一种蜂王浆小分子水液及其制备方法和应用与流程

1.本发明涉及化妆品原料领域，具体涉及一种蜂王浆小分子水液及其制备方法和应用。


背景技术：

2.蜂王浆(royal jelly)，又名蜂皇浆、蜂皇乳、蜂王乳、蜂乳，是蜜蜂巢中培育幼虫的青年工蜂咽头腺的分泌物，是供给将要变成蜂王的幼虫的食物，也是蜂王终身的食物。
3.蜂王浆中含有王浆酸、氨基酸、维生素、矿物质、小分子肽类物质，营养丰富，具有很高的食用价值，能够提高人体免疫力、治疗烫伤、改善贫血症状、美容养颜、消炎止痛、调节神经系统、促进造血等。
4.除具有食用价值外，蜂王浆也被用作化妆品原料。蜂王浆含有许多营养成分和药物成分，可以促进和增强表皮细胞的生命活力，改善细胞的新陈代谢，减少代谢产物的堆积，防止弹力纤维变性、硬化，还有很好的滋补皮肤、营养皮肤作用，从而使皮肤柔软，富有弹性，面容滋润、光泽，并有利于推迟和延缓皮肤老化。
5.目前以蜂王浆为重要原料组分的化妆品种类繁多，其多以蜂王浆作为原料直接添加，例如蜂王浆雪花膏、蜂王浆美容乳液、蜂王浆生发水等。又如中国专利文献cn105748395a公开了一种含有蜂王浆的护肤品，由橄榄油、蜂王浆、鱼鲨烷、小麦胚芽油、桑椹根提取物、甘草黄酮、金银花提取物、聚甘油、苯乙醇、佛手瓜提取物、三角褐指藻提取物、乙基葡糖苷、对羟基苯甲酸乙酯、三乙醇胺、辛酰甘氨酸、月桂醇醚磷酸酯钾和水组成，所制备的产品具有较为优越的美白效果，能有效地清除自由基，能加快皮肤表层细胞更新，美白功效显著，对皮肤无刺激，使用后皮肤弹性好。
6.此外，蜂王浆还以水解蜂王浆蛋白(酶解多肽)的形式添加到化妆品中，是利用蛋白酶将蜂王浆蛋白水解为较小分子量的产物，可促进表皮细胞的增殖，有活肤抗衰作用，同时有显著的保湿和调理功能。例如中国专利文献cn114099364a公开了一种含蜂王浆酶解多肽的乳液的制备方法，首先将蜂王浆酶解以分解其中的蛋白质，获得蜂王浆多肽，采用β-环糊精等组分并冻干以稳定蜂王浆酶解多肽，保持其活性，混合乳液组分和植物提取物，从而得到含蜂王浆酶解多肽的乳液，该方法能够有效酶解蜂王浆中易引发皮肤过敏反应的蛋白质，从而提高了乳液的修护功效，并且还使制得的乳液保存稳定性优异。
7.何黎、刘玮主编的《美容皮肤学》指出：理论上来说，40000d以下的分子都有机会通过基底膜而进入真皮层，超过40000d的分子没有机会进入真皮层。当直接以蜂王浆作为原料制备化妆品时，因其中含有分子量较大的物质无法进入真皮层，无法充分发挥其护肤功效。
8.通常情况下，作为化妆品的原料，必须满足化妆品微生物标准要求，因此，化妆品原料生产灌装工艺大致为以下四种：一、需要通过超高温杀菌+无菌灌装工艺进行生产；二、使用超高温杀菌+高温热灌装工艺进行生产；三、使用超高温杀菌+添加防腐剂保护生产；四、将化妆品原料直接放置于冷冻保存运输使用。以上四种灌装方式，无菌灌装和热灌装设
备和冷冻仓库固定费用较高。因此以水解蜂王浆蛋白作为原料时，通常也需要现配现用，其使用受到限制。
9.因此，本领域急需提出一种蜂王浆中可吸收成分含量高且贮存稳定性高的化妆品原料。目前有关洁净灌装生产蜂王浆小分子水液作为化妆品原料的技术方案未见报道。


技术实现要素：

10.因此，本发明要解决的技术问题在于提供一种蜂王浆中可吸收成分含量高且贮存稳定性高的化妆品原料，具体提供了一种蜂王浆小分子水液及其制备方法和应用。
11.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
12.第一方面，本发明提供一种蜂王浆小分子水液的制备方法，包括以下步骤：
13.(1)将蜂王浆和超纯水按照质量比1：3～10混合均匀，得到蜂王浆稀释液；
