雌性抗衰老剂的制作方法

1.本发明涉及一种雌性抗衰老剂。


背景技术：

2.对于女性而言，随着年龄增长，卵巢、卵泡、卵子等生殖组织逐渐衰老，变得难以妊娠或分娩。对于这种难以妊娠的女性的不孕治疗，大多采用激素替代疗法以促进排卵。然而，除了难以发育及排出均匀成熟的卵泡以外，作为副作用还会出现被称为卵巢过度刺激综合征(ohss)的症状，若该症状恶化，则还会存在陷入呼吸衰竭或循环衰竭的危险。因此，对于不孕治疗，正寻求一种安全且有效的治疗方法(非专利文献1)。
3.此外，随着女性生殖组织衰老的进程，若雌激素等女性激素的浓度下降，则主要会在40岁后期至50多岁的女性中引发更年期障碍。其中，对于30岁至40岁中期的女性，加上压力或过度疲劳，除了上述更年期障碍的症状以外，还会出现月经不调。这被称为前更年期障碍，其与更年期障碍一样，会显著降低女性的qol(生命质量)。在这些更年期障碍或前更年期障碍的治疗中，主要进行激素替代疗法，但存在有可能致癌、或存在不规则生殖器出血、呕吐、头痛、肝功能异常等副作用的问题。对于任何女性而言，都有可能引发前更年期障碍或更年期障碍，尤其在进入高龄化的日本，女性健康地从前更年期过渡至停经是非常重要的。因此，与不孕治疗一样，正寻求一种安全且有效的前更年期障碍或更年期障碍的治疗方法(非专利文献2)。
4.然而，不只是人类，对于牛或猪等家畜而言，雌性生殖组织的衰老也逐渐成为问题。例如，在养猪业中，母猪自交配至分娩的周期为每一年2.5次，但随着年龄增长，母猪的产仔数下降，因流产等繁殖障碍的增加，繁殖能力变差。因此，期望开发一种除人类以外对非人类动物也能够抑制雌性的生殖组织的衰老进程的方法。
5.现有技术文献
6.非专利文献
7.非专利文献1：日産婦誌，1998年，50卷，6号，n135-n138
8.非专利文献2：jim，1999年，9卷，8号，688-691


技术实现要素：

9.本发明要解决的技术问题
10.本发明的目的在于提供一种卵巢、卵泡或卵子(以下有时统称为“雌性生殖组织”)的抗衰老剂。
11.解决技术问题的技术手段
12.本技术的发明人发现，吡咯喹啉醌或其盐可以抑制雌性生殖组织的衰老进程，并且可以促进雌二醇的产生。本发明是基于该新发现而完成的。
13.本发明例如提供以下各发明。
14.[1]一种卵巢、卵泡或卵子的抗衰老剂，其含有吡咯喹啉醌或其盐。
[0015]
[2]一种雌性生殖组织纤维化的抑制剂或改善剂，其含有吡咯喹啉醌或其盐。
[0016]
[3]一种卵子质量提高剂，其含有吡咯喹啉醌或其盐。
[0017]
[4]一种月经不调的改善剂或预防剂，其含有吡咯喹啉醌或其盐。
[0018]
[5]一种针对卵巢过度刺激综合征的改善剂或预防剂，其含有吡咯喹啉醌或其盐。
[0019]
[6]一种雌激素产生促进剂，其含有吡咯喹啉醌或其盐。
[0020]
[7]根据[6]所述的雌激素产生促进剂，其改善或预防雌性因缺乏雌激素导致的症状。
[0021]
[8]根据[6]所述的雌激素产生促进剂，其改善或预防雌性的前更年期障碍或更年期障碍。
[0022]
[9]根据[6]所述的雌激素产生促进剂，其改善或预防雌性的更年期症状。
[0023]
[10]根据[1]～[9]中任一项所述的制剂，其用于非人类动物。
[0024]
[11]一种抑制卵巢、卵泡或卵子的衰老进程的方法，其通过摄取含有吡咯喹啉醌或其盐的组合物来抑制卵巢、卵泡或卵子的衰老进程。
[0025]
[2-1]根据[1]所述的抗衰老剂，其抑制或改善雌性生殖组织的纤维化。
[0026]
[2-2]根据[1]所述的抗衰老剂，其提高卵子质量。
[0027]
[2-3]根据[1]所述的抗衰老剂，其改善或预防月经不调。
[0028]
[2-4]根据[1]所述的抗衰老剂，其改善或预防卵巢过度刺激综合征。
[0029]
[2-5]根据[1]所述的抗衰老剂，其促进雌激素的产生。
[0030]
[2-6]根据[2-5]所述的抗衰老剂，其改善或预防雌性因缺乏雌激素导致的症状。
[0031]
[2-7]根据[2-5]所述的抗衰老剂，其改善或预防雌性的前更年期障碍或更年期障碍。
[0032]
[2-8]根据[2-5]所述的抗衰老剂，其改善或预防雌性的更年期症状。
[0033]
发明效果
[0034]
本发明能够提供一种雌性生殖组织的抗衰老剂。
附图说明
[0035]
图1是示出试验例1中各雌性小鼠的血中amh浓度的图表。
[0036]
