一种治疗重症肌无力的药物组合物及其制备方法和用途

1.本发明属于中药领域，具体涉及一种治疗重症肌无力的药物组合物及其制备方法和用途。


背景技术：

2.重症肌无力(myasthenia gracis，简称mg)是一种由抗体介导的获得性自身免疫性疾病，为神经肌肉接头处传递障碍而引起的慢性疾病。临床主要表现为部分或全身骨骼肌无力和极易疲劳，当出现重症肌无力危象时严重危及患者生命。一线治疗为长期服用强的松和胆碱酯酶抑制剂，但约1/2的患者经长期胆碱酯酶抑制剂和强的松治疗后仍然无法获得缓解。而采用其他免疫抑制剂则会抑制患者全身免疫系统，引起其他不良反应。
3.传统中药是治疗重症肌无力的一种有效方式。重症肌无力中医将此成为瘘证。瘘证就是指肢体筋脉驰缓，软弱无力，日久因不能随意运动而致肌肉萎缩的一类病症。中医认为瘘证的成因主要是由于“热”和“虚”，先天不足，后天失养，脏腑亏虚，功能失调所致。而重症肌无力的病因特点是肺脾肾虚，致气虚下陷，脾虚失运，肾虚失固，筋脉肌肉失养，脏腑功能失调，而肌肉瘘软无力。同时，由于肺脾肾虚，卫外失固，湿浊内生而致外感风邪，内伤痰湿，内外合攻，加重病情。中医根据“虚则补之，损者益之”、“陷则升之”的治疗原则，以健脾益气，补益气血，滋补肝肾，温阳补肾为基本治疗方法，并辅以祛瘀活血，舒筋活络等疗法。
4.由于中医治疗的疗效可靠稳定，治愈后不易复发，中药治疗重症肌无力展现了十分广阔的前景。专利cn104758436a、cn104721322a和cn104274704a均公开了治疗重症肌无力的药物组合物，但是这些药物组合物治疗重症肌无力的效果还不够理想。
5.目前尚未见本发明药物组合用于治疗重症肌无力。


技术实现要素：

6.本发明的目的是提供一种治疗重症肌无力的药物组合物及其制备方法和用途。
7.本发明提供了一种治疗重症肌无力的药物组合物，它是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂：党参1～5份，生黄芪1～10份，当归0.5～5份，地龙0.5～5份，川芎0.5～5份，赤芍1～5份，桃仁0.1～1份，红花0.1～1份，炒白术1～5份，柴胡1～5份，升麻0.1～1份，陈皮0.5～5份。
8.进一步地，前述的药物组合物是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂：党参2份，生黄芪6份，当归1份，地龙1份，川芎1份，赤芍1.5份，桃仁0.5份，红花0.5份，炒白术1.5份，柴胡1.5份，升麻0.5份，陈皮1份。
9.进一步地，前述药物组合物是由各重量配比原料药的原生药粉、水或有机溶剂提取物，加入药学上可接受的辅料或者辅助性成分制备而成的制剂。
10.进一步地，所述制剂为口服制剂。
11.进一步地，所述口服制剂为汤剂、颗粒剂、丸剂、片剂或胶囊剂。
12.本发明还提供了一种制备前述的药物组合物的方法，它包括如下步骤：取各重量
配比的原料药，直接打粉，或者加入水或有机溶剂提取，再加入药学上可接受的辅料或者辅助性成分，即得。
13.进一步地，前述的方法包括如下步骤：取各重量配比的原料药，加入水进行煎煮，煎煮后过滤，合并滤液，即得。
14.进一步地，所述煎煮共煎煮1～3次，每次煎煮加入水的体积为原料药总重量的8～10倍，每次煎煮30～60min。
15.本发明还提供了前述的药物组合物在制备治疗重症肌无力的药物中的用途。
16.本发明中，生黄芪为豆科植物蒙古黄芪astragalus membranaceus(fisch.)bge.var.mongholicus(bge.)hsiao或膜荚黄芪astragalus membranaceus(fisch.)bge.的根晒干切片而得。
17.本发明中，炒白术为麸炒白术，将蜜炙麸皮撒入热锅内，待冒烟时加入白术片，炒至黄棕色、逸出焦香气，取出，筛去蜜炙麸皮，即得。每100kg白术片，用蜜炙麸皮10kg。详见《药典2020》。
