本发明涉及抗癌药物技术领域,尤其涉及桔梗皂苷d2在制备预防和/或治疗肝癌药物中的应用。
背景技术:
癌症是对人类生命健康危害最大的疾病之一,每年都有大量的人死于癌症。抗癌药物研发一直是药学领域的研究热点。抗癌药物中有74%是天然产物或其衍生物,如紫杉醇及其衍生物就是目前临床上应用效果较好的抗癌药物。因此,从天然产物中寻找抗癌化合物具有重要意义。
桔梗皂苷d2是从桔梗中提取的新型皂苷类化合物(choicy,etal.aqueousextractisolatedfromplatycodongrandiflorumelicitsthereleaseofnitricoxideandtumornecrosisfactor-alphafrommurinemacrophages[j].internationalimmunopharmacology,2001,1(6):1141-1151.)。目前,已公开的桔梗皂苷d2的用途主要包括:抗炎(wangz,etal.anti-inflammatoryactivitiesofcompoundsisolatedfromtherhizomeofanemarrhenaasphodeloides[j].molecules,2018,23(10).)、抗丙型肝炎病毒(kimj-w,etal.triterpenoidsaponinsisolatedfromplatycodongrandifloruminhibithepatitiscvirusreplication[j].evidence-basedcomplementaryandalternativemedicine,2013,2013.)、抗乙型肝炎病毒(xiey,etal.platycodind2improvesspecificcellularandhumoralresponsestohepatitisbsurfaceantigeninmice[j].chemistry&biodiversity,2010,7(1):178-185.)。而桔梗皂苷d2在抗癌领域中的应用尚未见报道。
技术实现要素:
本发明的目的是提供一种桔梗皂苷d2的新用途,具体涉及桔梗皂苷d2在制备预防和/或治疗肝癌药物中的应用。
本发明为解决技术问题所采用的技术方案如下:
本发明的桔梗皂苷d2在制备预防和/或治疗肝癌药物中的应用。
作为优选的实施方式,所述桔梗皂苷d2的浓度为1-100μm。
作为优选的实施方式,所述桔梗皂苷d2的结构式如下所示:
作为优选的实施方式,所述桔梗皂苷d2对人肝癌细胞株hepg-2、hcclm3和huh-7生长的ic50值分别为:23.02±0.855μm、29.47±0.841μm和24.97±0.821μm。
作为优选的实施方式,所述桔梗皂苷d2通过抑制人肝癌细胞株hepg-2、hcclm3和huh-7的生长发挥抗肝癌活性。
作为优选的实施方式,所述桔梗皂苷d2对人正常肝细胞thle-2的生长无抑制作用。
作为优选的实施方式,所述桔梗皂苷d2具有对肿瘤细胞选择性的抑制作用。
本发明的有益效果是:
本发明通过体外cck-8抗癌活性评价发现,桔梗皂苷d2对人肝癌细胞株hepg-2、hcclm3和huh-7的生长具有显著的抑制作用,抑制这3株细胞生长的ic50值分别为23.02±0.855μm、29.47±0.841μm和24.97±0.821μm,桔梗皂苷d2对于人肝癌细胞株的抑制活性很强。而桔梗皂苷d2对于人正常肝细胞thle-2的生长抑制作用较小,表现出明显的选择性抑制作用。桔梗皂苷d2显示出了良好的抗肝癌活性,能够用于制备抗肝癌药物,具有良好的开发应用前景。
附图说明
图1为实施例1中采用cck-8法评价化合物桔梗皂苷d2对人肝癌细胞株hepg-2的生长抑制作用结果。
图2为实施例1中采用cck-8法评价化合物桔梗皂苷d2对人肝癌细胞株hcclm3的生长抑制作用结果。
图3为实施例1中采用cck-8法评价化合物桔梗皂苷d2对人肝癌细胞株huh-7的生长抑制作用结果。
图4为实施例1中采用cck-8法评价化合物桔梗皂苷d2对人正常肝细胞thle-2的生长抑制作用结果。
具体实施方式
本发明的桔梗皂苷d2在制备预防和/或治疗肝癌药物中的应用。
优选的,桔梗皂苷d2的浓度为1-100μm。
优选的,桔梗皂苷d2的结构式如下所示:
优选的,桔梗皂苷d2对人肝癌细胞株hepg-2、hcclm3和huh-7生长的ic50值分别为:23.02±0.855μm、29.47±0.841μm和24.97±0.821μm。
优选的,桔梗皂苷d2通过抑制人肝癌细胞株hepg-2、hcclm3和huh-7的生长发挥抗肝癌活性。
优选的,桔梗皂苷d2对人正常肝细胞thle-2的生长无抑制作用。
优选的,桔梗皂苷d2具有对肿瘤细胞选择性的抑制作用。
下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
材料来源:
桔梗皂苷d2购自成都普瑞法科技开发有限公司。
人肝癌细胞株hepg-2购自北京北纳创联生物技术研究院。
人肝癌细胞株hcclm3购自北京北纳创联生物技术研究院。
人肝癌细胞株huh-7购自北京北纳创联生物技术研究院。
人正常肝细胞thle-2购自北京北纳创联生物技术研究院。
实施例1采用cck-8法评价化合物桔梗皂苷d2对人肝癌细胞株的生长抑制作用
方法:消化处于对数生长期的人肝癌细胞株hepg-2、hcclm3和huh-7。计数并用完全细胞培养液调整细胞浓度至1×105个/ml,按100μl/孔接种于96孔细胞培养板(即1×104个/孔),待细胞贴壁后(24h左右),吸弃培养液,用hank’s液洗涤2次。试验分为空白对照组和药物处理组。空白对照组更换含有10%胎牛血清的dmem培养基;药物处理组更换含有浓度为100μm、50μm、20μm、10μm、5μm和1μm的桔梗皂苷d2培养基。以同样的方式处理人正常肝细胞thle-2。培养48h后吸弃孔中培养液,并加入100μl/孔的cck-8染液(按cck-8染液与培养基体积比为1:9的比例与培养基混匀制成工作液),继续放于培养箱中培养2h,利用酶标仪(tecan公司产品)测定吸光值(波长490nm),并根据吸光值计算细胞存活情况,每个处理设6个重复孔。按以下公式计算杀伤率:
杀伤率(%)=(对照孔a值-实验孔a值)/对照孔a值
结果:如图1-3所示,桔梗皂苷d2对人肝癌细胞株hepg-2、hcclm3和huh-7的生长具有显著的抑制作用。桔梗皂苷d2抑制人肝癌细胞株hepg-2、hcclm3和huh-7生长的ic50值分别为:23.02±0.855μm、29.47±0.841μm和24.97±0.821μm;且对人正常肝细胞thle-2抑制作用较小,如图4所示,桔梗皂苷d2具有对肿瘤细胞选择性的抑制作用。
结论:由上述实验证实,桔梗皂苷d2对人肝癌细胞株hepg-2、hcclm3和huh-7的生长具有很好的抑制作用。由此说明桔梗皂苷d2具有抗肝癌活性,能够应用于制备抗肝癌药物。
最后应说明的是:以上实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换,但这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。