图2中的(a)是示出试验例2中未对雌性的增龄化模型小鼠给予吡咯喹啉醌二钠盐时的发情周期的图表。图2中的(b)是示出试验例2中对雌性的增龄化模型小鼠给予吡咯喹啉醌时的发情周期的图表。在图2中，m表示发情后期，we表示微发情期，e表示发情期，p表示发情前期，d表示休情期。
[0037]
图3中的(a)是示出试验例4中对给予或未给予吡咯喹啉醌二钠盐的未成熟雌性小鼠给予ecg(马绒毛膜促性腺激素)时的时间与血中雌二醇浓度的关系的图表。图3中的(b)是示出试验例4中对给予或未给予吡咯喹啉醌二钠盐的未成熟雌性小鼠给予ecg(马绒毛膜促性腺激素)及hcg(人绒毛膜促性腺激素)时的时间与血中黄体酮浓度的关系的图表。
[0038]
图4中的(a)是试验例5中对向雌性的增龄化模型小鼠给予吡咯喹啉醌二钠盐前的卵巢进行psr染色后所拍摄(倍率20倍)的照片。图4中的(b)是试验例5中对向雌性的增龄化模型小鼠给予2周吡咯喹啉醌二钠盐后的卵巢进行psr染色后所拍摄(倍率20倍)的照片。图4中的(c)及图4中的(d)是分别对图4中的(a)及图4中的(b)进行描摹(tracing)的图，标有
斜线的区域表示被染色的区域。
具体实施方式
[0039]
以下，对本发明的具体实施方案进行详细说明。但本发明并不限定于以下的实施方案。
[0040]
[1.卵巢、卵泡或卵子的抗衰老剂]
[0041]
本实施方案的卵巢、卵泡或卵子的抗衰老剂含有吡咯喹啉醌或其盐(也称为“(a)成分”)。
[0042]
吡咯喹啉醌或其盐发挥抑制雌性的amh(anti-mullerian hormone；抗缪勒管激素)的消失或下降的效果。此处，amh是一种作为雌性生殖组织(尤其是卵巢)衰老的指标的激素，已知随着雌性生殖组织衰老的进程，血中amh浓度会下降。此外，吡咯喹啉醌或其盐发挥抑制或改善雌性生殖组织(卵巢、卵泡、卵子等，尤其是卵巢)纤维化的效果。因此，作为本发明的一个实施方案，提供一种含有吡咯喹啉醌或其盐的、卵巢、卵泡或卵子的抗衰老剂以及雌性生殖组织纤维化的抑制剂或改善剂。此处所谓的“抗衰老”是指女性恢复青春、抑制女性的衰老进程、即便是高龄女性也可保持较高的qol、即便是高龄女性也可以生活的有活力和青春等。此外，此处所谓的“高龄”是指30岁以上，优选40岁以上，更优选50岁以上。另外，作为雌性生殖组织(尤其是卵巢组织)衰老的一个实例，可列举出卵巢储备功能(卵巢中残存的次级卵泡的数量)。如上所述，由于吡咯喹啉醌或其盐具有抑制雌性的amh消失或下降的效果，因此同时还具有提高卵巢储备功能的效果。
[0043]
吡咯喹啉醌或其盐发挥提高卵子质量的效果。因此，作为本发明的一个实施方案，提供一种含有吡咯喹啉醌或其盐的卵子质量提高剂。此处“卵子质量的提高”是指增加排卵数量，并保持或提高该排出的卵子的受精率，此处所谓的受精率是受精的卵子的数量相对于排出的卵子的总数的比例。因此，作为本发明的一个实施方案，提供一种含有吡咯喹啉醌或其盐的、用于增加排出的卵子的数量并保持或提高排出的卵子的受精率的制剂。此外，“卵子质量的提高”是指保持或提高卵子的受精率并保持或提高发育率，此处所谓的发育率是指受精卵中成为囊胚期胚胎的受精卵的比例。因此，作为本发明的一个实施方案，提供一种含有吡咯喹啉醌或其盐的、用于保持或提高卵子的受精率并保持或提高发育率的制剂。
[0044]
吡咯喹啉醌或其盐发挥改善或预防月经不调的效果。因此，作为本发明的一个实施方案，提供一种含有吡咯喹啉醌或其盐的月经不调的改善剂或预防剂。此处“月经不调”是指雌性的月经(若为闭经的雌性的非人类动物，则是指排卵)周期异常的状态。例如，对于人类而言，正常的月经周期为25～38天，月经周期为24天以内或者39天以上时、或3个月以上无月经时(闭经时)被视为月经不调。
[0045]
吡咯喹啉醌或其盐发挥促进产生雌激素(可列举出雌酮、雌二醇、雌三醇，优选雌二醇)的效果。因此，作为本发明的一个实施方案，提供一种含有吡咯喹啉醌或其盐的雌激素产生促进剂。此外，吡咯喹啉醌或其盐通过促进雌激素的产生，发挥改善或预防雌性因缺乏雌激素导致的症状的效果、改善或预防雌性的更年期症状的效果、改善或预防雌性的前更年期障碍的效果、或者改善或预防雌性的更年期障碍的效果，除此以外，还发挥补充女性激素的效果。因此，作为本发明的一个实施方案，提供一种含有吡咯喹啉醌或其盐的、雌性因缺乏雌激素导致的症状的改善剂或预防剂、雌性更年期症状的改善剂或预防剂、或者雌
