用于面部提升的小颗粒脂肪填充物、制备方法及装置与流程

本发明属于自体脂肪移植领域，具体涉及一种用于面部提升的小颗粒脂肪填充物、制备方法及装置。

背景技术：

面部老化是由多因素造成的皮肤、深部软组织及骨骼的改变，导致面部出现一系列衰老表现。随着年龄的增长和光老化作用，逐渐出现静态性皱纹，皱纹不断增多加深，皮肤逐渐失去弹性，变得粗糙，出现色斑，呈现老态。由于重力作用，深部软组织支撑提拉作用减弱，容积丢失，松弛下垂。皮肤的老化是一个漫长而复杂的过程，随着年龄的增长，在内外因素的作用下，人的皮肤发生退行性改变，明显特征为皮肤松弛和皱纹出现，身体暴露部位的皮肤纹理增粗，皱纹加深、加粗；肌肤弹性减弱，出现皮下组织松弛、萎缩和移位，面部凹陷、轮廓改变等。针对皮肤老化的众多问题，国内外整形美容专家也开展了一系列面部提升的方法。

1893年有研究者首次报道自体脂肪移植的临床应用，随后coleman技术的问世推动了脂肪注射的广泛应用。传统脂肪移植的目的是容量充填，目前已广泛应用于隆乳术、乳房重建、面部年轻化、轮廓重塑等。传统脂肪提取技术获取的脂肪颗粒较大，一般颗粒直径在2mm-3mm。因此一般只能应用于组织较为宽松的皮下，脂肪组织内，肌肉间等组织间隙进行填充；而且传统方法提取的脂肪组织颗粒较粗，不能通过直径为1mm以内的注射针，也难以在皮肤内等组织较为致密的部位进行移植注射操作。

技术实现要素：

为了解决现有技术中的填充物脂肪颗粒直径过大，只能应用在皮肤较为松弛位置的问题，本发明提供一种用于面部提升的小颗粒脂肪填充物、制备方法及装置，通过两层滤网过滤的方法获得小颗粒脂肪，有效解决现有技术中的问题。

