韭菜籽总黄酮在制备治疗围绝经期抑郁症药物中的应用
【专利摘要】本发明涉及韭菜籽总黄酮在制备治疗围绝经期抑郁症药物中的应用，可有效解决围绝经期抑郁症的治疗用药问题，方法是，将韭菜籽粉碎成粗粉，加石油醚回流提取，脱脂，弃去石油醚；韭菜籽药渣挥干石油醚，加乙醇浸泡，回流提取，提取液减压回收乙醇至无醇味，加蒸馏水分散，得样品液；样品液上AB?8型大孔吸附树脂，依次用蒸馏水、质量浓度10%乙醇、质量浓度80%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱液，减压回收乙醇至无醇味，加等体积石油醚萃取，弃去石油醚；挥去有机溶剂，水层冷冻干燥，粉碎，得韭菜籽总黄酮，该韭菜籽总黄酮有效用于制备治疗围绝经期抑郁症的药物，实现韭菜籽总黄酮在制备治疗围绝经期抑郁症药物中的应用。
【专利说明】
韭菜籽总黄酮在制备治疗围绝经期抑郁症药物中的应用
技术领域
[0001] 本发明涉及医药，特别是一种韭菜籽总黄酮在制备治疗围绝经期抑郁症药物中的 应用。
【背景技术】
[0002] 韭菜籽最早出自《名医别录》，为百合科植物韭菜Allium tuberosum Rottler的干 燥成熟种子，河南为其主产区；适当食用可调节人体肝肾缺乏，韭菜籽用于肝肾缺乏，肾阳 虚衰所致的阳痿，腰膝酸软痛苦。韭子有补肝肾，暖腰膝，壮肾阳的功用。可单味用，或与菟 丝子，补骨脂，淫羊藿等补肾壮阳之品共同运用，用于肾气不固所致的遗精，尿频，遗尿，带 下清稀。韭子有补肾温阳，固精缩尿的成效，如《令媛要方》单用本品研末或作蜜丸服，肾虚 遗精带下。治遗精，亦常与龙骨，菟丝子配伍，如《丹台玉案》四妙丸。《魏氏家藏方》则以韭子 配伍补骨脂，益智仁等补肾缩尿药，治肾与膀胱虚冷，小便频数。
[0003] 围绝经期抑郁症是一种情绪障碍，不少妇女在绝经前数年就已经出现轻微的情绪 障碍。多半周期性地出现在月经来潮前数天，而在月经来潮后自然缓解，Sr经前综合征"。 这些患者围绝经期抑郁症的发病危险可能增加，严重影响着患者的身体健康。
[0004] 现虽有治疗围绝经期抑郁症的多种药物，但由于种种原因，其使用和疗效并不尽 人意，因此，治疗围绝经期抑郁症药物上的改进和创新是本领域技术人员一直研究解决的 技术问题，那么能否将韭菜籽总黄酮制备治疗围绝经期抑郁症药物至今未见有公开报导。
【发明内容】
[0005] 针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种韭菜籽总黄 酮在制备治疗围绝经期抑郁症药物中的应用，可有效解决围绝经期抑郁症的治疗用药问 题。
[0006] 本发明解决技术方案是，一种韭菜籽总黄酮在制备治疗围绝经期抑郁症药物中的 应用，所述的韭菜籽总黄酮是，将韭菜籽粉碎成粗粉，加石油醚回流提取，脱脂，弃去石油 醚;韭菜籽药渣挥干石油醚，加乙醇浸泡，回流提取，提取液减压回收乙醇至无醇味，加蒸馏 水分散，得样品液;样品液上AB-8型大孔吸附树脂，依次用蒸馏水、质量浓度10%乙醇、质量 浓度80%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱液，减压回收乙醇至无醇味，加等体积石油醚萃取， 弃去石油醚;挥去有机溶剂，水层冷冻干燥，粉碎，得韭菜籽总黄酮。
[0007] 该韭菜籽总黄酮有效用于制备治疗围绝经期抑郁症的药物，实现韭菜籽总黄酮在 制备治疗围绝经期抑郁症药物中的应用。
【具体实施方式】
[0008] 以下结合具体情况对本发明的【具体实施方式】作详细说明。
[0009] 本发明在具体实施中，是由以下方法实现的。