性前更年期障碍或更年期障碍的改善剂或预防剂。
[0046]
吡咯喹啉醌或其盐发挥改善或预防卵巢过度刺激综合征的效果。因此，作为本发明的一个实施方案，提供一种含有吡咯喹啉醌或其盐的卵巢过度刺激综合征的改善剂或预防剂。此处，“卵巢过度刺激综合征”是指因促排卵剂的过度刺激导致卵巢膨胀，由此导致因腹腔积液或胸腔积液引起的各种症状，当为重症时，还会发生血液浓缩，引起肾衰竭或血栓等并发症。作为卵巢过度刺激综合征的具体症状，可列举出腹胀、恶心、体重急剧增加、尿量减少、腹痛、下痢等。此外，吡咯喹啉醌或其盐通过改善或预防卵巢过度刺激综合征，发挥改善或预防由卵巢过度刺激综合征引起的症状及卵巢过度刺激综合征的并发症的效果。另外，将上述各实施方案的含有吡咯喹啉醌或其盐的制剂统称为“本实施方案的制剂”。
[0047]
在本说明书中，“更年期”是指雌性停经前后的约10年内，对于人类而言，40岁后期至50多岁的期间属于更年期。此外，在本说明书中，“前更年期”是指较之上述更年期更年轻的时期，且为出现后述前更年期障碍的症状的时期，对于人类而言，30岁至40岁中期的时期属于前更年期。
[0048]
作为“雌性更年期障碍”的症状，例如可列举出呼吸困难、起立头晕、眩晕、四肢麻痹、四肢僵硬、水肿、疲劳感、耳鸣、头部充血、潮热(热潮红)、出汗、心悸、兴奋、失眠、焦躁、易怒、情绪不稳定、情绪低落、容易落泪、热情低下、焦虑感、头痛、肩酸、胸痛、腰痛、关节疼痛、四肢发冷、发痒、皮肤或眼睛干燥、恶心、食欲不振、腹痛、便秘、下痢、尿频、性交障碍、外阴不适感等。
[0049]
作为“雌性因缺乏雌激素导致的症状”，例如可列举出月经异常、自主神经失调症状、精神神经系统症状、泌尿生殖器官萎缩症状、高血脂症、动脉硬化、高血压、脑中风、骨质疏松症、骨质减少症、皮肤萎缩、关节痛、口干、味觉变化、睡眠障碍、上述的“雌性更年期障碍”的症状，除此以外，还可列举出日本妇产科学会编辑的“激素补充疗法指南2017年度版”中的“1.hrt的预期作用和效果”中记载的症状等。
[0050]
作为“雌性前更年期障碍(雌性青年性更年期障碍)”的症状，除上述“雌性更年期障碍”的症状以外，还可列举出经期不调、闭经等。
[0051]“雌性更年期症状”是指上述“雌性更年期障碍”的症状、“雌性前更年期障碍(雌性青年性更年期障碍)”的症状。然而，不仅限于“更年期”或“前更年期”，青年(例如，人类月经开始的十几岁)也有可能会出现该症状。作为“雌性更年期症状”，在上述等具体的症状中，症状程度也可以较轻微。例如可列举出虽自我感觉到潮热或出汗但其次数较少的状态、抑郁或肩酸的程度较小的状态等。
[0052]
吡咯喹啉醌为下述式表示的公知的化合物。
[0053]
[化学式1]
[0054][0055]
作为吡咯喹啉醌的盐，例如可列举出碱金属盐、碱土金属盐及铵盐。作为碱金属
盐，例如可列举出钠盐、钾盐及锂盐。作为碱土金属盐，例如可列举出钙盐及镁盐。
[0056]
作为吡咯喹啉醌或其盐，优选吡咯喹啉醌的碱金属盐，更优选吡咯喹啉醌的钠盐，进一步优选吡咯喹啉醌二钠盐。
[0057]
吡咯喹啉醌或其盐可使用市售产品。此外，作为吡咯喹啉醌或其盐，例如可使用纳豆、大豆、可可粉、可可块、可可、欧芹、青椒等含有吡咯喹啉醌或其盐的作物。
[0058]
用于人类时，对于本实施方案的制剂中的(a)成分的含量，从所给予的制剂的稳定性的角度出发，以本实施方案的制剂的总量为基准，(a)成分的总含量优选为0.01～30重量％，更优选为0.2～10重量％，进一步优选为1～5重量％，特别优选为1.3～3重量％。此外，用于非人类动物时，对于本实施方案的制剂中(a)成分的含量，以本实施方案的制剂的总量为基准，(a)成分的总含量优选为0.01～0.3重量％，更优选为0.02～0.2重量％。
[0059]
对于本实施方案的制剂，(a)成分的每日摄取量可根据进行摄取的个体的状态(体重、年龄、性别等)、制剂形态等而不同，用于人类时，从单次量的摄取容易度的角度、基于(a)成分的生理作用的有效性的角度、安全性的角度出发，(a)成分的每日摄取量优选为7～100mg，更优选为10～40mg，进一步优选为20～25mg，用于非人类动物时，优选为1～30mg/kg，更优选为2～20mg/kg。
[0060]
本实施方案的制剂可进一步含有多元胺(也称为“(b)成分”)、及生药(也称为“(c)成分”)。由此，可更显著发挥本发明的效果。
