>[0138] 实验采用1. 0%、5. 0%两个梯度的实施例1、实施例2、实施例3作为测试浓度（实 验时稀释20倍使用），分别测定其对SDS诱导DNA损伤的保护作用。通过OxiSelect?彗 星分析试剂盒的观察，DNA受到的损坏愈大，DNA碎段就愈多，愈小的DNA碎段游离的速度就 愈快，也游离的愈远，进而形成了彗星的尾部，而较大的一些碎段位置则靠近细胞核，因而 形成彗星的头部。DNA碎段游动的程度不同使图像呈现出彗星状。彗星的长度与DNA的损 害程度呈正相关性，彗星尾端愈长，细胞的损害程度愈大。
[0139]
[0140] 表10实施例1、实施例2、实施例3抑制细胞DNA损伤彗星实验结果
[0141] 通过图像分析软件对彗星图片进行测量、分析发现，在没有实施例1、实施例2、实 施例3存在的情况下，DNA发生100 %损伤。在预添加实施例1、实施例2、实施例3保护，然 后用SDS刺激时，发生明显的DNA损伤减弱现象，其DNA损伤细胞拖尾率和彗尾长度均发生 显著性的降低。实验结果见表10。
[0142] 以上实验结果表明，实施例1、实施例2、实施例3对DNA的损伤和泄露有很好的抑 制作用，可以有效提升皮肤的抵抗力。
[0143] 七、实施例4、实施例5、实施例6所得膏霜A、B、C止痒效果评价
[0144] 1试验材料
[0145] 1. 1实验样品：实施例4、实施例5、实施例6制备膏霜A、B、C
[0146] 1. 2实验动物：健康豚鼠，SPF/VAF级，雌雄各半，体重250±10g。由北京金牧阳实 验动物养殖有限责任公司提供，动物合格证号：SCXK(京）2010-0001。饲养环境：北京金牧 阳实验动物养殖有限责任公司养殖场。
[0147] 1. 3试剂：磷酸组胺，Sigma公司产品。
[0148] 2试验方法
[0149] 2. 1剂量设计：受试品以0.lmL/lcm2局部涂抹。模型对照组给予0.lmL/lcm2蒸馏 水局部涂抹。
[0150] 2. 2磷酸组织胺致痒法：取豚鼠30只，于实验前1天右后足背剃毛，随机分组：模 型对照组、空白基质组、A组、B组和C组。连续3天于剃毛处分别均匀涂抹相应剂量受试 品，模型对照组给予蒸馏水涂抹。实验第3天，精密称取磷酸组胺适量，临用前以蒸馏水配 成梯度浓度备用。用粗砂纸将豚鼠右后足背剃毛处擦伤，面积约lcm2,局部再涂药1次，于 末次涂药10分钟后在擦伤处滴0. 01 %磷酸组胺0. 05mL，以后每隔3分钟依递增浓度涂抹， 每次均为〇. 〇5mL。直到出现豚鼠回头舔右后足，以最后出现豚鼠回头舔右后足时所滴取的 磷酸组胺总量为致痒阈。计算各组致痒阈并比较组间的差异性。
[0151] 结果表明，如图2所示：与模型对照组（去离子水）相比，在涂抹实施例制备膏霜 制剂后，显著提高了豚鼠耐受磷酸组胺的致痒阈值，发明人用实施例1、实施例2、实施例3 制备植物提取物重复上述实验，得到相同的结果，说明本发明制剂可有效抑制因组胺引起 的瘙痒反应，从而可缓解蚊虫叮咬后的瘙痒症状。
[0152] 八、实施例6制备膏霜制剂皮肤修复作用功效评价
[0153] 1试验材料
[0154] 1. 1实验样品：实施例6制备膏霜
[0155] 1. 2实验动物：健康豚鼠，SPF/VAF级，30只，雌雄各半，体重250±10g。由北京金 牧阳实验动物养殖有限责任公司提供，动物合格证号：SCXK(京）2010-0001。饲养环境：北 京金牧阳实验动物养殖有限责任公司养殖场。
[0156] 1. 3试剂及仪器：丙酮、乙醚，均为北京化工厂产品。皮肤含水量检测仪，
[0157] 2试验方法
[0158] 2. 1剂量设计：受试品以0.lg/lcm2局部涂抹。空白对照组和模型对照组给予 0.lmL/lcm2蒸馏水局部涂抹。
[0159] 2. 2取豚鼠30只，于实验前1天颈背部剃毛，面积约为2X2cm2,随机分组：空白对 照组、模型对照组、样品组。除空白对照组豚鼠，其余各组取丙酮：乙醚=1 :1混合液150μL 滴于去毛处，10分钟后分别取相应样品涂抹于去毛部位，一天2次，连续5天，空白对照组和 模型对照组豚鼠给予蒸馏水涂抹于去毛处。于第5天给予样品后20分钟测量豚鼠脱毛处 皮肤含水量，比较组间差异，并计算水分散失保护率。样品对皮肤脱水模型皮肤含水量的影 响，可以为评价样品对过敏皮肤的修复功效提供实验依据。
[0160] 水分散失保护率（％) =(用药组皮肤含水量-模型组皮肤含水量）/空白对照组 皮肤含水量X100
[0161] 3试验结果
[0162] 结果表明（表11):模型对照组皮肤水分含量与空白对照组呈极显著差异（ρ < 〇. 01)，说明皮肤损伤产生脱水作用显著降低了豚鼠皮肤水分含量，建模成功。在使用实 施例制备制剂后，极显著提高了豚鼠皮肤的水分含量（Ρ< 0. 01)，发明人用实施例1至5制 备样品重复上述实验，得到相同的结果，说明本发明中药提取物及膏霜可有效修复受损皮 肤，平复人体皮肤蚊虫叮咬后的红肿、损伤等状态。 「01631
【主权项】