[0010] -种韭菜籽总黄酮在制备治疗围绝经期抑郁症药物中的应用，所述的韭菜籽总黄 酮是，将韭菜籽粉碎成过20-30目的粗粉，加粗粉10倍重量的石油醚(沸程60-90°C )回流提 取lh，脱脂，弃去石油醚;粗粉再加同量石油醚回流提取lh，脱脂，弃去石油醚;韭菜籽药渣 挥干石油醚，加粗粉10倍重量质量浓度80 %的乙醇浸泡0.5h，回流提取2次，每次Ih，滤过， 合并滤液，减压回收乙醇至无醇味，加蒸馏水分散至相当于含生药量〇.3g/ml，得样品液;样 品液上AB-8型大孔吸附树脂，先用2倍柱体积蒸馏水洗脱，弃去水液;继用4倍柱体积、质量 浓度10%乙醇洗脱，弃去洗脱液;再用6倍柱体积、质量浓度80 %乙醇洗脱，收集80%乙醇洗 脱液，减压回收乙醇至无醇味，加等体积石油醚萃取1次，弃去石油醚;挥去有机溶剂，水层 冷冻干燥，粉碎，得韭菜籽总黄酮。
[0011] 本发明韭菜籽总黄酮经实地试验，可有效用于制备治疗围绝经期抑郁症的药物， 实现韭菜籽总黄酮在制备治疗围绝经期抑郁症药物中的应用，有关试验资料如下：
[0012] 1.材料与方法
[0013] 1.1实验材料
[0014] 1.1.1实验动物
[0015] KM小鼠，SPF级，雌性，22~25g，山东鲁抗医药股份有限公司；动物合格证号： 37005400000048;实验伦理编号：DWLL16020050;河南中医学院动物实验中心许可证号： SYXK(豫）2015-0005。
[0016] 1.1.2实验药物
[0017]韭菜籽总黄酮；
[0018]更年安胶囊，山西黄河中药有限公司生产，批号150102;大豆异黄酮维E软胶囊，威 海紫光生物科技开发有限公司生产，批号14100301。
[0019] 1.1.3实验试剂
[0020] 水合氯醛，天津市科密欧化学制剂开发中心，批号20140807 ;羧甲基纤维素钠，天 津市恒兴化学试剂制造有限公司，批号20140728;注射用青霉素钠，华北制药股份有限公司 生产，批号F4046509;0.9%氯化钠注射液，河南科伦药业有限分司，批号C2015041601-1;甲 醛溶液(分析纯），烟台市双双化工有限公司，批号20150401;酒精:新乡市三伟消毒制剂有 限公司；生产批号20140905;小鼠 E2ELISA检测试剂盒，R&D公司，批号20151 IOlAdHtT ELISA检测试剂盒，R&D公司，批号20151101A;小鼠5-HT ELISA检测试剂盒，R&D公司，批号 2015110IA;小鼠 DA ELISA检测试剂盒，R&D公司，批号2015110IA;小鼠 NE ELISA检测试剂 盒，R&D公司，批号20151101A。
[0021] 1.1.4实验仪器
[0022]电子称，上海民桥医疗器械有限公司生产，型号JY601;电子分析天平，奥豪斯(上 海)公司生产，型号ARl 140/C;高速台式离心机，上海安亭科学仪器厂生产，型号TGL-168;小 鼠自主活动测试仪，成都泰盟科技有限公司生产，型号ZZ-6;小鼠避暗仪，成都泰盟科技有 限公司生产，型号BA-200;悬尾测试仪，成都泰盟科技有限公司，型号TS-200;电热恒温水浴 锅，上海一恒科学仪器有限公司生产，型号HWS12;可调式移液器，上海雷勃分析仪器有限公 司；酶标仪，美国BIO-RAD公司生产，型号680;电动显微镜，日本OLYMPUS公司，型号:BX61。 [0023] 1.2实验方法
[0024] 1.2.1造模与给药