14.(2)利用膜设备过滤所述蜂王浆稀释液，得到滤过液，其中，所述膜设备分离滤过分子量在5000～40000道尔顿以下的物质；
15.(3)将所述滤过液加热至85～100℃，保温10～30min；
16.(4)将加热的滤过液降温后在洁净灌装区中灌装至无菌容器中，密封，得到所述蜂王浆小分子水液，其中，灌装温度不低于50℃，所述洁净灌装区的空气洁净度静态时达到10000级。
17.进一步地，步骤(1)中，所述蜂王浆和超纯水的质量比为1：5～10。
18.进一步地，步骤(1)中，所述蜂王浆和超纯水的质量比为1：5、1：8或1：10。
19.进一步地，步骤(2)中，所述膜设备分离滤过分子量在5000道尔顿以下、10000道尔顿以下或者40000道尔顿以下的物质。
20.进一步地，步骤(2)中，所述膜设备为超滤膜设备。
21.进一步地，步骤(3)中，加热温度为85～95℃，保温时间为10～15min。
22.进一步地，步骤(3)中，
23.加热温度为95℃，保温时间为10min；或者
24.加热温度为85℃，保温时间为15min；或者
25.加热温度为90℃，保温时间为10min；或者
26.加热温度为85℃，保温时间为10min。
27.进一步地，步骤(4)中，灌装温度为50～65℃。
28.进一步地，步骤(4)中，所述无菌容器采用无菌包装袋。
29.第二方面，本发明提供所述的制备方法得到的蜂王浆小分子水液。
30.第三方面，本发明提供所述的制备方法得到的蜂王浆小分子水液在化妆品中的应用。
31.本发明技术方案，具有如下优点：
32.1.本发明提供的蜂王浆小分子水液的制备方法，以超纯水(ro水)作为生产用水，将蜂王浆稀释后用膜设备过滤掉无法进入真皮层的大分子物质，加热杀菌后采用无菌容器进行洁净灌装。
33.一方面，经过膜设备提取分子量在5000～40000道尔顿以下的小分子物质，可作用于真皮层的有效成分含量高，便于皮肤细胞更好的吸收利用；
34.另一方面，蜂王浆小分子水液中含有的王浆酸成分，具有一定的天然抑菌性，结合科学的工艺标准、严格的杀菌参数、灌装工艺、包装要求，在整个过程不添加包括防腐剂在内的任何化学物质，仅采用中低温洁净灌装，灌装空气洁净度(悬浮粒子、沉降菌)静态时达到10000级即可，采用该方法制备的蜂王浆小分子水液原料既可以常温保存，又符合产品符合化妆品菌落总数和大肠菌群标准要求，避免了无菌灌装热灌装设备、冷冻仓库的高成本投入，节省生产费用，对于生产化妆品原料蜂王浆小分子水液原料具有很好的可行性。
35.2.本发明制备的蜂王浆小分子水液满足如下质量标准：
36.a)王浆酸(10-羟基-2-癸烯酸(10-had))含量：0.03-0.25％；
37.b)ph值：3.0-4.6；
38.c)菌落总数：≤10000cfu/ml；
39.d)大肠菌群/(mpn/ml)：不得检出。
具体实施方式
40.提供下述实施例是为了更好地进一步理解本发明，并不局限于所述最佳实施方式，不对本发明的内容和保护范围构成限制，任何人在本发明的启示下或是将本发明与其他现有技术的特征进行组合而得出的任何与本发明相同或相近似的产品，均落在本发明的保护范围之内。
41.本实施例中所采用的蜂王浆原料符合gb9697-2008《蜂王浆》规定；
42.本实施例中所采用的超滤膜设备中超滤膜组件购自山东金汇膜科技股份有限公司；
43.本实施例采用的无菌包装袋(规格20/25公斤)购自杭州环申包装新材料股份有限公司；
44.实施例中王浆酸含量检测采用gb9697-2008《蜂王浆》中指定的王浆酸检测方法。
45.实施例中未注明具体实验步骤或条件者，按照本领域内的文献所描述的常规实验步骤的操作或条件即可进行。所用原料或仪器，均为可以通过市购获得的常规产品，包括但不限于本技术实施例中采用的原料或仪器。
