紫珠果提取物在制备抑制组胺生成的护肤品中的应用的制作方法

1.本发明涉及日化领域，具体而言，涉及紫珠果提取物在制备抑制组胺生成的护肤品中的应用。


背景技术：

2.特异性皮炎是一种以皮肤持续瘙痒为特征的复发性和慢性炎症性疾病，还具有湿疹性病变。它由于遗传和环境因素之间相互作用，从而导致了表皮屏障受损，增加了不同类型过敏原的渗透性。穿透后的抗原与皮肤上的角质形成细胞相互作用，局部促进炎症过程组胺和相关细胞因子的分泌增加。开始时，炎症主要是由淋巴细胞t中的th2/th22和少数的th17参与反应，但在慢性过敏原暴露后，th1细胞的分化增加并参与反应，释放的组胺和细胞因子增加表皮屏障的恶化，从而诱导特异性皮炎加重。
3.角质形成细胞(kc)是表皮的主要功能和结构成分，表皮是皮肤的最外层，高度专门用于防御外部因素、防止体液渗漏和保持细胞内的内部水分。表皮屏障受损和异常的kc分化参与了几种皮肤病的病理生理学，例如特应性皮炎(ad)。角质形成细胞异常分化与特异性皮炎有关的机制主要是：(1)flg基因的突变/缺失，丝聚蛋白合成受阻；(2)toll样受体-2(tlr2)的单碱基突变，导致细胞正常功能改变；(3)toll样受体-4(tlr4)的单碱基突变，促进核因子nf-κβ的活化，从而刺激th2反应相关细胞因子(il-4\il-5\il-13)的产生；(4)角质形成细胞产生的胸腺基质淋巴细胞生成素(tslp)，促进抗原呈递细胞(apc)的成熟。其中(2)(3)(4)是导致免疫失调的机制。当外部刺激物或表皮屏障的损害会导致刺激th2反应，淋巴细胞产生特异性ige抗体，并与皮肤树突状细胞(dc)上的ige受体结合，刺激组胺的分泌，并产生免疫反应和皮肤炎症反应。
4.皮肤瘙痒是特异性皮炎的主要症状之一，ige与受体结合后促进感觉神经纤维附近的肥大细胞脱颗粒并释放瘙痒原(比如组胺)，并与末端轴突上的受体结合，瘙痒感觉信号通过相应的神经通路传递到中枢神经系统后，最终传递到大脑，并产生瘙痒的感觉。
5.鉴于此，特提出本技术。


技术实现要素：

6.本发明的目的在于提供紫珠果提取物在制备抑制组胺生成的护肤品中的应用。
7.本发明是这样实现的：
8.第一方面，本发明提供了紫珠果提取物在制备抑制组胺生成的护肤品中的应用。
9.第二方面，本发明提供了紫珠果提取物在制备用于治疗或改善由嗜碱性细胞rbl-2h3释放β-己糖胺酶而导致的皮炎的药物、保健品或护肤品中的应用。
10.第三方面，本发明提供了一种抑制组胺生长的舒缓组合物，其原料包括紫珠果提取物和中草药提取物，所述紫珠果提取物与所述中草药提取物的质量比为1:0.01～7。
11.第三方面，本发明提供了一种舒缓护肤品，其包括护肤助剂以及上述任一实施方式所述的抑制组胺生长的舒缓组合物，所述护肤助剂包括促渗透剂、保湿剂、增稠剂、ph调
节剂、乳化剂、油脂、皮肤调理剂、抗氧化剂、防腐剂、美白剂和芳香剂中的至少一种。
12.第四方面，本发明提供了一种舒缓乳液，按重量百分比计，由以下组分组成：
13.a相：氢化聚癸烯0.1～3％；聚二甲基硅氧烷0.5～5％；聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯0.1～4％；棕榈酸乙基己酯0.5～8％；牛油果树果脂0.1～2％；peg-100硬脂酸/甘油硬脂0.1～8％；油醇芥酸酯0.01～2％；神经酰胺30.05～1％；丁羟甲苯0.001～0.5％；c12-15醇苯甲酸酯0.1～5％；
14.b相：环五聚二甲基硅氧烷和环己硅氧烷的复合物0.1～5％；生育酚乙酸酯0.01～0.5％；
15.c相：水余量至100％；丙二醇0.1～5％；甘油0.1～5％；丁二醇0.1～7％；戊二醇0.1～5％；双丙甘醇0.5～10％；甜菜碱0.1～5％；丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物0.02～0.8％；尿囊素0.01～2％；卡波姆0.01～1.5％；苯氧乙醇0.05～0.9％；对羟基苯乙酮0.05～0.9％；
16.d相：氨甲基丙醇0.01～1％；己二醇0.05～0.9％；
17.e相：β-葡聚糖0.01～1％；双-二乙氧基二甘醇环己烷1,4-二羧酸酯0.01～10％；天女木兰提取物0.01～5％；香精0.005～0.5％；日本紫珠果提取物0.1～5％；蝶豆花提取物0.1～10％。
18.第五方面，本发明提供了一种舒缓乳液的制备方法，其包括先将所述a相和所述b相加热溶解混合得到混合相，接着将所述混合相与所述c相均质混合，随后加入所述d相搅拌均匀，加入所述e相搅拌均匀，经检验合格后，出料，静置12～48小时。
