贯叶连翘的稳定提取物、其制备方法和药物组合物的制作方法

专利名称：贯叶连翘的稳定提取物、其制备方法和药物组合物的制作方法
药理和临床试验证实贯叶连翘的提取物能够成功地用于调节严重抑郁症。但不能确切地指明这种温和的抗抑郁总功效是一种或多种组分产生的；参见J.Holzl，S.Sattler和H.Schutt，JohanniskrautEineAlternative zu synthetischen Antidepressiva(St.Johns wortanalternative to synthetic antidepressants)，PharmazeutischeZeitung，No.46，139.Jahrgang，1994年11月17日，第3959-3977页和E.Steinegger and R.Hnsel，Pharmakognosie，第5版，1992，p672-674，Springer Verlag。然而，近来强烈的暗示贯叶金丝桃素对达到功效起显著的作用(EP-A-0 599 307)。
粗草药是由贯叶连翘的地上部分组成的。贯叶连翘的组分是另外的金丝桃素和贯叶金丝桃素；参见J.Holzl等，见上。
在DE-PS-1 569 849以及S.Niesel和H.Schilcher在Arch.Pharm.，第323卷1990年第755页描述了富含金丝桃素的金丝桃提取物的制备。
从R.Berghofer和J.Holzl，Deutsche Apothekerzeitung，第126卷第47期(1986)第2569-2573页中我们知道一周后从储存的粗草药提取的贯叶金丝桃素已经完全降解而从新鲜植物中提取的提取物更稳定。这些作者推测该新鲜植物包括一种贯叶金丝桃素的稳定剂。
J.Hlzl等在Planta Med.，第55卷(1989)第601-602页中报道了金丝桃油并推测在金丝桃素的浓度和过氧化值之间有关系。暴露在阳光中的金丝桃油显示出不同的过氧化值。但是按照J.Holzl等，在过氧化值和金丝桃素的浓度之间没有关系。
P.Maisenbacher和K.-A.Kovar在Planta Med.第58卷(1992)第351到354页中报道了金丝桃油的稳定性。该油中也包括了几周内降解的金丝桃素。
从EP-A-0 599 307已知贯叶连翘的粗草药的粗提取物(见实施例1-3)。这些粗提物是用96％和60％乙醇水溶液且不带任何预防措施和任何额外步骤简单提取粗草药制备的。
在实施例1中，新鲜粗提物的贯叶金丝桃素含量为6.3％。在另两个实施例中，未显示贯叶金丝桃素的含量。我们发现该贯叶金丝桃素提取物是极其不稳定的；见说明书实施例5，表I。按实施例1通过用70％乙醇水溶液提取药物得到的粗提物(比较)在13星期后不再能检测到贯叶金丝桃素。
而且，已知通过用脂肪油如橄榄油、大豆油、麦芽油或葵花籽油提取捣碎(捣烂的)贯叶连翘的新鲜花来制备金丝桃油(金丝桃油；Oleumhyperici)。金丝桃油包括不同量的贯叶金丝桃素并可用于局部治疗伤口特别是烧伤和擦破；参见P.Maisenbacher和K.-A.Kovar，PlantaMed.，Vol158(1992)，第351-354页和J.Holzl，L.Demish和S.Stock，Planta Med.，第55卷(1989)第601-602页。
