碱提酸沉法对落叶松松针中蛋白的分离纯化的制作方法
【专利摘要】本发明公开一种对落叶松松针中蛋白的分离纯化，该方法为：将落叶松松针粉碎成粗粉，加15倍量0.05％的氢氧化钠溶液45～50℃浸泡120分钟，滤过；滤液，用体积比1∶1的盐酸∶水将滤液pH值调至4.5，放置40分钟，滤过；滤液弃去，收集凝乳，用0.05％的氢氧化钠溶液将凝乳pH值调至6.8，浓缩干燥得松针蛋白半成品；将所得松针蛋白半成品加入洗涤罐，并以体积比1∶10的盐酸∶水溶液洗杂质，滤过，滤液弃去，收集沉淀，继用0.01％的氢氧化钠溶液溶解，滤过，收集滤液；将所收集到的松针蛋白溶液进行喷雾干燥得松针蛋白成品，其含量在90％以上。本发明方法的最大特点是利用碱-酸反复精制，方便快捷、原料来源丰富、生产成本低廉、分离效果明显、提取纯度高。
【专利说明】碱提酸沉法对落叶松松针中蛋白的分离纯化
【技术领域】
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[0001]本发明属于天然有机化学领域，涉及一种松针蛋白的生产工艺，特别是涉及一种利用碱提酸沉法对落叶松松针中蛋白的分离纯化工艺。
【背景技术】
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[0002]落叶松,学名:Larix gmelinii (Rupr.)Kuzen.,为松科落叶松属的落叶乔木,是中国东北、内蒙古林区的主要森林组成树种，是东北地区主要三大针叶用材林树种之一。
[0003]松针中含有大量的叶绿素、粗蛋白质、粗脂肪、脂溶性维生素A和维生素C，以及氮、磷、钾、钙、镁等矿物质。松针的化学组成如下:针叶中含干物质94.04%，蛋白质
11.39%，脂肪10.31%，醚浸出物(包括树脂、挥发油、叶绿素、胡萝卜素等)11.87%，单宁4.58%，还原物3.36%，多缩戊糖6.78%，木素22.96%，纤维素29.73%，水浸提物18.66%,灰分3.08%，含钙0.54%，含磷0.08%。除上述成分外，还含有大量维生素，三年生针叶中维生素C的含量为0.522毫克/克，胡萝卜素含量为0.13-0.2毫克/克，叶绿素为5-7毫克/克。松针中不含有许多微量元素，如铜、锰、钴、铁等。
[0004]蛋白质是自然界中最重要的组成物质，是构成有机生物的基本元素。所有动、植物的一切生命活动都与蛋白质息息相关。
[0005]同时，蛋白质是人体所需第一营养素，占人体干物质总量的45%，占肌肉总量的70%。人体的细胞、组织、器官主要组成成分皆为蛋白质。人体的新陈代谢,抗病免疫,体液平衡，遗传信息传递等无不与蛋白质密切相关。没有蛋白质就没有生命，所以蛋白质又被称为人类的“第一营养素”或“生命素”。
[0006]近年来，人们对松针的研究利用越来越广，松针茶，松针油，松针栲胶等等，但对松针中蛋白的利用并不多见。本人从事北药研究多年，参与过大豆蛋白项目，豌豆蛋白项目，《中国居民膳食营养素参考摄入量》叶推荐成人每人每天蛋白质的摄入量是65?90克，随着经济水平提升蛋白粉需求量逐年递增，松针资源广泛成本低廉，较之白豆片、米糠，成本更低，并且本工艺成品蛋白含量在90%以上，品种高，市场竞争力大。本发明方法的最大特点是利用碱-酸反复精制，方便快捷、原料来源丰富、生产成本低廉、分离效果明显、提取纯度高。
【发明内容】
[0007]本发明目的在于提供一种松针蛋白的分离纯化方法；本发明目的还在于提供一种方便快捷、原料来源丰富、生产成本低廉、分离效果明显、提取纯度高的利用碱提酸沉法对落叶松松针中蛋白的分离纯化工艺。
[0008]本发明目的是通过如下技术方案实现的。
[0009]本发明松针蛋白的分离纯化方法包括如下步骤:
