本发明属于医药领域，具体涉及益智仁萜酮a、益智仁萜酮b、旋覆花佛术内酯、氧代大花旋覆花内酯、环醚大花旋覆花内酯、金栗兰内酯a、金栗兰内酯b在制备降低紫杉醇神经毒性的药物中的应用。
背景技术：
：紫杉醇(paclitaxel，商品名taxol)是从红豆杉科红豆杉属植物中提取得到的二萜类化合物，分子式为c47h51no14。1963年，美国化学家瓦尼和沃尔从一种生长在美国西部大森林中的太平洋杉的树皮和木材中分离到紫杉醇粗提物，在筛选实验中发现其具有很强的抗肿瘤活性。1971年分离出紫杉醇单体成分、确定其化学结构，并正式命名为紫杉醇。从1989到1990年在完成了紫杉醇的ii期和iii期临床试验后，美国食品与药物管理局(fda)于1992年12月正式批准紫杉醇用于临床卵巢癌的治疗，1993年批准用于乳腺癌治疗，随后紫杉醇逐渐广泛用于临床各种肿瘤的治疗，成为全世界公认的治疗肿瘤的有效药物之一。紫杉醇虽然抗肿瘤效果良好，但副作用也较多，包括过敏反应、骨髓抑制，心律失常、恶心、呕吐、腹泻等胃肠道反应，但其最重要的副作用还是神经毒性反应。外周神经毒性反应是紫杉醇最常见的主要副作用之一,因此紫杉醇的神经毒性成为临床上限制紫杉醇应用剂量的重要因素。根据大量临床报道，应用紫杉醇确可引起外周神经的病变，其主要特征表现为周边肢体的感觉麻木或异常，严重者甚至出现四肢远端对称性的感觉丧失和震颤麻痹等大神经损害症状，同时伴有局部温度异常和针刺感觉等小神经纤维损害症状。目前尚缺少可以用于降低紫杉醇副作用的化疗辅助用药。益智仁萜酮a、益智仁萜酮b、旋覆花佛术内酯、氧代大花旋覆花内酯、环醚大花旋覆花内酯、金栗兰内酯a和金栗兰内酯b是从不同植物中分离得到的天然产物，化学结构式如下表所示。研究表明，益智仁萜酮a、益智仁萜酮b、旋覆花佛术内酯、氧代大花旋覆花内酯、环醚大花旋覆花内酯、金栗兰内酯a和金栗兰内酯b具有多种药理作用。目前，未见益智仁萜酮a、益智仁萜酮b、旋覆花佛术内酯、氧代大花旋覆花内酯、环醚大花旋覆花内酯、金栗兰内酯a和金栗兰内酯b用于降低紫杉醇神经毒性的报道。技术实现要素：本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供益智仁萜酮a、益智仁萜酮b、旋覆花佛术内酯、氧代大花旋覆花内酯、环醚大花旋覆花内酯、金栗兰内酯a、金栗兰内酯b在制备降低紫杉醇神经毒性的药物中的应用。本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：一种如下化学结构的益智仁萜酮a或益智仁萜酮b：益智仁萜酮a或益智仁萜酮b用于制备降低紫杉醇神经毒性的药物的用途。一种如下化学结构的旋覆花佛术内酯：旋覆花佛术内酯用于制备降低紫杉醇神经毒性的药物的用途。一种如下化学结构的氧代大花旋覆花内酯：氧代大花旋覆花内酯用于制备降低紫杉醇神经毒性的药物的用途。一种如下化学结构的环醚大花旋覆花内酯：环醚大花旋覆花内酯用于制备降低紫杉醇神经毒性的药物的用途。一种如下化学结构的金栗兰内酯a或金栗兰内酯b：金栗兰内酯a或金栗兰内酯b用于制备降低紫杉醇神经毒性的药物的用途。一种降低紫杉醇神经毒性的紫杉醇化疗辅助用药，以益智仁萜酮a、益智仁萜酮b、旋覆花佛术内酯、氧代大花旋覆花内酯、环醚大花旋覆花内酯、金栗兰内酯a或金栗兰内酯b为活性成分，还含有药学上可以接受的辅料。有益效果：本发明发现，益智仁萜酮a、益智仁萜酮b、旋覆花佛术内酯、氧代大花旋覆花内酯、环醚大花旋覆花内酯、金栗兰内酯a或金栗兰内酯b可以显著降低紫杉醇的神经毒性，可以开发成紫杉醇化疗辅助用药以减少紫杉醇对周围神经系统的损伤。附图说明图1为益智仁萜酮a、益智仁萜酮b、旋覆花佛术内酯、氧代大花旋覆花内酯、环醚大花旋覆花内酯、金栗兰内酯a和金栗兰内酯b的化学结构式；图2为各药物对大鼠痛觉反应阈值的影响；图3为各药物对大鼠nrf2蛋白表达的影响。具体实施方式下面结合附图和实施例具体介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。一、实验材料益智仁萜酮a、益智仁萜酮b、旋覆花佛术内酯、氧代大花旋覆花内酯、环醚大花旋覆花内酯、金栗兰内酯a、金栗兰内酯b、紫杉醇自制或购买，纯度≥95％，化学结构式如图1所示。nrf2抗体购自abcam公司。spf级雄性sd大鼠，体重190～210g，购于南京江宁青龙山动物繁殖场，常规饲养。