在药物中的常规金丝桃提取物中的贯叶金丝桃素含量，在常规存储几个月内会剧烈地降低直到该物质消失；参见Ph.D.thesis of P.Maisenbacher，Tubingen 1991和the Ph.D.thesis of R.Berghofer，Marburg/L.1987。在早期金丝桃的油性提取物试验中，含有贯叶金丝桃素的组合物的稳定性只有在氩气中存储才能改善的好一点；参见Ph.D.thesis of P.Maisenbacher，见上。在这些提取物中用抗氧化剂如丁基羟基甲苯(BHT)和丁基羟基甲氧基苯(BHA)不能实现稳定。而且，常规的抗氧化剂如Oxynex LM和Oxynex 2004也不能改善稳定性。在金丝桃油时，使用辛基十二烷醇(Eutanol G)作提取剂达到了最好的稳定性(按照P.Maisenbacher的Ph.D.理论)；见P.Maisenbacher’sPh.D.thesis，第151-154页。该粗草药在有时加松节油下，用热植物油提取。在这种情况下，特别是在水影响下，Maisenbacher观察到降解。在P158-166页，Maisenbacher描述了最佳制备方法的条件。下面是具体说明水必须排出，应用Eutanol G作提取溶剂；常规抗氧化剂提供了抗氧化保护。3星期后，贯叶金丝桃素的橄榄油提取物开始稳定降解；见图7-10。尽管用惰性气体冲洗，但3个月后开始完全降解；见P160。用Eutanol G制备的油在室温氩气下稳定半年。在30℃发生慢降解，见P161。
用常规的药用无机或有机溶剂或其混合物能够制备含有贯叶金丝桃素的金丝桃提取物(P.List和P.C.Schmidt，Technologiepflanzlicher Arzneizubereitungen，Wissensch.VerlagsgesellschaftmbH，Stuttgart，1984)。
通常金丝桃的含水乙醇提取物和其制备成的药物组合物一般包括少于大约1％的贯叶金丝桃素(以提取物为准)。存储后该值明显下降并根据不同的存储条件趋向于零。人们推测氧化过程对原药材和提取物中的贯叶金丝桃素的降解起作用。
本发明的技术问题是提供含有贯叶金丝桃素的贯叶连翘的稳定提取物，其中贯叶金丝桃素长期保持稳定。本发明的另一个技术问题是提供了一种制备这些稳定提取物的方法以及提供了含有稳定提取物的药物组合物，其中该组合物中的贯叶金丝桃素的量也保持稳定。
按照本发明，这些技术问题用权利要求1到8的提取物、用权利要求9-21的方法以及权利要求22的药物组合物已经解决。
本发明首先是以这样一种出人意料的结果为基础的，即含有一些抗氧化剂和/或结合氧的稳定剂或还原剂的贯叶金丝桃素的提取物，这些试剂能够降解提取物中氧化剂类如游离基、过氧化物、大气中氧等和/或抑制贯叶金丝桃素的降解，以及任选在惰性气体中如氮气和/或避光和/或用一种高还原氧含量的溶剂进行的提取比未处理的金丝桃提取物稳定很多。这种提取物是与R.Berghofer和J.Holzl从干燥和存储的粗草药得到的观察相反的角度得到的。
通过物理处理如用惰性气体如氮气清洗能够制得高还原氧含量的溶剂。如按照本发明特别是通过加入抗氧化剂并优选避光和大气中氧来保护或稳定金丝桃的提取物时，则该提取物中的贯叶金丝桃素长期基本保持稳定。通过相应的药物制剂也能够实现避光和大气中氧的保护。
在本发明制备稳定提取物方法的优选实施方案中，用含水乙醇提取新鲜或最好是干燥的贯叶连翘药材，通过物理处理大大降低了溶剂的氧含量。由于可能存在氧化剂，将作为稳定剂的抗氧化剂加到提取溶液并使其溶解。提取贯叶连翘优选溶剂的例子还包括含水甲醇，低熔点含大约5到8个碳原子的烷烃如戊烷、己烷和庚烷，特别是正庚烷，以及液态和超临界的二氧化碳。术语“含水乙醇或甲醇”是指水含量最好高达大约40％体积的甲醇或乙醇。
优选抗氧化稳定剂或抗氧化剂的具体例子是药学上可接受的物质，其能够抑制贯叶金丝桃素的降解和/或还原提取物或药物组合物中的氧化剂。特殊的例子是有机硫醇化合物，如半胱氨酸和谷胱甘肽，以及抗坏血酸及其衍生物如抗坏血酸的脂肪酸酯，如肉豆蔻酸酯、棕榈酸酯和硬脂酸酯。
