一种降血脂的ACE活性肽的制造工艺的制作方法

文档序号:16207875发布日期:2018-12-08 07:20阅读:516来源:国知局
本发明涉及ace活性肽
技术领域
,尤其涉及一种降血脂的ace活性肽的制造工艺。
背景技术
ace是富含血管紧张素转化酶,肽是两个或两个以上的氨基酸以肽键相连的化合物,在人体内起重要生理作用,发挥生理功能,具有活性的多肽称为活性肽。ace活性肽具有很好的溶解性和流动性,人体内吸收快、利用率高;还能抗高血压,抗胆固醇,抗血栓形成,改善脂质代谢,消除过多脂肪,促进肌红细胞复原,帮助恢复疲劳,促进钙磷和其它微量元素吸收。目前活性肽的制备方法不能确保活性肽的纯度。因此,我们提出了一种降血脂的ace活性肽的制造工艺用于解决上述问题。技术实现要素:本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点,而提出的一种降血脂的ace活性肽的制造工艺。一种降血脂的ace活性肽的制造工艺,包括以下步骤:s1、提取原料蛋白,将原料蛋白进行强酸进行变性处理,在原料蛋白中添加三氯乙酸容易进行酸化处理,浸泡酸化1h-2h,然后通过离心机进行离心沉淀,收集沉淀;s2、将沉淀通过清水进行反复冲洗,使得沉淀放置在水中的ph为6-7;s3、在沉淀中加入浓度为4%-6%的三硝基苯磺酸,然后使用震荡机进行震荡,反应1h-2h,使用取液器取出混合液,然后检测混合液中三硝基苯衍生物的波长,多次进行取液检测,直至出现最大特征吸收波峰,使得沉淀中蛋白充分水解,得到肽溶液;s4、将肽溶液放置在85℃-100℃的水中进行水浴灭酶,水浴时间为4mim-9min,得到混合液a;s5、将混合液a通过离心机进行离心,通过超滤进行过滤,除去未转化的蛋白和不溶物,得到清亮的水解液;s6、在水解液中加入去色去味剂,通过搅拌机进行搅拌,搅拌时间为2h-3h,得到初制肽溶液;s7、将初制肽溶液高速通过阴阳离子交换树脂,使得初步肽溶液脱盐,得到精致肽溶液;s8、将精致肽溶液进行真空干燥,制成成品;s9、使用液相色谱分析法来检测成品中的活性肽的纯度。优选的,所述三氯乙酸的浓度为8%-12%。优选的,所述三硝基苯衍生物的波长使用高速光谱仪进行检测。优选的,所述超滤的膜孔径在20a°-1000a°。优选的,所述去色去味剂是活性炭和硅藻泥的混合物,活性炭和硅藻泥的混合比例为2比1。优选的,所述阴阳离子交换树脂含有磺酸基、羧基或苯酚基等酸性基团。本发明的有益效果是:本发明最终产品中的杂质含量低,纯度高,且无苦涩等异味,并且生产成本较低。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明作进一步解说。一种降血脂的ace活性肽的制造工艺,包括以下步骤:s1、提取原料蛋白,将原料蛋白进行强酸进行变性处理,在原料蛋白中添加三氯乙酸容易进行酸化处理,三氯乙酸的浓度为8%-12%,浸泡酸化1h-2h,然后通过离心机进行离心沉淀,收集沉淀;s2、将沉淀通过清水进行反复冲洗,使得沉淀放置在水中的ph为6-7;s3、在沉淀中加入浓度为4%-6%的三硝基苯磺酸,然后使用震荡机进行震荡,反应1h-2h,使用取液器取出混合液,然后使用高速光谱仪检测混合液中三硝基苯衍生物的波长,多次进行取液检测,直至出现最大特征吸收波峰,使得沉淀中蛋白充分水解,得到肽溶液;s4、将肽溶液放置在85℃-100℃的水中进行水浴灭酶,水浴时间为4mim-9min,得到混合液a;s5、将混合液a通过离心机进行离心,通过超滤进行过滤,超滤的膜孔径在20a°-1000a°,除去未转化的蛋白和不溶物,得到清亮的水解液;s6、在水解液中加入去色去味剂,去色去味剂是活性炭和硅藻泥的混合物,活性炭和硅藻泥的混合比例为2比1,通过搅拌机进行搅拌,搅拌时间为2h-3h,得到初制肽溶液;s7、将初制肽溶液高速通过阴阳离子交换树脂,阴阳离子交换树脂含有磺酸基、羧基或苯酚基等酸性基团,使得初步肽溶液脱盐,得到精致肽溶液。s8、将精致肽溶液进行真空干燥,制成成品;s9、使用液相色谱分析法来检测成品中的活性肽的纯度。