19.本发明具有以下有益效果：
20.本发明的紫珠果提取物对rbl-2h3细胞组胺的释放具有优异的抑制作用，在舒缓护肤品中具有广泛用途。
21.本技术的舒缓组合物，利用紫珠果提取物和蝶豆花提取物搭配，具有协同增效作用，能够很好的抑制组胺生成，并缓解特异性皮炎带来的不适感。
22.本技术的舒缓护肤品，包含舒缓组合物及护肤助剂，能够抑制组胺的释放，起舒缓的作用，还具有保湿锁水，能够阻挡水分流失，为肌肤营造保湿屏障。同时，本发明的舒缓乳液对肌肤产生修护作用，活化肌肤的机能，其制备方法操作简单，可用于大规模生产。
附图说明
23.为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
24.图1为试验例一提供的日本紫珠果提取物在不同的样品浓度下与细胞活力关系图，其中样品浓度为日本紫珠果提取物的质量浓度；
25.图2为试验例二提供的日本紫珠果提取物在不同的样品浓度下对嗜碱性细胞rbl-2h3释放β-己糖胺酶的影响示意图；
26.图3为试验例三提供的日本紫珠果提取物在不同的样品浓度下对嗜碱性细胞rbl-2h3释放组胺含量的测定结果示意图；
27.图4为试验例四提供的乳酸刺痛试验缓解情况示意图。
具体实施方式
28.为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
29.第一方面，本发明的目的是提供了紫珠果提取物在制备舒缓的护肤品方面的用途。
30.其中，紫珠果提取物为日本紫珠果提取物；日本紫珠(callicarpa japonica)为马鞭草科紫珠属植物，是一种中等大小的圆形落叶灌木，可快速生长至4～6英尺高，枝条纤细，呈拱形。果实是紫罗兰色浆果，在夏末成熟，并在10月份呈现最佳状态。传统上紫珠果在中国、日本和韩国被用作治疗炎症性疾病的草药。其性味淡、涩、凉，具有清热利湿、解毒的作用，用于湿热黄疸、胁痛不适。
31.本发明的发明人发现，日本紫珠果提取物对rbl-2h3细胞组胺的释放具有优异的抑制作用，抑制率会随着日本紫珠果提取物的质量浓度的增加而逐渐变大。
32.日本紫珠果提取物的制备方法包括以下步骤：
33.s1：将日本紫珠果原料粉碎；
34.s2：将粉碎后的日本紫珠果原料加入至提取罐中，利用水和醇进行提取，日本紫珠果原料、水以及醇的质量比为1：0.05～5：0.05～5，提取温度为55～85℃，提取1～5次，提取时间为1～5小时，获得日本紫珠果粗提液；
35.s3：将获得的日本紫珠果粗提液过滤，并经过外循环罐、沉降罐进行浓缩并进行冷冻干燥，获得日本紫珠果提取物。
36.在一些实施方案中，步骤s1中提取的温度为55～85℃，优选60～70℃。提取的次数为1～5次，优选1～3次。提取的时间为1～5小时，优选2～4小时。
37.在一些实施方案中，步骤s2中日本紫珠果原料、水以及醇的质量比为1：0.05～5：0.05～5，优选为1：0.1～4：0.1～4，更优选为1：0.2～2：0.2～4。当日本紫珠果原料、水以及醇的比例在1：0.05～5：0.05～5的范围内时，所获得的日本紫珠果提取物的有效成分较高，能够进一步有效抑制组胺的释放。所述醇可以是乙醇、乙二醇、丙醇等。
38.在一些实施方案中，步骤s3中，浓缩制备得到的液体成分进行冷冻干燥，过60～120目筛，溶解于50％丁二醇水溶液获得日本紫珠果提取物。
39.采用本发明的制备方法，制备获得的日本紫珠果提取物为棕色粉末，以质量计，灰分含量在10％以下，水分含量在5％以下，重金属含量在10ppm以下，铅含量在2ppm以下，砷含量在3ppm以下，细菌总数在1000cfu/g以下；霉菌和酵母菌的总数在100cfu/g以下，无沙氏门菌和大肠杆菌等细菌。
40.第二方面，本发明提出一种舒缓组合物，可有效减轻特异性皮炎。本发明的舒缓组合物包含日本紫珠果提取物和其他中草药提取物；优选地，中草药提取物为蝶豆花提取物。
41.其中，日本紫珠果提取物与蝶豆花提取物的质量比为1:0.01～7。
42.在一些实施方案中，日本紫珠果提取物与蝶豆花提取物与的质量比可以为：1:
0.01～3；更优选地，为1:0.1～2；更优选为1:0.3～1.86。
43.蝶豆(clitoria ternatea)是豆科多年生草本植物，蝶豆花为五瓣左右对称的豌豆形花，花萼呈管状，由五个萼片组成，广泛种植于全球热带和温带地区。蝶豆花含有大量的花青素，作为天然来源被广泛用于食用色素。蝶豆花提取物含有类黄酮、生物碱、单宁、强心苷蒽醌、皂苷和酚类等活性物质，具有抗菌、抗炎、抗氧化和抗糖尿病等功效。
