一种复方黄黛片及其制备方法与应用与流程

1.本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种复方黄黛片及其制备方法与应 用。


背景技术：

2.慢粒白血病，又称慢性粒细胞白血病、慢性髓性白血病，为影响造血的 血液系统恶性肿瘤，常表现出乏力、消瘦、低热、盜汗等症状。
3.实体瘤包括肝癌、肺癌、食管癌、宫颈癌、大肠癌、乳腺癌等。现有技 术在治疗血液系统恶性肿瘤以及实体瘤方面通常采用靶向药物治疗或者放 化疗进行治疗。靶向药物治疗会针对癌变细胞的突变位点进行靶向治疗，但 是一旦靶向基因发生突变，靶向药物就会失去效力，并且靶向药物的成本过 高。化疗不仅会给人体带来身体上的痛苦，还存在杀死机体病变细胞的同时， 将机体中的好细胞一起杀死的风险。因此研发一种对人体安全、无毒、无耐 药性的药物成为肿瘤治疗的关键。中药由于自身安全、无毒、无耐药性成为 肿瘤治疗的一种手段，但是现有技术治疗肿瘤的中药配伍并不合理，导致其 治疗效果有待进一步提高。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于提供一种复方黄黛片及其制备方法与应用。为了实现 上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
5.本发明提供了一种复方黄黛片，包括如下质量份数的组分：
6.雄黄40～80份、青黛130～180份、蓝心姜100～130份、太子参120～150 份、丹参80～120份、醋柴胡60～100份、山慈菇40～70份、天花粉70～90份、 甘草20～30份、淀粉50～80份、羟甲基纤维素钠6～10份、硬脂酸镁3～6份、 微晶纤维素12～16份。
7.作为优选，包括如下质量份数的组分：
8.雄黄50～70份、青黛140～170份、蓝心姜110～120份、太子参130～140 份、丹参90～110份、醋柴胡70～90份、山慈菇50～60份、天花粉60～80份、 甘草22～28份、淀粉60～70份、羟甲基纤维素钠7～9份、硬脂酸镁4～5份、 微晶纤维素13～15份。
9.作为优选，包括如下质量份数的组分：
10.雄黄60份、青黛155份、蓝心姜115份、太子参135份、丹参100份、 醋柴胡80份、山慈菇55份、天花粉70份、甘草25份、淀粉65份、羟甲 基纤维素钠8份、硬脂酸镁4.5份、微晶纤维素14份。
11.作为优选，所述醋柴胡的炮制方法为：将柴胡与米醋混合闷润3～4h后， 炒制，得到醋柴胡。
12.作为优选，所述柴胡与米醋混合的质量体积比为1g：1～3ml；
13.所述炒制的温度为120～130℃；
14.所述炒制的时间为8～10min。
15.本发明还提供了所述的复方黄黛片的制备方法，包括如下步骤：
16.(1)将太子参、蓝心姜、丹参、醋柴胡、雄黄、山慈菇、甘草与水混 合，煎煮1～3次，合并煎煮液，将所述煎煮液浓缩至60℃相对密度为1.2～1.3 的膏状，得到中药浸膏；
17.(2)将天花粉在70～80vt％的乙醇中回流提取1～3次，过滤，合并滤液， 将所述滤液浓缩至相对密度为1.3～1.4的膏状，得到天花粉浸膏；
18.(3)将所述中药浸膏、天花粉浸膏与青黛、淀粉、羟甲基纤维素钠、 硬脂酸镁、微晶纤维素混合，压片，得到复方黄黛片。
19.作为优选，步骤(1)所述太子参、蓝心姜、丹参、醋柴胡、雄黄、山 慈菇、甘草的总质量与水的质量比为1:3～4；
20.每次煎煮的时间为0.8～1.2h。
21.作为优选，步骤(2)所述天花粉与乙醇的质量体积比为1g：3～5ml；
22.每次回流提取的时间为1.2～1.5h。
23.本发明还提供了所述的复方黄黛片在制备防治白血病和/或实体瘤的药 物方面的应用。
