根据本发明的一些实施例的制剂，其中使用的可接受的辅料可以是包括但不限于填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等本领域所熟知的辅料。
具体实施方式
以下将结合实施例对本发明的构思及产生的技术效果进行清楚、完整地描述，以充分地理解本发明的目的、特征和效果。显然，所描述的实施例只是本发明的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本发明的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，均属于本发明保护的范围。
实施例1
本实施例提供一种降糖组合物。该降糖组合物由包括以下重量份的原料制成：番石榴10份、桑叶7份、黑芝麻2份、玉竹1份。
该降糖组合物的制备方法如下：
(1)取番石榴果、桑叶、黑芝麻、玉竹，分别在60℃干燥后粉碎过2号筛(24目，直径850±29μm)，得到对应的筛下物：番石榴原料粉、桑叶原料粉、黑芝麻原料粉和玉竹原料粉；
(2)分别取番石榴原料粉10g、桑叶原料粉7g、黑芝麻原料粉2g、玉竹原料粉1g混合后，加入400ml去离子水在100℃条件下提取2h，过滤，收集提取液；滤渣继续重复提取2次。
(3)合并三次的提取液，适当浓缩后在60℃条件下烘干，得到粉末形态的降糖组合物。
实施例2
本实施例提供一种降糖组合物。该降糖组合物由包括以下重量份的原料制成：番石榴10份、桑叶5份、黑芝麻3份、玉竹2份。
该降糖组合物的制备方法如下：
(1)取番石榴果、桑叶、黑芝麻、玉竹，冷冻干燥后粉碎过2号筛(24目)，得到对应的筛下物：番石榴原料粉、桑叶原料粉、黑芝麻原料粉和玉竹原料粉；
(2)分别取番石榴原料粉10g、桑叶原料粉5g、黑芝麻原料粉3g、玉竹原料粉2g混合后，加入400ml去离子水在80℃条件下提取2h，过滤，收集滤液为提取液；滤渣继续重复提取2次。
(3)合并三次的提取液，适当浓缩后在60℃条件下烘干，得到粉末形态的降糖组合物。
实施例3
本实施例提供一种降糖组合物。该降糖组合物由包括以下重量份的原料制成：番石榴10份、桑叶4份、黑芝麻4份、玉竹2份。
该降糖组合物的制备方法如下：
(1)取番石榴果、桑叶、黑芝麻、玉竹，60℃条件下干燥后粉碎过2号筛(24目)，得到对应的筛下物：番石榴原料粉、桑叶原料粉、黑芝麻原料粉和玉竹原料粉；
(2)分别取番石榴原料粉10g、桑叶原料粉4g、黑芝麻原料粉4g、玉竹原料粉2g混合后，加入400ml去离子水在70℃条件下提取2h，过滤，收集滤液为提取液；滤渣继续重复提取2次。
(3)合并三次的提取液，适当浓缩后冷冻干燥，得到粉末形态的降糖组合物。
实施例4
本实施例提供一种降糖组合物。该降糖组合物由包括以下重量份的原料制成：番石榴10份、桑叶2份、黑芝麻5份、玉竹3份。
该降糖组合物的制备方法如下：
(1)取番石榴果、桑叶、黑芝麻、玉竹，冷冻干燥后粉碎过2号筛(24目)，得到筛下物：番石榴原料粉、桑叶原料粉、黑芝麻原料粉和玉竹原料粉；
(2)分别取番石榴原料粉10g、桑叶原料粉2g、黑芝麻原料粉5g、玉竹原料粉3g混合后，加入400ml去离子水在80℃条件下提取2h，过滤，收集滤液为提取液；滤渣继续重复提取2次。
(3)合并三次的提取液，适当浓缩后在60℃条件下烘干，得到粉末形态的降糖组合物。
对比实验
对比例1：提供一种降糖组合物，与实施例4的区别在于，制备原料仅有番石榴果。
对比例2：提供一种降糖组合物，与实施例4的区别在于，制备原料仅有桑叶。