44.在一些实施方案中，本技术利用日本紫珠果提取物和蝶豆花提取物搭配，具有协同增效作用，能够很好的抑制组胺的生成，并缓解皮炎带来的不适感。
45.在一些实施方案中，按质量分数计，舒缓组合物由25～99％的日本紫珠果提取物和1～75％的蝶豆花提取物组成。
46.第三方面，本发明提供了一种舒缓护肤品，包括抑制组胺生成的舒缓组合物及促渗透剂，按舒缓护肤品的质量百分比计，抑制组胺生成的舒缓组合物的加入量为0.01～10％；促渗透剂的加入量为0.01～10％，促渗透剂为双-二乙氧基二甘醇环己烷1,4-二羧酸酯。
47.在一些实施方案中，按舒缓护肤品的质量百分比计，抑制组胺生成的舒缓组合物的加入量为0.01～10％，例如：舒缓组合物的加入量可以是1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、9％或者任意两者之间的范围值。舒缓组合物的加入量在0.01～10％之间时，使用舒缓护肤品的皮肤弹性增加。当舒缓组合物的加入量小于0.01％时，皮肤过敏症状改善效果不明显，不能起到舒缓的作用；当组胺抑制剂组合物的加入量大于10％时，组合物的含量过高，成本过高，且不能进一步增加过敏的作用。
48.在一些实施方案中，以舒缓护肤品的质量百分比计，促渗透剂的加入量为0.01～10％，例如：0.5％、1％、2％、3％、5％、6％、7％、8％或者任意两者之间的范围值。当促渗透剂的加入量小于0.01％时，促渗透效果不明显。当促渗透剂的加入量大于10％时，不能进一步起到促渗透的作用。
49.在一些实施方案中，还包括保湿剂、增稠剂、ph调节剂、乳化剂、油脂、皮肤调理剂、抗氧化剂、防腐剂、美白剂及芳香剂中的至少一种。
50.在一些实施方案中，以舒缓护肤品的质量百分比计，保湿剂的加入量为0.01～20％；增稠剂的加入量为0.02～1.5％；ph调节剂的加入量为0.01～1％；乳化剂的加入量为0.01～2％；油脂的加入量为1～8％；皮肤调理剂的加入量为0.01～10％；抗氧化剂的加入量为0.01～1％；防腐剂的加入量为0.01～1％；舒缓剂的加入量为0.01～5％；芳香剂的加入量为0.005～0.5％。
51.在一些实施方案中，以舒缓护肤品的质量百分比计，保湿剂的加入量可以是1～19％，可以是3～18％，可以是5～16％，可以是7～15％，可以是8～14％等。当保湿剂的含量低于0.01％时，保湿作用不明显；当保湿剂的含量高于20％时，会使舒缓护肤品有黏腻感。保湿剂选自甘油、双丙甘醇、甘油聚醚-26、透明质酸钠、泛醇、peg/ppg-17/6共聚物、丁二醇、木糖醇、甜菜碱、丙二醇、甘露糖、海藻糖中的至少一种。
52.在一些实施方案中，以舒缓护肤品的质量百分比计，增稠剂的加入量可以是0.05～0.6％，可以是0.1～0.5％等。增稠剂选自卡波姆、黄原胶、山嵛醇、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、丙烯酸(酯)类/c10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物和异十六烷和聚山梨醇
酯-60的复合物中的至少一种。
53.在一些实施方案中，以舒缓护肤品的质量百分比计，ph调节剂的加入量为0.01～1％。通过添加ph调节剂，使舒缓乳液的ph值更适宜人体皮肤。作为优选，本发明的ph调节剂的加入量可以是0.03～0.8％，可以是0.06～0.5％，可以是0.1～0.3％等。当ph调节剂的加入量大于1％或者小于0.01％时，均不能获得ph值合适的舒缓护肤品。ph调节剂选自氨甲基丙醇、精氨酸、柠檬酸、柠檬酸钠、氢氧化钠中的至少一种。
54.在一些实施方案中，以舒缓护肤品的质量百分比计，油脂的加入量为5～20％，例如油脂的加入量可以是8％、10％、12％、14％、16％、18％或者任意两者之间的范围值。通过在舒缓乳液中添加油脂，可以减少皮肤表面水分的蒸发，防止皮肤干裂。另外，通过添加油脂，可以在皮肤表面形成疏水性薄膜，防止外部有害物质的侵入。当油脂的含量小于5％时，不能减少皮肤表面水分的蒸发，且不能有效防止有害物质的侵入；当油脂的含量大于20％时，使舒缓乳液过于油腻，使用感会有所下降。油脂选自环五聚二甲基硅氧烷、环聚二甲基硅氧烷、聚二甲基硅氧烷和聚二甲基硅氧烷醇的复合物、油醇芥酸酯、牛油果树果脂、棕榈酸乙基己酯、氢化聚癸烯、环己硅氧烷、氢化聚异丁烯、c20-24烷基聚二甲基硅氧烷、c13-14异链烷烃、c12-15醇苯甲酸酯中的至少一种。
