0] 测定方法同实施例4。
[0101] 2. 3免疫器官指数
[0102] 鸡只称重后，剖杀，取其脾脏、法氏囊称重后，计算免疫器官指数。免疫器官指数= 脾脏（法氏囊）重量+对应鸡只重量
[0103] 2. 4血清指标计算
[0104] 剖杀鸡只时采血，凝固后5000rpm离心5min收集血清，生化分析仪测定其谷草转 氨酶、总蛋白、白蛋白、尿素氮等指标。ELISA试剂盒测定血清IgG、sIgA含量，ELISA试剂盒 购于北京鑫方程生物科技有限公司。
[0105] 2. 5病理组织学切片
[0106] 取约1. 5cm长度的腺胃于福尔马林固定液中固定，送到山东农业大学动物科技学 院制作石蜡切片。
[0107] 2. 6数据处理
[0108] 试验数据采用SPSS17.0进行统计，用One-wayAN0VA进行方差分析，LSD法进行 组间多重比较，结果均以平均数土标准差表示。
[0109] 3结果
[0110] 3· 1饲料霉菌计数结果（见表5、图2)
[0111] 表5饲料霉菌计数结果（cfu/g)
[0112]
[0113] 注：根据新版《饲料卫生标准》，每克饲料霉菌总数不得超过5X104cfu/g。
[0114] 从表5可以看出，模型组、试验组、相关产品组饲喂发霉料霉菌总数均达到106cfu/ g，霉菌远超饲料卫生标准。
[0115] 3. 2饲料营养水平测定（见表6)
[0116] 表6饲料营养水平
[0117]
[0118] 从表6可以看出，模型组、试验组、相关产品三组的饲料能量、粗蛋白、粗脂肪、 粗纤维含量与对照组相比均出现显著下降，模型组分别比对照组下降27.0 %、40. 14%、 87. 36%、24. 78%，试验组分别比对照组下降28. 3%、43. 4%、77. 6%、29. 0%，相关产品组 分别比对照组下降25. 1%、35. 8%、74. 7%、28. 6%。结果表明，三组饲料营养水平较低，适 合进行腺肌胃炎模型的构建。
[0119] 3. 3中药益生菌复合制剂对海蓝褐蛋鸡免疫器官指数影响（表7)
[0120] 表7中药益生菌复合制剂对海蓝褐蛋鸡免疫器官指数影响
[0121]
[0122] 从表7可看出，40日龄时，试验组法氏囊指数比对照组显著升高了 40.4% (P〈0.05)，50日龄时，试验组、相关产品组脾脏指数分别比对照组显著升高了 85.7%、 40. 5% (P〈0. 05)，试验组法氏囊指数比对照组显著升高了 46. 6% (P〈0. 05)。结果表明，试 验组促进了免疫器官的发育，增强了机体的免疫能力。
[0123] 3. 4中药益生菌复合制剂对海蓝褐蛋鸡血清生化指标影响（见表8)
[0124] 表8中药益生菌复合制剂对海蓝褐蛋鸡血清生化指标影响
[0125]
[0127] 从表8可以看出，试验组与对照组差异不显著（P>0. 05)，试验组TP、ALB分别比模 型组显著升高18. 6%、17. 4% (P〈0. 05)，试验组AST、BUN分别比模型组显著降低13. 5%、 40. 3% (P〈0. 05)。结果表明，试验组可以提高血清中的总蛋白、白蛋白，降低尿素氮、谷草转 氨酶，维持机体的免疫水平，预防疾病。效果略优于相关产品组。
[0128] 3. 5中药益生菌复合制剂对海蓝褐蛋鸡免疫力的影响（见表9)
[0129] 表9中药益生菌复合制剂对海蓝褐蛋鸡免疫力的影响
[0130]
[0131] 免疫球蛋白是机体体液免疫的主要抗体。黏膜免疫是机体抵抗病原体入侵的第一 道屏障，其中slgA是黏膜免疫的主要效应因子。从表9可以看出，试验组免疫球蛋白和分 泌型免疫球蛋白分别比模型组显著提高48. 1%、38. 1% (P〈0. 05)。结果表明，试验组提高 了动物机体的免疫水平，增强了抗病力，效果略优于相关产品组。
[0132] 3. 6病理组织学切片（如图3)
[0133] 从图3中的4组切片可以明显的看出，模型组腺胃绒毛出现严重断裂，排列疏松， 组织间隙较大，黏膜上皮组织溃疡、增厚，有的绒毛杯状细胞核出现空腔，细胞核变小，细胞 质变大，细胞浆内有大量的空泡样结构，空泡大小不一，形态各异；试验组腺胃绒毛排列整 齐，杯状细胞排列有序，细胞紧密度强，异常细胞出现较少，胃粘膜得到更好的修复。
[0134] 4 结论