[0010]将落叶松松针粉碎成粗粉，加15?20倍量0.05%的氢氧化钠溶液45?50°C浸泡120?180分钟，滤过；滤液，用体积比1:1的盐酸；水将滤液pH值调至4.5?5.0，放置20?40分钟，滤过；滤液弃去，收集凝乳，用0.05%的氢氧化钠溶液将凝乳pH值调至6.8，浓缩干燥得松针蛋白半成品；将所得松针蛋白半成品加入洗涤罐，并以体积比1: 10的盐酸:水溶液洗杂质，滤过，滤液弃去，收集沉淀，继用0.01%的氢氧化钠溶液溶解，滤过，收集滤液；将所收集到的松针蛋白溶液进行喷雾干燥得松针蛋白成品。
[0011]本发明松针蛋白的分离纯化方法包括如下步骤:
[0012]称取粉碎成粗粉的落叶松松针，加入粗粉质量20倍量的0.05%的氢氧化钠溶液50°C浸泡180分钟,滤过；滤液滤液,用体积比1:1的盐酸:水将滤液pH值调至4.5,放置40分钟后滤过；滤液弃去，收集凝乳，用0.05%的氢氧化钠溶液将凝乳pH值调至6.8，浓缩干燥得松针蛋白半成品；将所得松针蛋白半成品加入洗涤罐，并以体积比1: 10的盐酸:水溶液洗杂质，滤过，滤液弃去，收集沉淀，继用0.01 %的氢氧化钠溶液溶解，滤过，收集滤液；将所收集到的松针蛋白溶液进行喷雾干燥得松针蛋白成品。
[0013]所述清洗凝乳步骤采用精确定量稀酸液，酸浓度为体积比1: 10的盐酸:水溶液，量为半成品的20?30倍，洗涤3次。
[0014]所述沉淀用稀碱液溶解,碱浓度为质量百分百0.01%的氢氧化钠水溶液。
[0015]本发明中采用喷雾干燥得松针蛋白成品。喷雾干燥进口温度为160?165°C，出口温度为80?90°C。
[0016]本发明公开一种对落叶松松针中蛋白的分离纯化，该方法为:将落叶松松针粉碎成粗粉，加15倍量0.05%的氢氧化钠溶液45?50°C浸泡120分钟，滤过；滤液，用体积比I: I的盐酸:水将滤液PH值调至4.5，放置40分钟，滤过；滤液弃去，收集凝乳，用0.05%的氢氧化钠溶液将凝乳PH值调至6.8，浓缩干燥得松针蛋白半成品；将所得松针蛋白半成品加入洗涤罐，并以体积比1: 10的盐酸:水溶液洗杂质，滤过，滤液弃去，收集沉淀，继用
0.01%的氢氧化钠溶液溶解，滤过，收集滤液；将所收集到的松针蛋白溶液进行喷雾干燥得松针蛋白成品，其含量在90%以上。本发明方法的最大特点是利用碱-酸反复精制，方便快捷、原料来源丰富、生产成本低廉、分离效果明显、提取纯度高。
【具体实施方式】
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[0017]实施例1:
[0018]称取落叶松针10kg，粉碎成粗粉，加18倍量0.05%的氢氧化钠溶液50°C浸泡140分钟，滤过；滤液，用体积比1:1的盐酸:水将滤液PH值调至4.5，放置40分钟，滤过；滤液弃去，收集凝乳，用0.05%的氢氧化钠溶液将凝乳pH值调至6.8，浓缩干燥得松针蛋白半成品140g;将所得松针蛋白半成品加入洗涤罐，并以体积比1: 10的盐酸:水溶液洗杂质，滤过,滤液弃去，收集沉淀,继用0.01 %的氢氧化钠溶液溶解，滤过，收集滤液；将所收集到的松针蛋白溶液进行喷雾干燥得松针蛋白成品80g，含量92.5%。
[0019]实施例2:
[0020]称取落叶松针15kg，粉碎成粗粉，加20倍量0.05%的氢氧化钠溶液45°C浸泡160分钟，滤过；滤液，用体积比1:1的盐酸:水将滤液PH值调至5.0，放置30分钟，滤过:滤液弃去，收集凝乳，用0.05%的氢氧化钠溶液凝乳pH值调至6.8，浓缩干燥得松针蛋白半成品180g ;将所得松针蛋白半成品加入洗涤罐，并以体积比1: 10的盐酸:水溶液洗杂质,滤过，滤液弃去，收集沉淀，继用0.01%的氢氧化钠溶液溶解，滤过，收集滤液；将所收集到的松针蛋白溶液进行喷雾干燥得松针蛋白成品120g，含量91.2%。