55.在一些实施方案中，以舒缓护肤品的质量百分比计，乳化剂的加入量为0.01～5％，例如：可以是0.1～4.5％，可以是1～4％等。本技术的乳化剂用量小于0.01％时，导致乳化不充分使得体系不稳定；乳化剂用量大于5％时，会对产品的稳定性也会造成一定的影响。乳化剂选自peg～20甲基葡糖倍半硬脂酸酯、山梨坦异硬脂酸酯、聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯、月桂醇聚醚-7、异硬脂醇聚醚-20中的至少一种。
56.在一些实施方案中，本技术的乳化体系是水包油体系，因此，当使用丙二醇和双-二乙氧基二甘醇环己烷1,4-二羧酸酯作为促渗透剂使用时，即使不同时加入，也不会影响其协同作用的发挥。
57.在一些实施方案中，以舒缓护肤品的质量百分比计，皮肤调理剂的加入量为0.01～5％。皮肤调理剂的加入量可以是0.1～4％，可以是0.15～3％，可以是0.2～2％等。当皮肤调理剂的加入量小于0.01％时，无法起到相应的功效；当皮肤调理剂的加入量大于5％时，成本过高。皮肤调理剂选自水解胶原蛋白、燕麦肽、神经酰胺3、墨角藻提取物、小球藻发酵产物、绿藻提取物、褐藻提取物、北美金缕梅水、红没药醇、尿囊素、白果槲寄生叶提取物、白茅根提取物、丝氨酸、巨藻提取物、β～葡聚糖、仙人掌提取物中的至少一种。
58.本发明的舒缓乳液还可以添加少量美白剂。皮肤美白剂的加入量为0.01～5％。皮肤美白剂的加入量可以是0.01～4％，可以是0.1～3％，可以是0.4～2％等。当皮肤美白剂的加入量小于0.01％时，含量过低，无法起到相应的功效；当皮肤美白剂的加入量大于5％时，成本过高。皮肤美白剂包括烟酰胺、天女木兰提取物、曲酸及其衍生物、熊果苷及其衍生物、维生素c及其衍生物中的一种或两种以上的组合。
59.在一些实施方案中，以舒缓护肤品的质量百分比计，抗氧化剂的加入量为0.01～1％。本发明通过使用抗氧化剂，可以防止化妆品的油脂、蜡、烃类等油性成分接触空气中的氧，发生氧化作用，产生过氧化物、醛、酸等，使化妆品变色、酸败、质量下降等。所述抗氧化剂包括维生素e、丁羟甲苯、番茄红素、生育酚、生育酚乙酸酯中的一种或两种以上的组合。
60.另外，本发明的舒缓护肤品中还含有防腐剂和芳香剂。以舒缓护肤品的质量百分
比计，本发明的舒缓护肤品中的防腐剂的加入量为0.01～1％，所述芳香剂的加入量为0.01～0.5％。防腐剂可以包括苯氧乙醇、苯氧乙醇、羟苯丙酯、苯甲酸及其盐中的一种或两种以上的组合。芳香剂可以是香精等。
61.本技术所述的舒缓护肤品，可以为具有舒缓功效的乳液、膏霜或者水剂等。
62.进一步的，本发明还提供了一种舒缓乳液，按重量百分比计，由以下组分组成：
63.a相：
[0064][0065][0066]
b相：
[0067]
环五聚二甲基硅氧烷和环己硅氧烷的复合物0.1～5％；
[0068]
生育酚乙酸酯
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0.01～0.5％；
[0069]
c相：
[0070][0071]
d相：
[0072]
氨甲基丙醇
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0.01～1％；
[0073]
己二醇
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
0.05～0.9％；
[0074]
e相：
[0075][0076]
在一些实施方案中，本技术的舒缓乳液，其制备方法，包括以下步骤：
[0077]
1)将a相原料加入油相锅，搅拌并加热至75～85℃，完全溶解；乳化前将b相原料加入油相锅，75～85℃保温5～20min；
[0078]
2)将c相原料加入水相锅，搅拌溶解完全，并加热至75～85℃，保温5～20min；
[0079]
3)抽真空预热并烘干乳化锅，然后先抽入c相，真空抽入a/b混合相，然后开均质1～10分钟，开搅拌速度1000～1500转/分，75～85℃保温搅拌20～40分钟；
[0080]
4)降温至55～65℃，加入d相，搅拌速度500～1000转/分钟，搅拌均匀；
[0081]
5)降温至40～50℃，加入e相搅拌均匀；
[0082]
6)降温至30～40℃，经检验合格后，出料，静置12～48小时；
[0083]
7)检验合格，分装、包装，再检验，成品入库。
[0084]