二、实验方法1、分组、造模及给药将sd大鼠随机分为正常组、模型组和各药物组，每组10只。模型组、各药物组腹腔注射紫杉醇5mg/kg，每周2次，共注射给药4周(分别于第1、2、8、9、15、16、22、23天注射)，建立紫杉醇周围神经毒性大鼠模型，对照组给予等体积溶媒。造模后，药物组分别灌胃给予20mg/kg药物，连续给药4周，正常组和模型组给予等体积溶媒。2、机械性缩足反射阈值的测定机械触痛异常采用机械性缩足反射阈值(pwt)测定。最后一次给药6h后进行。将大鼠置于金属网上，盖以透明的有机玻璃箱，测试之前让大鼠适应环境15min，用vonfrey纤维丝垂直刺激后肢足底中部皮肤，缓慢增加刺激压力。大鼠出现抬足或舔足行为视为阳性反应时，读取electrovonfrey读数器上显示的最大值。刺激从2g开始，设定切断压力为200g以避免损伤大鼠足底组织。每只后肢双足重复测量5次，每次间隔5分钟。去除最大和最小值计算余下的平均值即为大鼠的pwt值。3、westernblot检测nrf2表达水平最后一次给药8h后，处死大鼠，解剖称取约50mg的l4-5段背根神经节，将组织剪成细小碎片，按照细胞核蛋白与细胞质蛋白抽提试剂盒操作步骤提取核蛋白。bca法对蛋白进行定量，加入loadingbuffer后煮沸变性5-10min再进行电泳和转膜，5％脱脂牛奶封闭1h，然后加入1:2000稀释的nrf2一抗，4℃孵育过夜和二抗室温孵育1h，用ecl化学发光显影液，于化学发光凝胶成像系统中显影成像，imageproplus6.0软件对结果进行灰度扫描分析，以β-actin为内参，计算各蛋白条带灰度与内参照的灰度比值。每组实验各重复3次。4、统计学方法采用spss19.0统计软件包进行数据统计分析，计量资料采用均数±标准差表示，多组间比较采用one-wayanova方差分析，两组间比较用t检验，p＜0.05认为差异显著。三、实验结果1、各药物对大鼠痛觉反应阈值的影响与正常组相比，模型组大鼠的痛觉反应阈值明显降低(p＜0.05)，说明紫杉醇对大鼠的神经功能造成了毒性作用；与模型组相比，益智仁萜酮a、益智仁萜酮b、旋覆花佛术内酯、氧代大花旋覆花内酯、环醚大花旋覆花内酯、金栗兰内酯a、金栗兰内酯b给药组大鼠的痛觉反应阈值明显升高(p＜0.05)，说明益智仁萜酮a、益智仁萜酮b、旋覆花佛术内酯、氧代大花旋覆花内酯、环醚大花旋覆花内酯、金栗兰内酯a、金栗兰内酯b具有修复紫杉醇造成的神经毒性损伤的作用。结果如表1和图2所示。表1各药物对大鼠痛觉反应阈值的影响组别pwt值(g，均值)正常组62模型组17益智仁萜酮a组48益智仁萜酮b组45旋覆花佛术内酯组42氧代大花旋覆花内酯组54环醚大花旋覆花内酯组51金栗兰内酯a组44金栗兰内酯b组452、各药物对大鼠nrf2蛋白表达水平的影响与正常组相比，模型组大鼠的nrf2蛋白表达水平明显降低(p＜0.05)；与模型组相比，益智仁萜酮a、益智仁萜酮b、旋覆花佛术内酯、氧代大花旋覆花内酯、环醚大花旋覆花内酯、金栗兰内酯a、金栗兰内酯b给药组大鼠的nrf2蛋白表达水平明显升高(p＜0.05)。结果如表2和图3所示。表2各药物对大鼠nrf2蛋白表达水平的影响组别nrf2/β-actin(归一化处理)正常组1.00模型组0.29益智仁萜酮a组1.73益智仁萜酮b组1.68旋覆花佛术内酯组1.64氧代大花旋覆花内酯组1.96环醚大花旋覆花内酯组1.91金栗兰内酯a组1.67金栗兰内酯b组1.69本领域技术人员知道，神经系统在受到外界有害物质刺激时会激活一系列的酶(如nrf2)参与抗氧化、抗炎症和解毒反应，以缓解细胞压力，保护机体。这些酶的表达高低体现了神经系统功能的完善程度。因此，上述结果说明，紫杉醇对大鼠的神经系统产生了毒性，降低了神经系统的功能，而益智仁萜酮a和b、旋覆花佛术内酯、氧代大花旋覆花内酯、环醚大花旋覆花内酯、金栗兰内酯a和b可以修复紫杉醇带来的神经功能损伤。综上，本发明发现，益智仁萜酮a、益智仁萜酮b、旋覆花佛术内酯、氧代大花旋覆花内酯、环醚大花旋覆花内酯、金栗兰内酯a或金栗兰内酯b可以显著降低紫杉醇的神经毒性，可以开发成紫杉醇化疗辅助用药以减少紫杉醇对周围神经系统的损伤。上述实施例的作用在于具体介绍本发明的实质性内容，但本领域技术人员应当知道，不应将本发明的保护范围局限于该具体实施例。当前第1页12