1.本发明涉及药用植物铜锤玉带草的提取工艺，具体涉及铜锤玉带草提取物的有效成分的提取工艺。
背景技术：
2.铜锤玉带草 ( pratia begoniifolia(wall.) lindl.)，属桔梗科(campanulaceae)，又称地茄子草、小铜锤，生于阴湿田坎边，或山林阴处
1.。全草药用，用以祛风除湿、活血解毒，良好的抗炎、镇痛作用，可用于治疗风湿疼痛，跌打损伤，乳痈，无名肿毒等作用。
3.《铜锤玉带草食用开发研究》对其果实在食品领域进行了开发研究，《铜锤玉带草果皮色素的提取及稳定性研究》对果实的色素进行了提取和稳定性研究，《超声波辅助提取铜锤玉带草茎叶黄酮类化合物的工艺研究》对枝叶的黄酮提取进行了报道，但目前还没有对果实黄酮提取的报道。本研究以铜锤玉带草的果实为材料，对其总黄酮的提取工艺进行探索。
技术实现要素：
4.本发明的一个目的在于提供以铜锤玉带草的果实为材料，对其铜锤玉带草的有效成分总黄酮的有效成分提取工艺。
5.一种铜锤玉带草提取物的有效成分提取工艺，其特征在于，包括以下步骤：s1：将采集的铜锤玉带草果实洗净晾干，在105℃杀青10min，后置于 65 ℃ 干燥箱中烘干至恒重后粉碎至粉末；s2：将所述步骤s1制得粉末按1：15-1:25之间比例加入浓度为50-70%的乙醇静置过夜；s3：将步骤s2处理过的药物在50-70℃的温度下回流提取时长为20-100min之间；s4：收集滤液置于容量瓶中得到铜锤玉带草有效成分的提取物。
6.优选的，所述步骤1中选取深紫色的铜锤玉带草果实，用正交实验所得最佳条件，以果实为材料进行 3 次平行验证实验，经测定不同青白色、浅紫色、深紫色成熟度果实进行提取时，深紫色成熟度果实的黄酮含量最高。
7.优选的， 所述步骤1中的所述粉末为过60目筛。
8.优选的，所述步骤s2中粉末和乙醇的料液比为1:20，铜锤玉带草果实总黄酮含量随料液比的变化而变化，料液比为1:20时总黄酮含量最高优选的，所述步骤s2中乙醇浓度为60%，乙醇浓度过高或过低都会影响铜锤玉带草果实总黄酮的提取，在乙醇浓度为 60%时总黄酮含量达到最高值，故选择乙醇体积分数为 60%提取效果较好。
9.优选的，所述步骤s3中回流温度为55℃或60℃，黄酮浓度随着温度的升高而逐渐上升，当温度处于55℃到60℃之间时，黄酮浓度基本趋于稳定。当温度高于60℃时黄酮浓度
逐渐下降。故选择提取温度为 55℃或60℃提取效果较好优选的，所述步骤s3中提取时长为20min，当提取时间超过20min分钟时总黄酮含量逐渐下降，在提取时间40min至100min间总黄酮含量基本趋于稳定。故选择提取时间为20min。
10.本发明的有益效果：通过对铜锤玉带草的果实提取黄酮的工艺进行研究，可有效提取铜锤玉带草的果实的有效成分黄酮，从而提高其药用价值。
具体实施方式
11.以下结合具体实施例对发明做出进一步说明，应理解这些实施例仅用于说明本发明而不限制本发明的范围，在阅读本发明后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本发明所附权利要求限定的范围。
12.实施例1铜锤玉带草果实的有效成分黄酮提取，其通过以下方法制备得到：s1：将采集的铜锤玉带草果实洗净晾干，在105℃杀青10min，后置于 65 ℃ 干燥箱中烘干至恒重后粉碎并过60目筛，制得铜锤玉带草果实粉；s2：精确称取1.00g的铜锤玉带草果实粉末按1：15的比例加入浓度为50%的乙醇静置过夜；s3：将步骤s2处理过的药物在50℃的温度下回流提取时长为20min之间；s4：收集滤液置于容量瓶中得到铜锤玉带草有效成分的提取物。
13.取一定体积的样品液适当稀释后，按亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法测定其吸光度。对照标准曲线，计算出样品中黄酮含量，按下列计算公式计算：总黄酮含量=（c
×v×
d）/m(单位：mg/g)式中，c 为按照线性回归方程而计算得到的黄酮浓度（mg/ml），v 为样品液总体积（ml），d 为样品液稀释倍数，m 为铜锤玉带草粉末重量（g），试验测得提取的总黄酮含量为3.1853 mg/g。
14.实施例2铜锤玉带草果实的有效成分黄酮提取，其通过以下方法制备得到：s1：将采集的铜锤玉带草果实洗净晾干，在105℃杀青10min，后置于 65 ℃ 干燥箱中烘干至恒重后粉碎并过60目筛，制得铜锤玉带草果实粉；s2：精确称取1.00g的铜锤玉带草果实粉末按1：20的比例加入浓度为60%的乙醇静置过夜；s3：将步骤s2处理过的药物在50℃的温度下回流提取时长为40min之间；s4：收集滤液置于容量瓶中得到铜锤玉带草有效成分的提取物。
15.取一定体积的样品液适当稀释后，按亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法测定其吸光度。对照标准曲线，计算出样品中黄酮含量，按下列计算公式计算：总黄酮含量=（c
×v×
