本发明属于农产品加工领域，具体涉及一种利用陈皮制备聚阿拉伯半乳糖醛酸的方法。
背景技术：
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陈皮为芸香科柑橘属植物橘(Citrus reticulata Blanco)的成熟果皮，主要产于中国南方多个省份。陈皮是一味重要的传统中药材，也是药食同源食品。可以治疗呕吐，改善胃肠功能，促进消化。对于心血管疾病有很好的疗效，可有效降低血脂、血压。另外，还有抗菌消炎、祛痰平喘等功效。用在烹饪调味方面，陈皮可以去除腥膻味，提升食物香味。目前有关陈皮活性物质的报道，集中在芳香精油、甲氧基黄酮类物质等，对于其主要的多糖类成分结构特征，仍未被鉴定。因此，有必要开展陈皮多糖的分离纯化与结构鉴定研究，揭示主要多糖的结构，这对于明确陈皮化学组成具有重要意义。
技术实现要素：
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本发明的目的是提供一种利用陈皮制备聚阿拉伯半乳糖醛酸的方法。
本发明发现并制备了陈皮中的一种主要多糖，经NMR解析确定结构为聚阿拉伯半乳糖醛酸，其化学结构如式(I)所示：
本发明的制备聚阿拉伯半乳糖醛酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：
将陈皮粉碎，加水浸提，分离并收集浸提液后将其浓缩，加入乙醇沉淀多糖类物质，收集沉淀即得到陈皮粗多糖，采用阴离子交换柱纯化陈皮粗多糖，用水、NaCl溶液梯度洗脱，收集NaCl溶液洗脱组分，浓缩后继续用凝胶过滤柱纯化，水洗脱，收集目标组分，浓缩干燥得到聚阿拉伯半乳糖醛酸。
优选，所述的“采用阴离子交换柱纯化陈皮粗多糖，用水、NaCl溶液梯度洗脱，收集NaCl溶液洗脱组分，浓缩后继续用凝胶过滤柱纯化，水洗脱，收集目标组分，浓缩干燥得到聚阿拉伯半乳糖醛酸”是将陈皮粗多糖采用阴离子交换柱纯化，先用水洗脱去除中性多糖组分，再用NaCl溶液洗脱，收集该洗脱组分，浓缩后用凝胶过滤柱纯化，以水作为溶剂进行洗脱，收集目标多糖组分，浓缩后干燥得到聚阿拉伯半乳糖醛酸。
优选，所述的将陈皮粉碎，加水浸提是将陈皮粉碎后，加入1～30倍质量的水中，25℃～100℃浸提1～120小时。
优选，所述的分离并收集浸提液中的分离是采用离心或过滤的方式。
优选，所述的加入乙醇进行沉淀是加入乙醇至浸提液的终浓度为体积分数20％～90％进行沉淀。
所述的陈皮为新鲜陈皮或者干燥后的陈皮。
所述的NaCl溶液优选为0.2M NaCl水溶液。
本发明还提供了陈皮在制备聚阿拉伯半乳糖醛酸中的应用。
本发明所获得的聚阿拉伯半乳糖醛酸具有良好的免疫增强活性。
本发明从陈皮中制备分离得到聚阿拉伯半乳糖醛酸，其产率为6～45g/kg(纯度为80～95％)。本发明为聚阿拉伯半乳糖醛酸的制备提供了一种新的方法，对于推动陈皮的深加工利用，提升陈皮产品附加值，促进该行业的可持续发展具有重要的意义。
具体实施方式
以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
实施例1：聚阿拉伯半乳糖醛酸制备分离和结构鉴定
一、聚阿拉伯半乳糖醛酸的制备分离
1)选料：选择新鲜陈皮，粉碎；
2)浸提：加入陈皮15倍质量的水，50℃浸提2小时，离心，收集浸提液；
3)有机溶剂沉淀：将上述浸提液浓缩，加入乙醇至终浓度为体积分数60％(浸提液：乙醇＝60:40，v/v)，4℃放置12小时。离心，收集沉淀，即为陈皮粗多糖；