18.本发明药物组合物各药味配伍精当，对于重症肌无力有显著治疗效果，该药物组合物各药味发挥了协同增效作用，与其他药物组合相比，本发明药物组合物显著提高了对重症肌无力的治疗效果。同时，本发明药物组合物治疗重症肌无力时无明显毒副作用，安全性高，显著提高了患者的生活质量，具有良好的应用前景。
19.显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
20.以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
21.本发明具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。
22.实施例1、本发明药物组合物的制备
23.1、原料药配比：党参2g、生黄芪6g、当归1g、地龙1g、川芎1g、赤芍1.5g、桃仁0.5g、红花0.5g、炒白术1.5g、柴胡1.5g、升麻0.5g、陈皮1g。
24.2、制备方法：称取上述原料药，加入清水进行煎煮，共煎煮3次，每次煎煮加入清水的体积为原料药总重量的8～10倍(ml/g)，每次煎煮30～60min，煎煮后过滤，合并滤液，得到汤剂。
25.实施例2、本发明药物组合物的制备
26.1、原料药配比：党参1g、生黄芪1g、当归0.5g、地龙0.5g、川芎0.5g、赤芍1g、桃仁0.1g、红花0.1g、炒白术1g、柴胡1g、升麻0.1g、陈皮0.5g。
27.2、制备方法：同实施例1。
28.实施例3、本发明药物组合物的制备
29.1、原料药配比：党参5g、生黄芪10g、当归5g、地龙5g、川芎5g、赤芍5g、桃仁1g、红花1g、炒白术5g、柴胡5g、升麻1g、陈皮5g。
30.2、制备方法：同实施例1。
31.实施例4、本发明药物组合物制备成制剂
32.按照实施例1～3任一项所述原料配比称取各原料药，按照本领域常规技术手段还可制备成颗粒剂、丸剂、片剂、胶囊剂等制剂形式。
33.以下通过具体试验例证明本发明药物组合物的有益效果。
34.试验例1、本发明药物组合物对于重症肌无力小鼠模型的功效性试验
35.1、试验方法
36.取70只5
‑
7周spf级的c57bl/6雌性小鼠，所有动物自购买后1周内不作特殊处理，以利于其适应周围环境。然后按随机数字表法将其分为正常对照组(10只)、模型组(10只)、本发明组合物组(10只)、对照1组(10只)、对照2组(10只)、对照3组(10只)、对照4组(10只)。各组小鼠体重无显著性差异。
37.正常对照组：正常动物；
38.模型组：仅构建重症肌无力模型，但不给药治疗的小鼠；
39.本发明组合物组：使用本发明实施例1制备的药物组合物；
40.对照1组：使用2g党参、6g生黄芪、1g当归、1.5g炒白术、1.5g柴胡、0.5g升麻、1g陈皮，按照实施例1所述制备方法制备而得的药物组合物；
41.对照2组：使用6g生黄芪、1.5g柴胡、1g当归、0.5g升麻，按照实施例1所述制备方法制备而得的药物组合物；
42.对照3组：使用1.5g柴胡、0.5g升麻、1g当归，按照实施例1所述制备方法制备而得的药物组合；
43.对照4组：使用党参1g、生黄芪1g、当归0.5g、地龙1g、川芎1g、赤芍1.5g、桃仁0.5g、红花0.5g、炒白术1.5g、柴胡1g、升麻0.5g、陈皮1g，按照实施例1所述制备方法制备而得的药物组合物。
44.除正常对照组外，其余小鼠均采用以下描述的方法构建实验性重症肌无力小鼠模型：首先用无菌生理盐水充分溶解乙酰胆碱受体(achr)，再与等量完全弗氏佐剂(cfa)充分混匀，用针式匀浆器反复推匀、乳化制成油包水的抗原乳剂(使achr的最终浓度为20μg/200μl)。然后采用灭菌后的双蒸水将戊巴比妥钠稀释成50mg/ml的戊巴比妥钠原液，将其置于4℃冰箱内保存。每次使用前同样采用灭菌后的双蒸水稀将其释成5mg/ml。每只小鼠根据体重，按65mg/kg的量腹腔注射5mg/ml的戊巴比妥钠溶液，待麻醉满意后再进行后续操作，以减轻小鼠的痛苦。造模方法为：第0天每只小鼠于两侧肩部以及两侧后足垫的皮下，每个部位注射50ml含有achr的抗原乳剂(浓度为20μg/200μl)。在第30天和第60天的时候按同样的方法制成抗原乳剂，然后在小鼠双肩和双侧大腿外侧皮下注射与第1次相同剂量的抗原乳剂以加强免疫。每天采用连续抓握的方法检测小鼠的肌力。