[0021]实施例3:
[0022]称取落叶松针20kg，粉碎成粗粉，加15倍量0.05%的氢氧化钠溶液50°C浸泡120分钟，滤过；滤液，用体积比1:1的盐酸:水将滤液PH值调至4.8，放置30分钟，滤过；滤液弃去，收集凝乳，用0.05%的氢氧化钠溶液将凝乳pH值调至6.8，浓缩干燥得松针蛋白半成品300g;将所得松针蛋白半成品加入洗涤罐，并以体积比1: 10的盐酸:水溶液洗杂质，滤过,滤液弃去，收集沉淀,继用0.01 %的氢氧化钠溶液溶解，滤过，收集滤液；将所收集到的松针蛋白溶液进行喷雾干燥得松针蛋白成品140g，含量90.5%。
[0023]实施例4:
[0024]称取落叶松针5kg，粉碎成粗粉，加20倍量0.05%的氢氧化钠溶液45°C浸泡180分钟，滤过；滤液，用体积比1:1的盐酸:水将滤液PH值调至4.5，放置30分钟，滤过；滤液弃去，收集凝乳，用0.05%的氢氧化钠溶液将凝乳pH值调至6.8，浓缩干燥得松针蛋白半成品80g ;将所得松针蛋白半成品加入洗涤罐，并以体积比1: 10的盐酸:水溶液洗杂质，滤过,滤液弃去,收集沉淀,继用0.01 %的氢氧化钠溶液溶解，滤过，收集滤液；将所收集到的松针蛋白溶液进行喷雾干燥得松针蛋白成品50g，含量85.7%。
【权利要求】
1.碱提酸沉法对落叶松松针中蛋白的分离纯化，其特征在于该方法包括如下步骤: 将落叶松松针粉碎成粗粉，加15?20倍量0.05 %的氢氧化钠溶液45?50°C浸泡120?180分钟，滤过；滤液，用体积比1:1的盐酸:水将滤液pH值调至4.5?5.0，放置20?40分钟，滤过；滤液弃去，收集凝乳，用0.05%的氢氧化钠溶液将凝乳pH值调至6.8，浓缩干燥得松针蛋白半成品；将所得松针蛋白半成品加入洗涤罐，并以体积比1: 10的盐酸:水溶液洗杂质，滤过，滤液弃去，收集沉淀，继用0.01%的氢氧化钠溶液溶解，滤过，收集滤液；将所收集到的松针蛋白溶液进行喷雾干燥得松针蛋白成品。
2.如权利要求1所述的蒲公英总黄酮的分离纯化方法，其特征在于该方法包括如下步骤: 称取粉碎成粗粉的落叶松松针，加入粗粉质量20倍量的0.05%的氢氧化钠溶液50°C浸泡180分钟,滤过；滤液滤液,用体积比1:1的盐酸:水将滤液pH值调至4.5,放置40分钟后滤过；滤液弃去，收集凝乳，用0.05%的氢氧化钠溶液将凝乳pH值调至6.8，浓缩干燥得松针蛋白半成品；将所得松针蛋白半成品加入洗涤罐，并以体积比1: 10的盐酸:水溶液洗杂质，滤过，滤液弃去，收集沉淀，继用0.01 %的氢氧化钠溶液溶解，滤过，收集滤液；将所收集到的松针蛋白溶液进行喷雾干燥得松针蛋白成品。
3.如权利要求1或2所述的松针蛋白的分离纯化方法，其特征在于该方法中所述清洗凝乳步骤采用精确定量稀酸液，酸浓度为体积比1: 10的盐酸:水溶液，量为半成品的20?30倍，洗涤3次。
4.如权利要求1或2所述的松针蛋白的分离纯化方法，其特征在于该方法中所述沉淀用稀碱液溶解，碱浓度为质量百分百0.01%的氢氧化钠水溶液。
5.如权利要求1或2所述的松针蛋白的分离纯化方法，其特征在于该方法中所述采用喷雾干燥得松针蛋白成品。喷雾干燥进口温度为160?165°C，出口温度为80?90°C。
【文档编号】C07K1/30GK104447969SQ201410617091
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2014年10月31日 优先权日:2014年10月31日
【发明者】姚德坤, 姚德利, 刘巍, 姚航, 黄运生, 吴海龙 申请人:大兴安岭林格贝有机食品有限责任公司