实施例一一种降血脂的ace活性肽的制造工艺,包括以下步骤:s1、提取原料蛋白,将原料蛋白进行强酸进行变性处理,在原料蛋白中添加三氯乙酸容易进行酸化处理,三氯乙酸的浓度为8%,浸泡酸化1h,然后通过离心机进行离心沉淀,收集沉淀;s2、将沉淀通过清水进行反复冲洗,使得沉淀放置在水中的ph为6-7;s3、在沉淀中加入浓度为4%的三硝基苯磺酸,然后使用震荡机进行震荡,反应1h,使用取液器取出混合液,然后使用高速光谱仪检测混合液中三硝基苯衍生物的波长,多次进行取液检测,直至出现最大特征吸收波峰,使得沉淀中蛋白充分水解,得到肽溶液;s4、将肽溶液放置在85℃的水中进行水浴灭酶,水浴时间为4mim,得到混合液a;s5、将混合液a通过离心机进行离心,通过超滤进行过滤,超滤的膜孔径在20a°-1000a°,除去未转化的蛋白和不溶物,得到清亮的水解液;s6、在水解液中加入去色去味剂,去色去味剂是活性炭和硅藻泥的混合物,活性炭和硅藻泥的混合比例为2比1,通过搅拌机进行搅拌,搅拌时间为2h,得到初制肽溶液;s7、将初制肽溶液高速通过阴阳离子交换树脂,阴阳离子交换树脂含有磺酸基、羧基或苯酚基等酸性基团,使得初步肽溶液脱盐,得到精致肽溶液。s8、将精致肽溶液进行真空干燥,制成成品;s9、使用液相色谱分析法来检测成品中的活性肽的纯度。实施例二一种降血脂的ace活性肽的制造工艺,包括以下步骤:s1、提取原料蛋白,将原料蛋白进行强酸进行变性处理,在原料蛋白中添加三氯乙酸容易进行酸化处理,三氯乙酸的浓度为10%,浸泡酸化1.5h,然后通过离心机进行离心沉淀,收集沉淀;s2、将沉淀通过清水进行反复冲洗,使得沉淀放置在水中的ph为6-7;s3、在沉淀中加入浓度为5%的三硝基苯磺酸,然后使用震荡机进行震荡,反应1.5h,使用取液器取出混合液,然后使用高速光谱仪检测混合液中三硝基苯衍生物的波长,多次进行取液检测,直至出现最大特征吸收波峰,使得沉淀中蛋白充分水解,得到肽溶液;s4、将肽溶液放置在90℃的水中进行水浴灭酶,水浴时间为6min,得到混合液a;s5、将混合液a通过离心机进行离心,通过超滤进行过滤,超滤的膜孔径在20a°-1000a°,除去未转化的蛋白和不溶物,得到清亮的水解液;s6、在水解液中加入去色去味剂,去色去味剂是活性炭和硅藻泥的混合物,活性炭和硅藻泥的混合比例为2比1,通过搅拌机进行搅拌,搅拌时间为2.5h,得到初制肽溶液;s7、将初制肽溶液高速通过阴阳离子交换树脂,阴阳离子交换树脂含有磺酸基、羧基或苯酚基等酸性基团,使得初步肽溶液脱盐,得到精致肽溶液。s8、将精致肽溶液进行真空干燥,制成成品;s9、使用液相色谱分析法来检测成品中的活性肽的纯度。实施例三一种降血脂的ace活性肽的制造工艺,包括以下步骤:s1、提取原料蛋白,将原料蛋白进行强酸进行变性处理,在原料蛋白中添加三氯乙酸容易进行酸化处理,三氯乙酸的浓度为12%,浸泡酸化2h,然后通过离心机进行离心沉淀,收集沉淀;s2、将沉淀通过清水进行反复冲洗,使得沉淀放置在水中的ph为6-7;s3、在沉淀中加入浓度为4%-6%的三硝基苯磺酸,然后使用震荡机进行震荡,反应2h,使用取液器取出混合液,然后使用高速光谱仪检测混合液中三硝基苯衍生物的波长,多次进行取液检测,直至出现最大特征吸收波峰,使得沉淀中蛋白充分水解,得到肽溶液;s4、将肽溶液放置在100℃的水中进行水浴灭酶,水浴时间为9min,得到混合液a;s5、将混合液a通过离心机进行离心,通过超滤进行过滤,超滤的膜孔径在20a°-1000a°,除去未转化的蛋白和不溶物,得到清亮的水解液;s6、在水解液中加入去色去味剂,去色去味剂是活性炭和硅藻泥的混合物,活性炭和硅藻泥的混合比例为2比1,通过搅拌机进行搅拌,搅拌时间为3h,得到初制肽溶液;s7、将初制肽溶液高速通过阴阳离子交换树脂,阴阳离子交换树脂含有磺酸基、羧基或苯酚基等酸性基团,使得初步肽溶液脱盐,得到精致肽溶液。s8、将精致肽溶液进行真空干燥,制成成品;s9、使用液相色谱分析法来检测成品中的活性肽的纯度。对上述实施例一到实施例三制备的活性肽的纯度检测检测结果如下实施例一实施例二实施例三纯度%97.598.297.8以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本
技术领域
的技术人员在本发明揭露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。当前第1页12
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