24.本发明还提供了所述的制备方法制备得到的复方黄黛片在制备防治白 血病和/或实体瘤的药物方面的应用。
25.本发明提供了一种复方黄黛片及其制备方法与应用。本发明的复方黄黛 片中以清热解毒、清肝定惊功效的青黛为君药；以行气破血、消积止痛功效 的蓝心姜，补气健脾，提高免疫力功效的太子参为臣药；以活血化瘀功效的 丹参，解毒燥湿、祛痰功效的雄黄，疏肝解郁、解热退热功效的醋柴胡，解 毒、化痰止咳功效的山慈菇以及清热生津，消肿排脓功效的天花粉为佐药； 以补脾益气、止咳化痰功效的甘草为使药调和诸药，使本发明的复方黄黛片 共奏清热解毒、补气健脾、活血化瘀、化痰导浊、提高免疫力的功效。本发 明的复方黄黛片不仅能够治疗慢粒白血病，对于肝癌、肺癌、乳腺癌等都有 一定疗效。
具体实施方式
26.本发明提供了一种复方黄黛片，包括如下质量份数的组分：
27.雄黄40～80份，优选为50～70份，进一步优选为60份；
28.青黛130～180份，优选为140～170份，进一步优选为155份；
29.蓝心姜100～130份，优选为110～120份，进一步优选为115份；
30.太子参120～150份，优选为130～140份，进一步优选为135份；
31.丹参80～120份，优选为90～110份，进一步优选为100份；
32.醋柴胡60～100份，优选为70～90份，进一步优选为80份；
33.山慈菇40～70份，优选为50～60份，进一步优选为55份；
34.天花粉70～90份，优选为60～80份，进一步优选为70份；
35.甘草20～30份，优选为22～28份，进一步优选为25份；
36.淀粉50～80份，优选为60～70份，进一步优选为65份；
37.羟甲基纤维素钠6～10份，优选为7～9份，进一步优选为8份；
38.硬脂酸镁3～6份，优选为4～5份，进一步优选为4.5份；
39.微晶纤维素12～16份，优选为13～15份，进一步优选为14份。
40.在本发明中，所述青黛的制备方法为：(1)将植物茎叶置于60～80℃水 中，提取20
～30min后过滤，得滤液；(2)在所述滤液中通入臭氧20～30s 后，加入终浓度为1～3vt％的盐酸水解1～2h，得到水解液；(3)调节所述水 解液的ph至7.0～7.2，静置1～2h，取沉淀，水洗所述沉淀至ph为7.0～7.1 后，干燥得到青黛。在本发明中，所述植物为马蓝、蓼蓝和菘蓝中的一种或 几种；所述植物茎叶与水的质量比为1:6～8；所述水的温度优选为70℃；所 述提取时间优选为25min；所述通入臭氧的时间优选为25s；所述盐酸的终 浓度优选为2vt％；所述水解的时间优选为1.5h；所述静置的时间优选为1.5h； 所述干燥为在40～50℃干燥箱中干燥8～12h；所述干燥的温度优选为45℃； 所述干燥的时间优选为10h。
41.在本发明中，所述醋柴胡的炮制方法为：将柴胡与米醋混合闷润3～4h 后，炒制，得到醋柴胡。在本发明中，所述柴胡与米醋混合的质量体积比为 1g：1～3ml，优选为1g：2ml。在本发明中，所述闷润时间优选为3.5h；所 述炒制的温度为120～130℃，优选为125℃；所述炒制的时间为8～10min， 优选为9min。
42.本发明还提供了所述的复方黄黛片的制备方法，包括如下步骤：
43.(1)将太子参、蓝心姜、丹参、醋柴胡、雄黄、山慈菇、甘草与水混 合，煎煮1～3次，合并煎煮液，将所述煎煮液浓缩至60℃相对密度为1.2～1.3 的膏状，得到中药浸膏；
44.(2)将天花粉在70～80vt％的乙醇中回流提取1～3次，过滤，合并滤液， 将所述滤液浓缩至相对密度为1.3～1.4的膏状，得到天花粉浸膏；
45.(3)将所述中药浸膏、天花粉浸膏与青黛、淀粉、羟甲基纤维素钠、 硬脂酸镁、微晶纤维素混合，压片，得到复方黄黛片。