45.从第61天(即最后一次注射的第二天)开始给药。本发明组合物组、对照1组、对照2组、对照3组、对照4组的给药方式：每天给药2次，按照每次给药1.2ml/kg的剂量，采取灌胃的方式给药；正常对照组和模型组给予等体积的生理盐水，连续给药30天，给药30天后，对试验动物进行体重测量，并采用连续抓握的方法检测小鼠的肌力：0分表示无任何肌无力的现象；1分表示安静时无肌无力现象，连续抓握20次后出现下颌无力，抬头不能；2分表示在安静时即出现下颌无力，抬头不能；3分表示小鼠呈衰竭状态，生命垂危。检测结果如表1所示。
46.表1.本发明药物组合物对于重症肌无力小鼠的治疗效果
[0047][0048]
多组织间的比较采用one way anova分析，当p＜0.05时认为多组之间均值存在差异。然后采用lsd法分别比较本发明组合物组(t)和各组之间的差异，结果如表2所示。
[0049]
表2.本发明药物组合物与各组之间的效果比较
[0050]
对比组别t vs.eamgt vs.c1t vs.c2t vs.c3t vs.c4p(小鼠体重)＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05p(肌力评分)＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05＜0.05
[0051]
试验结果显示：与正常小鼠相比，造模后的小鼠体重显著降低，使用药物治疗后小鼠体重得到增加；与对照1～4组相比，本发明组合物组小鼠体重增加最显著，体重接近于正常对照组。同时，与正常小鼠相比，造模后的小鼠出现显著的重症肌无力症状，使用药物治疗后重症肌无力症状得到改善，肌力评分降低，本发明组合物组改善效果最显著。表明采用本发明组合物组治疗能够显著改善重症肌无力小鼠的症状，使轻重症肌无力小鼠的体重得到恢复。
[0052]
试验结果说明：本发明药物组合物能够治疗重症肌无力，该药物组合物中的各味药物发挥了协同增效作用，在相同剂量的情况下，本发明特定药味及用量组成的药物组合物治疗重症肌无力效果显著优于其他药味或用量组成的药物组合物，增强了治疗重症肌无力的效果。
[0053]
试验例2、本发明药物组合物的临床治疗效果
[0054]
1、临床资料
[0055]
本病例研究来源于四川大学华西医院重症肌无力患者，共纳入重症肌无力患者189例，平均年龄为39.5
±
12.4岁，平均病程为4.5
±
3.9年。
[0056]
1.1纳入标准
[0057]
①
年龄为6
‑
60岁；
[0058]
②
根据中国重症肌无力诊断和治疗指南(2015版)确诊为重症肌无力的患者：1)符合重症肌无力的典型临床表现；2)achr抗体或musk抗体阳性；3)肌电图示低频衰减；4)抗乙酰胆碱酯酶治疗有效；
[0059]
③
初次发病或既往确诊重症肌无力此次复发的患者经正规服用溴吡斯的明(60mg tid)以及醋酸泼尼松0.5～1.0mg/kg持续6周qmg评分改善程度＜25％；
[0060]
④
osserman分型分i型(眼肌型)和ⅱ型(ⅱa轻度全身型和ⅱb中度全身型)。
[0061]
1.2排除标准
[0062]
①
胸部ct扫描显示胸腺瘤拟行手术治疗；
[0063]
②
osserman分型分ⅲ型(重度激进型)、ⅳ型(迟发重度型)和v型(肌萎缩型)的患
者；
[0064]
③
合并心、肝、肾、肺功能不全等病情严重者；
[0065]
④
已出现重症肌无力危象的患者；
[0066]
⑤
不愿参加本项目的患者。
[0067]