向金丝桃提取溶液中加入足以稳定贯叶金丝桃素的量的抗氧化稳定剂。对一般金丝桃提取物讲0.01％到5％浓度的抗氧化稳定剂是足够的。
在另一个实施方案中，如上所述进行，但稳定剂是在干燥提取溶液后即除去溶剂后加入的。
在本发明的另一个优选的实施方案中，在与其它药物添加剂一起制备药物产品阶段加入抗氧化稳定剂。
所有的实施方案最好在避开光和氧下进行。
所得到的提取物能够与常规药物添加剂一起制备，择性地在之后把稳定剂再加入到药物组合物如胶囊、片剂和包衣片中。
药物添加剂是填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂和用于膜片和包衣片的包衣剂以及用于软胶囊的油类和脂肪类填充剂。
本发明通过下列实施例加以解释，但不限定本发明的范围。如果不另作说明，百分比按重量计。用氮气作惰性气体(保护性气体)。应当清楚其它惰性气体如氩或氪也能使用。实施例1(对照实施例)在碾机中把1kg贯叶连翘的粗草药碾细并加入7kg70(v/v)％的乙醇。在55℃惰性气体下把1kg粗草药的悬浮液和7kg溶剂剧烈搅拌1小时。然后从粗草药中离心分离所得到的提取物。用7kg的溶剂再把药渣提取。合并两次提取液并测定提取物等分部分的干燥残余物。缓缓地减压浓缩提取物到含大约72％干燥剩余物，再在40℃减压干燥。得到0.44kg干燥提取物。贯叶金丝桃素的含量是0.37％。实施例2在碾机中把8kg贯叶连翘的粗草药碾细并加入56kg70(v/v)％的乙醇。在用惰性气体冲洗前还原所用溶剂的氧含量。然后在惰性气体55℃下把8kg粗草药的悬浮液和56kg溶剂剧烈搅拌1小时。从药物中离心分离所得到的提取物同时用氮气作惰性气体冲洗。把药渣用相同方式再次提取。合并两次提取溶液并加入0.1％抗坏血酸。在氮气作惰性气体下把该溶液剧烈搅拌10分钟。然后温和减压浓缩到干燥残余物含量为70％并在40℃减压干燥。得到贯叶金丝桃素含量0.9％的2.52kg稳定的干燥提取物。实施例3向400g干燥细碾的新鲜贯叶连翘中加入3.2kg正庚烷。加入120ng抗坏血酸棕榈酸酯。在50℃避光持续搅拌下提取1小时。用Seitz Supra1500滤头把混合物吸出并把药渣用相同方式再提取一次。在35℃避光下旋转蒸发浓缩合并的提取溶液得到大约70％含量的干燥残余物然后冷冻干燥。得到贯叶金丝桃素含量为1.7％的21g干燥提取物。实施例4向470g干燥的细碾新鲜贯叶连翘中加入150ng抗坏血酸棕榈酸酯。然后把混合物转到高压提取机上并在200巴35℃用7.5kg二氧化碳提取。提取后，减压到60巴来分离提取物。将提取物从提取机中取出并与10mg抗坏血酸棕榈酸酯混合。得到贯叶金丝桃素含量为1.9％的12.2g干燥提取物。实施例5在碾机中把2.4kg贯叶连翘的粗草药碾细并在用氮气冲洗之前加入16kg 80(v/v)％的甲醇。然后在55℃把混合物搅拌1小时。从药物剩余物中离心分离所得到的提取溶液。接着把剩余物再提取1次。合并两次提取溶液并加入重量百分比1.0％的抗坏血酸。把该溶液搅拌15分钟。然后地把提取溶液浓缩到干燥残余物含量为70％并在40℃减压干燥。得到贯叶金丝桃素含量0，7％的0.5kg稳定的干燥提取物。提取物中金丝桃素的总含量为0.46％。实施例6检测贯叶金丝桃素的稳定性在该实施例中，把按照实施例1制备中没有特别预防措施和加入法得到的提取物的贯叶金丝桃素含量与本发明实施例2到5制得的提取物比较。在氮气室温避光下把本发明制得的提取物储。结果总结在表1中。该结果显示6个月后按照本发明制得的提取物的贯叶金丝桃素的含量几乎没有变化。表1