本发明研究发现日本紫珠果提取物对rbl-2h3细胞组胺的释放具有优异的抑制作用，在舒缓护肤品中具有广泛用途。本技术的舒缓组合物，利用日本紫珠果提取物和蝶豆花提取物搭配，具有协同增效作用，能够很好的抑制组胺生成，并缓解特异性皮炎带来的不适感。本技术的舒缓护肤品，包含舒缓组合物及促渗透剂，能够抑制组胺的释放，起舒缓的作用，还具有保湿锁水，能够阻挡水分流失，为肌肤营造保湿屏障。同时，本发明的舒缓乳液对肌肤产生修护作用，活化肌肤的机能，其制备方法操作简单，可用于大规模生产。
[0085]
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
[0086]
实施例1
[0087]
本实施例提供了一种日本紫珠果提取物，其制备方法包括：将日本紫珠果原料粉碎后，加入到提取罐内，在70℃的温度下加入水和乙醇，其中，日本紫珠果原料、水和乙醇的质量比为1:1:4，煮提取3次，每次2.5小时，获得日本紫珠果提取液。之后将获得的日本紫珠果提取液过滤并存放于储存罐，让储存罐中的滤液缓慢流入外循环罐和沉降罐进行浓缩，获得液体成分和沉淀物，将液体成分进行喷雾干燥，将沉淀物进行烘干后过80～100目筛，获得日本紫珠果提取物，然后对日本紫珠果提取物进行检测，灰分含量为7％，水分含量为4％。
[0088]
实施例2
[0089]
本实施例提供了一种舒缓乳液，其组分按舒缓乳液的质量百分数计包括：
[0090]
舒缓组合物：日本紫珠果提取物0.500％、蝶豆花提取物3.500％；
[0091]
护肤助剂：丙二醇2.000％、甘油5.000％、丁二醇4.000％、戊二醇2.000％、双丙甘醇2.000％、甜菜碱1.000％、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物0.300％、尿囊素0.100％、卡波姆0.100％、苯氧乙醇0.500％、对羟基苯乙酮0.300％、氢化聚癸烯1.000％、聚二甲基硅氧烷2.000％、聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯1.500％、棕榈酸乙基己酯3.000％、牛油果树果脂0.500％、环五聚二甲基硅氧烷和环己硅氧烷的复合物2.000％、peg-100硬脂酸/甘油硬脂1.000％、油醇芥酸酯0.200％、生育酚乙酸酯0.200％、c12-15醇苯甲酸酯2.000％、神经酰胺3 0.200％、丁羟甲苯0.020％、氨甲基丙醇0.060％、己二醇0.300％、β-葡聚糖0.200％、双-二乙氧基二甘醇环己烷1,4-二羧酸酯2.000％、天女木兰提取物1.500％、香精0.080％、余量的水。
[0092]
舒缓乳液生产工艺步骤如下：
[0093]
1、将a相原料加入油相锅，搅拌并加热至82℃，完全溶解；乳化前将b相原料加入油相锅，82℃保温10min；
[0094]
2、将c相原料加入水相锅，搅拌溶解完全，并加热至82℃，保温10min；
[0095]
3、抽真空预热并烘干乳化锅，然后先抽入c相，真空抽入a/b混合相，然后开均质5分钟，开搅拌速度1200转/分，82℃保温搅拌30分钟；
[0096]
4、降温至60℃，加入d相，搅拌速度800转/分钟，搅拌均匀；
[0097]
5、降温至45℃，加入e相搅拌均匀；
[0098]
6、降温至36℃，经检验合格后，出料，静置24小时；
[0099]
7、检验合格，分装、包装，再检验，成品入库。
[0100]
注：工艺中的a、b、c、d、e相分别为：
[0101]
a相：氢化聚癸烯、聚二甲基硅氧烷、聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯、peg-100硬脂酸/甘油硬脂、棕榈酸乙基己酯、油醇芥酸酯、牛油果树果脂、丁羟甲苯、神经酰胺3、c12-15醇苯甲酸酯；
[0102]
b相：环五聚二甲基硅氧烷和环己硅氧烷的复合物、生育酚乙酸酯；
[0103]
c相：水、甘油、丙二醇、丁二醇、戊二醇、双丙甘醇、尿囊素、甜菜碱、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、卡波姆、苯氧乙醇、对羟基苯乙酮；
[0104]
d相：己二醇、氨甲基丙醇；
[0105]
e相：日本紫珠果提取物、蝶豆花提取物、天女木兰提取物、β-葡聚糖、香精、双-二乙氧基二甘醇环己烷1,4-二羧酸酯。
[0106]
其中，聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯、peg-100硬脂酸/甘油硬脂是乳化剂；
[0107]
甘油、甜菜碱、戊二醇、己二醇是保湿剂；
[0108]
棕榈酸乙基己酯、氢化聚癸烯、油醇芥酸酯、牛油果树果脂、聚二甲基硅氧烷、环五聚二甲基硅氧烷和环己硅氧烷的复合物、c12-15醇苯甲酸酯是油脂；