2、治疗方法
[0068]
所有患者随机分组：
[0069]
本发明组合物组(32例患者)：本发明实施例1制备的药物组合物；
[0070]
对照1组(31例患者)：使用2g党参、6g生黄芪、1g当归、1.5g炒白术、1.5g柴胡、0.5g升麻、1g陈皮，按照实施例1所述制备方法制备而得的药物组合物；
[0071]
对照2组(31例患者)：使用6g生黄芪、1.5g柴胡、1g当归、0.5g升麻，按照实施例1所述制备方法制备而得的药物组合物；
[0072]
对照3组(32例患者)：使用1.5g柴胡、0.5g升麻、1g当归，按照实施例1所述制备方法制备而得的药物组合；
[0073]
对照4组(32例患者)：使用党参1g、生黄芪1g、当归0.5g、地龙1g、川芎1g、赤芍1.5g、桃仁0.5g、红花0.5g、炒白术1.5g、柴胡1g、升麻0.5g、陈皮1g，按照实施例1所述制备方法制备而得的药物组合物。
[0074]
所有患者均在既往治疗方案的基础上分别添加本发明实施例1、对照1组、对照2组、对照3组和对照4组制备的药物组合物治疗，各组药物组合物的使用方法：每天3次，每次100ml，连续服用2
‑
6周，根据患者病情逐渐停药，对所有患者连续随访6个月。
[0075]
空白对照组(31例患者)：不接受中药制剂治疗，继续服用强的松和/或溴吡斯的明治疗的mg患者。
[0076]
3、疗效判断标准
[0077]
基于重症肌无力定量评分(qmg评分)对患者治疗效果进行评价。
[0078]
痊愈(完全缓解)：经治疗后患者重症肌无力定量评分(qmg评分)为0分；
[0079]
有效(部分缓解)：经治疗后患者重症肌无力定量评分(qmg评分)较服用中药制剂前改善超过25％；
[0080]
无效：经治疗后患者重症肌无力定量评分(qmg评分)较服用中药制剂前改善＜25％。
[0081]
总有效率(％)＝(痊愈病例数+有效病例数)/总病例数
×
100％。
[0082]
4、治疗结果
[0083]
经本发明药物组合物治疗后：共治疗32例患者，其中25例获得了完全缓解，4例获得部分缓解，3例无效，总有效率为90.6％，完全缓解率为78.1％。所有患者均未诉明显不适。
[0084]
经对照1组药物组合物治疗后：共治疗31例患者，其中11例获得了完全缓解，10例获得部分缓解，10例无效，总有效率为67.8％，完全缓解率为35.4％。其中一例患者诉稍恶心，未行特殊治疗，自行好转。
[0085]
经对照2组药物组合物治疗后：共治疗31例患者，其中10例获得了完全缓解，12例获得部分缓解，9例无效，总有效率为70.9％，完全缓解率为32.2％。所有患者均未诉明显不适。
[0086]
经对照3组药物组合物治疗后：共治疗32例患者，其中9例获得了完全缓解，12例获得部分缓解，11例无效，总有效率为65.6％，完全缓解率为28.1％。所有患者均未诉明显不适。
[0087]
经对照4组药物组合物治疗后：共治疗32例患者，其中10例获得了完全缓解，11例获得部分缓解，11例无效，总有效率为65.6％，完全缓解率为31.2％。所有患者均未诉明显不适。
[0088]
空白对照组治疗后：共31例患者，其中5例获得了完全缓解，16例获得部分缓解，10例无效，总有效率为67.7％，完全缓解率为16.1％。其中，3例患者出现转氨酶升高，2例患者自诉服药后稍有恶心，3例患者自诉体重明显升高。
[0089]
上述试验结果可知：本申请药物组合物治疗重症肌无力效果最优，总有效率达90.6％，完全缓解率达78.1％。同时，与服用强的松和溴吡斯的明相比，本发明药物组合物无明显毒副作用，安全性高。
[0090]
综上，本发明药物组合物各药味配伍精当，对于重症肌无力有显著治疗效果，该药物组合物各药味发挥了协同增效作用，与其他药物组合相比，本发明药物组合物显著提高了对重症肌无力的治疗效果。同时，本发明药物组合物治疗重症肌无力时无明显毒副作用，安全性高，显著提高了患者的生活质量，具有良好的应用前景。