[0061]
多元胺是分子内包含2个以上伯氨基的脂肪族烃。作为多元胺的具体例，例如可列举出腐胺、尸胺、乙二胺、三亚甲基二胺、六亚甲基二胺、亚精胺、去甲精眯(caldine)、高亚精胺(homospermidine)、氨基丙基尸胺、精胺、热胺(thermine)、热精胺(thermospermine)、刀豆四胺(canavalmine)、氨基戊基去甲精眯(aminopentyl norspermidine)、氨基丙基高精胺(aminopropyl homospermine)、刀豆四胺、高精胺、嗜热性五胺(caldopentamine)、高嗜热性五胺(homocaldopentamine)、氨基丙基刀豆四胺、双(氨基丙基)高精胺、双(氨基丙基)去甲精胺(bis(aminopropyl)norspermine)、氨基丁基刀豆四胺、氨基丙基高精胺、均戊胺(homopentamine)、嗜热性六胺(caldohexamine)、高嗜热性六胺(homocaldohexamine)、热六胺(thermohexamine)、高热六胺(homothermohexamine)。从易于使用的角度出发，作为多元胺，优选亚精胺、精胺、腐胺，更优选亚精胺、精胺，进一步优选亚精胺。
[0062]
多元胺也可以使用市售产品。多元胺可以单独使用一种，也可以组合使用两种以上。此外，作为多元胺，也可以使用来自大豆(优选大豆胚芽)、小麦(优选小麦胚芽)或米(优选大米胚芽)等植物的提取物、来自鱼贝类(优选鱼白)的提取物、干燥清酒酵母等含有多元胺的组合物(也称为“多元胺组合物”)。当多元胺组合物为来自植物的提取物时，可使用水、或者乙醇等有机溶剂或这些溶剂的混合溶剂等作为提取溶剂。从易于使用的角度出发，作为多元胺组合物，优选来自植物的提取物，更优选来自大豆(优选大豆胚芽)的提取物。作为市售的多元胺组合物，例如可列举出“soypolya”(combi corporation制造)、“oryza polyamine-p”(oryza oil&fat chemical co.,ltd.制造)、“oryzapolyamine-lc”(oryza oil&fat chemical co.,ltd.制造)、“phytopolyamine-s”(toyobo co.,ltd.制造)、“phytopolyamine-sp”(toyobo co.,ltd.制造)、“elion sp”(mitsubishi gas chemical company,inc.制造)等。
[0063]
本实施方案的制剂中的(b)成分的含量没有特别限定，可根据(b)成分的种类、其
他掺合成分的种类及含量、制剂形态等适当设定。从制剂的稳定性的角度、减小(b)成分所具有的异味的影响的角度出发，作为(b)成分的含量，例如，以本实施方案的制剂的总量为基准，(b)成分的总含量优选为0.001～10重量％，更优选为0.01～0.1重量％，进一步优选为0.02～0.05重量％。
[0064]
在本实施方案的制剂中，含有多元胺组合物作为(b)成分时，多元胺组合物的含量没有特别限定，可根据多元胺组合物的种类、其他掺合成分的种类及含量、制剂形态等适当设定。从制剂的稳定性的角度、基于(b)成分的生理作用的有效性的角度、安全性的角度、减小(b)成分所具有的异味的影响的角度出发，作为多元胺组合物的含量，例如以本实施方案的制剂的总量为基准，多元胺组合物的总含量优选为5～35重量％，更优选为10～30重量％，进一步优选为14～23重量％。
[0065]
本实施方案的制剂中的(b)成分相对于(a)成分的含有比率没有特别限定，可根据(a)成分及(b)成分的种类、其他掺合成分的种类及含量、制剂形态等适当设定。从进一步提高本发明带来的效果的角度出发，作为(b)成分相对于(a)成分的含有比率，例如，相对于本实施方案的制剂中所包含的(a)成分的总含量1重量份，(b)成分的总含量优选为0.001～0.1重量份，更优选为0.01～0.03重量份，进一步优选为0.015～0.02重量份。
[0066]
在本实施方案的制剂中，当含有多元胺组合物作为(b)成分时，多元胺组合物相对于(a)成分的含有比率没有特别限定，可根据(a)成分及多元胺组合物的种类、其他掺合成分的种类及含量、制剂形态等适当设定。从进一步提高本发明带来的效果的角度出发，作为多元胺组合物相对于(a)成分的含有比率，例如，相对于本实施方案的制剂中所包含的(a)成分的总含量1重量份，多元胺组合物的总含量优选为5～15重量份，更优选为7～10重量份。