46.实施例1
47.本实施例提供一种蜂王浆小分子水液的制备方法，具体步骤如下：
48.(1)将蜂王浆和超纯水按照质量比1：5混合均匀，得到蜂王浆稀释液；
49.(2)利用超滤膜设备过滤步骤(1)得到的蜂王浆稀释液，得到滤过液，其中，超滤膜设备分离滤过分子量在10000道尔顿以下的物质；
50.(3)将步骤(2)得到的滤过液在带有夹套的加热罐中加热至95℃，保温10min；
51.(4)将步骤(3)加热的滤过液降温后在洁净灌装区中灌装至无菌包装袋中，封盖密封，得到蜂王浆小分子水液，其中，灌装温度为60
±
2℃，洁净灌装区的空气洁净度(悬浮粒子、沉降菌)静态时达到10000级。
52.除步骤(4)对于洁净灌装区的空气清洁度有要求外，步骤(1)～(3)的操作环境保持清洁即可。
53.经检测，本实施例制备的蜂王浆小分子水液中王浆酸(10-羟基-2-癸烯酸(10-had))含量为0.10％；ph值为3.8；微生物标准达到：菌落总数≤10000cfu/ml，大肠菌群/
(mpn/ml)未检出。
54.实施例2
55.本实施例提供一种蜂王浆小分子水液的制备方法，具体步骤如下：
56.(1)将蜂王浆和超纯水按照质量比1：8混合均匀，得到蜂王浆稀释液；
57.(2)利用超滤膜设备过滤步骤(1)得到的蜂王浆稀释液，得到滤过液，其中，超滤膜设备分离滤过分子量在40000道尔顿以下的物质；
58.(3)将步骤(2)得到的滤过液在带有夹套的加热罐中加热至85℃，保温15min；
59.(4)将步骤(3)加热的滤过液降温后在洁净灌装区中灌装至无菌包装袋中，封盖密封，得到蜂王浆小分子水液，其中，灌装温度为53
±
2℃，洁净灌装区的空气洁净度(悬浮粒子、沉降菌)静态时达到10000级。
60.除步骤(4)对于洁净灌装区的空气清洁度有要求外，步骤(1)～(3)的操作环境保持清洁即可。
61.经检测，本实施例制备的蜂王浆小分子水液中王浆酸(10-羟基-2-癸烯酸(10-had))含量为0.07％；ph值为3.9；微生物标准达到：菌落总数≤10000cfu/ml，大肠菌群/(mpn/ml)未检出。
62.实施例3
63.本实施例提供一种蜂王浆小分子水液的制备方法，具体步骤如下：
64.(1)将蜂王浆和超纯水按照质量比1：8混合均匀，得到蜂王浆稀释液；
65.(2)利用超滤膜设备过滤步骤(1)得到的蜂王浆稀释液，得到滤过液，其中，超滤膜设备分离滤过分子量在5000道尔顿以下的物质；
66.(3)将步骤(2)得到的滤过液在带有夹套的加热罐中加热至90℃，保温10min；
67.(4)将步骤(3)加热的滤过液降温后在洁净灌装区中灌装至无菌包装袋中，封盖密封，得到蜂王浆小分子水液，其中，灌装温度为55
±
2℃，洁净灌装区的空气洁净度(悬浮粒子、沉降菌)静态时达到10000级。
68.除步骤(4)对于洁净灌装区的空气清洁度有要求外，步骤(1)～(3)的操作环境保持清洁即可。
69.经检测，本实施例制备的蜂王浆小分子水液中王浆酸(10-羟基-2-癸烯酸(10-had))含量为0.07％；ph值为3.9；微生物标准达到：菌落总数≤10000cfu/ml，大肠菌群/(mpn/ml)未检出。
70.实施例4
71.本实施例提供一种蜂王浆小分子水液的制备方法，具体步骤如下：
72.(1)将蜂王浆和超纯水按照质量比1：10混合均匀，得到蜂王浆稀释液；
73.(2)利用超滤膜设备过滤步骤(1)得到的蜂王浆稀释液，得到滤过液，其中，超滤膜设备分离滤过分子量在10000道尔顿以下的物质；
74.(3)将步骤(2)得到的滤过液在带有夹套的加热罐中加热至85℃，保温10min；