[0025]造模方法：取体重22~25g雌性昆明小鼠84只，随机取10只作为空白组，做假手术 处理，其余小鼠造围绝经期模型。小鼠称重后腹腔注射10%水合氯醛(0.03ml/10g)麻醉后 腹位固定，然后从小鼠背部最末肋骨下，在腋中线和距脊柱外侧约Icm交叉处去毛（用动物 专用推子去毛），碘酒消毒后切开皮肤和背肌约0.5~lcm，切口视野中可见一乳白色发亮的 脂肪团，卵巢即包埋其中。用小镊子轻轻夹住脂肪团拉出切口外，分离脂肪团，即可见到一 团细线状不规则呈黄红色的卵巢。剪取时先将卵巢下输卵管(包括脂肪）用细线结扎，再摘 除卵巢，术后用生理盐水棉球擦拭后，顺势将子宫角放回腹腔中，缝合肌肉及皮肤，同法摘 除双侧卵巢。术后精心饲养，肌肉注射青霉素25万u/kg(每只0.02mL)以防感染，连续3d，每 天1次。手术5d后开始逐只进行小鼠阴道涂片检查，每天1次，连续5d，以确定卵巢是否完全 切除。涂片呈现动情反应的小鼠弃去不用，选择60只去势完全的小鼠随机均匀分为6组供实 验用，分别为模型组，更年安胶囊组，大豆异黄酮软胶囊组，大、中、小剂量韭菜籽总黄酮组。
[0026] 给药5d后，空白组小鼠5只/笼饲养，正常饮食饮水，不给任何刺激，造模型6组均为 每笼饲养1只小鼠，每天随机给予不同刺激。6种应激因子按随机方法在18d内应用:①潮湿 垫料（Ig垫料，Iml水），②冰水游泳(4 °C，5min)，③热应激(45 °C，5min)，④通宵照明（24h)， ⑤禁食(24h)，⑥禁水(24h)，。每天随机给予一种刺激，每种刺激不能连续出现，连续18d。
[0027] 配药:0.5 % CMC配制方法:称取羧甲基纤维素钠4g，用蒸馏水配成800ml。
[0028] (1)大、中、小剂量韭菜籽总黄酮组给药剂量分别为300mg · kg-1USOmg · kg一\ 75mg · kg<(相当于临床用量的30、15、7.5倍，给药体积0.11111/1(^)。配置方法:分别取韭菜 籽总黄酮4粒、2粒、1粒，先混悬于少量的0.5 % CMC溶液，然后再定容到40ml，混匀，即为所需 韭菜籽总黄酮大、中、小剂量混悬液。
[0029] (2)更年安胶囊(675mg · kg'浓度67.5mg iL'相当于临床用量的15倍）；配置 方法:取更年安胶囊9粒，先混悬于少量的0.5%CMC溶液，然后再定容到40ml，混匀，即为所 需更年安胶囊混悬液。
[0030] (3)大豆异黄酮维E软胶囊（250mg · kg'浓度25mg · ml/1，相当于临床用量的15 倍）；配置方法:取大豆异黄酮胶囊2粒，先混悬于少量的0.5 % CMC溶液，然后再定容到40ml， 混匀，即为所需大豆异黄酮混悬液。
[0031] 储存方法:冷藏，用时隔水温热
[0032] 给药方法:各组动物于手术后第10天给予相应药物。更年安胶囊组灌服更年安胶 囊混悬液675mg · kg^1，大豆异黄酮软胶囊组灌服大豆异黄酮软胶囊混悬液250mg · kg^1， 大、中、小剂量韭菜籽总黄酮组分别组别灌服大、中、小剂量韭菜籽总黄酮300mg · kg' 150mg · kgijSmg · kg+1。空白组和模型组分别灌服同体积蒸馏水，每日灌胃给药1次，连续 给药30d。
[0033] 1.2.2观察项目及检测方法
[0034] 于末次给药后2h，小鼠取血，测定血清中E2、T、DA、5-HA、NE的含量;然后处死小鼠， 摘除胸腺、脾脏、子宫组织，称量其湿重并计算脏器指数，然后取脑，切去一半，制备脑组织 匀浆，用酶免法测定脑组织匀浆中单胺类神经递质5_HT、DA的含量。将胸腺、脾脏、子宫、脑 组织固定于10%福尔马林溶液中，HE染色，观察各组的组织形态学变化。用免疫组化法测下 丘脑、垂体、子宫中ER表达，下丘脑、垂体中AR表达；
[0035] 1 · 2 · 2 · 1强迫游泳实验测试