[0067]
在本实施方案的制剂中，当(b)成分包含亚精胺及精胺时，精胺相对于亚精胺的重量比率没有特别限定，可根据(a)成分及(b)成分的种类、其他掺合成分的种类及含量、制剂形态等适当设定。从进一步提高本发明带来的效果的角度出发，作为精胺相对于亚精胺的重量比率，例如优选为0.01～10，更优选为0.1～2，进一步优选为0.2～0.5。
[0068]
在本实施方案的制剂中，(b)成分的每日摄取量因进行摄取的个体的状态(体重、年龄、性别等)、制剂形态等而不同，但从基于(b)成分的生理作用的有效性的角度、安全性的角度、及减小(b)成分所具有的异味的影响的角度出发，(b)成分的每日摄取量优选为0.001～20mg，更优选为0.01～2mg，进一步优选为0.1～0.7mg，特别优选为0.3～0.4mg。
[0069]
在本实施方案的制剂中，当含有多元胺组合物作为(b)成分时，多元胺组合物的每日摄取量因进行摄取的个体的状态(体重、年龄、性别等)、制剂形态等而不同，但从单次量的摄取容易度的角度、基于(b)成分的生理作用的有效性的角度、安全性的角度、及减小(b)成分所具有的异味的影响的角度出发，优选为50～400mg，更优选为100～300mg，进一步优选为200～250mg，特别优选为201～220mg。
[0070]
生药是指具有药用目的的植物、动物、矿物等天然产物的全部或一部分，或者对该植物、动物、矿物等天然产物的全部或一部分实施干燥等简单加工而得到的物质。在本实施方案的制剂中，作为生药的形态，例如可列举出生药本身(原料药)；将原料药干燥、粉末化的生药粉末；利用水、或者乙醇等有机溶剂或这些溶剂的混合溶剂等对原料药或生药粉末进行提取而得到的生药提取物等。其中，从更加显著发挥本发明带来的效果的角度出发，优
选生药提取物。生药提取物可为浸提液本身(酊、流体提取物(fluid extracts)等)，也可以为将浸提液稀释或浓缩而成的产物(软稠提取物(viscous extracts)等)，或者还可以为将浸提液干燥后将其粉末化或制成膏状而成的产物(干燥提取物(dry extracts)等)。
[0071]
作为生药提取物的具体例，例如可列举出生姜提取物、玛卡提取物、甘草提取物、黄耆提取物、陈皮提取物、芍药提取物、人参提取物、姜黄提取物、肉苁蓉提取物、桂皮提取物、刺五加提取物、山楂提取物、地黄提取物、当归提取物、锯棕榈提取物、银杏叶提取物、柴胡提取物、升麻提取物、山药提取物、大枣提取物、白术提取物、苍术提取物、灵芝提取物、鹿茸提取物、东革阿里提取物、法国海岸松树皮提取物、欧洲栎提取物、野山药提取物、含薯蓣皂苷元的山芋提取物、管花肉苁蓉提取物、大蒜提取物、刺五加提取物、黎豆提取物、栀子提取物、喜来芝提取物、冬虫夏草菌丝体粉末、黑姜提取物、黑胡椒提取物、石榴籽提取物、牡荆提取物、黑升麻提取物、欧蒲公英提取物等。从制剂的稳定性的角度出发，作为生药提取物，优选玛卡提取物、人参提取物、锯棕榈提取物、生姜提取物、东革阿里提取物、法国海岸松树皮提取物、欧洲栎提取物、野山药提取物、含薯蓣皂苷元的山芋提取物、石榴籽提取物、牡荆提取物，更优选玛卡提取物、人参提取物。
[0072]
生药也可以使用市售产品。生药可以单独使用一种，或者也可以组合使用两种以上。
[0073]
本实施方案的制剂中的(c)成分的含量没有特别限定，可根据(c)成分的种类、其他掺合成分的种类及含量、制剂形态等适当设定。从更加显著发挥本发明带来的效果的角度出发，作为(c)成分的含量，例如以本实施方案的制剂的总量为基准，(c)成分的总含量优选为0.1～70重量％，更优选为1～10重量％，进一步优选为2～4重量％。
[0074]
本实施方案的制剂中的(c)成分相对于(a)成分的含有比率没有特别限定，可根据(a)成分及(c)成分的种类、其他掺合成分的种类及含量、制剂形态等适当设定。从进一步提高本发明带来的效果的角度出发，作为(c)成分相对于(a)成分的含有比率，例如相对于本实施方案的制剂中所包含的(a)成分的总含量1重量份，(c)成分的总含量优选为0.1～3重量份，更优选为0.5～2.5重量份，进一步优选为1～1.5重量份。
[0075]
