用于治疗白化病的口服药物组合物的制作方法
【专利摘要】本发明涉及医药领域，具体涉及用于一种治疗白化病的口服药物组合物，该口服药物组合物由医药学上可接受的辅料和以下重量比的原料制成：蟛蜞菊内脂5~9重量份、盐酸二甲双胍1重量份。其中盐酸二甲双胍对白化病无显著治疗作用，但与蟛蜞菊内脂联合口服给药可显著提高蟛蜞菊内脂对白化病的改善作用。
【专利说明】
用于治疗白化病的口服药物组合物
技术领域
[0001] 本发明属于医药领域，具体涉及一种用于治疗白化病的口服药物组合物。
【背景技术】
[0002] 白化病是酪氨酸酶缺乏或功能减退引起的一种皮肤及附属器官黑色素缺乏导致 的遗传性白斑病。患者通常表现为视网膜无色素，虹膜和瞳孔呈现淡粉色，怕光。皮肤、眉 毛、头发及其他体毛呈白色或黄白色。该病属于家族遗传性疾病，一般认为该病为常染色体 隐性遗传疾病，常发生于近亲结婚的人群中。但也有两个白化病患者婚配，其子代均正常 的情况，说明白化病至少存在两种不同的遗传类型。
[0003] 目前白化病的治疗主要通过物理方法，尽量减少紫外辐射对眼睛和皮肤的损害。 也可以使用光敏性药物、激素等治疗，但尚缺乏针对白化病的有效治疗药物。
[0004] 国内涂彩霞等（涂彩霞，张荣鑫，马景昕，刘亚玲，刘影，李宏.墨旱莲乙醇提取物 动物致色素作用和对小鼠 B16黑素瘤细胞黑素生成的影响.中国中西医结合皮肤性病学杂 志.2006,5(1): 1-4)报道，墨旱莲乙醇提取物也具有促进黑色素生成，上调酪氨酸酶活性 的作用，但未能找出墨旱莲乙醇提取物促进黑色素生成，上调酪氨酸酶活性的活性单体化 合物。
【发明内容】
[0005] 针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种用于治疗白化病的口服药物组合 物。
[0006] 为实现上述的目的，本发明采用的技术方案为： 一种用于治疗白化病的口服药物组合物，由医药学上可接受的辅料和以下重量比的原 料制成:膨蜞菊内脂5~9重量份、盐酸二甲双胍1重量份。
[0007] 作为本发明的一个优选方案，所述原料的重量比为:蟛蜞菊内脂6重量份、盐酸二 甲双胍1重量份。
[0008] 作为本发明的另一个优选方案，所述原料的重量比为:蟛蜞菊内脂7重量份、盐酸 二甲双胍1重量份。
[0009] 作为本发明的又一个优选方案，所述原料的重量比为:蟛蜞菊内脂8重量份、盐酸 二甲双胍1重量份。
[0010] 作为本发明的再一个优选方案，上述医药学上可接受的辅料包括二氧化钛。
[0011] 本发明的技术方案所述的盐酸二甲双胍CAS号为1115-70-4，属于常用抗糖尿病药 物，近年来报道其外用给药对皮肤病如多毛症、痤疮、反向性痤疮、黑棘皮病、银肩病及皮肤 肿瘤等具有治疗作用，这是本领域技术人员所公知的。
[0012] 本发明的技术方案所述的蟛蜞菊内脂，英文名Wedel〇lact〇n e，CAS号为524-12-9， 是中药材蟛蜞菊、墨旱莲中均含有的成分，这是本领域技术人员所公知的。
[0013] 本发明的发明人经过大量的研究表明，蟛蜞菊内脂具有促进黑色素生成，上调酪 氨酸酶活性的活性，对白化病具有一定的治疗作用，但所需剂量较高。当蟛蜞菊内脂与盐酸 二甲双胍联合口服给药时，盐酸二甲双胍可显著提高蟛蜞菊内脂促进黑色素生成及上调酪 氨酸酶的活性。
【具体实施方式】
[0014] 下面结合实施例对本发明作进一步的解释。应当理解的是，以下实施例仅用于解 释本发明，而不是限制本发明的保护范围。