本发明解决上述技术问题所采用的技术手段是：一种用于面部提升的小颗粒脂肪填充物，包括：

小颗粒脂肪悬液；

prp，所述prp与所述小颗粒脂肪悬液比例为1：4~6；

svf-gel，所述svf-gel在所述小颗粒脂肪悬液与所述prp形成的混合物中的含量为10⁶~10⁷/ml；

所述小颗粒脂肪悬液中的小颗粒脂肪的直径为：0.18~0.425mm。

一种用于面部提升的小颗粒脂肪填充物的制备方法，包括：

将小颗粒脂肪悬液与prp按照1：4~6的比例进行混合，形成混合物；

将所述小颗粒脂肪悬液与所述prp形成的混合物与svf-gel进行混合；

所述svf-gel在所述小颗粒脂肪悬液与所述prp形成的混合物中的含量为10⁶~10⁷/ml；

所述小颗粒脂肪悬液中的小颗粒脂肪的直径为：0.18~0.425mm。

所述小颗粒脂肪的获取方法，包括：

将获得的自身脂肪提取物，进行第一次过筛，取滤网后的过滤物；

将所述过滤物进行第二次过滤，取滤网上的残留物；

将所述残留物进行纯化，得到所述小颗粒脂肪细胞。

所述svf-gel的获取方法，包括：

将待处理的含有脂肪抽吸物进行离心后形成上层油脂、中层油脂以及底层液体；

将所述底层液体抛弃，所述上层油脂回收备用，将所述中层脂肪转移至一个螺口式注射器中，得到含有中层脂肪的注射器；

将另一个空的螺口式注射器与所述含有中层脂肪的注射器相连接；

使所述含有中层脂肪的注射器中的中层脂肪在所述空的螺口式注射器与所述含有中层脂肪的注射器之间内反复移动，直到得到乳糜样脂肪；

将所述上层油脂加入所述乳糜样脂肪中，并充分混匀，得到混合物；

保持装有所述混合物的容器密闭，并形成负压，然后轻轻震荡，至容器中出现絮凝现象，得到凝絮物；

将所述凝絮物进行离心后，获取中间层产物，得到所述svf-gel。

在所述“将所述凝絮物进行离心后，获取中间层产物，得到所述svf-gel”中，包括：

若离心后，所述凝絮物不分层或离心后的上层油脂的体积未达到总体积的80%，则重复以下步骤：

将所述上层油脂加入所述乳糜样脂肪中，并充分混匀，得到混合物；

保持装有所述混合物的容器密闭，并形成负压，然后轻轻震荡，至容器中出现絮凝现象，得到凝絮物；

将所述凝絮物进行离心后，获取中间层产物，得到所述svf-gel。

所述svf-gel的体积低于所述含有脂肪抽吸物体积的15%，且svf-gel细胞浓度高于4.0×10³/ml。

所述prp的获取，包括：

采集自体外周静脉血，加入全血体积1/16的40%枸橼酸，得到混合液体；

将所述混合液体进行离心，取上清液；

将所述上清液加入10%cacl2，所述上清液与10%cacl2的比例为10∶1。

一种提取小颗粒脂肪细胞的装置，包括：

筒体；

上层细胞筛，设置在筒体内，用于第一次过滤；

下层细胞筛，设置在筒体内并平行设置在所述上层细胞筛的下方，用于第二次过滤；

负压装置，通过管路与所述筒体连通设置，用于抽取第二次过滤后的液体。

有益效果：本发明采用双滤层过滤的方法，得到适用于面部提升等精细部位填充的小颗粒脂肪填充物，所述小颗粒脂肪悬液中的小颗粒脂肪的直径为：0.18~0.425mm。本发明采用双层细胞筛，具有快速高效的分离小颗粒脂肪的功效，相对于传统离心分离方法操作步骤减少，能够有效减少体外脂肪的处理时间。同时，通过svf-gel和prp等辅助提高移植后脂肪细胞成活率，使得受试者面部提升术后满意度大大提升。

附图说明

图1为本发明所述提取小颗粒脂肪细胞的装置的结构示意图。

其中，1为密封性上盖；2为上层细胞筛；3为筒身；4为下层细胞筛；5为可开合式接口，用于肿胀液及组织液；6为负压装置阀门；7为底座；8为负压装置。

具体实施方式

下面结合附图对本发明进行进一步的说明。

目前传统的细小颗粒脂肪提取需要1mm的定制脂肪抽吸管来吸取脂肪，这种方法非常耗时，获取率低，而且由于脂肪组织在经过细小针管是收到挤压，其活性会受到影响。

本发明所述的面部提升是指通过注射填充，手术等途径改善皱纹，解决皮肤松弛问题，恢复皮肤弹性，使面部展现年轻态的方法。

如图1，一种提取小颗粒脂肪细胞的装置，包括：密封性上盖1、上层细胞筛2、筒体3、下层细胞筛4以及可开合式接口5、负压装置阀门6、设置筒体3的底座7、负压装置8；其中，上层细胞筛2设置在筒体3内，用于第一次过滤；下层细胞筛4设置在筒体3内并平行设置在所述上层细胞筛2的下方，用于第二次过滤；负压装置8通过管路与所述筒体3连通设置，用于抽取第二次过滤后的液体。

如上所述提取小颗粒脂肪细胞的装置获取小颗粒脂肪细胞的过程是：将获得的自身脂肪提取物，通过上层细胞筛2和下层细胞筛4进行过筛，上层细胞筛2和下层细胞筛4使用耐高温透明树脂制作。所述上层细胞筛2为40目，下层细胞筛4为80目，上层细胞筛2为40目和下层细胞筛4为一次性尼龙布。吸脂出来的颗粒脂肪倒入上层细胞筛2，大颗粒脂肪存留在这一层。然后小颗粒脂肪被下层细胞筛4拦住，液体流入最下层。筒体3的底部接软管引出，其上设置负压装置阀门6，然后接负压装置8，如吸引器，加速液体排出，纯化脂肪，收集下层细胞筛4上的细胞即可到得到纯化的小颗粒脂肪细胞。