本实施方案的制剂中的(c)成分相对于(b)成分的含有比率没有特别限定，可根据(b)成分及(c)成分的种类、其他掺合成分的种类及含量、制剂形态等适当设定。从进一步提高本发明带来的效果的角度出发，作为(c)成分相对于(b)成分的含有比率，例如相对于本实施方案的制剂中所包含的(b)成分的总含量1重量份，(c)成分的总含量优选为50～250重量份，更优选为80～200重量份，进一步优选为100～170重量份。
[0076]
本实施方案的制剂可以在不损害本发明的效果的范围内包含除(a)成分、(b)成分及(c)成分以外的药理活性成分或生理活性成分。作为该药理活性成分或生理活性成分的具体例，例如可列举出泛醌(辅酶q10)、维生素b1、维生素b2、维生素b6、叶酸、维生素b12、维生素c、维生素d、维生素a、维生素e、烟酸、泛酸钙、牛磺酸、肌肽、鹅肌肽、鲸肌肽、瓜氨酸、γ-氨基丁酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甘氨酸、精氨酸、鸟氨酸、肉碱、谷氨酸、谷氨酰胺、肌酸、肉碱、木樨草素、槲皮素、染料木苷、矢车菊素、白藜芦醇、薯蓣皂苷元、异黄酮苷元、异黄酮、硫辛酸、锌、铁、钙、硒、虾青素、玉米黄素、β-胡萝卜素、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸、胎盘提取物、碧萝芷(原花青素)、雌马酚等。从进一步提高本发明带来的效果的角度出发，作为药理活性成分或生理活性成分，优选泛醌(辅酶q10)、
维生素b12、维生素c、维生素e、虾青素、锌、肉碱、白藜芦醇、异黄酮、雌马酚、碧萝芷(原花青素)、叶酸，更优选泛醌(辅酶q10)、虾青素、锌、白藜芦醇、异黄酮、雌马酚、碧萝芷(原花青素)、叶酸。药理活性成分或生理活性成分可以单独使用一种，或者也可以组合使用两种以上。
[0077]
本实施方案的制剂可以在不损害本发明效果的范围内包含除上述成分以外的各种添加剂。作为该添加剂的具体例，例如可列举出赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、着色剂、矫味剂、矫臭剂、糖类、糖醇/多元醇类、高甜度甜味剂、油脂、乳化剂、增稠剂、酸味剂、果汁类等。作为赋形剂，可列举出乳糖、白糖、氯化钠、葡萄糖、淀粉、明胶、碳酸钙、高岭土、结晶纤维素、硅酸等。作为粘合剂，可列举出水、乙醇、丙醇、单糖浆、葡萄糖液、淀粉液、明胶液、纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丙基淀粉、甲基纤维素、乙基纤维素、磷酸钙、聚乙烯吡咯烷酮等。作为崩解剂，可列举出干燥淀粉、海藻酸钠、琼脂粉、碳酸氢钠、碳酸钙、月桂基硫酸钠、单硬脂酸甘油酯、乳糖等。作为润滑剂，可列举出滑石、硬脂酸盐、硼砂、聚乙二醇等。作为矫味剂，可列举出白糖、橙皮、柠檬酸、酒石酸等。作为糖类，可列举出蔗糖、异构化糖、葡萄糖、果糖、帕拉金糖、海藻糖、乳糖、木糖等糖等。作为糖醇/多元醇类，可列举出山梨糖醇、木糖醇、赤藓糖醇、乳糖醇、异麦芽酮糖醇、氢化糖浆、氢化麦芽糖糖浆、甘油、丙二醇等。作为高甜度甜味剂，可列举出阿斯巴甜、甜菊、乙酰舒泛钾、三氯蔗糖等。作为油脂，可列举出红花油(safflower oil)、葡萄籽油、葵花籽油(sunflower oil)、橄榄油、玉米油、芝麻油、大豆油、菜籽油、紫苏油等。作为乳化剂，可列举出蔗糖脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、卵磷脂等。作为增稠剂，可列举出角叉菜胶、黄原胶、瓜尔豆胶、果胶、刺槐豆胶等。作为酸味剂，可列举出柠檬酸、乳酸、苹果酸等。作为果汁类，可列举出柠檬汁、橙汁、浆果类果汁等。添加剂可以单独使用一种，或者也可以组合使用两种以上。从制剂化时的(a)成分和(b)成分的稳定性的角度出发，作为添加剂，优选包含油脂。
[0078]
本实施方案的制剂的剂型没有特别限定，例如可列举出片剂(包括口腔崩解片、咀嚼片、含片等)、颗粒剂、散剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、含片剂、胶冻剂(jellies)或液体制剂(包括混悬剂、乳剂、糖浆剂等)等口服剂；软膏剂、栓剂、贴剂、喷雾剂等外用剂；注射剂等。其中，从易于操作的角度、进一步提高本发明带来的效果的角度出发，优选口服剂，更优选片剂、颗粒剂、软胶囊剂、硬胶囊剂。
[0079]