[0036]慢性应激刺激结束后的第1天测定各组小鼠6分钟内2-6分钟不动时间。（将各组小 鼠放入2000mL的烧杯，水温25°C动物除了保持漂浮所需的必要的最小运动外，肢体停止运 动记为不动，记录6min内的第2~6min的不动时间总和。）
[0037] 1.2.2.2自主活动测试
[0038]慢性应激刺激结束后的第2天测定各组小鼠5min内自主活动次数。
[0039] 1.2.2.3避暗法
[0040] 慢性应激刺激结束后的第3天，将小鼠尾部对着进入暗室的小口放入测定盒中，进 行训练，24h后重新测定小鼠首次进入暗室的潜伏期及5min内进入暗室遭电击的次数。
[0041 ] 1.2.2.4悬尾实验
[0042]慢性应激刺激结束后的第5天测定各组小鼠6分钟内2-6分钟不动时间。
[0043] 1.2.3试剂盒测定方法
[0044] 血清标本的获取:使用不含热原和内毒素的试管，取血过程中避免任何刺激，防止 溶血;收集血液后，3000转离心10分钟后，将血清和红细胞迅速小心的分离。
[0045] 小鼠雌二醇(E2)、睾酮(T)、5_羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)ELISA检测试剂盒测定方 法，详见说明书。
[0046] 1 · 2 · 4统计学处理方法
[0047]数据分析用SPSS17.0医用统计包进行数据资料的统计学处理，计量资料用平均数 土标准差（X土s)表示，各组间比较采用单因素方差分析，方差检验齐者用LSD法，方差不齐者 用Games-Howell法检验，等级资料采用Ridit检验。
[0048] 2 结果
[0049] 2.1对围绝经期抑郁模型小鼠自主活动的影响
[0050] 实验各组小鼠自主活动测试结果，见表1。
[0051] 表1韭菜籽总黄酮对围绝经期抑郁模型小鼠自主活动的影响
LUUOJj 壮：―-F^U.U丄，衣不勺;fiiHSEPL权；氺尸氺氺F^U.U丄，衣不勺恢坐SEPL权
[0054]由上表可看出，与空白组比，模型组小鼠的活动、站立次数显著减少(P〈0.01)，反 映了围绝经期抑郁症模型小鼠对新鲜环境的好奇程度降低。与模型组比，大、中、小剂量韭 菜籽总黄酮、大豆异黄酮软胶囊、更年安胶囊可显著提高小鼠的活动次数和站立次数(P〈 0·01)〇
[0055] 2.2对围绝经期抑郁模型小鼠避暗法中潜伏期和受电击次数的影响
[0056] 实验各组小鼠避暗法测试结果，见表2。
[0057] 表2韭菜籽总黄酮对围绝经期抑郁模型小鼠避暗潜伏期和电击次数的影响(X土S)
[0059] 注:ΛΛΡ〈0.01，表示与空白组比较;*P〈0.05，#P〈0.01，表示与模型组比较
[0060]由上表可看出，与空白组比，模型组小鼠的潜伏期显著减少、受电击次数显著增加 (P〈0.01)，反映了围绝经期抑郁模型小鼠记忆力降低。与模型组比，各给药组均可显著延长 小鼠的潜伏期(P〈〇.01)，大豆异黄酮软胶囊组、更年安组、大剂量韭菜籽总黄酮组可以显著 减少小鼠的受电击次数(P〈〇. 01)。
[0061 ] 2.3对围绝经期抑郁模型小鼠强迫游泳和悬尾不动时间的影响
[0062] 实验各组小鼠强迫游泳和悬尾不动时间测试结果，见表3。
[0063] 表3韭菜籽总黄酮对围绝经期抑郁模型小鼠强迫游泳和悬尾不动时间的影响 (x±s)
[
[0065] 注:ΛΛΡ〈0.01，表示与空白组比较;*P〈0.05，#P〈0.01，表示与模型组比较
[0066]由上表可看出，与空白组比，模型组小鼠的强迫游泳和悬尾不动时间均显著增加 (P〈0.01)，反映了围绝经期抑郁症模型小鼠对不利环境的绝望程度升高。与模型组比，大、 中剂量韭菜籽总黄酮、大豆异黄酮软胶囊、更年安胶囊可显著显著减少小鼠强迫游泳不动 时间和悬尾不动时间(P〈〇. 01)。