d）/m(单位：mg/g)式中，c 为按照线性回归方程而计算得到的黄酮浓度（mg/ml），v 为样品液总体积（ml），d 为样品液稀释倍数，m 为铜锤玉带草粉末重量（g），试验测得提取的总黄酮含量为3.8426 mg/g。
16.实施例3铜锤玉带草果实的有效成分黄酮提取，其通过以下方法制备得到：s1：将采集的铜锤玉带草果实洗净晾干，在105℃杀青10min，后置于 65 ℃ 干燥箱中烘干至恒重后粉碎并过60目筛，制得铜锤玉带草果实粉；s2：精确称取1.00g的铜锤玉带草果实粉末按1：25的比例加入浓度为70%的乙醇静置过夜；s3：将步骤s2处理过的药物在50℃的温度下回流提取时长为60min之间；s4：收集滤液置于容量瓶中得到铜锤玉带草有效成分的提取物。
17.取一定体积的样品液适当稀释后，按亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法测定其吸光度。对照标准曲线，计算出样品中黄酮含量，按下列计算公式计算：总黄酮含量=（c
×v×
d）/m(单位：mg/g)式中，c 为按照线性回归方程而计算得到的黄酮浓度（mg/ml），v 为样品液总体积（ml），d 为样品液稀释倍数，m 为铜锤玉带草粉末重量（g），试验测得提取的总黄酮含量为4.1659 mg/g。
18.实施例4铜锤玉带草果实的有效成分黄酮提取，其通过以下方法制备得到：s1：将采集的铜锤玉带草果实洗净晾干，在105℃杀青10min，后置于 65 ℃ 干燥箱中烘干至恒重后粉碎并过60目筛，制得铜锤玉带草果实粉；s2：精确称取1.00g的铜锤玉带草果实粉末按1：20的比例加入浓度为50%的乙醇静置过夜；s3：将步骤s2处理过的药物在55℃的温度下回流提取时长为60min之间；s4：收集滤液置于容量瓶中得到铜锤玉带草有效成分的提取物。
19.取一定体积的样品液适当稀释后，按亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法测定其吸光度。对照标准曲线，计算出样品中黄酮含量，按下列计算公式计算：总黄酮含量=（c
×v×
d）/m(单位：mg/g)式中，c 为按照线性回归方程而计算得到的黄酮浓度（mg/ml），v 为样品液总体积（ml），d 为样品液稀释倍数，m 为铜锤玉带草粉末重量（g），试验测得提取的总黄酮含量为4.1120 mg/g。
20.实施例5铜锤玉带草果实的有效成分黄酮提取，其通过以下方法制备得到：s1：将采集的铜锤玉带草果实洗净晾干，在105℃杀青10min，后置于 65 ℃ 干燥箱中烘干至恒重后粉碎并过60目筛，制得铜锤玉带草果实粉；s2：精确称取1.00g的铜锤玉带草果实粉末按1：15的比例加入浓度为70%的乙醇静置过夜；s3：将步骤s2处理过的药物在55℃的温度下回流提取时长为40min之间；s4：收集滤液置于容量瓶中得到铜锤玉带草有效成分的提取物。
21.取一定体积的样品液适当稀释后，按亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法测定其吸光度。对照标准曲线，计算出样品中黄酮含量，按下列计算公式计算：总黄酮含量=（c
×v×
d）/m(单位：mg/g)
式中，c 为按照线性回归方程而计算得到的黄酮浓度（mg/ml），v 为样品液总体积（ml），d 为样品液稀释倍数，m 为铜锤玉带草粉末重量（g），试验测得提取的总黄酮含量为4.8663 mg/g。
22.实施例6铜锤玉带草果实的有效成分黄酮提取，其通过以下方法制备得到：s1：将采集的铜锤玉带草果实洗净晾干，在105℃杀青10min，后置于 65 ℃ 干燥箱中烘干至恒重后粉碎并过60目筛，制得铜锤玉带草果实粉；s2：精确称取1.00g的铜锤玉带草果实粉末按1：25的比例加入浓度为50%的乙醇静置过夜；s3：将步骤s2处理过的药物在60℃的温度下回流提取时长为40min之间；s4：收集滤液置于容量瓶中得到铜锤玉带草有效成分的提取物。
23.取一定体积的样品液适当稀释后，按亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法测定其吸光度。对照标准曲线，计算出样品中黄酮含量，按下列计算公式计算：总黄酮含量=（c
×v×
d）/m(单位：mg/g)式中，c 为按照线性回归方程而计算得到的黄酮浓度（mg/ml），v 为样品液总体积（ml），d 为样品液稀释倍数，m 为铜锤玉带草粉末重量（g），试验测得提取的总黄酮含量为4.8987 mg/g。
24.以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，本领域技术人员知悉，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，可以对这些特征和实施例进行各种改变或等同替换。另外，在本发明的教导下，可以对这些特征和实施例进行修改以适应具体的情况及材料而不会脱离本发明的精神和范围。因此，本发明不受此处所公开的具体实施例的限制，所有落入本技术的权利要求范围内的实施例都属于本发明的保护范围。