本发明涉及天然药物化学技术领域，特别涉及一种从诺丽酵素中提取的2,4二取代苯酚衍生物类化合物、其提取方法及用途。
背景技术：
糖尿病是一种与胰岛素产生和作用异常相关、以血糖增高为特征的慢性疾病。随着我国社会经济的发展，人们饮食结构的改变、生活水平的不断提高，糖尿病的患病率呈迅猛上升趋势，目前全球糖尿病患者的总数已超过1.2亿人。我国的糖尿病现状十分严峻，发病率高达9.6％，已成为世界范围内糖尿病患病人数增长最快的国家。近几十年以来，我国糖尿病患病率不断增加，1995年全国糖尿病流行病学调查，我国25岁至64岁人群糖尿病的患病率为2.5％。2010年8月—2010年12月中国疾病预防控制中心与上海交通大学医学院共同对全国18岁及以上常住居民98658人进行了糖尿病调查，调查结果显示2010年我国18岁及以上居民糖尿病患病率为9.65％。目前，我国18岁及以上的成年人中，患有糖尿病的人数已达到9240万，位居世界第一位，与此同时，我国青少年糖尿病的患病情况也不容乐观，糖尿病防治已成为我国面临的最主要的公共卫生问题之一。糖尿病时长期存在的高血糖，导致各种组织，特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍。
现有的降血糖药物种类尚不够丰富，且长期服用常常会发生耐药作用，大量患者由于耐药作用而不得不选择成本更高、风险更大的注射胰岛素治疗，因此，亟待进一步开发效果良好的新型降血糖药物。
诺丽果(noni)是海滨木巴戟的果实。灌木至小乔木,高1-5米；茎直,枝近四棱柱形。叶交互对生,长圆形、椭圆形或卵圆形，长12-25厘米，两端渐尖或急尖，通常具光泽，无毛，全缘。诺丽酵素具有降血压、调血脂、改善骨质疏松及听觉能力、抗疲劳、增强记忆力、创伤修复、驱虫等作用。经文献检索，目前诺丽酵素及其提取物在降血糖的应用尚未见报道。
技术实现要素：
本发明的第一目的在于提供一种从诺丽酵素中提取的全新结构的2,4二取代苯酚衍生物类化合物，其结构如下：
本发明的第二目的在于提供上述化合物的提取方法，包括如下步骤：
(1)将诺丽果发酵得到诺丽酵素；
(2)诺丽酵素用乙酸乙酯萃取；
(3)萃取液浓缩后，经柱层析、薄层层析和凝胶柱层析，得到上述化合物。
优选的，所述诺丽酵素的具体制备方法如下：
a.将成熟诺丽果的表皮用刷子洗净，切成厚度为1～5mm的薄片；
b.将诺丽果按照白砂糖：诺丽果：水＝1:2～4:8～20放入干净的发酵容器中，发酵容器中留有20～30％的空间供其发酵；
c.置于阴凉处发酵三个月，其中第一个月每天打开搅拌或摇动发酵容器，三个月后过滤得到诺丽酵素。
优选的，所述步骤(2)萃取中诺丽酵素与乙酸乙酯的体积比为1：1～5。
优选的，所述步骤(3)中萃取液浓缩至原体积的1/20～1/100。
优选的，所述步骤(3)中的柱层析条件具体如下：以300目硅胶填装柱色谱柱，以乙酸乙酯体积百分数为10～20％的乙酸乙酯-石油醚混合溶剂为洗脱剂。
优选的，所述步骤(3)中的薄层层析条件具体如下：以乙酸乙酯体积百分数为10％～20％的乙酸乙酯-石油醚混合溶剂为展开剂，或以体积比为4:1的石油醚-丙酮混合溶剂为展开剂，或以体积比为10:1的氯仿-丙酮的混合溶剂为展开剂。
优选的，所述步骤(3)中的凝胶柱层析条件具体如下：凝胶为sephadexlh-20，以氯仿体积百分数为20％-40％的氯仿-甲醇混合溶剂为洗脱剂。
本发明的第三方面在于提高上述化合物在制备治疗降血糖药物中的用途。
本发明的有益效果是：本发明提供的2,4二取代苯酚衍生物类化合物结构新颖，对降血糖具有很好的治疗效果、来源天然、副作用小；同时，其制备方法工艺简单、成本低廉、原料来源广泛。
具体实施方式
以下通过具体实施例来说明本发明的技术方案，但本发明的保护范围不限于此。
实施例1
(1)诺丽酵素的制备
a.将成熟诺丽果的表皮用刷子洗净，切成厚度为1～5mm的薄片；