[0109]
苯氧乙醇、对羟基苯乙酮是防腐剂；丁羟甲苯、生育酚乙酸酯是抗氧化剂；
[0110]
丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物、卡波姆是增稠剂；
[0111]
氨甲基丙醇是ph调节剂；天女木兰提取物是美白剂；
[0112]
神经酰胺3、尿囊素、β-葡聚糖是皮肤调理剂；香精是芳香剂。
[0113]
双-二乙氧基二甘醇环己烷1,4-二羧酸酯是促渗透剂；
[0114]
日本紫珠果提取物和蝶豆花提取物是抑制组胺生成的组合物，其中，日本紫珠果提取物的制备方法如实施例1所示，蝶豆花提取物的制备方法为：将蝶豆花60℃烘干并粉碎，过40目筛，加入到提取罐内，在水浴温度60℃下加入水和乙醇，其中，蝶豆花、水和乙醇的质量比为1:1:3，提取2次，每次2小时，以3500r/min频率离心20min，取上清液，浓缩回收乙醇，获得蝶豆花乙醇初提物。将蝶豆花乙醇初提物加入一定体积的去离子水溶解，并用大孔树脂过滤，先用3～5bv水洗脱，再用4～6bv 65％乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液。将洗脱液浓缩至相对密度为1.05～1.1，上清液喷雾干燥，沉淀减压干燥并混合均匀，再过100目筛，得到蝶豆花提取物。需要说明的是，不同批次的购买的提取物会有相应的误差，一般误差不超过5％。
[0115]
环五聚二甲基硅氧烷和环己硅氧烷的复合物的生产厂家：牌号：dc345；购自：美国道康宁公司。
[0116]
实施例3-7
[0117]
实施例3-7与实施例2基本相同，区别仅在于舒缓组合物中的日本紫珠果提取物和蝶豆花提取物用量不同。
[0118]
实施例3中，日本紫珠果提取物1.400％、蝶豆花提取物2.600％；
[0119]
实施例4中，日本紫珠果提取物2.000％、蝶豆花提取物2.000％；
[0120]
实施例5中，日本紫珠果提取物2.500％、蝶豆花提取物1.500％；
[0121]
实施例6中，日本紫珠果提取物3.000％、蝶豆花提取物1.000％；
[0122]
实施例7中，日本紫珠果提取物0.800％、蝶豆花提取物3.200％；
[0123]
实施例8-9
[0124]
实施例8-9与实施例2基本相同，区别仅在于护肤助剂的用量不同。
[0125]
实施例8中，丙二醇0.100％、甘油1.000％、丁二醇2.000％、戊二醇0.100％、双丙甘醇1.000％、甜菜碱2.000％、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物0.500％、尿囊素0.500％、卡波姆0.500％、苯氧乙醇0.900％、对羟基苯乙酮0.800％、氢化聚癸烯0.500％、聚二甲基硅氧烷5.000％、聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯3.500％、棕榈酸乙基己酯5.000％、牛油果树果脂0.800％、环五聚二甲基硅氧烷和环己硅氧烷的复合物5.000％、peg-100硬脂酸/甘油硬脂5.000％、油醇芥酸酯0.500％、生育酚乙酸酯0.020％、c12-15醇苯甲酸酯5.000％、神经酰胺3 1.000％、丁羟甲苯0.080％、氨甲基丙醇0.100％、己二醇0.800％、β-葡聚糖0.800％、双-二乙氧基二甘醇环己烷1,4-二羧酸酯1.000％、天女木兰提取物0.500％、香精0.010％、余量的水。
[0126]
实施例9中，丙二醇5.000％、甘油3.000％、丁二醇7.000％、戊二醇5.000％、双丙甘醇10.000％、甜菜碱3.000％、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物0.700％、尿囊素2.000％、卡波姆1.100％、苯氧乙醇0.050％、对羟基苯乙酮0.500％、氢化聚癸烯3.000％、聚二甲基硅氧烷1.000％、聚甘油-3甲基葡糖二硬脂酸酯0.500％、棕榈酸乙基己酯0.800％、牛油果树果脂2.000％、环五聚二甲基硅氧烷和环己硅氧烷的复合物1.000％、peg-100硬脂酸/甘油硬脂8.000％、油醇芥酸酯1.200％、生育酚乙酸酯0.500％、c12-15醇苯甲酸酯1.000％、神经酰胺3 0.500％、丁羟甲苯0.420％、氨甲基丙醇0.10％、己二醇0.050％、β-葡聚糖0.600％、双-二乙氧基二甘醇环己烷1,4-二羧酸酯10.000％、天女木兰提取物4.500％、香精0.50％、余量的水。