1. 一种具有防治蚊虫叮咬功效的外用中药组合物，其特征在于，所述外用中药组合物 由下述重量份配比的原料药组成： 香薷20~60份、藤茶15~45份、漠藜10~30份、肉豆蔻5~20份。2. 如权利要求1所述的外用中药组合物，其特征在于，所述外用中药组合物由下述重 量份配比的原料药组成： 香薷30~50份、藤茶20~40份、漠藜15~25份、肉豆蔻8~15份。3. -种权利要求1或2所述外用中药组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法步 骤如下： (1) 将权利要求1或2所述原料药粉碎后按所述重量份配比称取，混匀； (2)用体积百分比为60%~95%乙醇提取，原料药与乙醇质量体积比g/mL为1:10~ 1:50, 20~40°C下超声提取5~15分钟后，75~85°C下热回流提取30~50分钟； (3) 将步骤（2)得到的料液冷却至20°C~30°C，50~100目滤过滤，得滤液； (4) 向步骤（3)得到的滤液中加入原始乙醇量的1，3-丁二醇混溶均匀，去除溶液中的 乙醇，然后真空减压抽滤，收集滤液，即得。4. 如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（2)中超声提取的频率为 20 ~50kHz，功率为 200 ~500W。5. -种具有防治蚊虫叮咬功效的外用中药提取物，其特征在于，所述外用中药提取物 是由权利要求3所述制备方法提取得到的。6. 权利要求5所述外用中药提取物在制备具有防治蚊虫叮咬功效的外用护肤制剂中 的用途。7. -种具有防治蚊虫叮咬功效的外用护肤制剂，其特征在于，所述外用护肤制剂由权 利要求5所述外用中药提取物及护肤品领域可接受的辅料制成。8. -种具有防治蚊虫叮咬功效的外用护肤组合物，其特征在于，所述外用护肤组合物 由A相、B相、C相及D相组成，所述A相、B相、C相及D相分别由下述重量百分比的原料组 成： A相 PEG-100甘油硬脂酸酯/甘油硬脂酸酯 1. 5~3. 0wt% 聚二甲基硅氧烷 2.0~4.0wt% 乳木果油 1.0~3.0wt% 异硬脂酸异硬脂酸酯 1. 0~3. 0wt% 澳洲坚果油 2.0~4.0wt% 肉豆寵酸异丙醋 1. 0~4, 0wt% 鲸蜡硬脂醇 Q, 5~2, 5wt% 蜂蜡 1. 0~3. 0wt% 氢化聚癸烯 0, 3~5, 0wt% VE醋酸酯 0.4~1.2 辛酸/癸酸甘油三酯 1. 0~4, 0wt% B相 汉生胶 0. 05~0. 2wt% 甘油 2, 0~4, 0wt% ]二醇 3. 0~5. 0wt% EDTA.二钠 0.01 ~0.1wt% ΡΓΑ-Nci 0. 5 ~2.Owtf 甜菜碱 0. 50~2. 0魏％ 水 余量 C相 丙烯酰胺/丙烯酸铵共聚物/聚异丁烯/聚山0. 2~0wt% 梨醇酯-20 D相 权利要求5所述中药提取物 1.0~5.0wt% 防腐剂 0. 05~0. 2wt%。9. 一种权利要求8所述外用护肤组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括 如下步骤： (1)B相：将丁二醇、甘油与汉生胶搅拌均匀，待用；B相其他原料加入水中，搅拌均匀后 加入丁二醇、甘油与汉生胶混合物，加热至80~85°C，混匀； (2) A相：A相原料混合，加热至80~85°C，混匀； (3) 将步骤（2)A相全部加入到步骤（1)B相中，均质5~10分钟；加入C相，继续均质 1~3分钟；30~50转/分钟，搅拌5~10分钟后，开始搅拌降温； (4) 当温度降到45~50°C时，加入D相所有原料，搅拌至均匀，继续降温至40°C以下， 即得。10. 如权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（2)中均质的搅拌速率为 2000~3000转/分钟；搅拌降温的条件为：搅拌速率30~50转/分钟，降温速率为1~ 2°C/分钟。
【专利摘要】本发明公开了一种具有抑菌止痒功效的外用中药组合物。该外用中药组合物由下述重量份配比的原料药制成：香薷20～60份、藤茶15～45份、蒺藜10～30份、肉豆蔻5～20份。本发明经实验证实对皮肤安全无刺激，具有有效的抑菌止痒效果，对蚊虫叮咬引其的红肿、瘙痒具有良好的修复舒缓作用。本发明还兼具良好的修复过敏皮肤、防辐射功能，达到美容护肤的功效。本发明的原材料获取容易、制备方法简便，绿色安全，具有很好的应用前景和市场前景。
【IPC分类】A61P31/04, A61K36/87, A61P17/16, A61Q17/00, A61K8/97, A61Q17/02, A61P17/02, A61P17/04
【公开号】CN105250522
【申请号】CN201510729771
【发明人】董银卯, 孟宏, 任晗堃, 刘宇红
【申请人】北京工商大学
【公开日】2016年1月20日
【申请日】2015年10月30日