b.将诺丽果按照白砂糖：诺丽果：水＝1:2:20放入干净的发酵容器中，发酵容器中留有20～30％的空间供其发酵；
c.置于阴凉处发酵三个月，其中第一个月每天打开搅拌或摇动发酵容器，三个月后过滤得到诺丽酵素。
(2)萃取
所得的诺丽酵素用乙酸乙酯萃取两次，每次乙酸乙酯的用量为待萃取诺丽酵素体积的2.5倍，收集萃取液；
(3)分离
将步骤(2)得到的萃取液浓缩至原体积的1/50，先后经柱层析、薄层层析、凝胶柱层析；柱层析的条件为：色谱柱为300目硅胶柱，以乙酸乙酯体积百分数为20％的乙酸乙酯-石油醚混合溶剂为洗脱剂，收集洗脱液浓缩进入薄层层析；薄层层析条件为：以乙酸乙酯体积百分数为25％的乙酸乙酯-石油醚混合溶剂为展开剂，收集薄层色谱上面积最大的产物点；凝胶柱层析条件为：凝胶为sephadexlh-20，以氯仿体积百分数为40％的氯仿-甲醇混合溶剂为洗脱剂，收集洗脱液浓缩得到目标化合物。
实施例2
(1)诺丽酵素的制备
a.将成熟诺丽果的表皮用刷子洗净，切成厚度为1～5mm的薄片；
b.将诺丽果按照白砂糖：诺丽果：水＝1:4:8放入干净的发酵容器中，发酵容器中留有20～30％的空间供其发酵；
c.置于阴凉处发酵三个月，其中第一个月每天打开搅拌或摇动发酵容器，三个月后过滤得到诺丽酵素。
(2)萃取
所得的诺丽酵素用乙酸乙酯萃取两次，每次乙酸乙酯的用量为待萃取诺丽酵素体积的1/2，收集萃取液；
(3)分离
将步骤(2)得到的萃取液浓缩至原体积的1/100，先后经柱层析、薄层层析、凝胶柱层析；柱层析的条件为：色谱柱为300目硅胶柱，以乙酸乙酯体积百分数为10％的乙酸乙酯-石油醚混合溶剂为洗脱剂，收集洗脱液浓缩进入薄层层析；薄层层析条件为：以乙酸乙酯体积百分数为10％的乙酸乙酯-石油醚混合溶剂为展开剂，收集薄层色谱上面积最大的产物点；凝胶柱层析条件为：以氯仿体积百分数为20％的氯仿-甲醇混合溶剂为洗脱剂，收集洗脱液浓缩得到目标化合物。
实施例3
目标化合物的理化性质、氢谱及质谱检测数据如下：
目标化合物为无色晶体，易溶于甲醇、dmso，254nm紫外灯下呈黑色暗斑。hresi-ms[m/z263.0,计算值240.10]推出该化合物分子量为240，分子式为c12h16o5，不饱和度为5。1hnmr(400mhzincd3od)和13cnmr(100mhzincd3od)见表。
实施例4
将目标化合物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性测试：
将目标化合物用pbs(磷酸盐缓冲液)配制成0.6、0.3、0.15mg/ml储备液。
配制浓度为2u的酶溶液以及2.5mmol/l的底物pnpg待用
实验步骤：取96孔板一块，加入58μl0.1mpbs缓冲液；加入20μl稀释后化合物(共4组，3组平行1组对照)平行组加入10μl配制好的酶溶液，对照组加入同体积0.01mpbs缓冲液，混匀后均加入20μl底物pnpg，另设置空白对照，加入20μldmso，其余操作同上。混匀后放置在37℃恒温培养箱中15min,取出后加入150μl终止液(na2co3溶液)，以阿卡波糖作为标准对照，酶标仪测定其吸光度。
以α-葡萄糖苷酶抑制率判断诺丽酵素中2,4二取代苯酚衍生物类化合物对α-葡萄糖苷酶的影响，根据下面公式计算抑制率(inhibitoryrate)＝(单体化合物组od值-对照组od值/对照组od值)×100％，通过抑制率计算ic50值，实验结果见表1。
表1诺丽酵素中苯酚衍生物类合物α-葡萄糖苷酶抑制活性ic50值
实验结果表明目标化合物对α-葡萄糖苷酶抑制活性高于对照品阿卡波糖。
以上述依据本发明的理想实施例为启示，通过上述的说明内容，相关工作人员完全可以在不偏离本项发明技术思想的范围内，进行多样的变更以及修改。本项发明的技术性范围并不局限于说明书上的内容，必须要根据权利要求范围来确定其技术性范围。