专利名称：一种从红楠中提取纯化楠木脂素a的方法
技术领域：
本发明属于中药提取技术领域，涉及一种从红楠中提取纯化楠木脂素A的方法。
背景技术：
楠木脂素A (Machilin A),分子式为C2tlH22O4,分子量为326. 39,为无色针晶，是从樟科植物红楠thunbergii Sieb. et Zucc.的树皮分离出的一种木脂素类化合物。药理研究表明，楠木脂素A具有免疫抑制活性，对分裂素(刀豆球蛋白A)诱导的人外周血液淋巴细胞增生有极强的抑制作用，其IC5tl为O. 02 μ g/mL,与强的松龙相当，另外还具有细胞毒活性，对人型白血病细胞株HL-60和Molt-4细胞具有细胞毒活性，其IC5tl (ng/ml)分别为26和54。 目前尚未检索到楠木脂素A的制备方法报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种从红楠中提取纯化楠木脂素A的方法，
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案
一种从红楠中提取纯化楠木脂素A的方法，其特征在于包括以下步骤将红楠树皮晾干粉碎，粉碎后以50-95%乙醇浸泡3-6小时，然后超声提取1-2小时，提取液加入硅藻土与活性炭的混合物，所述混合物加入量为提取液的2-6% (w/v),充分搅拌后过滤，滤液通过大孔吸附树脂柱，收集洗脱液减压回收试剂，经制备液相色谱分离，即可获得楠木脂素A。所述硅藻土与活性炭的混合物，硅藻土与活性炭的质量比为1:2。所述大孔树脂为AB_8、D101等极性或非极性大孔吸附树脂，洗脱剂为10-90%乙醇溶液。所述制备液相色谱分离，以甲醇-水为流动相，甲醇体积百分比为50-80%，流速为10-100ml/mino本发明采用超声提取、大孔树脂吸附柱层析及制备液相色谱分离纯化，具有生产过程简单，易于实现工业化等优点，且在整个工艺过程避免使用有毒溶剂，安全环保。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限 于下列实施方式。
具体实施例方式实施例I :
将2kg红楠树皮晾干粉碎加入提取罐中，加入4倍量80%乙醇溶液，浸泡4小时，然后超声提取2小时，将提取液加入硅藻土与活性炭按质量比1:2混合的混合物，加入量为提取液的5% (w/v),充分搅拌后过滤，将滤液浓缩至无醇，通过AB-8大孔吸附树脂柱，先用3倍柱体积的10%乙醇洗脱,洗脱液回收试剂后弃去,再用4倍柱体积85%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥得粗品。将粗品用甲醇配制成20mg/ml的溶液，用制备型高效液相色谱分离，制备柱以C18为柱填料，以甲醇-水(63:37)为流动相，控制流速为45ml/min，收集目标成分，旋转蒸发浓缩干燥，得到O. 62g楠木脂素A产品，含量为96. 7%。实施例2:
将2kg红楠树皮晾干粉碎加入提取罐中，加入3倍量65%乙醇溶液，浸泡3小时，然后超声提取2小时，将提取液加入硅藻土与活性炭按质量比1:2混合的混合物，加入量为提取液的4% (w/v)，充分搅拌后过滤，将滤液浓缩至无醇，通过DlOl大孔吸附树脂柱，先用4倍柱体积的15%乙醇洗脱,洗脱液回收试剂后弃去,再用6倍柱体积80%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥得粗品。将粗品用甲醇配制成20m g/ml的溶液，用制备型高效液相色谱分离，制备柱以C18为柱填料，以甲醇-水(56:44)为流动相，控制流速为55ml/min，收集目标成分，旋转蒸发浓缩干燥，得到O. 60g楠木脂素A产品，含量为96. 3%。实施例3:
将5kg红楠树皮晾干粉碎加入提取罐中，加入6倍量50%乙醇溶液，浸泡6小时，然后超声提取I小时，将提取液加入硅藻土与活性炭按质量比1:2混合的混合物，加入量为提取液的2% (w/v),充分搅拌后过滤，将滤液浓缩至无醇，通过AB-8大孔吸附树脂柱，先用6倍柱体积的20%乙醇洗脱，洗脱液回收试剂后弃去，再用5倍柱体积75%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥得粗品。将粗品用甲醇配制成20mg/ml的溶液，用制备型高效液相色谱分离，制备柱以C18为柱填料，以甲醇-水(73:27)为流动相，控制流速为20ml/min，收集目标成分，旋转蒸发浓缩干燥，得到I. 48g楠木脂素A产品，含量为97. 4%。实施例4:
将5kg红楠树皮晾干粉碎加入提取罐中，加入5倍量95%乙醇溶液，浸泡5小时，然后超声提取2小时，将提取液加入硅藻土与活性炭按质量比1:2混合的混合物，加入量为提取液的6% (w/v)，充分搅拌后过滤，将滤液浓缩至无醇，通过DlOl大孔吸附树脂柱，先用3倍柱体积的25%乙醇洗脱，洗脱液回收试剂后弃去，再用5倍柱体积90%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥得粗品。将粗品用甲醇配制成20mg/ml的溶液，用制备型高效液相色谱分离，制备柱以C18为柱填料，以甲醇-水(50:50)为流动相，控制流速为65ml/min，收集目标成分，旋转蒸发浓缩干燥，得到I. 36g楠木脂素A产品，含量为98. 2%。
权利要求
1.一种从红楠中提取纯化楠木脂素A的方法，其特征在于包括以下步骤将红楠树皮晾干粉碎，粉碎后以50-95%乙醇浸泡3-6小时，然后超声提取1-2小时，提取液加入硅藻土与活性炭的混合物，所述混合物加入量为提取液的2-6% (w/v)，充分搅拌后过滤，滤液通过大孔吸附树脂柱，收集洗脱液减压回收试剂，经制备液相色谱分离，即可获得楠木脂素A。
2.如权利要求I所述的一种从红楠中提取纯化楠木脂素A的方法，其特征在于所述硅藻土与活性炭的混合物，硅藻土与活性炭的质量比为1:2。
3.如权利要求I所述的一种从红楠中提取纯化楠木脂素A的方法，其特征在于所述大孔树脂为AB-8、D101等极性或非极性大孔吸附树脂，洗脱剂为10-90%乙醇溶液。
4.如权利要求I所述的一种从红楠中提取纯化楠木脂素A的方法，其特征在于所述制备液相色谱分离，以甲醇-水为流动相，甲醇体积百分比为50-80%，流速为10-100ml/min。
全文摘要
本发明公开了一种从红楠中提取纯化楠木脂素A的方法，本发明将红楠树皮晾干粉碎，粉碎后以50-95%乙醇浸泡3-6小时，然后超声提取，将提取液加入硅藻土与活性炭的混合物，过滤，滤液浓缩后通过大孔吸附树脂柱，收集洗脱液减压回收试剂，经制备液相色谱分离，即可获得楠木脂素A。本发明生产过程简单，易于实现工业化，在整个工艺过程避免使用有毒溶剂，安全环保。
文档编号C07D317/50GK102659749SQ20121011755
公开日2012年9月12日 申请日期2012年4月20日 优先权日2012年4月20日
发明者刘东锋, 郭琴 申请人:南京泽朗医药科技有限公司