[0067] 2.4对围绝经期抑郁症模型小鼠脑内单胺类神经递质水平的影响
[0068] 各组小鼠脑内5-HT、DA水平，结果见表4。
[0069] 表4韭菜籽总黄酮对围绝经期抑郁模型小鼠脑内5_HT、DA水平的影响(x±s )
[0071] 注:ΛΛΡ〈0.01，表示与空白组比较;*P〈0.05，#P〈0.01，表示与模型组比较 [0072]由上表可看出，与空白组比，模型组小鼠脑匀浆中的5_HT、DA水平均显著降低(P〈 0.01)，说明造小鼠慢性应激抑郁模型成功。与模型组比，大剂量韭菜籽总黄酮、大豆异黄酮 软胶囊、更年安胶囊可显著提高脑匀浆中的5-HT和DA水平(P〈0.01);中剂量韭菜籽总黄酮 可显著提高脑匀浆中的5-HT(P〈0.01)，明显提高脑匀浆中DA水平(P〈0.05)。
[0073] 2.5对围绝经期抑郁模型小鼠脏器指数的影响
[0074] 各组小鼠胸腺、脾脏、子宫指数，结果见5。
[0075] 表5韭菜籽总黄酮对围绝经期抑郁模型小鼠胸腺、脾脏、子宫指数的影响(x±s)
[0077] 注:ΛΛΡ〈0.01，表示与空白组比较;*P〈0.05，#P〈0.01，表示与模型组比较
[0078]由上表可看出，与空白组比，模型组胸腺指数、脾脏指数、子宫指数均显著降低(P〈 0.01)，说明围绝经期抑郁症小鼠模型出现胸腺、脾脏及子宫组织的萎缩。与模型组比，大、 中剂量韭菜籽总黄酮、更年安胶囊、大豆异黄酮软胶囊可显著提高模型动物的胸腺、脾脏、 子宫指数(p〈0.01)。
[0079] 2.6对围绝经期抑郁模型小鼠血清性激素的影响
[0080] 各组小鼠血清中E2、T含量，结果见表6。
[0081 ] 表6韭菜籽总黄酮对围绝经期抑郁模型小鼠血清中E2、T含量的影响(x±s )
[0083] 注:ΛΛΡ〈0.01，表示与空白组比较;*P〈0.05，#P〈0.01，表示与模型组比较 [0084] 从上表可以看出，与空白组比，模型组小鼠血清中E2、T水平显著下降(P〈0.01 )，说 明小鼠血清中的性激素水平紊乱，围绝经期抑郁小鼠模型复制成功。与模型组比，大、中剂 量韭菜籽总黄酮组、更年安胶囊、大豆异黄酮软胶囊组均可显著升高血清E 2、T水平（P〈 0·01)〇
[0085] 2.7对免疫组化指标的影响
[0086]对围绝经期合并抑郁模型小鼠子宫、垂体、下丘脑中ER的表达，垂体和下丘脑中AR 表达的影响，见表7、表8。
[0087]表7韭菜籽总黄酮对围绝经期抑郁模型小鼠垂体、子宫、下丘脑ER表达的影响（平 均光密度)(x±s)
[0089] 注:ΛΛΡ〈0.01，表示与空白组比较;*P〈0.05，#P〈0.01，表示与模型组比较
[0090] 表8韭菜籽总黄酮对围绝经期抑郁模型小鼠垂体、下丘脑AR表达的影响（平均光密 度）（X土S )
[0092] 注:aaP〈0.01，表示与空白组比较;*P〈0.05，#P〈0.01，表示与模型组比较 [0093]由上表可看出，与空白组比较，模型小鼠各组织ER、AR的表达均显著降低（P〈 0.01)，说明完全摘除卵巢合并慢性刺激所致围绝经期合并抑郁小鼠模型机体相关组织分 布的性激素受体有所降低，从而降低了雌雄激素的生物效应。与模型组比较，大剂量韭菜籽 总黄酮、更年安胶囊和大豆异黄酮软胶囊能够显著升高ER在子宫、垂体、下丘脑的表达(P〈 0.01)，显著升高AR在垂体、下丘脑的表达(P〈0.01)。
[0094] 2.8对围绝经期抑郁模型小鼠器官组织形态的影响
[0095] 实验各组小鼠子宫、下丘脑、胸腺、脾脏的病理组织学观察结果如下，病理照片 [0096] 2.8.1对围绝经期合并抑郁模型小鼠子宫内膜厚度的影响 Γ00971 丟9韭莖耔总昔酾对_雒怒柚