46.在本发明中，步骤(1)所述太子参、蓝心姜、丹参、醋柴胡、雄黄、 山慈菇、甘草的总质量与水的质量比为1:3～4，优选为1:3.5；每次煎煮的时 间为0.8～1.2h，优选为1h。在本发明中，所述煎煮的次数优选为2次。在本 发明中，步骤(1)所述浓缩的相对密度优选为60℃相对密度为1.25的膏状。
47.在本发明中，步骤(2)所述天花粉与乙醇的质量体积比为1g：3～5ml， 优选为1g：4ml；所述乙醇的浓度优选为75vt％；每次回流提取的时间为 1.2～1.5h，优选为1.35h；所述回流提取的次数优选为2次；步骤(2)所述 浓缩的相对密度为1.35的膏状。
48.在本发明中，步骤(3)所述压片在压片机中进行。每片复方黄黛片的 重量为0.2～0.3g。
49.本发明还提供了所述的复方黄黛片在制备防治白血病和/或实体瘤的药 物方面的应用。
50.本发明还提供了所述的制备方法制备得到的复方黄黛片在制备防治白 血病和/或实体瘤的药物方面的应用。
51.下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把 它们理解为对本发明保护范围的限定。
52.本发明实验例中所述的k562细胞购自长沙艾碧维生物科技有限公司。
53.本发明实验例中所述nod/scid小鼠购自辽宁长生生物技术股份有限 公司。
54.本发明实验例中所述的雌性balb/c纯系小鼠购自辽宁长生生物技术股 份有限公司。
55.本发明实验例中所述的荷hac肝癌种鼠购自中科院药物所苏州研究 所。
56.本发明实验例中所述的lewis细胞购自上海弘顺生物科技有限公司。
57.本发明实验例中所述的c57bl/6小鼠购自辽宁长生生物技术股份有限 公司。
58.实施例1
59.取马蓝植物茎叶5kg，洗净去杂后置于60℃水中，提取25min后，过滤， 得到滤液。在滤液中通入20s的臭氧后，加入终浓度为1vt％的盐酸水解1h， 得到水解液，利用氢氧化钠将所述水解液的ph调至7.0后，静置2h，取沉 淀，水洗沉淀3次后沉淀的ph达到7.0，将所述沉淀置于50℃干燥箱中烘 干10h，得到青黛备用。
60.取1kg柴胡，加入2l米醋混合均匀，闷润3h后，置于120℃炒制机中 炒制10min，得到醋柴胡，备用。
61.取120g太子参、110g蓝心姜、120g丹参、60g醋柴胡、50g雄黄、60g 山慈菇、20g甘草混匀，加入1620g水，煎煮2次，每次煎煮1h。合并两次 煎煮液，将所述煎煮液减压浓缩至60℃相对密度为1.2的膏状，得到中药浸 膏。
62.在90g天花粉中加入75vt％的乙醇360ml，回流提取3次，每次提取1.2h， 过滤，合并滤液，将所述滤液浓缩至相对密度为1.4的膏状，得到天花粉浸 膏。
63.将上述所述的中药浸膏、天花粉浸膏与150g青黛、60g淀粉、10g羟甲 基纤维素钠、3g硬脂酸镁、16g微晶纤维素混合，压片，干燥得到复方黄黛 片。
64.实施例2
65.取蓼蓝植物茎叶2.5kg，菘蓝植物茎叶2.5kg，洗净去杂后置于80℃水中， 提取30min后，过滤，得到滤液。在滤液中通入25s的臭氧后，加入终浓度 为2vt％的盐酸水解2h，得到水解液，利用氢氧化钠将所述水解液的ph调 至7.2后，静置1h，取沉淀，水洗沉淀2次后沉淀的ph达到7.1，将所述沉 淀置于40℃干燥箱中烘干12h，得到青黛备用。
66.取1kg柴胡，加入3l米醋混合均匀，闷润3.5h后，置于130℃炒制机 中炒制8min，得到醋柴胡，备用。
67.取150g太子参、100g蓝心姜、100g丹参、80g醋柴胡、80g雄黄、40g 山慈菇、30g甘草混匀，加入2320g水，煎煮1次，煎煮时间为1.2h。将所 述煎煮液减压浓缩至60℃相对密度为1.3的膏状，得到中药浸膏。
