氯法齐明在制备抗新型冠状病毒感染性疾病的药物中的应用的制作方法

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本发明属于医药技术领域，具体涉及一种氯法齐明在制备抗新型冠状病毒感染性疾病的药物中的应用。


背景技术：

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氯法齐明(clofazimine)又名氯苯吩嗪，其化学名为10-(对-氯苯基)
ꢀ-
2,10-二氢-3-(对-氯苯氨基)-2-异丙亚氨基吩嗪，该药对麻风杆菌有抑制作用，其作用机制为干扰核酸代谢，抑制菌体蛋白合成，作用较氨苯砜缓慢，目前主要用于治疗对氨苯砜耐药的麻风杆菌感染性疾病。
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新冠肺炎(covid-19)是由新型冠状病毒(sars-cov-2)感染引起的传染性疾病，其症状主要包括发热、乏力、干咳、呼吸困难和肾衰竭等，目前，尚无特效的抗病毒药物和疫苗用于covid-19的治疗，多以对症支持治疗为主。因此，研究并开发有效的抗sars-cov-2感染的药物具有重要意义。


技术实现要素：

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本发明的目的在于提供一种氯法齐明在制备抗新型冠状病毒感染性疾病的药物中的应用，为新冠肺炎病毒感染性疾病的预防和治疗提供了一种新的方向。
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为实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
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氯法齐明在制备抗新型冠状病毒感染性疾病的药物中的应用。
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进一步的，所述新型冠状病毒感染性疾病为新冠肺炎。
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进一步的，所述氯法齐明的抗新型冠状病毒活性浓度为0.03～10μm。
[0009]
进一步的，所述药物包括活性成分以及药学上可接受的辅料，其中活性成分包括氯法齐明。
[0010]
进一步的，所述药物的剂型包括片剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂或口服液。
[0011]
本发明中，氯法齐明(又称氯苯吩嗪)为现有主要用于治疗对氨苯砜耐药的麻风杆菌感染的药物，其化学结构式如下：
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与现有技术相比，本发明的有益效果：
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本发明首次发现了氯法齐明可用于预防和治疗新型冠状病毒感染性疾病，并且通过对氯法齐明在veroe6细胞上的细胞毒性及其对新冠肺炎病毒抗病毒活性进行检测，表明氯法齐明在细胞水平表现出较强的抗新冠肺炎病毒效果，为新冠肺炎病毒感染性疾病的预防和治疗提供了一种新的方向。
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以下将结合附图对本发明做进一步详细说明。
附图说明
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图1是本发明实施例1中不同浓度的氯法齐明在vero e6细胞上的细胞存活率曲线图；
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图2是本发明实施例2中不同浓度的氯法齐明在vero e6细胞上抑制新冠肺炎病毒复制的抑制率曲线图。
具体实施方式
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下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
[0019]
本发明首次发现了氯法齐明可用于预防和治疗新型冠状病毒感染性疾病，这一发现具有显著进步，因为无法预测用于治疗对氨苯砜耐药的麻风杆菌感染的化合物能够预防和治疗新型冠状病毒感染性疾病。
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因此，根据此发现，提供了一种氯法齐明在制备抗新型冠状病毒感染性疾病的药物中的应用。
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在本发明的优选实施方式中，新型冠状病毒感染性疾病为新冠肺炎 (covid-19)，而抗新型冠状病毒感染性疾病的药物包括活性成分以及药学上可接受的辅料，其中活性成分包括上述的氯法齐明；药物的剂型可采用片剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂或口服液。
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下面通过具体实施例进一步说明本发明的技术效果。
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实施例1：
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本实施例研究了目标化合物氯法齐明的细胞毒性，具体过程如下：
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vero e6细胞分别按1.5
×
104细胞/孔接种于96孔细胞培养板中，于37℃， 5％co2培养箱中培养12～16h后，先更换培养基为含有2％fbs的dmem 培养基，再使用浓度为0.046μm、0.137μm、0.41μm、1.23μm、3.70μm、 11.1μm、33.3μm和100μm的氯法齐明进行处理，阴性对照加入同体积 dmso，每个浓度设置三个复孔，37℃孵育24h，同时需设置只有培养基无细胞的调零孔，用cck8检测试剂盒检测细胞活力。检测结果如图1所示，并且通过绘制不同浓度下的细胞存活率曲线计算出氯法齐明在vero e6细胞上的cc
50
为>100μm。
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实施例2：
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本实施例研究了目标化合物氯法齐明对新冠肺炎病毒的抗病毒活性，具体过程如下：
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vero e6细胞分别按1.5
×
104细胞/孔接种于48孔细胞培养板中，于37℃， 5％co2培养箱中培养12～16h后，48孔板的细胞移除上清，再使用浓度为 0.03μm、0.1μm、0.33μm、1
μm、3.3μm和10μm的氯法齐明进行处理，孵育1小时，在生物安全3级(bsl-3)实验室里加入sars-cov-2，感染复数(moi)为0.05，孵育1小时后，移除上清，pbs洗，加入浓度为0.033μm、 0.1μm、0.33μm、1μm、3.3μm和10μm的氯法齐明，感染后24小时收集上清。每孔收取150μl上清加入271μl的裂解液中灭活，灭活样品管置消毒剂中浸泡后，带出生物安全3级实验室。
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带出的灭活上清样品，按照试剂盒说明书提取rna并进行反转录，提取完成后，利用实时荧光定量pcr技术，对上清中的病毒rna拷贝数进行定量检测。测定拷贝数后以dmso组作为对照孔来计算化合物对病毒复制的抑制率。并进一步对氯法齐明抑制sars-cov-2的ic
50
进行检测，结果如图2所示，表明氯法齐明显著抑制sars-cov-2活性，氯法齐明在veroe6细胞上的ic
50
为0.07694μm。
[0030]
以上例举仅仅是对本发明的举例说明，并不构成对本发明的保护范围的限制，凡是与本发明相同或相似的设计均属于本发明的保护范围之内。