[0015] 实施例1用于治疗白化病的口服片剂及其制备 用于治疗白化病的口服片剂组方如下：
用于治疗白化病的口服片剂制备方法如下： 1)取处方量蟛蜞菊内脂、盐酸二甲双胍分别粉碎，过80目筛，混合得原料粉末； 2 )取处方量淀粉加水制备成浓度为5%的淀粉浆； 3) 将步骤1)所得原料粉末加入步骤2)所得淀粉浆，然后将处方中除羟丙基甲基纤维 素、二氧化钛外的辅料加入混合均匀，压制片心； 4) 将羟丙基甲基纤维素、二氧化钛加入乙醇溶解分散作为包衣液对步骤3)的片心进行 包衣即得。
[0016] 实施例2抗白化病药效学研究及安全性研究 雄性白化病大鼠144只，28周龄，体重320~350g，随机分为8组，每组18只。实验过程中 自由摄食摄水，12小时明暗循环光照。
[0017] A组灌胃给予生理盐水； B组灌胃给予盐酸二甲双胍水溶液，盐酸二甲双胍剂量为10mg/kg; C组灌胃给予蟛蜞菊内脂水混悬液，蟛蜞菊内脂剂量为90 mg/kg; D组灌胃给予盐酸二甲双胍、蟛蜞菊内脂水混悬液，盐酸二甲双胍、蟛蜞菊内脂剂量分 别为 1 Omg/kg、50mg/kg; E组灌胃给予盐酸二甲双胍、蟛蜞菊内脂水混悬液，盐酸二甲双胍、蟛蜞菊内脂剂量分 别为 1 Omg/kg、60mg/kg; F组灌胃给予盐酸二甲双胍、蟛蜞菊内脂水混悬液，盐酸二甲双胍、蟛蜞菊内脂剂量分 别为 1 Omg/kg、70mg/kg; G组灌胃给予盐酸二甲双胍、蟛蜞菊内脂水混悬液，盐酸二甲双胍、蟛蜞菊内脂剂量分 别为 1 Omg/kg、80mg/kg; H组灌胃给予盐酸二甲双胍、蟛蜞菊内脂水混悬液，盐酸二甲双胍、蟛蜞菊内脂剂量分 别为 1 Omg/kg、90mg/kg; 各组动物均为每3日给药一次，共给药15次。
[0018] ( - )药物对模型动物皮肤酪氨酸酶的影响 末次给药后，各组大鼠禁食24h，每组处死6只大鼠，取每只大鼠背部皮肤（3 cm x3cm)，-30摄氏度下制成4~5μηι厚度的冰冻切片，室温下用45%的多聚甲醛固定45min，37摄 氏度下将载有切片的玻片置于含0.5%过氧化氢的甲醇溶液中30min，用3%柠檬酸稀释的复 合消化液(武汉博士德生物工程有限公司）消化，用l〇yg/yL地高辛配基标记的探针原位杂 交液（武汉博士德生物工程有限公司）30yL滴于被检切片表面，孵育90 min。背景对照用 0.5mol/L的磷酸盐缓冲液代替探针。柠檬酸钠缓冲溶液(南京森贝伽生物科技有限公司)洗 涤两次，然后分别与杂交稳定液和封闭液(武汉博士德生物工程有限公司）孵育20 min，与 兔抗地高辛抗体孵育60min(北京中山生物技术有限公司），与生物素羊抗兔抗IgG(北京中 山生物技术有限公司）、封闭液(武汉博士德生物工程有限公司）和辣根过氧化物酶标记的 链霉亲和素（北京中山生物技术有限公司）分别孵育20min，DAB染色，HE复染后在光学显微 镜下观察。
[0019] 高倍镜视野下观察各组原位杂交切片和相应的背景对照切片，计数高倍镜下每 1 〇〇个基底层细胞中胞浆呈棕黄色的细胞数。
[0020] 结果见下表：
3与八组相比？<0.01:与(：组相比P<0.01。
[0021] 由上表可见，蟛蜞菊内脂可显著调高白化病大鼠皮肤酪氨酸酶mRNA表达（显著高 于生理盐水和盐酸二甲双胍）；盐酸二甲双胍对白化病大鼠皮肤酪氨酸酶mRNA表达无显著 影响（与生理盐水无显著差异）；盐酸二甲双胍、蟛蜞菊内脂联合给药后白化病大鼠皮肤酪 氨酸酶mRNA表达均显著高于蟛蜞菊内脂（与蟛蜞菊内脂组相比P<0.01)。结果表明盐酸二 甲双胍对大鼠皮肤酪氨酸酶mRNA表达无显著影响，但可显著促进蟛蜞菊内脂对白化病大鼠 皮肤酪氨酸酶mRNA表达的上调作用，有利于白化病的治疗。