68.在70g天花粉中加入80vt％的乙醇350ml，回流提取2次，每次提取1.4h， 过滤，合并滤液，将所述滤液浓缩至相对密度为1.3的膏状，得到天花粉浸 膏。
69.将上述所述的中药浸膏、天花粉浸膏与180g青黛、50g淀粉、6g羟甲 基纤维素钠、6g硬脂酸镁、12g微晶纤维素混合，压片，干燥得到复方黄黛 片。
70.实施例3
71.取马蓝植物茎叶1kg，蓼蓝植物茎叶2kg，菘蓝植物茎叶2kg，洗净去杂 后置于70℃水中，提取20min后，过滤，得到滤液。在滤液中通入30s的臭 氧后，加入终浓度为3vt％的盐酸水解1.5h，得到水解液，利用氢氧化钠将 所述水解液的ph调至7.0后，静置1.5h，取沉淀，水洗沉淀1次后沉淀的 ph达到7.0，将所述沉淀置于50℃干燥箱中烘干8h，得到青黛备用。
72.取1kg柴胡，加入1l米醋混合均匀，闷润4h后，置于120℃炒制机中 炒制8min，得到醋柴胡，备用。
73.取130g太子参、130g蓝心姜、80g丹参、100g醋柴胡、40g雄黄、70g 山慈菇、20g甘草混匀，加入1800g水，煎煮3次，煎煮时间为0.8h。合并3次煎煮液，将所述煎煮液减压浓缩至60℃相对密度为1.2的膏状，得到中 药浸膏。
74.在80g天花粉中加入70vt％的乙醇240ml，回流提取1次，提取时间为 1.5h，过滤，将所述滤液浓缩至相对密度为1.4的膏状，得到天花粉浸膏。
75.将上述所述的中药浸膏、天花粉浸膏与130g青黛、80g淀粉、6g羟甲 基纤维素钠、5g硬脂酸镁、12g微晶纤维素混合，压片，干燥得到复方黄黛 片。
76.对比例1
77.按照实施例1的方法设置对比例1，与实施例1不同的是利用相同质量 的柴胡替换实施例1的醋柴胡制备复方黄黛片。
78.实验例1
79.取对数生长期的k562细胞，在nod/scid小鼠皮下注射200万的k562 细胞悬液。待瘤块长至1cm3时，颈椎脱臼处死小鼠，皮肤消毒，取出皮下 肿瘤，剪切成直径2mm的小块，用18号套管针移植至其他小鼠皮下，进行 鼠间传代，共移植50只小鼠。移植10天后，使用游标卡尺测量小鼠瘤体的 瘤径，计算公式为v＝1/2
×a×
b2，a表示瘤体长，b表示瘤体宽。移植10d后 将小鼠随机分成5组，实施例1组、实施例2组、实施例3组、对比例1组 和对照组，每组10只小鼠，实施例1组按照1mg/kg/d的量饲喂实施例1的 复方黄黛片，实施例2组按1mg/kg/d的量饲喂实施例2的复方黄黛片，实 施例3组按1mg/kg/d的量饲喂实施例3的复方黄黛片，对比例1组按1mg/kg/d 的量饲喂对比例1的复方黄黛片，空白对照组每只小鼠灌喂2ml生理盐水。 连续喂药14d，使用游标卡尺检测每组小鼠的瘤径，计算每组小鼠的肿瘤体 积。根据测量结果计算得到相对肿瘤体积rtv。rtv＝vt/vo(vt为连续喂 药14d时小鼠肿瘤的体积；vo为喂药前小鼠肿瘤的体积)，根据公式计算 相对肿瘤增殖率t/c(％)，t/c％＝t
rtv
/c
rtv
×
100％(t
rtv
为治疗组rtv；c
rtv
为对照组rtv)，结果如表1所示。实验结束后，将实验小鼠脱颈椎处死， 完整剥离瘤组织称重，各组取平均值，并以对照组细胞瘤重为100％，按公 式计算各组抑瘤率(ir)。ir(％)＝(1-实验组瘤重/对照组瘤重)
×
100％，结 果如表2所示。
80.表1本发明药物对k562细胞所致的肿瘤体积的影响
[0081][0082]
表1显示，饲喂实施例1～3组的药物后对k562细胞所致的肿瘤的体积 低于对比例1组，明显低于对照组。相对增值率也低于对比例1组。说明本 发明的药物可以抑制k562细胞所致的肿瘤的生长。
[0083]
表2本发明药物对k562细胞所致肿瘤的抑瘤率
[0084]
‑‑