[0127]
对比例1-3
[0128]
对比例1-3与实施例2基本相同，区别仅在于舒缓组合物中的日本紫珠果提取物和蝶豆花提取物用量不同。
[0129]
对比例1中省略了日本紫珠果提取物和蝶豆花提取物，其余用水补足；
[0130]
对比例2中，日本紫珠果提取物0.000％、蝶豆花提取物4.000％；
[0131]
对比例3中，日本紫珠果提取物4.000％、蝶豆花提取物0.000％。
[0132]
对比例4
[0133]
对比例4与实施例2基本相同，区别仅在于，将实施例2中的蝶豆花提取物替换为疑拟香桃木果提取物。对比例4中，日本紫珠果提取物0.500％、疑拟香桃木果提取物3.500％。
[0134]
对比例5
[0135]
本对比例5于实施例2的区别仅在于，紫珠果提取物的制备方法不同，本对比例中，制备方法包括：将日本紫珠果原料粉碎后，加入到提取罐内，在75℃的温度下加入水，其中，日本紫珠果原料和水的质量比为1:20，煮提取3次，每次2小时，获得日本紫珠果提取液。之后将获得的日本紫珠果提取液过滤并存放于储存罐，让储存罐中的滤液缓慢流入外循环罐和沉降罐进行浓缩，获得液体成分和沉淀物，将液体成分进行喷雾干燥，将沉淀物进行烘干后过80～100目筛，获得日本紫珠果提取物，然后对日本紫珠果提取物进行检测，灰分含量为7％，水分含量为4％。
[0136]
试验例一：角质形成细胞活性检测。
[0137]
将实施例1提供的日本紫珠果提取物用磷酸盐缓冲液稀释得到5组不同浓度(终浓度)的测试溶液，使用0.22μm滤头进行过滤。进行细胞活力测试时，日本紫珠果提取物的质量浓度如下表1所示。
[0138]
(1)测试方法：使用calcein-am荧光探针标记活细胞进行体外角质形成细胞活性检测；
[0139]
(2)测试步骤：角质形成细胞经计数后使用稀释到5
×
104个/ml，并取100μl接种到黑色96孔细胞培养板中，在37℃培养箱避光孵育12小时，空白组无需加角质形成细胞。吸取并弃掉培养基后，实验组加入100μl不同浓度的日本紫珠果提取物，空白组和对照组加入100μl培养基，在37℃培养箱避光孵育2～4小时。加入100μl的3
×
calcein-am溶液，在37℃培养箱避光孵育30分钟。孵育结束后，可以直接用荧光酶标仪(激发波长494nm，发射波长517nm)检测荧光并计算细胞活性，细胞活性和荧光强度成正比。
[0140]
(3)角质形成细胞活性率按照一下公式计算：
[0141]
角质形成细胞活性率＝[(od实验组-od空白组)/(od对照组-od空白组)]
×
100％
[0142]
表1
[0143]
日本紫珠果提取物质量浓度(mg/ml)相对细胞活性(％)0.290.770.8103.921.4102.142.095.372.691.55
[0144]
通过表1和图1可知，日本紫珠果提取物浓度在0.2～2.6mg/ml之间对角质形成细胞的活性率均大于90％，以此证明在该提取物浓度区间对皮肤角质细胞损害可不予以考虑。
[0145]
试验例二：β-己糖胺酶释放检测。
[0146]
将实施例1提供的日本紫珠果提取物用磷酸盐缓冲液稀释得到5组不同浓度(终浓度)的测试溶液，使用0.22μm滤头进行过滤。进行β-己糖胺酶释放检测时，日本紫珠果提取物的质量浓度如下表2所示。
[0147]
(1)测试方法：β-己糖胺酶释放检测
[0148]
(2)测试步骤：取对数生长期浓度为3.5
×
105个/ml的rbl-2h3细胞100μl接种于96孔板中，在37℃co2培养箱生长24h。吸取上清培养基，并使用siraganian缓冲液冲洗2次。实验组加入100μl不同浓度的日本紫珠果提取物，对照组和空白组各加入100μl siraganian缓冲液，各三个复孔，并放入37℃co2培养箱孵育1小时。实验组和对照组加入50μl 100nm钙离子载体(a23187)诱导，空白组加入50μl siraganian缓冲液，37℃水浴6小时。孵育结束后，将板置于冰上10分钟，各吸取50μl上清液加入到含有50μl以0.1m柠檬酸缓冲液配制的浓度为1m底物(4-nitrophenyl n-acetyl-β-d-glucosaminide)的96孔板中，37℃孵育1h，以0.1m碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液200μl终止反应，于405nm处测量吸光度值。
[0149]
(3)β-己糖胺酶相对浓度(％)＝[(od实验组-od空白组)/(od对照组-od空白组)]
×
100％
[0150]
表2
[0151]