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[0099] 注:ΛΛΡ〈0.01，表示与空白组比较;*P〈0.05，#P〈0.01，表示与模型组比较
[0100] 由上表可看出，与空白组比，模型组小鼠子宫内膜厚度显著下降(P〈〇.01)，说明完 全摘除卵巢所致围绝经期小鼠模型显著子宫萎缩。与模型组比，大剂量韭菜籽总黄酮、大豆 异黄酮软胶囊组、更年安胶囊组均可显著升高子宫内膜的厚度(p〈0.01)。
[0101] 2.8.2对围绝经期合并抑郁模型小鼠胸腺、脾脏组织形态的影响
[0102] 采用测微尺，对实验各组每只小鼠胸腺皮质最厚处和最窄处测定其厚度求得均 数;然后用测微尺的基线测得压在基线上的胸腺皮质最厚处和最窄处的淋巴细胞数求得均 数；
[0103] 采用测微尺的基线落在脾小结上，以中央动脉为中心分别测定两侧的脾小结厚度 大小，求均数;同时计算落在基线上两侧的淋巴细胞数的个数，求均数；
[0104] 表10韭菜籽总黄酮对围绝经期抑郁模型小鼠胸腺、脾脏病理变化的影响(X ± s )
[0106] 注:ΛΛΡ〈0.01，表示与空白组比较;*P〈0.05，#P〈0.01，表示与模型组比较
[0107] 从上表可看出，与空白组比，模型组小鼠胸腺皮质厚度、脾小结体积显著减少(P〈 0.01)，说明小鼠造围绝经期抑郁模型后胸腺、脾脏体积萎缩。与模型组比，大、中剂量韭菜 籽总黄酮、大豆异黄酮软胶囊组、更年安胶囊组可显著增厚胸腺皮质和脾小结体积（P〈 0·01)〇
[0108] 3.结论
[0109]韭菜籽总黄酮对小鼠围绝经期合并抑郁模型有很好改善作用，韭菜籽总黄酮可显 著提高小鼠的活动次数和站立次数;可显著延长小鼠的潜伏期，可以显著减少小鼠的受电 击次数。韭菜籽总黄酮可显著显著减少小鼠强迫游泳不动时间和悬尾不动时间。韭菜籽总 黄酮可显著提高脑匀浆中的5-HT和DA水平。韭菜籽总黄酮可显著提高模型动物的胸腺、脾 脏、子宫指数。韭菜籽总黄酮可显著升高血清E2、T水平。韭菜籽总黄酮显著升高ER在子宫、 垂体、下丘脑的表达，显著升高AR在垂体、下丘脑的表达。韭菜籽总黄酮可显著升高子宫内 膜的厚度，可显著增厚胸腺皮质和脾小结体积，有效用于制备治疗围绝经期抑郁症的药物， 开拓了治疗围绝经期抑郁症药物上的新途径，是药物上的创新，具有实际的应用价值。
【主权项】
1. 一种韭菜籽总黄酮在制备治疗围绝经期抑郁症药物中的应用，所述的韭菜籽总黄酮 是，将韭菜籽粉碎成过20-30目的粗粉，加粗粉10倍重量的石油醚回流提取lh，脱脂，弃去石 油醚;粗粉再加同量石油醚回流提取lh，脱脂，弃去石油醚;韭菜籽药渣挥干石油醚，加粗粉 10倍重量质量浓度80%的乙醇浸泡0.5h，回流提取2次，每次lh，滤过，合并滤液，减压回收乙 醇至无醇味，加蒸馏水分散至相当于含生药量0.3g/ml，得样品液;样品液上AB-8型大孔吸 附树脂，先用2倍柱体积蒸馏水洗脱，弃去水液;继用4倍柱体积、质量浓度10%乙醇洗脱，弃 去洗脱液;再用6倍柱体积、质量浓度80%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱液，减压回收乙醇至无 醇味，加等体积石油醚萃取1次，弃去石油醚;挥去有机溶剂，水层冷冻干燥，粉碎，得韭菜籽 总黄酮。
【文档编号】A61P15/00GK106075007SQ201610405434
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月8日
【发明人】苗明三, 白明, 田硕
【申请人】河南中医学院