[0022] (二)药物对模型动物皮肤的致色素作用 末次给药后，各组大鼠禁食24h，每组处死6只大鼠，取每只大鼠背部皮肤（3 cm x3cm)，-30摄氏度下制成4~5μηι厚度的冰冻切片，室温下用45%的多聚甲醛固定45min，石錯 包埋，梯度乙醇脱水。Schmorl染色法识别黑色素和黑色素生成细胞，对黑素颗粒进行染 色，黑素细胞被染成黑褐色，在高倍镜下计数每100个基底细胞中含黑素颗粒的细胞数。 [0023] 结果见下表：
3与八组相比？<0.01:与(：组相比P<0.01。
[0024] 由上表可见，蟛蜞菊内脂可显著提高白化病大鼠皮肤含黑素颗粒细胞数（显著高 于生理盐水和盐酸二甲双胍）；盐酸二甲双胍对白化病大鼠皮肤含黑素颗粒细胞数无显著 影响（与生理盐水无显著差异）；盐酸二甲双胍、蟛蜞菊内脂联合给药后白化病大鼠皮肤含 黑素颗粒细胞数均显著高于蟛蜞菊内脂（与蟛蜞菊内脂组相比P<0.01)。结果表明盐酸二 甲双胍对大鼠皮肤含黑素颗粒细胞数无显著影响，但与蜞菊内脂联合给药时白化病大鼠皮 肤含黑素颗粒细胞数显著高于蜞菊内脂单独用药，有利于白化病的治疗。
[0025] (三)药物对模型动物的安全性研究 末次给药后，每组剩余的6只大鼠，处死3只，取心、肝、脾、肺、肾、肠、睾丸做大体观察， 观察脏器色泽及是否存在脏器肿大情况；随后常规病理切片，石蜡包埋，HE染色，光学显微 镜下观察各脏器显微结构是否存在明显病变。
[0026] 每组其余3只大鼠继续观察14天，每日观察大鼠的活跃程度，皮肤红斑、鼻腔内分 泌物是否正常、饮食/饮水量变化;然后处死各组大鼠，取心、肝、脾、肺、肾、肠、睾丸做大体 观察，观察脏器色泽及是否存在脏器肿大情况;随后常规病理切片，石蜡包埋，HE染色，光学 显微镜下观察各脏器显微结构是否存在明显病变。
[0027] 除Η组大鼠肝脏组织存在轻微肝细胞水肿，无其他显著不良反应，14天后处死的Η 组大鼠中肝脏组织无显著病变，说明上述肝细胞病理变化为可逆损伤，盐酸二甲双胍、蟛蜞 菊内脂组合物口服给药对白化病模型动物无显著毒性作用。
【主权项】
1. 一种用于治疗白化病的口服药物组合物，其特征在于，所述口服药物组合物由医药 学上可接受的辅料和以下重量比的原料制成:蟛蜞菊内脂5~9重量份、盐酸二甲双胍1重量 份。2. 根据权利要求1所述的用于治疗白化病的口服药物组合物，其特征在于，所述原料的 重量比为:蟛蜞菊内脂6重量份、盐酸二甲双胍1重量份。3. 根据权利要求1所述的用于治疗白化病的口服药物组合物，其特征在于，所述原料的 重量比为:蟛蜞菊内脂7重量份、盐酸二甲双胍1重量份。4. 根据权利要求1所述的用于治疗白化病的口服药物组合物，其特征在于，所述原料的 重量比为:蟛蜞菊内脂8重量份、盐酸二甲双胍1重量份。5. 根据权利要求1至4所述的用于治疗白化病的口服药物组合物，其特征在于，所述医 药学上可接受的辅料包括二氧化钛。
【文档编号】A61P17/00GK106038537SQ201610412398
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年6月14日
【发明人】郑涛, 吕志阳, 朱露莎
【申请人】泰州职业技术学院