对照组实施例1组实施例2组实施例3组对比例1组瘤重(g)3.241.161.231.202.47抑瘤率％10064.262.0462.9623.77
[0085]
表2显示，饲喂实施例1～3的药物后对k562细胞所致肿瘤的抑瘤率能 达到62％以上。说明本发明的药物可以抑制k562细胞所致的肿瘤的增长。
[0086]
实验例2
[0087]
无菌获取传代接种hac肝癌的balb/c种鼠的肿瘤组织，除去包膜， 剪碎组织，200目滤网过滤，用无菌生理盐水稀释hac细胞至5
×
106/ml， 每只小鼠左腋下接种0.2ml。将接种肝癌细胞的小鼠平均分成5组，每组10 只小鼠，实施例1组、实施例2组、实施例3组、对比例1组、对照组。从 接种肝癌细胞开始，实施例1组按1mg/kg/d的量饲喂实施例1的复方黄黛 片，实施例2组按1mg/kg/d的量饲喂实施例2的复方黄黛片，实施例3组 按1mg/kg/d的量饲喂实施例3的复方黄黛片，对比例1组按1mg/kg/d的量 饲喂对比例1的复方黄黛片，对照组每只小鼠灌喂2ml生理盐水。连续喂 药14d。用药结束后，将实验小鼠脱颈椎处死，完整剥离瘤组织称重，各组 取平均值，并以对照组细胞瘤重为100％，按公式计算各组抑瘤率(ir)。 ir(％)＝(1-实验组瘤重/对照组瘤重)
×
100％。结果如表3所示。
[0088]
表3本发明药物对肝癌的抑制率
[0089]
‑‑
对照组实施例1组实施例2组实施例3组对比例1组瘤重(g)0.310.120.110.100.24抑瘤率％-61.2964.5267.7422.58
[0090]
表3显示，饲喂实施例1～3的药物后对肝癌的抑制率高于对比例1组。 说明本发明的药物也对肝癌有抑制作用，抑制率为61.29％以上。
[0091]
实验例3
[0092]
将小鼠体内接种200万lewis细胞悬浮液，待瘤块长至1cm3时，分离 瘤组织，剪切成直径1mm的小块，用18号套管针移植至c57bl/6其他小鼠 皮下，进行鼠间传代。移植10d后，将小鼠随机分成5组，实施例1组、实 施例2组、实施例3组、对比例1组和对照组，实施例1组按1mg/kg/d的 量饲喂实施例1的复方黄黛片，实施例2组按1mg/kg/d的量饲喂实施例2 的复方黄黛片，实施例3组按1mg/kg/d的量饲喂实施例3的复方黄黛片， 对比例1组按1mg/kg/d的量饲喂对比例1的复方黄黛片，对照组每只小鼠 灌喂2ml生理盐水。连续喂药14d。用药结束后，将实验小鼠脱颈椎处死， 完整剥离瘤组织称重，各组取平均值，并以对照组细胞瘤重为100％，按公 式计算各组抑瘤率(ir)。ir(％)＝(1-实验组瘤重/对照组瘤重)
×
100％。结 果如表4所示。
[0093]
表4本发明药物对肺癌的抑制率
[0094]
‑‑
对照组实施例1组实施例2组实施例3组对比例1组瘤重(g)2.470.820.930.871.89抑瘤率％-66.862.3564.7823.48
[0095]
表4显示，饲喂实施例1～3的药物后对肺癌的抑制率高于对比例1组， 说明本发明的药物对肺癌有效，抑制率为62.35％以上。
[0096]
由以上实施例可知，本发明提供了一种复方黄黛片及其制备方法与应 用。本发明的复方黄黛片各组分相互作用共奏清热解毒、补气健脾、活血化 瘀、化痰导浊、提高免疫力的功效。本发明的复方黄黛片不仅能够治疗慢粒 白血病，对于肝癌、肺癌、乳腺癌等均有一定疗效。
[0097]
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普 通技术人
员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润 饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。