[0135] 综上所述，本发明的中药益生菌复合制剂可显著提高免疫器官指数，增强机体免 疫能力和抵抗疾病的能力；可明显促进蛋白质代谢；增强黏膜免疫、修复胃黏膜，提高抵抗 力，有效预防腺肌胃炎的发生。
【主权项】
1. 一种防治禽腺肌胃炎的中药益生菌复合制剂，其特征在于，由中药复方和益生菌的 菌粉复配而成； 所述中药复方是由以下重量份的原料药制成： 黄芩10-15份、黄连6-10份、黄芪10-15份、苍术5-8份、厚朴10-15份、甘草15-20份、 板蓝根10-15份、淫羊藿10-15份、鱼腥草2-6份、蒲公英6-8份、桔梗2-5份； 所述益生菌为乳酸菌和枯草芽孢杆菌的复合； 中药益生菌复合制剂中，乳酸菌和枯草芽孢杆菌的活菌数均为106cfU/mL-109cfU/mL。2. 如权利要求1所述的中药益生菌复合制剂，其特征在于，所述中药复方是由以下重 量份的原料制成： 黄芩13份，黄连8份，黄芪13份，苍术7份，厚朴13份，甘草13份，板蓝根13份，淫羊 藿13份，鱼腥草4份，蒲公英7份，桔梗4份。3. 如权利要求1所述的中药益生菌复合制剂，其特征在于，所述乳酸菌为粪肠球菌 SRG，其保藏编号为CCTCCΜ2010046。4. 如权利要求1所述的中药益生菌复合制剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌为枯草 芽孢杆菌BacillussubtilisΒ7348,其保藏编号为CCTCCΜ2010260。5. 如权利要求1或2所述的中药益生菌复合制剂，其特征在于，复合制剂中，乳酸菌和 枯草芽孢杆菌的活菌数均为10scfu/mL。6. 如权利1-4任一项所述的中药益生菌复合制剂，其特征在于，该复合制剂的剂型为 水剂。7. -种防治禽腺肌胃炎的中药益生菌复合制剂的制备方法，其特征在于，步骤如下： (1) 称取黄芩10-15份、黄连6-10份、黄芪10-15份、苍术5-8份、厚朴10-15份、甘草 15-20份、板蓝根10-15份、淫羊藿10-15份、鱼腥草2-6份、蒲公英6-8份、桔梗2-5份，混 合，加水煎煮，煎煮液浓缩至浓度为〇.Ι-lg/mL，得中药提取液； (2) 向步骤（1)的中药提取液中加入乳酸菌和枯草芽孢杆菌菌粉，混合均匀，即得中药 益生菌复合制剂，复合制剂中乳酸菌和枯草芽孢杆菌的活菌数均为10 6cfU/mL-109cfU/mL。8. 如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，步骤（1)中，中药提取液制备的具体方 法为：向混合后的中药中加8-10倍体积的水，浸泡l-2h后，煎煮l-2h，过滤，得初滤液；药 渣中加入4-6倍体积的水进行复煎，煎煮30-60min，过滤，得二级滤液；药渣中再加入4-6 倍体积的水进行第二次复煎，煎煮30-60min，过滤，得三级滤液，合并二、三级滤液，先低温 浓缩后再与初滤液混合，最终浓缩为质量浓度为〇.Ι-lg/mL的中药提取液。9. 如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，步骤（1)中，所述中药提取液的浓度为 lg/mL〇
【专利摘要】本发明公开了一种防治禽腺肌胃炎的中药益生菌复合制剂，由中药复方和益生菌的菌粉复配而成；中药复方是由以下重量份的原料药制成：黄芩10-15份、黄连6-10份、黄芪10-15份、苍术5-8份、厚朴10-15份、甘草15-20份、板蓝根10-15份、淫羊藿10-15份、鱼腥草2-6份、蒲公英6-8份、桔梗2-5份；益生菌为乳酸菌和枯草芽孢杆菌的复合；中药益生菌复合制剂中，乳酸菌和枯草芽孢杆菌的活菌数均为106cfu/mL-109cfu/mL。本发明还公开该中药益生菌复合制剂的制备方法。本发明的中药益生菌复合制剂对禽腺肌胃炎具有很好的防治效果。CCTCC M 201004620100302
【IPC分类】A61K36/78, A61K35/742, A61K35/744, A61P1/04
【公开号】CN105395674
【申请号】CN201510829247
【发明人】单宝龙, 陈雷, 谷巍, 王红, 林显华, 王丽荣, 秦波, 孙明杰, 崔斌, 王春凤
【申请人】山东宝来利来生物工程股份有限公司
【公开日】2016年3月16日
【申请日】2015年11月24日