4)柱纯化：陈皮粗多糖采用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换柱纯化，以水/NaCl溶液为洗脱溶剂，先用水洗脱，然后用0.2M NaCl溶液洗脱，收集NaCl溶液洗脱的组分，浓缩后上Sephadex G100凝胶过滤柱(15×460mm)，用水进行洗脱，流速为0.5ml/min，收集50～160min流出的多糖组分，浓缩后干燥即得到多糖A(聚阿拉伯半乳糖醛酸)。
采用该方法获得的聚阿拉伯半乳糖醛酸产率为26～35g/kg，纯度为80～95％。
二、多糖A(聚阿拉伯半乳糖醛酸)的结构鉴定
多糖A(聚阿拉伯半乳糖醛酸)可溶于水，该多糖的1H NMR(500MHz，D2O)和13C NMR(125MHz)结果见表1。
表1.陈皮聚阿拉伯半乳糖醛酸的13C与1H谱化学位移
依据NMR信息，鉴定该多糖的结构如式(I)所示，名称为聚阿拉伯半乳糖醛酸。
实施例2：
1)选料：选择新鲜陈皮，粉碎；
2)浸提：加入陈皮1倍质量的水，室温(25℃)浸提120小时，过滤，收集浸提液；
3)有机溶剂沉淀：将上述浸提液浓缩，加入乙醇至终浓度为体积分数50％(浸提液：乙醇＝50:50，v/v)，4℃放置12小时。离心，收集沉淀，即为陈皮粗多糖；
4)柱纯化：陈皮粗多糖采用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换柱纯化，以水/NaCl溶液为洗脱溶剂，先用水洗脱，然后用0.2M NaCl溶液洗脱，收集NaCl溶液洗脱的组分，浓缩后上Sephadex G100凝胶过滤柱，用水进行洗脱，收集目标多糖组分，浓缩后干燥即得到多糖A(聚阿拉伯半乳糖醛酸)。结构鉴定同实施例1。
采用该方法获得的聚阿拉伯半乳糖醛酸产率为6～16g/kg，纯度为80～95％。
实施例3：
1)选料：选择新鲜陈皮，粉碎；
2)浸提：加入陈皮30倍质量的水，100℃浸提5小时，过滤，收集浸提液；
3)有机溶剂沉淀：将上述浸提液浓缩，加入乙醇至终浓度为体积分数90％(浸提液：乙醇＝90:10，v/v)，4℃放置12小时。离心，收集沉淀，即为陈皮粗多糖；
4)柱纯化：陈皮粗多糖采用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换柱纯化，以水/NaCl溶液为洗脱溶剂，先用水洗脱，然后用0.2M NaCl溶液洗脱，收集NaCl溶液洗脱的组分，浓缩后上Sephadex G100凝胶过滤柱，用水进行洗脱，收集目标多糖组分，浓缩后干燥即得到多糖A(聚阿拉伯半乳糖醛酸)。结构鉴定同实施例1。
采用该方法获得的聚阿拉伯半乳糖醛酸产率为32～45g/kg，纯度为80～95％。
实施例4：
1)选料：选择干燥陈皮，粉碎；
2)浸提：加入陈皮30倍质量的水，60℃浸提1小时，过滤，收集浸提液；
3)有机溶剂沉淀：将上述浸提液浓缩，加入乙醇至终浓度为体积分数20％(浸提液：乙醇＝20:80，v/v)，4℃放置12小时。离心，收集沉淀，即为陈皮粗多糖；
4)柱纯化：陈皮粗多糖采用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换柱纯化，以水/NaCl溶液为洗脱溶剂，先用水洗脱，然后用0.2M NaCl溶液洗脱，收集NaCl溶液洗脱的组分，浓缩后上Sephadex G100凝胶过滤柱，用水进行洗脱，收集目标多糖组分，浓缩后干燥即得到多糖A(聚阿拉伯半乳糖醛酸)。结构鉴定同实施例1。
采用该方法获得的聚阿拉伯半乳糖醛酸产率为11～23g/kg，纯度为80～95％。