75.(4)将步骤(3)加热的滤过液降温后在洁净灌装区中灌装至无菌包装袋中，封盖密封，得到蜂王浆小分子水液，其中，灌装温度为63
±
2℃，洁净灌装区的空气洁净度(悬浮粒子、沉降菌)静态时达到10000级。
76.除步骤(4)对于洁净灌装区的空气清洁度有要求外，步骤(1)～(3)的操作环境保
持清洁即可。
77.经检测，本实施例制备的蜂王浆小分子水液中王浆酸(10-羟基-2-癸烯酸(10-had))含量为0.05％；ph值为3.9；微生物标准达到：菌落总数≤10000cfu/ml，大肠菌群/(mpn/ml)未检出。
78.实验例1料水比参数的确定
79.由于蜂王浆中含有王浆酸成分，本身具有一定的抑菌性，因此，选择合适的料水比是实现中低温洁净灌装的关键。本实验例旨在确定出较为合适的料水比，具体方法如下：
80.称取500克蜂王浆，选择料水比(蜂王浆和超纯水的质量之比)为1:5、1:10、1:20进行实验，蜂王浆按比例用超纯水稀释后利用超滤膜设备滤过分子量在10000道尔顿以下的物质，得到滤过液，并将得到的滤过液在带有夹套的加热罐中加热至85℃，保温10min，在超净工作台中冷却至常温，得到蜂王浆小分子水液，然后接种枯草芽孢杆菌在37℃下培养48h，观察菌落生长情况，同时检测蜂王浆小分子水液中的王浆酸含量，结果如表1所示。
81.表1蜂王浆小分子水液中的王浆酸含量和抑菌情况
[0082][0083]
由此可以看出，料水比高于1:10将会影响抑菌性能。
[0084]
实验例2灌装温度的确定
[0085]
按照实验例1确定出的最高料水比1:10进行实验，确定合适的灌装温度，具体方法如下：
[0086]
称取500克蜂王浆，按料水比1：10用超纯水稀释后利用超滤膜设备滤过分子量在10000道尔顿以下的物质，得到滤过液，并将得到的滤过液在带有夹套的加热罐中加热至85℃，保温10min，然后分别在常温25℃、50℃、65℃条件下灌装到无菌包装袋中，得到蜂王浆小分子水液，常温放置7天后观察胀袋情况并检测菌落总数，结果如表2所示。
[0087]
表2蜂王浆小分子水液放置后的胀袋情况和菌落总数
[0088][0089][0090]
由此确定出灌装温度应不低于50℃。
[0091]
实验例3蜂王浆小分子水液的贮存稳定性试验
[0092]
按如下步骤制备蜂王浆小分子水液：
[0093]
(1)取500克蜂王浆，将蜂王浆和超纯水按照质量比1：10混合均匀，得到蜂王浆稀释液；
[0094]
(2)利用膜设备过滤步骤(1)得到的蜂王浆稀释液，得到滤过液，其中，超滤膜设备分离滤过分子量在10000道尔顿以下的物质；
[0095]
(3)将步骤(2)得到的滤过液在带有夹套的加热罐中加热至85℃，保温10min；
[0096]
(4)将步骤(3)加热的滤过液降温后在洁净灌装区中灌装至无菌包装袋中，封盖密封，得到蜂王浆小分子水液，其中，灌装温度为50℃，洁净灌装区的空气洁净度(悬浮粒子、沉降菌)静态时达到10000级。
[0097]
除步骤(4)对于洁净灌装区的空气清洁度有要求外，步骤(1)～(3)的操作环境保持清洁即可。
[0098]
将制备好的蜂王浆小分子水液在常温(25℃)下贮存，跟踪观察其王浆酸含量、ph值、胀袋情况和菌落总数的变化，结果如表3所示。
[0099]
表3常温贮存条件下蜂王浆小分子水液的质量指标跟踪结果
[0100][0101]
根据常温贮存稳定性试验，本发明提供的制备方法得到的蜂王浆小分子水液在常温贮存3个月、6个月后依然质量稳定，微生物安全，具有优良的贮存稳定性。经试验，实施例1～4制备的蜂王浆小分子水液也同样具有优良的贮存稳定性。
[0102]
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。