同时，成熟的脂肪细胞内含有一大脂肪滴，少量细胞器被挤向边缘，特殊的细胞结构决定了脂肪细胞的高耗能性，成熟的脂肪细胞很容易因缺血缺氧而发生坏死，从而影响移植脂肪的成活。颗粒脂肪移植后的高吸收率和各种并发症如钙化、坏死、硬化结节和液化囊肿等限制了该颗粒脂肪注射移植技术在临床的广泛开展。因此，如何提高颗粒脂肪移植术后成活率，从而控制远期填充效果，成为整形外科临床应用及基础理论研究中的重大难题之一。

针对上述问题，本发明提供一种用于面部提升的小颗粒脂肪填充物，包括：小颗粒脂肪悬液、prp以及svf-gel；

其中给，所述prp与所述小颗粒脂肪悬液比例为1：4~6；所述svf-gel在所述小颗粒脂肪悬液与所述prp形成的混合物中的含量为10⁶~10⁷/ml；

所述小颗粒脂肪悬液中的小颗粒脂肪的直径为：0.18~0.425mm。

优选的，所述prp与所述小颗粒脂肪悬液比例为1：5；所述svf-gel在所述小颗粒脂肪悬液与所述prp形成的混合物中的含量为10⁶~10⁷/ml；所述小颗粒脂肪悬液中的小颗粒脂肪的直径为：0.3mm。

上述的一种用于面部提升的小颗粒脂肪填充物的制备方法，包括：

将小颗粒脂肪悬液与prp按照1：4~6的比例进行混合，形成混合物；

将所述小颗粒脂肪悬液与所述prp形成的混合物与svf-gel进行混合；

所述svf-gel在所述小颗粒脂肪悬液与所述prp形成的混合物中的含量为10⁶~10⁷/ml；

所述小颗粒脂肪悬液中的小颗粒脂肪的直径为：0.18~0.425mm。

所述svf-gel的获取方法，包括：

1.首先将含有脂肪抽吸物的注射器放入离心机中，以1200g的离心力离心3min后，弃底层液体；上层油脂回收备用，将中层脂肪组织转移至另一个20ml螺口式注射器中。

2.通过鲁尔接头密封对接，将另一个空的20ml螺口式注射器与含有脂肪的螺口注射器相连接，然后以10ml/s的速度将脂肪在2个注射器之间内反复推注，共推注1min。

3.向推注后的乳糜样脂肪中加入步骤1中回收的油脂，再次缓慢推注3～5次以充分混匀;

4.使用专用堵头堵住注射器出口，拉开注射器针栓保持注射器内负压，轻轻震荡30s，至注射器中出现絮凝现象(表现为有棉絮样固体从乳糜样的脂肪中析出)。

5.最后再次将产物置入离心机中，以2000g的离心力离心3min后，弃上层油脂和底层残留的液体，获取的中间层产物即为svf-gel。若离心后，混合物不分层或上层油脂的体积未达到混合物体积的80%，则重复步骤③～⑤的操作，注意重复次数不超过3次。

依照标准方案制备的svf-gel应符合以下要求:

1.最终体积低于原有体积的15%；

2.svf-gel细胞浓度高于4.0×10³/ml；

3.可以通过27g针头进行注射，利用鲁尔接头将svf-gel转移至注射器中备用。

所述prp的获取，包括：自体外周静脉采血后加入全血1/16的4．0%枸橼酸，离心力200g，离心10min，两次离心后上清液即为prp，加入10%cacl2，prp与10%cacl2的比例为10∶1。