对比例3：提供一种降糖组合物，与实施例4的区别在于，制备原料仅有黑芝麻。
对比例4：提供一种降糖组合物，与实施例4的区别在于，制备原料仅有玉竹。
对比例5：提供一种降糖组合物，与实施例4的区别在于，制备原料仅有对应比例的桑叶、黑芝麻和玉竹。
对比例6：阿卡波糖。
实验方法：采用pnpg法测定组合物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用，以此评价受试样品的降低血糖的效果。
主要试剂：kh2po4、pnpg、na2co3、α-葡萄糖苷酶、阿卡波糖。
主要仪器：酶标仪。
(1)缓冲液的配制：称量6.8gkh2po4溶于250ml蒸馏水，加2mol/lnaoh调ph至7.0。
(2)底物pnpg溶液的配制：称取60.0mgpnpg粉末于容量瓶中，加磷酸缓冲液定容至10ml，混合摇匀，28℃超声溶解，用锡箔纸包裹，避光保存，备用。
(3)na2co3终止液的配制：称取5.3g碳酸钠粉末，加适量水溶解，转移至250ml容量瓶中，定容到250ml，摇匀备用。
(4)样品溶液的配制：称量一定质量的各实施例以及对比例的降糖组合物/化合物加入8ml配置好的pnpg溶液中溶解，设置5.0mg/ml、2.5mg/ml和1.25mg/ml的样品浓度梯度(降糖组合物的粉末原料浓度)。
(5)配制α-葡萄糖苷酶溶液：取10μl的α-葡萄糖苷酶酶液(酶活力为100u/mg)于棕色ep管内，用1mol/l磷酸缓冲液稀释到活度为1u/ml。
(6)显色反应：
在96孔板中设置样品组、背景组和空白组，反应步骤如下：
样品组：30μl酶溶液与20μl样品溶液混合后37℃水浴5min，加入150μl底物和800μl缓冲溶液，37℃水浴孵化30min，加入终止液2ml，离心混匀。
空白组：30μl酶溶液与20μl缓冲溶液混合后37℃水浴5min，加入150μl底物和800μl缓冲溶液，37℃水浴孵化30min，加入终止液2ml，离心混匀。
背景组：30μl去离子水与20μl样品溶液混合后37℃水浴5min，加入150μl底物和800μl缓冲溶液，37℃水浴孵化30min，加入终止液2ml，离心混匀。
(7)测量吸光度：酶标仪测定波长405nm下的吸光度a。
(8)计算抑制率
抑制率(％)＝[a空白-(a样品-a背景)/a空白]×100％
a样品：样品组反应后的吸光度；
a空白：空白组反应后的吸光度；
a背景：背景组反应后的吸光度。
抑制率测试结果见表1。
表1.不同样品对α-葡萄糖苷酶抑制率(％)
从上述结果可以看到，阿卡波糖抑制α-葡萄糖苷酶酶活的效果极高，而单独的番石榴、玉竹、黑芝麻和桑叶(对比例1～4)虽然也具有一定的抑制α-葡萄糖苷酶酶活的效果，但相对较差。而实施例1～4对四种组分进行组合后，各原料药之间的相互协同作用使得整体的抑制酶活的效果有了极大的提升。其中，尤以实施例2和实施例3的抑制效果的提升幅度较大。而实施例3的抑制率更是与阿卡波糖接近。同时，在不同浓度梯度的对比中可以看出，降糖组合物的浓度越高，抑制α-葡萄糖苷酶酶活的效果越好。
基于上述对比结果，本发明实施例所提供的组合物能够用于制备相应的降糖产品，如具有降糖作用的食品或药品中，或者其它需要对α-葡萄糖苷酶的酶活进行抑制的产品中。得到的制剂具有较好的抑制酶活的作用，对于降糖这一功用效果显著。
上面结合实施例对本发明作了详细说明，但是本发明不限于上述实施例，在所述技术领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。此外，在不冲突的情况下，本发明的实施例及实施例中的特征可以相互组合。