日本紫珠果提取物质量浓度(mg/ml)β-己糖胺酶相对浓度(％)0.282.950.862.15
1.444.792.044.542.634.47
[0152]
通过表2和图2可知日本紫珠果提取物浓度在0.2～2.6mg/ml之间，日本紫珠果对rbl-2h3细胞组胺的释放具有抑制效果，并且抑制率随着浓度的升高而升高。
[0153]
试验例三：组胺含量检测。
[0154]
将实施例1提供的日本紫珠果提取物用磷酸盐缓冲液稀释得到6组不同浓度(终浓度)的测试溶液，使用0.22μm滤头进行过滤。进行组胺含量检测时，日本紫珠果提取物的质量浓度如下表3所示。
[0155]
(1)测试方法：组胺含量检测
[0156]
(2)测试步骤：取对数生长期浓度为3.5
×
105个/ml的rbl-2h3细胞100μl接种于96孔板中，在37℃co2培养箱生长24h。吸取上清培养基，并使用siraganian缓冲液冲洗2次。实验组加入100μl不同浓度的日本紫珠果提取物，对照组和空白组各加入100μl siraganian缓冲液，各三个复孔，并放入37℃co2培养箱孵育1小时。实验组和对照组加入50μl 100nm钙离子载体(a23187)诱导，空白组加入50μl siraganian缓冲液，37℃水浴6小时。孵育结束后，取细胞上清液并按照组胺elisa试剂盒说明书进行操作。并用酶标仪在450nm波长下测定吸光度。
[0157]
(3)组胺相对浓度(％)＝[(od实验组-od空白组)/(od对照组-od空白组)]
×
100％
[0158]
表3
[0159]
日本紫珠果提取物质量浓度(mg/ml)组胺相对浓度(％)0.184.780.267.840.855.561.435.422.033.922.633.71
[0160]
通过表3和图3可知提取物浓度在0.1～2.6mg/ml之间，日本紫珠果提取物可抑制组胺释放，并且抑制效果随着浓度的升高而升高，证明其具有抑制组胺生成作用。
[0161]
实验例四：乳酸刺痛试验：
[0162]
乳酸刺痛试验(lactic acid tingling test,last)在大部分舒缓功效化妆品原料及产品的开发环节必不可少，是评价皮肤屏障修复最有效的办法。该方法简便有效、可重复性强，被广泛应用于临床检测及实验研究中。乳酸刺痛试验操作如下：在室温下，将50μl 10％的乳酸水溶液涂抹于一侧鼻唇沟，分别在2.5min、5min时询问受试者的自觉症状，按4分法进行评分(0分为没有刺痛感，1分为轻度刺痛，2分为中度刺痛，3分为重度刺痛)。然后将两次分数相加即为乳酸刺痛评分。同时比较舒缓乳液使用前后皮肤乳酸刺痛试验分值来评估乳液的皮肤屏障修复作用。
[0163]
受试者人数为78人，实验周期为4周，每6人为一组，分别按照实施例2-9以及对比例1-5进行操作，每天早晚将舒缓乳液涂抹于同一侧鼻唇沟，分别测定实验前(day1)和使用28天时(day28)的受试区域皮肤进行乳酸刺痛试验并进行评分，实验前后乳酸刺痛试验缓
解情况的结果如图4所示。乳酸刺痛缓解值＝实验前(day1)乳酸刺痛评分-实验后(day28)乳酸刺痛评分。
[0164]
从图4可以看出，实施例和对比例均对皮炎有缓解效果，而采用同时具有日本紫珠果提取物及蝶豆花提取物的应用实施例2-9，其具有协同效果，对应效果优于对比例，并且在应用实施例3的配方时，对皮炎的缓解效果最好。对比实施例2和对比例2和3的数据，可以看出，本技术提供的日本紫珠果提取物及蝶豆花提取物具有协同增效的作用，比单独使用其中一者的效果更佳，此外，从实施例2和对比例4的数据可以看出，本技术选用与蝶豆花提取物具有类似抗菌、抗炎、抗氧化作用的疑拟香桃木果提取物与本技术的日本紫珠果提取物进行复配，这两者复配的效果显著差于本技术中日本紫珠果提取物及蝶豆花提取物的复配效果。此外，对比例5可以看出，采用本技术提供的提取方法获得的日本紫珠果提取物效果更佳。
[0165]
综上所述，本发明的紫珠果提取物对rbl-2h3细胞组胺的释放具有优异的抑制作用，可广泛应用于舒缓护肤品中。对应的，本技术提供的舒缓组合物，利用紫珠果提取物和蝶豆花提取物搭配，这两者具有协同增效的作用，能够很好的抑制组胺生成，并缓解特异性皮炎带来的不适感。本技术的舒缓护肤品，包含舒缓组合物及护肤助剂，能够抑制组胺的释放，起舒缓的作用，还具有保湿锁水，能够阻挡水分流失，为肌肤营造保湿屏障。同时，本发明的舒缓乳液对肌肤产生修护作用，活化肌肤的机能，其制备方法操作简单，可用于大规模生产。
[0166]
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。