实施例7含有贯叶金丝桃素的软明胶胶囊-组合物贯叶金丝桃素的干燥提取物 300mg抗坏血酸 0.25mg辛基十二烷醇 200mg制备把干燥提取物和抗坏血酸一起分散到辛基十二烷醇中并在避开大气氧下加工成软明胶胶囊。实施例8含有贯叶金丝桃素提取物的包膜片-组合物贯叶金丝桃素的干燥提取物 300mg纤维素100mg改良淀粉 90mg羧甲基纤维素钠 30mg高度分散的二氧化硅5.0mg抗坏血酸 5.0mg硬脂酸镁 5.0mg羟丙基甲基纤维素-包衣 20.0mg制备在干燥条件下用混合机把组分混合并直接压成片。把所得到的片用羟丙基甲基纤维素包衣。
权利要求
1.含0.1％-2％贯叶金丝桃素的贯叶连翘的稳定提取物，其特征在于通过加选自抗氧化及氧结合剂的稳定剂和还原剂的稳定剂使惯叶金丝桃素对分解或降解是稳定的。
2.根据权利要求1的稳定提取物，其特征在稳定剂含量为选自用于稳定贯叶金丝桃素的有机硫醇化合物，抗坏血酸及其衍生物的足够量。
3.根据权利要求1或2的稳定的提取物，其特征在于该稳定剂是基于提取物的0.01％到5％浓度存在的。
4.根据权利要求1或2的稳定的提取物，其特征在于该稳定剂是基于提取物的0.2％到1％浓度存在的。
5.根据权利要求1-4任一的稳定的提取物，其特征在于该稳定剂是半胱氨酸。
6.根据权利要求1-4任一的稳定的提取物，其特征在于该稳定剂是谷胱甘肽。
7.根据权利要求1-4任一的稳定的提取物，其特征在于该稳定剂是抗坏血酸。
8.根据权利要求1-4任一的稳定的提取物，其特征在于该稳定剂是抗坏血酸的脂肪酸酯。
9.一种制备含0.1％-2％贯叶金丝桃素的贯叶连翘稳定提取物的方法，其中用常规的药物无机或有机溶剂或其混合物提取粗贯叶连翘药材，条件是该溶剂是非油性提取溶剂，和在提取制备期间或制备后加入足够量的用于稳定贯叶金丝桃素的选自于有机硫醇化合物类、抗坏血酸及其衍生物中的稳定剂，稳定剂的量是足够稳定贯叶金丝桃素的量，以及其中从这样获得的液态提取物中得到干燥提取物。
10.根据权利要求9的方法，其特征在于提取新鲜的粗贯叶连翘药物。
11.根据权利要求9的方法，其特征在于提取干燥的粗贯叶连翘药物。
12.根据权利要求9-11任一的方法，其特征在于把半胱氨酸用作稳定剂。
13.根据权利要求9-11任一的方法，其特征在于把谷胱甘肽用作稳定剂。
14.根据权利要求9-11任一的方法，其特征在于把抗坏血酸用作稳定剂。
15.根据权利要求9-11任一的方法，其特征在于把抗坏血酸的脂肪酸酯用作稳定剂。
16.根据权利要求9-15任一的方法，其特征在于以基于提取物的0.01％到5％，优选0.2％到1％的浓度加入稳定剂。
17.根据权利要求9-16任一的方法，其特征在于用于提取的溶剂的氧含量较低或显著降低。
18.根据权利要求9-17任一的方法，其特征在于用于提取的溶剂选自含水乙醇，含水甲醇，正庚烷或液态或超临界二氧化碳。
19.根据权利要求9-18任一的方法，其特征在于除去提取液中溶剂后加入稳定剂。
20.根据权利要求9-19任一的方法，其特征在于仅在与常规药物添加剂一起制备药物组合物的阶段加入稳定剂。
21.根据权利要求9-20任一的方法，其特征在于该方法避光和/或氧下进行。
22.用于治疗抑郁和植物性神经疾病的药物组合物，其包括权利要求1-8任一的提取物和药用添加剂。
全文摘要
本发明涉及含0.1%－2%贯叶金丝桃素的贯叶连翘的改进提取物,其中贯叶金丝桃素是长期稳定的。
文档编号A61K47/16GK1251999SQ98803931
公开日2000年5月3日 申请日期1998年4月7日 优先权日1997年4月8日
发明者C·艾德梅尔, E·格莱斯兰, F·朗, R·奥施曼, K－H·斯杜姆普 申请人:威廉施瓦布博士有限公司