验证环节：

填充物的制备

制备a：prp与小颗粒脂肪悬液比例分别为1∶4，确保混合物中svf-gel的含量为10⁶-10⁷/ml。

制备b：prp与小颗粒脂肪悬液比例分别为1∶5，确保混合物中svf-gel的含量为10⁶-10⁷/ml。

制备c：prp与小颗粒脂肪悬液比例分别为1∶6，确保混合物中svf-gel的含量为10⁶-10⁷/ml。

受试者分组

选取120例接受面部年轻化治疗的患者，分为实验组1，实验组2，实验组3，对照组，每组各30例。患者均为女性，经比较，三组患者在年龄等基础资料方面无差异，不具备统计学意义p＞0.05，可以进行比较。

实验组1采用小颗粒脂肪填充，其中填充物为制备a，

实验组2采用小颗粒脂肪填充，其中填充物为前者等量的制备b。

实验组3采用小颗粒脂肪填充，其中填充物为前者等量的制备c。

对照组1采用常规脂肪填充，其中填充物为前者等量脂肪提取物。

对照组2采用小颗粒脂肪填充，其中填充物为前者等量脂肪提取物

注射方法

实验组与对照组采用相同的注射方法，由同一位手术医生完成。遵循多隧道、多平面、多点、少量、均匀的原则，以钝针、退针的方式进行全面部填充。

注射剂量：根据术前计算，应保证溢出值在10%-20%

效果评估

效果评估包括以下两个方面，第一为术后填充位置钙化，脂肪液化，硬结，纤维囊性化等常见脂肪填充后并发症；其二为面部提升后患者满意度调查，在术后9个月进行满意度调查，分为非常满意，满意，一般，不满意，非常不满意五个级别，受试者根据其自身感受进行打分。

效果验证

共纳入患者120例，均为女性。术前检查血常规、凝血功能、肝肾功能、病毒全套、心电图，结果均正常，无手术禁忌，无中途退出者。按意向性处理分析，均进入结果分析，在实验组1和实验组2分别有5人和2人进行了二次填充。

在术后并发症方面，组1，2，3使用的是小颗粒脂肪制备物，组4使用的为常规脂肪制备物，根据实验结果，使用小颗粒脂肪制备物的组2,3中没有并发症的发生，使用常规脂肪制备物的组4中，有钙化1人，脂肪液化2人，硬结1人，纤维囊性化3人，总体的并发症发生率为23.3%。组1中仅有1人出现硬结，并发症发生概率为3.3%；对照组2中有1人发生脂肪液化，1人发生纤维囊性化，并发症概率为6.67%。

表1实验组术后并发症发生比较（n=30）

在术后满意度方面，采用小颗粒脂肪填充物的实验组1，有28人非常满意，2人感觉一般，其余为0；将满意与非常满意一起统计，定义为满意率，实验组1的满意率为93.3%.实验组2中有29人非常满意，1人感觉一般，满意率为96.7%；实验组3中有29人非常满意，1人满意，满意率为100%；对照组1、2的满意率分别为76.7%和86.7%，远远低于实验组。

表2满意度调查表

对比实验组与对照组的术后并发症结果，发现实验组2与实验组3效果最好，术后并发症发生率为0%，再具体结合术后满意度调查结果，明确得出制备c中所述的填充物配比效果最好。从结果可以看出，实验组的并发症发生率远远低于对照组，这也可以体现出，经过双层细胞筛筛选之后的小颗粒脂肪用于面部提升的填充，并且以svf-gel和prp辅助进行填充，能够降低因填充物导致的术后并发症的发生概率。

综上所述，本发明中小颗粒脂肪的获取通过特定的双层细胞筛上层滤网40目，下层滤网80目获取，通过svf-gel和prp辅助进行脂肪填充，这种采用小颗粒脂肪的填充剂特别适用于面部等精细部位填充，与常规的脂肪细胞填充剂进行面部提升相比能够大大提高受试者术后的满意度，减少术后并发症的发生。

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易变化或替换，都属于本发明的保护范围之内。因此本发明的保护范围所述以权利要求的保护范围为准。