本实施方案的制剂例如可用作药物、准药物(quasi drug)、化妆品、饮食品(饮料、食品)的成分。此外，本实施方案的剂例如可用作医药制剂、准药品制剂、特定保健用食品、营养功能食品、老人用食品、特别用途食品、功能性食品、健康辅助食品(营养补充剂)、食品用制剂(例如糖果片剂)、显而易见的食品(明
らか
食品)。进一步，本实施方案的制剂例如也可用作动物用药物、饲料添加剂。
[0080]
当本实施方案的制剂用作食品时，该食品可为在通常的食品中掺合(a)成分、及根据需要的其他成分而成的食品。作为这样的食品，可列举出曲奇、饼干、零食点心、果冻、软糖、巧克力、口香糖、饴糖、奶酪等固体食品；营养饮料、果汁、茶饮料、咖啡饮料、乳饮料等液体食品。
[0081]
本实施方案的制剂可适宜地用于需要抑制雌性生殖组织的衰老进程的作用的对象(例如，人类；牛、猪、马、绵羊、山羊、狗、兔、小鼠、大鼠、豚鼠、沙鼠、仓鼠、雪貂等非人类动物)。从进一步提高本发明带来的效果的角度出发，作为对象，优选人类。此外，从进一步提
高本发明带来的效果的角度出发，在非人类动物中，优选为牛、猪、马，更优选猪。
[0082]
[2.抑制卵巢、卵泡或卵子的衰老进程的方法]
[0083]
吡咯喹啉醌或其盐具有抑制卵巢、卵泡或卵子的衰老进程的作用。因此，作为本发明的一个实施方案，提供一种摄取含有吡咯喹啉醌或其盐的组合物的、抑制卵巢、卵泡或卵子的衰老进程的方法。卵巢、卵泡或卵子可以是人类的卵巢、卵泡或卵子，也可以是牛、猪、马、绵羊、山羊、狗、兔、小鼠、大鼠、豚鼠、沙鼠、仓鼠、雪貂等非人类动物的卵巢、卵泡或卵子。从进一步提高本发明带来的效果的角度出发，优选人类的卵巢、卵泡或卵子。此外，从进一步提高本发明带来的效果的角度出发，在非人类动物的卵巢、卵泡或卵子中，优选牛、猪或马的卵巢、卵泡或卵子，更优选猪的卵巢、卵泡或卵子。
[0084]
另外，关于这些实施方案中的组合物中的吡咯喹啉醌或其盐的种类、含量及每日摄取量等、其他成分的种类、含量及每日摄取量等、组合物的制剂形态等，如[1.卵巢、卵泡或卵子的抗衰老剂]中的说明所述。
[0085]
实施例
[0086]
以下，基于实施例等对本发明进行更具体的说明。但本发明不受以下的实施例的限定。另外，以下的试验例均在广岛大学动物实验伦理委员会的批准下实施。
[0087]
[试验例1：吡咯喹啉醌的给予对雌性小鼠血中amh(抗缪勒管激素)的影响]
[0088]
通过饮水对6月龄莱氏细胞特异性nrg1缺失雌性小鼠给予2周pqq二钠盐(2mg/kg/天)(n＝5)。此外，对6月龄莱氏细胞特异性nrg1缺失雄性小鼠(ko；对照组)及6月龄野生型小鼠(wt小鼠)分别仅给予2周水。此后，回收血液，使用amh elisa试剂盒(elabscience biotechnology，bethesda，md)并按照该试剂盒的使用方法测定作为卵泡标记物的amh(抗缪勒管激素)的浓度。将结果示于图1。另外，莱氏细胞特异性nrg1缺失雌性小鼠的寿命较短，6月龄相当于人类40多岁。
[0089]
如图1所示，未给予pqq二钠盐的对照组雌性小鼠与wt小鼠相比，amh的浓度下降，而给予了pqq二钠盐的雌性小鼠与wt小鼠相比，amh的浓度上升。即，可确认到通过摄取pqq二钠盐，卵巢组织恢复青春。
[0090]
[试验例2：吡咯喹啉醌的给予对雌性小鼠发情周期的影响]
[0091]
通过饮水持续对6月龄莱氏细胞特异性nrg1缺失雌性小鼠(ko)给予pqq二钠盐(2mg/kg/天)。另外，将仅给予了水的雌性小鼠作为对照组。通过阴道涂片检查考察各小鼠的发情周期。另外，以如下方式进行阴道涂片检查：以生理盐水在阴道内回流，将该回流物涂抹于载玻片。干燥后，以甲醇固定，进行吉姆萨染色(giemsa staining)。在倒置显微镜(keyence corporation制造)下观察该载玻片，仅观察到白血球时判定为休情期，仅观察到有核上皮细胞时判定为发情前期，仅观察到无核上皮细胞时判定为发情期，观察到混合存在无核上皮细胞及白血球且无核上皮细胞的数量较多时判定为微发情期，观察到混合存在无核上皮细胞及白血球且白血球的数量较多时判定为发情后期。将结果示于图2。
[0092]
如图2所示，可确认到：未给予pqq二钠盐的对照组雌性小鼠始终保持微发情期，未观察到发情的周期性变化，相对于此，给予了pqq二钠盐的雌性小鼠自给予开始后经过约14天后再次开始发情的周期性变化。即，可确认到通过给予pqq二钠盐，雌性小鼠的排卵周期异常得以改善。
[0093]
[试验例3：吡咯喹啉醌的给予对卵子的影响]
[0094]
通过饮水对3周龄的未成熟雌性小鼠给予pqq二钠盐(2mg/kg/天)(n＝5)。另外，将仅给予了水的雌性小鼠作为对照组。在开始给予并经过2天后的时间点，给予诱导卵泡发育的ecg(马绒毛膜促性腺激素)4iu，接着在48小时后给予hcg(人绒毛膜促性腺激素)5iu。此后，测定各雌性小鼠的排卵数量。排卵数量通过以下方式进行计算：自被宰杀的小鼠回收输卵管并切开输卵管壶腹部，从而回收排出的卵子、卵丘细胞复合体，通过在立体显微镜下肉眼观察该复合体，从而进行计算。此外，使用所排出的卵子进行体外受精，计算出其受精率及发育率。此处，受精卵是指受精24小时后的分裂卵，受精率是指成功受精的卵子的数量相对于所排出的成熟卵子的总数的比例。此外，发育率是指受精卵中成为囊胚期胚胎的受精卵的比例。对于排卵数量及受精率，将以平均值
±
标准偏差所表示的结果示于表1。另外，对于小鼠而言，3周龄相当于人类中开始月经的十几岁。
[0095]
[表1]
[0096] 对照组pqq二钠盐排卵数量(个)40.41
±
1.1260.21
±
1.77受精卵数量(个)26.63
±
1.2941.67
±
1.48受精率(％)65.77
±
2.1069.41
±
0.77发育率(％)80.42
±
2.4488.09
±
1.56
[0097]
如表1所示，相较于未给予pqq二钠盐的对照组雌性小鼠，给予了pqq二钠盐的雌性小鼠的排卵数量增加且同时保持了体外受精率，并在保持了体外受精率的同时发育率增高。即，可确认到通过给予pqq二钠盐，卵子质量增高。
[0098]
[试验例4：吡咯喹啉醌的给予对血中雌性激素浓度的影响]
[0099]
通过饮水对3周龄未成熟雌性小鼠给予pqq二钠盐(2mg/kg/天)。另外，将仅给予了水的雌性小鼠作为对照组。在开始给予并经过2天后的时间点，腹腔给予诱导卵泡发育的ecg(马绒毛膜促性腺激素)4iu，接着在48小时后腹腔给予hcg(人绒毛膜促性腺激素)5iu。在即将给予ecg时开始经时地回收各雌性小鼠的血清，使用endocrine technology,inc.(newark，ca)的市售试剂盒分别测定作为卵泡发育标志物的血中雌二醇(e2)浓度、及作为黄体标志物的黄体酮(p4)浓度。将结果示于图3。
[0100]
如图3中的(a)所示，相较于未给予pqq二钠盐的对照组雌性小鼠，给予了pqq二钠盐的雌性小鼠的血中雌二醇浓度经时性地升高。即，可确认到通过给予pqq二钠盐，促进了雌二醇的产生。众所周知雌二醇是在激素补充疗法中广泛使用的雌性激素之一，其用于更年期障碍的治疗或更年期症状的改善。即，可确认到吡咯喹啉醌或其盐可用作雌性因缺乏雌激素导致的症状的改善剂或预防剂、雌性的前更年期障碍或更年期障碍的改善剂或预防剂。由此，前更年期或更年期的女性可无痛苦地迎来闭经。
[0101]
此外，如图3中的(b)所示，对于给予了pqq二钠盐的雌性小鼠与未给予pqq二钠盐的对照组雌性小鼠，未发现两者在血中黄体酮浓度上升方面有较大差异。已知黄体酮与卵巢过度刺激综合征中血液的浓缩相关。即，可确认到吡咯喹啉醌或其盐通过促进雌二醇的产生并缓解黄体酮的产生，可用作卵巢过度刺激综合征的预防剂。
[0102]
[试验例5：吡咯喹啉醌的给予对卵巢纤维化的影响]
[0103]
通过饮水对6月龄莱氏细胞特异性nrg1缺失雌性小鼠(ko)给予2周pqq二钠盐(2mg/kg/天)。然后，对摘除的卵巢进行psr染色，使用倒置显微镜(keyence corporation制
造)以20倍的倍率进行观察。将结果示于图4。
[0104]
如图4所示，给予pqq二钠盐前的小鼠的基质细胞内被整体染成红色，由此可确认到胶原蛋白的沈积，即卵巢的纤维化。此外，同时也观察到了基质细胞的萎缩。另一方面，对于给予2周pqq二钠盐的小鼠，确认到了其基质细胞的红色消失，已纤维化的基质细胞被改善为健康的状态。已知卵巢的基质细胞随着增龄而逐渐纤维化。即，可确认到通过摄取pqq二钠盐，卵巢组织恢复青春。此外，观察到了囊状卵泡，确认到了卵泡的萎缩也得到改善，因此可确认到卵子的质量得到改善。
[0105]
根据试验例1～5的结果，通过摄取吡咯喹啉醌或其盐，能够确保因临近闭经产生的身心异常而容易受损的女性的qol，能够使高龄女性也生活的有活力和青春。